吳楠++牟鈺
高效液相色譜綜合了液相柱層析法和氣相色譜法的優(yōu)點(diǎn),其主要特點(diǎn)是:應(yīng)用廣泛,分離效率高,分析速度快,而且分離、分析少量樣品時(shí)靈敏度高。色譜法是利用不同物質(zhì)在不同相中的選擇性不同,用流動(dòng)的相對(duì)固定相中的混合物洗脫,實(shí)驗(yàn)混合物中的不同物質(zhì)流動(dòng)的快慢不同,但都會(huì)沿著固定相移動(dòng),實(shí)現(xiàn)分離的目的。色譜法廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)中。高效液相色譜法是色譜法中的一種,現(xiàn)在常被應(yīng)用于食品安全檢測(cè)中。
高效液相色譜法簡(jiǎn)介
高效液相色譜法簡(jiǎn)單來(lái)講就是運(yùn)用相色譜對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離分析的一種比較先進(jìn)的化學(xué)物理方法,簡(jiǎn)稱HPLC,下面主要從高效液相色譜法的分離原理、高效液相色譜法的優(yōu)點(diǎn)和高效液相色譜法的應(yīng)用三方面來(lái)介紹高效液相色譜法。
高效液相色譜法的分離原理。自然界中許多物質(zhì)都是以混合形式存在的,在需要研究物質(zhì)中某一單一成分時(shí),要對(duì)混合物進(jìn)行分離,分離方法大致分為物理分離法、化學(xué)分離法和物理化學(xué)分離法,高效液相色譜法屬于新型的物理化學(xué)分離法。HPLC的分離機(jī)制是流動(dòng)相分子與被分離組分爭(zhēng)奪吸附表面活性中心的吸附能力不同,所以能將混合物分離在吸附物表面的不同位置上。高效液相色譜法是在HPLC的基礎(chǔ)上加入氣相色譜的實(shí)踐和理論方法,用高壓輸送代替流動(dòng)相,從高效固定相在線檢測(cè)法發(fā)展而來(lái)的綜合分離方法。
高效液相色譜法的優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜法因其使用時(shí)對(duì)環(huán)境及分離物要求不高,所以被廣泛應(yīng)用,使用于各種物質(zhì)的分離;HPLC可選用的固定相種類多,可選擇的流動(dòng)相范圍廣,資源豐富;用HPLC進(jìn)行分離時(shí)不僅分離速率快,而且分離效果極佳,靈敏度高;HPLC使用的色譜柱可以重復(fù)利用,分理出的物質(zhì)收集方法簡(jiǎn)便,分離的安全性能高,所以HPLC也是一種節(jié)能環(huán)保型的分離方法。HPLC用于高分子化合物和離子型化合物的分離時(shí),分離效果是最好的,如非常適合分離食物中含量較高的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和脂類等。
高效液相色譜法的應(yīng)用。HPLC在藥物分析和食物測(cè)試中應(yīng)用最為廣泛,在藥物分析中,HPLC的主要作用是檢查藥物純度,測(cè)定藥物含量及藥物的定性鑒別。而在食物測(cè)試中,它的主要作用是分離檢測(cè)出用常規(guī)方法難以查出的食品成分。另外,HPLC在生物化工產(chǎn)品、石油化工產(chǎn)品和環(huán)境污染物等方面也有相關(guān)的應(yīng)用。
高效液相色譜法在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用
工業(yè)的發(fā)展應(yīng)用于生活的方方面面,但使用不當(dāng)將會(huì)影響人的身體健康,引發(fā)各種疑難雜癥,縮短人的壽命。工業(yè)食品是人們最為擔(dān)心的問(wèn)題,怎樣才能讓人們放心使用美食成為現(xiàn)在人類關(guān)注的焦點(diǎn),所以需要一種科學(xué)的具有權(quán)威性的食品安全檢測(cè)方法,此時(shí),高效液相色譜法應(yīng)運(yùn)而生,解決了大部分食品安全使用問(wèn)題。
HPLC檢測(cè)食品中添加劑的使用情況。食品添加劑有純天然的和人工合成的兩種類型,它能改變食品的質(zhì)、色、氣、味等特性。對(duì)食品有防腐、保鮮和干燥的作用,因此在食品加工和保存中深受人們喜愛(ài),但在食品中濫用添加劑會(huì)嚴(yán)重?fù)p害食用者的健康,引發(fā)各種疾病。HPLC能檢測(cè)出食物中的各組分含量,分析食品是否可以安全食用。如將HPLC和紫外檢測(cè)器及熒光檢測(cè)器結(jié)合使用,可以監(jiān)測(cè)甜味添加劑中的糖精鈉。這種監(jiān)測(cè)方法靈敏度高,回收率高,準(zhǔn)確快速。
HPLC檢測(cè)食品中的微生物及微生物代謝物。食品中的微生物含量過(guò)多會(huì)威脅人體健康,HPLC能根據(jù)微生物及微生物代謝物的組成成分不同將其分離,進(jìn)而分析其對(duì)人體是否有害。
HPLC監(jiān)測(cè)分析食品加工運(yùn)輸過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。食品在加工或運(yùn)輸過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生對(duì)人體有害的物質(zhì),如丙烯酰胺,食用后可能會(huì)引發(fā)神經(jīng)病,遺傳性疾病或癌癥,所以在食品生產(chǎn)過(guò)程中要對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行實(shí)時(shí)抽樣,用HPLC法對(duì)樣品進(jìn)行監(jiān)測(cè)分析。確保出售給消費(fèi)者的食品的安全性。
HPLC檢測(cè)食品中殘留的農(nóng)藥及獸藥。農(nóng)畜產(chǎn)品是人類食用最多的食物,但農(nóng)作物上常會(huì)有農(nóng)藥殘留,飼養(yǎng)的動(dòng)物肉食上會(huì)殘留獸藥,這些藥物也會(huì)影響人體健康??茖W(xué)研究出的HPLC與液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)能對(duì)食物中的難揮發(fā)及熱不穩(wěn)定性物質(zhì)進(jìn)行分離,如分離農(nóng)藥、獸藥等,分析農(nóng)畜食品是否可以食用。
HPLC在食品檢測(cè)中發(fā)揮著重要的作用,它對(duì)食品進(jìn)行監(jiān)測(cè),如果食品安全部門能嚴(yán)格監(jiān)督,那么食品安全問(wèn)題的解決就指日可待了。但HPLC法在使用的過(guò)程中往往要與其它技術(shù)配合運(yùn)用,所以相關(guān)研究人員應(yīng)繼續(xù)努力,完善高效液相色譜法,提高食品安全檢測(cè)的效率。