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        堿性成纖維細胞生長因子在慢性硬膜下血腫患者外膜中的表達

        2017-08-16 09:34:13汪新宇陳曉旭姜大宇李國棟董克辛
        中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2017年15期
        關(guān)鍵詞:外膜漿細胞硬膜

        汪新宇 陳曉旭 姜大宇 李國棟 董克辛

        堿性成纖維細胞生長因子在慢性硬膜下血腫患者外膜中的表達

        汪新宇 陳曉旭 姜大宇 李國棟 董克辛

        目的 通過檢測堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)在慢性硬膜下血腫(CSDH)外膜中的表達, 研究其與CSDH病情發(fā)展的關(guān)系。方法 選取32例CSDH患者, 術(shù)中取材血腫外膜及硬膜, 通過免疫組化檢測bFGF在CSDH患者血腫外膜及硬膜的表達。結(jié)果 CSDH外膜為新鮮肉芽組織, 可見網(wǎng)狀血管存在, 其間為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞浸潤并聚集, 相鄰硬膜未見明顯異常。高倍顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)bFGF主要表達在中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞的胞漿中,而在鄰近硬膜中未見明顯表達;血腫外膜bFGF為強陽性表達, 術(shù)后復(fù)發(fā)7例, 占22%, 未復(fù)發(fā)25例,占78%, 則術(shù)后血腫復(fù)發(fā)危險性明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 bFGF來源于血腫外膜中的中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞, 其介導(dǎo)血腫外膜新生血管形成、局部炎癥反應(yīng),最終導(dǎo)致血腫量增多, 病情逐漸加重。

        堿性成纖維細胞生長因子;慢性硬膜下血腫

        CSDH是神經(jīng)外科的常見病, 好發(fā)人群為老人與嬰幼兒,如積極治療, 術(shù)后恢復(fù)良好[1-3]。本研究通過術(shù)中取材, 術(shù)后免疫組化染色檢測bFGF在CSDH外膜及鄰近硬腦膜中的表達情況, 分析其與CSDH疾病發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系, 提供個性化針對性治療。

        1 資料與方法

        1. 1 一般資料 從2012年1月~2015年12月本院神經(jīng)外科進行鉆孔引流的CSDH患者中隨機選擇32例, 其中女12例,男20例;年齡45~89歲, 中位年齡65.3歲;病程最短24 d,最長1年;無明顯誘因隱匿起病6例, 發(fā)病年齡均>60歲(占19%);腦外傷患者共26例(占81%), 受傷病史1~5個月?;颊甙Y狀及體征:輕度頭痛伴頭暈27例, 惡心伴噴射性嘔吐5例, 格拉斯哥昏迷評分9~12分共3例, 13~15分共29例,言語不清1例, 尿便失禁1例, 偏癱14例, 單側(cè)病理反射陽性6例, 智力下降及精神異常2例, 偏身感覺減退3例。影像學(xué)檢查:頭計算機斷層掃描提示等、低密度14例, 高密度10例, 混雜密度8例。治療:診斷明確、術(shù)前準備完善后于局部麻醉下行單側(cè)鉆孔引流術(shù)31例, 分期行雙側(cè)鉆孔引流術(shù)1例;術(shù)后共7例存在血腫復(fù)發(fā);其中3例患者術(shù)后1周內(nèi)反復(fù)出現(xiàn)癲癇發(fā)作, 再次行鉆孔引流后, 均痊愈出院;4例患者術(shù)后復(fù)查CT提示血腫仍有殘留, 但最厚層面<1 cm,經(jīng)保守治療1個月后完全吸收。

        1. 2 主要試劑 鼠抗人bFGF單克隆抗體。

        1. 3 取材過程 所有病例均在本院行鉆孔引流術(shù), 術(shù)中在血腫最厚部位切取血腫外膜及硬膜(5 mm×5 mm), 術(shù)后制成石蠟切片。

        1. 4 免疫組織化學(xué)染色方法 使用鼠抗人bFGF試劑盒, 由本院病理科醫(yī)技人員操作, 根據(jù)試劑盒要求的程序測定外膜和硬膜上的表達。

        1. 5 判定標準 每張染色切片觀察5個高倍視野, 陽性率≤10%為陰性(-), 10%~25%為弱陽性(+), 25%~50%為陽性(++), >50%為強陽性(+++)。

        1. 6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差()表示, 采用t檢驗;計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2. 1 外膜及硬膜的HE染色 外膜為新鮮肉芽組織, 可見大量網(wǎng)狀血管存在, 其間為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞浸潤并聚集。相鄰硬膜未見明顯異常。

        2. 2 bFGF的表達結(jié)果 高倍視野下所見bFGF主要表達在中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞的胞漿中, 而在鄰近硬膜中未見明顯表達, bFGF在血腫外膜和硬膜表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。血腫外膜bFGF為強陽性表達, 則術(shù)后血腫復(fù)發(fā)危險性明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

        表1 bFGF在血腫外膜及硬膜中的表達(n)

        表2 bFGF在術(shù)后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)中的表達(n)

        3 討論

        CSDH占顱內(nèi)血腫的10%左右, 老年人的發(fā)病率較高,約為6.5/10萬人, 發(fā)病癥狀不典型, 無特征表現(xiàn)。在我國CSDH患者中存在外傷史的占53.3%~80.3%, 發(fā)病誘因包括:腦萎縮、腦室引流術(shù)后過度分流、動脈粥樣硬化、抗血小板治療等[4-6]。

        CSDH病理基礎(chǔ)主要在于血腫液及包膜產(chǎn)生的占位效應(yīng),導(dǎo)致鄰近皮層受壓、腦脊液循環(huán)受阻, 從而引起顱內(nèi)壓增高,進一步可能誘發(fā)癲癇甚至出現(xiàn)腦疝, 加重神經(jīng)功能損害, 產(chǎn)生嚴重后果。鉆孔引流術(shù)是目前公認首選的治療方法, 但有學(xué)者研究表明, 術(shù)后較易出現(xiàn)血腫復(fù)發(fā), 占8%~37%。本試驗患者中, 術(shù)后復(fù)發(fā)7例, 占22%, 再次行鉆孔引流2例, 占6%, 與文獻接近[7]。CSDH的發(fā)病機制及術(shù)后復(fù)發(fā)原因, 至今不明, 國外有學(xué)者傾向于滲透壓梯度及半透膜學(xué)說, 但國內(nèi)有學(xué)者分析病變處凝血功能異??赡苁菍?dǎo)致血腫不斷擴大、術(shù)后復(fù)發(fā)的主要病因, 但都缺乏相關(guān)臨床試驗依據(jù)。王良偉等[8]對CSDH新生外膜進行病理檢查提示, 血腫外膜可見大量新生毛細血管擴張充血, 有炎性細胞、膠原纖維和纖維細胞等, 血管壁不完整。國內(nèi)有學(xué)者對血腫外膜進行電鏡掃描, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)大部分毛細血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)異常, 也有部分毛細血管結(jié)構(gòu)完整, 擴張不明顯[9]。

        對血腫外膜和鄰近硬膜進行HE染色提示外膜為新鮮肉芽組織, 可見大量網(wǎng)狀血管存在, 其間為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞浸潤并聚集;相鄰硬膜未見明顯異常。本試驗結(jié)果顯示, bFGF在主要表達在中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、成纖維細胞、漿細胞的胞漿中, 而在鄰近硬膜中未見明顯表達;bFGF在二者之間的表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);且血腫外膜bFGF為強陽性表達患者, 術(shù)后血腫復(fù)發(fā)危險性明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。bFGF是近年來發(fā)現(xiàn)的促血管再生因子, 它在體內(nèi)主要存在于上皮組織中, 包括神經(jīng)上皮組織、心臟、肺臟、腎臟、肝臟以及腫瘤組織中;主要作用于新生血管的內(nèi)皮細胞, 具有極強的促細胞有絲分裂和促細胞趨化作用, 并可促進新生血管基底膜降解, 從而加快血管生成速度同時也可增加新生血管管壁的通透性, 導(dǎo)致新生血管再出血。

        綜上所述, bFGF介導(dǎo)了CSDH外膜血管形成, 并使血腫外膜新生網(wǎng)狀血管的通透性增加, 隨著腦搏動的物理作用,導(dǎo)致新生外膜不斷滲血, 從而使慢性硬膜下血腫液不斷擴大和術(shù)后出現(xiàn)血腫復(fù)發(fā)。體會在臨床工作中檢測血腫外膜中bFGF表達, 相關(guān)技術(shù)成熟, 術(shù)中取材操作簡單、安全, 且費用不高。bFGF的檢測結(jié)果可作為一項參考指標, 更進一步了解患者病情, 有利于及早提供個性化針對性治療, 從而減少血腫復(fù)發(fā)再次手術(shù)的風(fēng)險, 應(yīng)用前景廣闊。

        [1] 高乃康, 毛伯鏞. 慢性硬膜下血腫治療及其復(fù)發(fā)相關(guān)因素研究.中華神經(jīng)外科疾病研究雜志, 2004, 3(4):350-351.

        [2] 蘇少波, 張建寧. 慢性硬膜下血腫外膜的超微結(jié)構(gòu)觀察. 中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 11(2):145-148.

        [3] 王湘如. 外用重組人堿性成纖維細胞生長因子治療慢性傷口臨床分析. 醫(yī)藥衛(wèi)生(文摘版), 2016(9):00063.

        [4] 趙允沛, 劉文, 王曉蘭, 等. 堿性成纖維細胞生長因子對鼓膜修復(fù)的影響. 聽力學(xué)及言語疾病雜志, 2007, 15(6):485-486.

        [5] 馬京庫. 慢性硬膜下血腫外膜中轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達及臨床意義. 大連醫(yī)科大學(xué), 2013.

        [6] 馬京庫, 左毅, 李寶明, 等. 慢性硬膜下血腫外膜中轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達及臨床意義. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志, 2016, 15(4):342-345.

        [7] 蘇少波, 張建寧. 慢性硬膜下血腫外膜的超微結(jié)構(gòu)觀察. 中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 11(2):145-148.

        [8] 王良偉, 李監(jiān)松, 徐光斌, 等. 慢性硬膜下血腫鉆孔引流術(shù)后再出血的原因及治療. 臨床神經(jīng)外科雜志, 2015(2):137-139.

        [9] 徐建榮, 李曦, 金曉, 等. 肌成纖維細胞在CSDH外膜中分布的初步研究. 浙江醫(yī)學(xué)教育, 2011, 10(2):44-46.

        Expression of basic fibroblast growth factor in the adventitia of patients with chronic subdural hematoma

        WANG Xin-yu, CHEN Xiao-xu, JIANG Da-yu, et al. Department of Neurosurgery, Dalian City

        Friendship Hospital, Dalian 116001, China

        Objective To detect the expression of basic fibroblast growth factor (bFGF) in adventitia of patients with chronic subdural hematoma (CSDH), and study its correlation with CSDH disease progression. Methods A total of 32 patients with CSDH were enrolled in this study. The hematoma adventitia and dura mater were collected and the expression of bFGF in hematoma adventitia and dura mater of CSDH patients was detected by immunohistochemistry. Results CSDH adventitia is fresh granulation tissue, showing the presence of reticular vessels, among which were neutrophils, eosinophils, fibroblasts, plasma cell infiltration and aggregation. No obvious abnormality exists in adjacent dura mater. Under high power microscope, bFGF was mainly expressed in the cytoplasm of neutrophils, eosinophils, fibroblasts and plasma cells, but no obvious expression was observed in the adjacent dura mater. The hematoma adventitia bFGF of hematoma was strongly positive, and there were 7 recurrence cases after operation, accounting for 22% and 25 non-recurrence cases, accounting for 78%. The risk of postoperative recurrence of hematoma increased significantly, and the difference had statistical significance (P<0.05). Conclusion BFGF is derived from hematoma adventitia of neutrophils, eosinophils, fibroblasts, plasma cells, which mediates hematoma epicardial neovascularization, local inflammatory response, eventually leading to increased hematoma number and gradually worsened condition.

        Basic fibroblast growth factor; Chronic subdural hematoma

        10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.15.008

        2017-05-18]

        大連市衛(wèi)生局課題項目(項目編號:WSJ/KJC-01-JL-01)

        116001 大連市友誼醫(yī)院神經(jīng)外科

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