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        基于低場(chǎng)核磁共振檢測(cè)海南瑞今黑豬肉

        2017-08-22 02:40:00楊芳許建梅王瑞軍林卿
        農(nóng)產(chǎn)品加工 2017年13期

        楊芳,許建梅,王瑞軍,林卿

        基于低場(chǎng)核磁共振檢測(cè)海南瑞今黑豬肉

        楊芳,*許建梅,王瑞軍,林卿

        (海南醫(yī)學(xué)院信息技術(shù)部,海南海口571199)

        基于低場(chǎng)核磁共振檢測(cè)海南瑞今黑豬肉的水分性質(zhì)和含量,并討論了核磁共振分析儀檢測(cè)肉品的參數(shù)設(shè)定。橫向弛豫時(shí)間圖譜可以表明肉品內(nèi)水分的分布及其狀態(tài)改變,從分子水平探討海南瑞今黑豬肉與普通瘦肉型豬肉的差別。關(guān)鍵詞:低場(chǎng)核磁共振;海南瑞今黑豬肉;橫向弛豫時(shí)間圖譜

        海南瑞今黑豬是依靠海南當(dāng)?shù)睾谪i母豬與外來(lái)品種杜洛克雜交后所生的后代,生長(zhǎng)在富含微量硒元素水質(zhì)的海南省澄邁縣,采用生物飼料喂養(yǎng)、生態(tài)放養(yǎng)的養(yǎng)殖。對(duì)屠宰后的生豬采用冷鏈物流體系,使肉品始終處于0~4℃的冷鏈之下,整個(gè)過(guò)程能有效抑制微生物和細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。

        海南瘦肉型豬養(yǎng)殖大都是圈養(yǎng),用飯店剩菜和玉米、麩皮、豆粕等作為飼料喂養(yǎng),前一天晚上或凌晨宰殺,早晨上市,在這期間并沒(méi)有經(jīng)過(guò)任何降溫處理。在加工、運(yùn)輸和銷售過(guò)程中,容易受到空氣中細(xì)菌和病毒、車輛、包裝等的污染。因?yàn)槿馄诽幱跍囟认鄬?duì)較高環(huán)境中,細(xì)菌會(huì)大量繁殖,存在著安全隱患[1]。

        水分占肉品的75%以上,肉品中的物理和化學(xué)變化都與水分有關(guān)[2]。因此,水分的分布和狀態(tài)改變是肉品品質(zhì)變化的重要影響因素。核磁共振是指具有磁性的原子核在靜磁場(chǎng)的作用下,核能級(jí)發(fā)生分裂。當(dāng)滿足一定能量條件的外加射頻電磁波作用于原子核系統(tǒng)時(shí),原子核吸收入射電磁波能量,從低能級(jí)躍遷到相鄰高能級(jí)的現(xiàn)象。關(guān)閉射頻脈沖后,氫核由激發(fā)態(tài)恢復(fù)到平衡狀態(tài)的時(shí)間與氫核的狀態(tài)及所處的物理環(huán)境、化學(xué)環(huán)境有關(guān)[3-4]。因此,可以用橫向弛豫圖譜體現(xiàn)肉品中水分的性質(zhì)、分布及其動(dòng)態(tài)信息。低場(chǎng)核磁共振檢測(cè)技術(shù),具有檢測(cè)迅速、對(duì)操作人員要求低、對(duì)樣品無(wú)損等優(yōu)點(diǎn)[5]。

        海南瑞今黑豬肉是綠色有機(jī)豬肉,其價(jià)格比普通豬肉高1倍,其對(duì)生豬的養(yǎng)殖、屠宰、運(yùn)輸、銷售等環(huán)節(jié)實(shí)施全程監(jiān)控,有利于確保豬肉食品的質(zhì)量安全。然而質(zhì)量檢測(cè)部門(mén)缺少有效的手段區(qū)分綠色有機(jī)豬肉和普通豬肉,供應(yīng)商也有認(rèn)證難的問(wèn)題。試驗(yàn)用低場(chǎng)核磁共振技術(shù)檢測(cè)2種豬肉水分分布及其狀態(tài)的差別,為海南瑞今黑豬肉作為品牌豬肉提供數(shù)據(jù)支撐。

        1 材料與方法

        1.1 樣品

        海南瑞今黑豬的豬后腿肉,海南瑞今投資控股有限公司提供;普通瘦肉型豬后腿肉,??谵r(nóng)工貿(mào)股份有限公司提供。

        1.2 儀器與設(shè)備

        1.3 低場(chǎng)核磁共振檢測(cè)

        采用CPMG(硬脈沖回波)序列檢測(cè)肉品的橫向弛豫圖譜,由于設(shè)置不同的序列參數(shù),對(duì)采樣信號(hào)的信號(hào)強(qiáng)度和信噪比有很大影響,設(shè)置合適的序列參數(shù)[6],可得到幅值大、信噪比高的信號(hào),且有利于提高檢測(cè)效率,可保證采樣信號(hào)的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和重復(fù)性[7]。因此,這里有必要說(shuō)明試驗(yàn)對(duì)序列參數(shù)的設(shè)置。

        (1)肉品質(zhì)量。肉品質(zhì)量越大,所含氫核的數(shù)量也就越多,核磁共振的信號(hào)強(qiáng)度越大,試驗(yàn)采用儀器的口徑為60 mm。為了得到一個(gè)較強(qiáng)的采樣信號(hào),把肉品放置在磁場(chǎng)均勻性較好的磁共振中心位置,因此選擇質(zhì)量為15±0.02 g的豬肉。

        (2)磁體溫度。磁體溫度在32±0.02℃時(shí),磁場(chǎng)穩(wěn)定,均勻性好;超過(guò)磁體溫度范圍,檢測(cè)到的磁共振信號(hào)非常差。

        (3)P1,P2。肉品放入恒溫水浴鍋至32℃(使肉品與磁體溫度一致)后置于核磁共振分析儀的磁場(chǎng)中心,尋找中心頻率后,用FID序列尋找合適的90°脈寬P1和180°脈寬P2。測(cè)量得到P1(μS)=16,P2(μS)=34。

        (4)RG1,DRG1,PRG。由于核磁共振本身的信號(hào)很小,所以需要通過(guò)硬件來(lái)放大信號(hào),而信號(hào)放大倍數(shù)太大,又會(huì)使信號(hào)失真。因此,設(shè)置RG1(dB)=20,DRG1=3,PRG=1。

        (5)RFD。射頻延遲RFD,即采樣開(kāi)始時(shí)間,是指通過(guò)延遲90°脈沖的施加時(shí)間用來(lái)控制第1個(gè)采樣點(diǎn)的采樣時(shí)間。由于信號(hào)接收的時(shí)間是固定的,可以通過(guò)設(shè)置合適的RFD來(lái)控制接收機(jī)采樣時(shí)間。若RFD過(guò)大,90°脈沖施加的時(shí)間在接收機(jī)開(kāi)始采集信號(hào)之前,采樣信號(hào)會(huì)包括一段未發(fā)生核磁共振的信號(hào);若RFD過(guò)小,接收機(jī)開(kāi)始采樣的信號(hào)就包括了90°脈沖的信號(hào)和零蕩信號(hào)。通常選擇90°零蕩結(jié)束的第1個(gè)不受零蕩干擾的幅值最高點(diǎn)作為起始點(diǎn)。設(shè)置RFD=0.01。

        如今智能倉(cāng)儲(chǔ)機(jī)器人是采用地貼碼進(jìn)行運(yùn)作的,如若能夠研發(fā)出紅外線式或者雷達(dá)式機(jī)器人,通過(guò)紅外或是雷達(dá)感應(yīng)來(lái)自動(dòng)尋找最短路徑,既能省去人工規(guī)劃路線的步驟,又能避免因避讓其他機(jī)器人而繞遠(yuǎn)路。這樣就能大大節(jié)省機(jī)器人搬運(yùn)時(shí)間,提高揀貨效率。

        (6)TW。TW是重復(fù)采樣等待時(shí)間,是前一次采樣結(jié)束后,等待一定的時(shí)間,氫核的縱向磁化強(qiáng)度才能恢復(fù)到平衡狀態(tài)。等待時(shí)間足夠長(zhǎng),縱向磁化強(qiáng)度完全恢復(fù)到磁化強(qiáng)度矢量最大值M0;若等待時(shí)間短,縱向磁化強(qiáng)度沒(méi)有恢復(fù)至M0,則下一次采樣得到的信號(hào)幅度會(huì)減小。TW長(zhǎng),縱向弛豫恢復(fù)越完全,信號(hào)強(qiáng)、信噪比大,但采樣時(shí)間長(zhǎng),影響檢測(cè)效率;TW短,縱向弛豫沒(méi)有完全恢復(fù),采樣信號(hào)幅值較小。一般情況,TW大于等于縱向弛豫時(shí)間T1的5倍。因此,設(shè)置TW=4 500 ms。

        (7)TE。回波時(shí)間TE不僅會(huì)影響CPMG序列回波幅值的最大值,還會(huì)影響信號(hào)的總弛豫時(shí)間大小。TE越長(zhǎng),氫核的自擴(kuò)散作用越強(qiáng),弛豫時(shí)間越長(zhǎng);TE越短,橫向磁化強(qiáng)度的衰減越不明顯,能得到較強(qiáng)信號(hào),有較好的信噪比。系統(tǒng)要求回波時(shí)間TE大于6倍的P1值。因此,設(shè)置TE=0.22 ms。

        (8)SW。若采樣頻率SW過(guò)小,很可能會(huì)丟失樣品中的有效信息;SW越大,采樣時(shí)間越短,較大的樣品頻率有利于獲得完整的樣品信息。樣品的弛豫時(shí)間越短,需要設(shè)置的SW越大。設(shè)置SW=100KHz。

        (9)NECH。隨著回波個(gè)數(shù)NECH的增加,CPMG回波曲線的橫向弛豫區(qū)間變大。一般而言,回波個(gè)數(shù)應(yīng)設(shè)置的足夠大以使信號(hào)完全衰減。但NECH過(guò)大,則會(huì)延長(zhǎng)測(cè)定時(shí)間、降低試驗(yàn)檢測(cè)效率、降低采樣信號(hào)信噪比;過(guò)小則會(huì)丟失樣品中的有效信息。理論上,NECH是使樣品弛豫的最小回波數(shù),在圖像上使得信號(hào)占窗口的1/3。設(shè)置NECH=5 000。

        豬肉的采樣信號(hào)見(jiàn)圖1。

        圖1 豬肉的采樣信號(hào)

        (10)TD。采樣點(diǎn)數(shù)TD,在CPMG試驗(yàn)中,軟件根據(jù)設(shè)置的SW和NECH,自動(dòng)計(jì)算TD。

        (11)NS。重復(fù)采樣次數(shù)NS一般為2的倍數(shù),NS大,采樣信號(hào)的信噪比高,但掃描時(shí)間長(zhǎng);NS小,數(shù)據(jù)信噪比差。設(shè)定NS=8。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 海南瑞今黑豬肉和普通瘦肉型豬肉低場(chǎng)核磁共振分析

        海南瑞今黑豬肉T2弛豫圖譜見(jiàn)圖2,普通瘦肉型豬肉T2弛豫圖譜見(jiàn)圖3。

        圖2 海南瑞今黑豬肉T2弛豫圖譜

        圖3 普通瘦肉型豬肉T2弛豫圖譜

        圖2 和圖3給出的2種豬肉質(zhì)量都為15±0.02 g,其變化趨勢(shì)大致相同。圖中都有3個(gè)峰,這3個(gè)峰分別代表結(jié)合水T21(0~10 ms)、不易流動(dòng)水T22(10~100 ms)、自由水T23(100~1 000 ms),其中T21表示蛋白質(zhì)分子表面的極性基團(tuán)與水分子緊密結(jié)合的水分子層;T22表示存在于肌纖絲、肌原纖維及膜之間的不易流動(dòng)水,容易受蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和電荷變化的影響;T23表示存在于細(xì)胞外間隙中能自由流動(dòng)的水,依靠毛細(xì)管作用力而保持[8-9]。從圖中可以看出隨弛豫時(shí)間的延長(zhǎng),T21的峰面積變化不大,T22峰和T23峰都逐漸左移,T22的峰面積逐步減小,而T23的峰面積逐步增大。這是由于隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),肉中的肌纖維逐漸由松散變得緊密,不能吸附更多的水分,肉品中存在于肌原纖維及膜之間的不易流動(dòng)水流動(dòng)到細(xì)胞外的間隙,轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂伤?,從而使得不易流?dòng)水減少、自由水增多。而總峰面積逐漸減小,是由于隨著時(shí)間的延長(zhǎng),肉品中微生物的生長(zhǎng)消耗了部分水分,導(dǎo)致豬肉的總水分含量降低。

        2.2 海南瑞今黑豬肉與普通瘦肉型豬肉橫向弛豫比較

        海南瑞今黑豬肉與普通瘦肉型豬肉的T2比較見(jiàn)圖4。

        圖4海南瑞今黑豬肉與普通瘦肉型豬肉的T2比較

        圖4 給出相同質(zhì)量的海南瑞今黑豬肉和普通瘦肉型豬肉在同一時(shí)間的橫向弛豫T2反演結(jié)果比較,從圖4中可以看出,質(zhì)量相同的2種豬肉,海南瑞今黑豬肉的T22峰面積比普通瘦肉型豬肉T22峰面積大,說(shuō)明海南瑞今黑豬肉存在于肌原纖維及膜之間的不易流動(dòng)水較多,因此肉質(zhì)較嫩。海南瑞今黑豬肉與普通瘦肉型豬肉的T21和T23峰面積相差較小,但海南瑞今黑豬肉的T23峰頂點(diǎn)時(shí)間比普通瘦肉型豬肉T23峰頂點(diǎn)時(shí)間小。弛豫時(shí)間越短說(shuō)明水分與底物結(jié)合越緊密,弛豫時(shí)間越長(zhǎng)說(shuō)明水分越自由[10]。也就是說(shuō)普通瘦肉型豬肉的自由水與底物的結(jié)合較松,其自由水流動(dòng)性稍大一些。

        普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T21峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖5,普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T22峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖6,普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T23峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖7。

        圖5 普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T21峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化

        圖6 普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T22峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化

        圖7普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T23峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化

        圖5 ~圖7分別給出普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T21,T22,T23峰頂點(diǎn)時(shí)間隨時(shí)間的變化,從圖中可以看出海南瑞今黑豬肉的峰頂點(diǎn)時(shí)間T21比普通瘦肉型豬肉的低,說(shuō)明海南瑞今黑豬肉的大分子蛋白與水分的結(jié)合較緊密,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),T21的峰頂點(diǎn)時(shí)間都逐漸增大,水分與大分子的結(jié)合逐漸松散;T22和T23的峰頂點(diǎn)時(shí)間都隨時(shí)間呈階段性減小的變化,是由于自由水和不易流動(dòng)水的含量變少,氫核的數(shù)量減少,由激發(fā)態(tài)到平衡態(tài)所需的時(shí)間短,所以弛豫時(shí)間變短。

        普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T22峰面積比例隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖8,普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T23峰面積比例隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖9。

        圖8 普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T22峰面積比例隨時(shí)間的變化

        圖9普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T23峰面積比例隨時(shí)間的變化

        圖8 和圖9分別給出普通瘦肉型豬肉與海南瑞今黑豬肉T22,T23峰面積比例隨時(shí)間的變化。從圖中可以看出,不易流動(dòng)水所占的比例高,占80%以上,其次為自由水、結(jié)合水,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),海南瑞今黑豬肉和普通瘦肉型豬肉的T23峰面積比例都隨時(shí)間逐步增大,T22峰面積比例都隨時(shí)間逐步減小,是由于不易流動(dòng)水轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂伤?。海南瑞今黑豬肉比普通瘦肉型豬肉的T23峰面積比例高,說(shuō)明其自由水含量較多,但其與底物的結(jié)合較緊。

        3 結(jié)論

        從結(jié)合水、不易流動(dòng)水、自由水的峰頂點(diǎn)時(shí)間和峰面積比例中可以看出2種豬肉的差別,相對(duì)普通瘦肉型豬肉,海南瑞今黑豬肉的不易流動(dòng)水含量較高,因此肉質(zhì)較嫩。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),不易流動(dòng)水轉(zhuǎn)化為自由水,使得不易流動(dòng)水的含量減小而自由水的含量增大。海南瑞今黑豬肉比普通瘦肉型豬肉的自由水T23頂點(diǎn)時(shí)間低,但T23峰面積比例高,說(shuō)明海南瑞今黑豬肉細(xì)胞膜間隙與水之間的結(jié)合緊密而且水含量高。用低場(chǎng)核磁共振技術(shù),可以區(qū)分海南瑞今黑豬肉和普通瘦肉型豬肉。

        [1]王常華,周益.海南本土黑豬產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及對(duì)策[J].區(qū)域經(jīng)濟(jì),2015(11):142-143.

        [2]張錦勝.核磁共振及其成像技術(shù)在食品科學(xué)中的應(yīng)用研究[D].南昌:南昌大學(xué),2007.

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        [5]夏天蘭.低場(chǎng)核磁共振技術(shù)在肉與肉制品水分測(cè)定及其相關(guān)品質(zhì)特性的應(yīng)用[J].食品科學(xué),2011,32(21):253-256.

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        Detection ofHainan Ruijin Black Pork Based on Low-field Nuclear Magnetic Resonance

        YANG Fang,*XU Jianmei,WANG Ruijun,LIN Qing
        (Department of Medical Information,Hainan Medical College,Haikou,Hainan 571199,China)

        This study is based on low field nuclear magnetic resonance(LF-NMR)to detect water content in Hainan Ruijin black pork,and discuss with parameter setting of LF-NMR analyzer in meat.Transverse relaxation time spectrum can show the distribution and state of water change in meat,and to explore the Hainan Ruijin black pork and common lean pork differences at the molecular level.

        LF-NMR;Hainan Ruijin black pork;transverse relaxation time spectrum

        TS251.1

        A

        10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2017.07.011

        1671-9646(2017)07a-0035-04

        2017-05-13

        海南醫(yī)學(xué)院教育科研項(xiàng)目(HYZX201603)。

        楊芳(1983—),女,碩士,講師,研究方向?yàn)楹舜殴舱癯上衽c分析。

        *通訊作者:許建梅(1962—),女,碩士,副教授,研究方向?yàn)獒t(yī)學(xué)影像物理成像。

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