王貴波 郭妮妮 謝家聲 趙小龍 羅超應(yīng) 羅永江 鄭繼方 辛蕊華 李錦宇

摘要：為了在對“慢呼寧”口服液的安全性進(jìn)行評價(jià)，為臨床用藥提供安全依據(jù)，選取120羽14日齡的三黃肉雞，適應(yīng)性飼喂1周后，隨機(jī)分為治療劑量的1倍劑量組、3倍劑量組、5倍劑量組和對照組，每組30羽。試驗(yàn)時(shí)分別按照每組試驗(yàn)雞的平均體質(zhì)量給予不同劑量的藥物，連續(xù)給藥1周。在試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組隨機(jī)選取10只進(jìn)行稱質(zhì)量和采血，測定體質(zhì)量變化、血常規(guī)和肝腎功能指標(biāo)，測定臟器指數(shù)，并對雞的心、肝、脾、肺和腎臟進(jìn)行病理檢查。結(jié)果表明，用藥后各組雞的體質(zhì)量增加量及臟器指數(shù)組間差異不顯著（P>0.05）。血常規(guī)指標(biāo)則在試驗(yàn)前后組間差異亦不顯著（P>0.05）；血清ALT活性、白蛋白、肌酐和尿素含量組間差異不顯著（P>0.05）；在用藥后，各組雞的心、肝、脾、肺和腎臟組織變化均無顯著差異和異常。結(jié)果表明，“慢呼寧”口服液對雞生理生化指標(biāo)的影響小，病理剖檢未見對心、肝、脾、肺和腎臟產(chǎn)生毒性作用，是一種低毒安全的中獸藥制劑。

關(guān)鍵詞：“慢呼寧”口服液；中獸藥；呼吸道疾病；雞；安全性評價(jià)

中圖分類號： S858.31文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）11-0114-03[HS）][HT9.SS]

隨著雞群養(yǎng)殖集約化程度越來越高，雞的呼吸道疾病成為當(dāng)前養(yǎng)雞業(yè)中具有嚴(yán)重危害的一類疾病，由此造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且還影響了相關(guān)產(chǎn)品的品質(zhì)。目前，雞的呼吸道疾病在治療上多采用疫苗緊急免疫或西藥治療，而疫苗免疫具有免疫失敗的潛在危險(xiǎn)性，西藥治療又極易產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性，中藥防治為此提供了必要的補(bǔ)充，又符合當(dāng)前人們對畜產(chǎn)品安全性的需求。“慢呼寧”口服液是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所研發(fā)，針對雞慢性呼吸道病而開發(fā)的新型中獸藥制劑，具有調(diào)節(jié)雞體免疫力和抗菌消炎等功效。為對“慢呼寧”口服液的安全性進(jìn)行評價(jià)，作為臨床用藥的安全依據(jù)，開展此項(xiàng)研究。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗(yàn)用藥“慢呼寧”口服液（批號：2011062402），由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院中獸醫(yī)研究所藥廠生產(chǎn)，主要由金銀花、連翹等中藥組成，具有辛涼透邪、清熱解毒的功效，可用于治療雞的慢性呼吸道病。

1.1.2儀器及試劑邁瑞B(yǎng)S-420型全自動生化分析儀，由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)；AUW120D電子天平，由日本島津公司生產(chǎn)；LEICA RM2025型組織切片機(jī)、LEICA TP1020型組織脫水機(jī)，由德國Leica公司生產(chǎn)；CK-2型倒置顯微鏡，由日本Olympus公司生產(chǎn)；CELL-DYN3200[HJ1.4mm]血細(xì)胞分析儀，由美國雅培公司生產(chǎn)；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒（批號：140212018）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒（批號：140112022）、白蛋白試劑盒（批號：140912017）、肌酐試劑盒（批號：141012017）和尿素試劑盒（批號：141212020），均由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。

1.1.3試驗(yàn)動物120羽[JP2]14日齡三黃肉雞，購于蘭州市西固區(qū)聯(lián)合養(yǎng)雞公司，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動物房飼養(yǎng)，適應(yīng)性飼喂1周。將雞隨機(jī)分為4組（每組30羽）：1倍劑量組、3倍劑量組、5倍劑量組和對照組。[JP][HJ][LM]

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1給藥方案1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組分別按照推薦劑量（按原藥材計(jì)0.50 g/kg體質(zhì)量）的1、3、5倍量，將藥物進(jìn)行飲水飼喂，連續(xù)飼喂1周。對照組不給予任何藥物，進(jìn)行正常飼喂。

1.2.2相關(guān)指標(biāo)的觀察測定觀察試驗(yàn)期間每天各組雞的健康狀況，包括活動、采食、飲水、發(fā)病和死亡等。在試驗(yàn)雞21日齡時(shí)，隨機(jī)選取10羽，進(jìn)行稱質(zhì)量，然后心臟采血和剖檢。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組剩余雞再隨機(jī)選取10羽重復(fù)上述操作。觀察剖檢雞的實(shí)質(zhì)性臟器有無眼觀病理變化，對心、肝、脾、肺、腎稱質(zhì)量并計(jì)算臟器指數(shù)（臟器濕質(zhì)量/體質(zhì)量×100%）并進(jìn)行病理取材，于4%甲醛固定48 h后，做病理組織切片，經(jīng)HE染色后，進(jìn)行顯微鏡觀察。

1.2.3血常規(guī)及血清生化指標(biāo)的測定用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)分析，主要測定白細(xì)胞（WBC）數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、中性粒細(xì)胞百分比、紅細(xì)胞（RBC）數(shù)、血紅蛋白（HGB）含量、血小板（PLT）數(shù)。用邁瑞B(yǎng)S-420型全自動生化分析儀測定血清中肌酐含量、尿素含量、白蛋白（albumin，ALB）含量、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransterase，AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）活性。

1.2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用SPSS 14.0軟件進(jìn)行方差分析，P<0.05 時(shí)，表示差異顯著；P<0.01時(shí)，表示差異極顯著。

2結(jié)果與分析

2.1“慢呼寧”口服液對雞體質(zhì)量的影響

2.3“慢呼寧”口服液對雞血常規(guī)指標(biāo)的影響

由表3可見，用藥前，1倍劑量組雞的單核細(xì)胞百分比顯著低于對照組（P<0.05）；1倍劑量組和3倍劑量組雞的中性粒細(xì)胞百分比顯著低于對照組（P<0.05）；而紅細(xì)胞數(shù)量、白細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量、血小板數(shù)量和淋巴細(xì)胞百分比組間差異不顯著（P>0.05）。

2.5雞臟器病理剖檢結(jié)果

[JP+1]在用藥前及用藥7 d后，除對照組1羽雞在試驗(yàn)過程中因應(yīng)激發(fā)生死亡外，其余各組雞的心、肺、脾和腎臟均未表現(xiàn)差異。心臟均為圓錐體，顏色粉紅，心包膜及心包液透明；有結(jié)構(gòu)完整閏盤，心肌纖維致密和肌纖維束分布均勻；細(xì)胞核和胞漿均勻；眼觀無明顯異常。肺臟均扁平呈長四邊形海綿狀，顏色粉紅，有結(jié)構(gòu)完整、分布均勻、大小不等的肺泡；眼觀無明顯異常。脾臟如球體，顏色棕紅，脾束、脾血竇和小靜脈結(jié)構(gòu)明顯，淋巴細(xì)胞均勻分布，皮質(zhì)、髓質(zhì)結(jié)構(gòu)完整；眼觀無明顯異常。腎臟為紅褐色，呈長條狀，質(zhì)軟，腎小體、近曲小管和遠(yuǎn)曲小管結(jié)構(gòu)完整，腎小管密集，細(xì)胞核大小一致，分布均勻；眼觀無明顯異常。肝臟呈紅褐色，肝組織以肝細(xì)胞及中央靜脈為中心，呈放射狀排列，肝細(xì)胞呈梁索狀；眼觀無明顯異常。[JP]

3小結(jié)與討論

3.1“慢呼寧”口服液的毒副作用

“慢呼寧”口服液以金銀花和連翹為主要有效成分。與連翹相關(guān)的藥理作用研究和報(bào)道中，涉及的化學(xué)成分以連翹酯苷、連翹苷、連翹酚和揮發(fā)油類居多，這些成分臨床應(yīng)用廣泛且療效確切，毒副作用低[1，3]。

方中金銀花具有抗病原微生物、抗炎、免疫調(diào)節(jié)和中樞興奮等作用。研究表明，金銀花的水浸液灌服對家兔、犬等無明顯的毒性，對呼吸、血壓和尿量均無影響，小鼠皮下注射金銀花浸膏的LD50為53 g/kg體質(zhì)量。報(bào)道表明，溶血作用均為其生曬品，其致敏作用也可在口服過程中被消化道的酶類所破壞[4]。

3.2“慢呼寧”口服液對雞生理生化指標(biāo)的影響

將“慢呼寧”口服液對試驗(yàn)組雞進(jìn)行飲水飼喂后，對雞的體質(zhì)量增長無明顯影響，且與對照組雞相比有體質(zhì)量增長加快的趨勢。同時(shí)，該藥對雞的臟器指數(shù)亦無顯著影響。各組雞在用藥前，單核粒細(xì)胞數(shù)和中性粒細(xì)胞數(shù)雖然組間出現(xiàn)了差異；但用藥7 d后，組間的差異性反而消除了；而其他血常規(guī)指標(biāo)則在試驗(yàn)前后組間差異不顯著；從一定意義上說明了此方對機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用[5-6]。在血清生化指標(biāo)方面，ALT活性、AST活性和白蛋白作為綜合衡量肝功能的重要指標(biāo)，在用藥7 d后，僅3倍劑量組雞的AST活性顯著低于對照組（P<0.05），結(jié)合ALT活性和白蛋白組間差異不顯著（P>0.05）及3倍劑量組肝臟病理剖檢的結(jié)果，不能說明藥物對雞的肝功能造成了影響；在試驗(yàn)前后，各組間雞的血清尿素含量和肌酐含量差異不顯著，說明藥物對腎功能未造成影響[7]。試驗(yàn)前后，根據(jù)獸醫(yī)組織學(xué)相關(guān)資料[8-9]，各組雞經(jīng)病理剖檢未見明顯的眼觀病變，而顯微鏡檢也未發(fā)現(xiàn)異常。

綜上所述，“慢呼寧”口服液是一種低毒安全的中獸藥制劑。

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