李元龍 ，王中華 ，馮獻(xiàn)忠

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，陜西楊凌 712100；2.中國(guó)科學(xué)院 東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，長(zhǎng)春 130000)

?

大豆矮化突變體苗期表型觀察及對(duì)外源激素的響應(yīng)

李元龍1，王中華1，馮獻(xiàn)忠2

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，陜西楊凌 712100；2.中國(guó)科學(xué)院 東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，長(zhǎng)春 130000)

以‘菏豆12’及其60CO-γ射線誘導(dǎo)矮化突變體為材料，研究突變體的第一復(fù)葉葉柄長(zhǎng)度、苗期株高、葉柄顯微結(jié)構(gòu)，利用4種外源激素處理根系，初步探查突變基因的類型。結(jié)果表明：該突變體葉柄比野生型短，株高矮，整體緊湊。葉柄橫切觀察發(fā)現(xiàn)，該突變體木質(zhì)部細(xì)胞及髓細(xì)胞直徑變小。根系對(duì)6-芐氨基嘌呤(6-BA)、赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)非常敏感，對(duì)油菜素內(nèi)酯(BR)無(wú)應(yīng)答，表明該突變體可能是BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)出現(xiàn)障礙，后續(xù)目標(biāo)基因發(fā)掘應(yīng)圍繞BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的相關(guān)基因展開(kāi)。矮化短葉柄突變體在大豆理想株型改造與大豆分子育種中可能具有潛在利用價(jià)值。

大豆；矮化突變體；短葉柄；根系；植物外源激素；顯微結(jié)構(gòu)

高產(chǎn)是大豆育種的重要目標(biāo)，受谷物的“綠色革命”啟示，通過(guò)適度降低大豆株高，高密度種植可提高植株的水分利用效率，從而增加大豆的單位面積產(chǎn)量[1]。研究表明，大豆矮桿、短葉柄可以改變大豆冠層結(jié)構(gòu)，形成緊湊的株型，可以在高密度種植的前提下，最大限度地提高群體光能利用率而增加產(chǎn)量[2]。對(duì)于大豆矮桿、短葉柄的研究最早始于1983年，Kilen發(fā)現(xiàn)1個(gè)大豆矮桿、短葉柄突變體‘D76-1609’,其與長(zhǎng)葉柄大豆‘Lee68’雜交，遺傳分析表明該短葉柄性狀受1對(duì)隱性基因控制, 命名為lps[3]。1998年，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究所發(fā)現(xiàn)新型大豆短葉柄突變體‘NJ90L-1SP’，表現(xiàn)為短葉柄且葉枕異常。遺傳研究發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)性狀受2對(duì)隱性重疊基因 lps1和 lps2控制[4]。2009年，Jun等發(fā)現(xiàn)1個(gè)大豆短葉柄突變體——‘SS98206’，經(jīng)過(guò)遺傳分析后發(fā)現(xiàn)其基因與‘D76-1609’短葉柄基因lps不是等位基因。且其表型與‘NJ90L-1SP’的表型明顯不同，故命名該基因?yàn)?lps3[5]。由此可見(jiàn)，培育和研究矮化、短葉柄大豆突變體一方面豐富了大豆的遺傳資源；另一方面對(duì)于培育大豆理想株型、高密種植來(lái)提高產(chǎn)量具有重要意義。

許多研究表明植物矮化多是由某一植物激素?zé)o法合成或某一植物激素作用通路受阻所致[6-7]。在豌豆矮化突變體1 kb中存在GA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常和IAA合成缺陷[8]。在番茄中與BR合成相關(guān)的dwarf基因突變?cè)斐芍仓臧痆9]。Sasaki等[10]對(duì)1個(gè)GA不敏感水稻矮化突變體研究發(fā)現(xiàn)，GID1和GID2與GA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)。張達(dá)對(duì)矮化大豆突變體‘東澤11號(hào)’的激素處理研究和李葳對(duì)矮桿及半矮桿大豆突變體的激素處理研究都證明GA3與大豆矮化存在正相關(guān)聯(lián)系[11-12]。矮化植株的細(xì)胞學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，矮化表型主要由于細(xì)胞數(shù)目減少或細(xì)胞間隙變小，細(xì)胞長(zhǎng)度變短所致。多種激素間存在復(fù)雜的相互作用且均會(huì)影響植物發(fā)育。GA可以影響細(xì)胞分裂的某個(gè)階段促進(jìn)細(xì)胞分裂的進(jìn)程和細(xì)胞壁長(zhǎng)軸以及微管的伸長(zhǎng)[13]，IAA可促進(jìn)GA1的生物合成，抑制GA1向無(wú)活性的GA29轉(zhuǎn)化[14]。BR在促進(jìn)植株生長(zhǎng)的過(guò)程中具有縱向伸長(zhǎng)和橫向擴(kuò)展的雙重作用，作用機(jī)制既不同于IAA，也不同于GA[15]。由此可見(jiàn)，激素與矮化、短葉柄性狀有緊密的關(guān)系。

本研究對(duì)60CO-γ射線誘變‘菏豆12’產(chǎn)生的1個(gè)矮化短柄突變體的株高、葉柄長(zhǎng)度進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀測(cè)，對(duì)葉柄進(jìn)行顯微觀察。為了研究該突變體與激素的關(guān)系，采用4種激素處理來(lái)檢測(cè)突變體與野生型‘菏豆12’的表型差異，為進(jìn)一步研究該大豆矮化、短葉柄性狀的調(diào)控基因功能奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

大豆突變體由‘菏豆12’經(jīng)60CO-γ誘變而來(lái)，由中國(guó)科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所提供。野生型大豆‘荷豆12’由山東省菏澤市農(nóng)科所選育。

所用植物激素有6-芐氨基嘌呤(6-BA)，赤霉素(GA3)，吲哚乙酸(IAA)，油菜素內(nèi)酯(BR)。使用1/2 MS培養(yǎng)液(MS 2.165 g，蔗糖15 g，調(diào)節(jié)pH=5.8)配制4種植物激素的所需濃度。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 大豆幼苗株高和葉柄長(zhǎng)度測(cè)量 挑選飽滿、大小一致的突變體和‘菏豆12’種子，進(jìn)行溫室盆栽，從出苗后第10天開(kāi)始，即第1片三出復(fù)葉完全展開(kāi)，每隔3 d測(cè)量1次株高與第1片三出復(fù)葉葉柄長(zhǎng)度，各取3株重復(fù)，共測(cè)量6次，每次測(cè)量3次取平均值，繪制生長(zhǎng)曲線。

1.2.2 大豆突變體葉柄橫切觀察 材料取自成熟突變體和野生型‘菏豆12’植株上第4片復(fù)葉葉柄中間部位。各3個(gè)重復(fù)，置于FAA固定液中48 h，沖洗后備用，采用常規(guī)石蠟制片方法，切片厚度10 μm。番紅固綠染色。阿拉伯樹(shù)膠封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察拍照。各項(xiàng)數(shù)據(jù)測(cè)量取3個(gè)重復(fù)的“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。

1.2.3 大豆突變體根系在不同激素處理反應(yīng) 試驗(yàn)材料種植與管理：挑選飽滿、大小一致的突變體和‘菏豆12’種子，用氯氣(200 mL次氯酸鈉+40 mL濃鹽酸)熏蒸一夜，取出敞口放在超凈工作臺(tái)上吹0.5 h，封口放置2 d后分別放于無(wú)菌培養(yǎng)皿中，加適量無(wú)菌水，將培養(yǎng)皿封口放于37 ℃培養(yǎng)箱中，進(jìn)行浸種處理(約60 h)；將露出胚根的大豆，胚根向下依次放入Phytotc培養(yǎng)袋(北京啟維益成科技有限公司)中，每個(gè)培養(yǎng)袋加入10 mL相應(yīng)濃度的植物激素營(yíng)養(yǎng)液。放于空氣相對(duì)濕度為60%的培養(yǎng)室，設(shè)置溫度(26 ℃光/24 ℃暗)和光照(13 h光/11 h暗)條件。每天向培養(yǎng)袋添加5 mL相應(yīng)濃度的植物激素營(yíng)養(yǎng)液，保持生長(zhǎng)袋濕潤(rùn)。培養(yǎng)6 d后，觀察根系生長(zhǎng)情況。

外源激素濃度設(shè)置：對(duì)突變體和‘菏豆12’的種子同時(shí)設(shè)置4種外源植物激素處理，分別為IAA、6-BA、GA3、BR，每種植物激素設(shè)置3個(gè)濃度梯度處理，0.1、1、5 μmol/L，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。野生型與突變體對(duì)照組只用1/2 MS營(yíng)養(yǎng)液處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 突變體株高與葉柄長(zhǎng)度的變化

從圖1可以看出，突變體第一片葉葉柄長(zhǎng)度明顯短于野生型，且長(zhǎng)度變化并不明顯，平均只增長(zhǎng)0.70 cm，而野生型的葉柄的伸長(zhǎng)非常明顯，大約是突變體的4倍，平均增長(zhǎng)2.733 cm。突變體植株株高在出苗10～13 d增長(zhǎng)顯著，之后增長(zhǎng)緩慢。野生型株高在全時(shí)期增長(zhǎng)明顯，在出苗后19～21 d增幅最大。以上結(jié)果表明，突變體的生長(zhǎng)速度要弱于野生型。

2.2 葉柄顯微結(jié)構(gòu)觀察

大豆葉柄橫切從外到內(nèi)依次是表皮、皮層、維管束、髓。具有多個(gè)維管束列，以大型維管束和小型維管束交替相間的方式環(huán)形排列，維管束類型為外韌維管束。通過(guò)顯微觀察發(fā)現(xiàn)，突變體葉柄表皮細(xì)胞，皮層細(xì)胞的大小形態(tài)與野生型差異不大，維管束個(gè)數(shù)與野生型類似，大致為13個(gè)。突變體葉柄中大型維管束管孔鏈數(shù)為3～4列，野生型中為3～5列(圖2)。在細(xì)胞直徑大小方面，突變體葉柄木質(zhì)部導(dǎo)管細(xì)胞和髓細(xì)胞直徑都顯著小于野生型(P<0.05)，野生型木質(zhì)部導(dǎo)管平均直徑為23.88 μm，而突變體木質(zhì)部導(dǎo)管細(xì)胞平均直徑只有19.26 μm。野生型髓細(xì)胞較突變體發(fā)達(dá)，細(xì)胞直徑普遍較大，其中大于100 μm的有10個(gè)左右，而突變體中只有4個(gè)左右(表1)。綜上所述，突變體大豆葉柄在整體的顯微組成結(jié)構(gòu)上相比于野生型無(wú)變化，但木質(zhì)部細(xì)胞及髓細(xì)胞直徑較野生型小，這可能由于突變體中細(xì)胞的橫向發(fā)育能力下降所致。

2.3 外源激素處理對(duì)突變體根部的影響

早前研究表明，植物矮化與多種植物激素如GA、BR、IAA、6-BA有關(guān)[16]。主根長(zhǎng)是評(píng)價(jià)根系生長(zhǎng)發(fā)育的重要指標(biāo)。本研究用4種植物激素處理該突變體根系，用主根長(zhǎng)的變化判斷突變是否與某種激素有關(guān)。

從圖3得出，突變體主根長(zhǎng)在應(yīng)對(duì)不同濃度GA3、6-BA、IAA處理時(shí)的變化趨勢(shì)與野生型類似。這表明突變體在應(yīng)答模式上與野生型相同。不同的是，在0.1 μmol/L的GA3、6-BA、IAA低濃度處理下均會(huì)對(duì)突變體主根長(zhǎng)產(chǎn)生顯著影響，而對(duì)野生型影響不大。這可能是突變體在各激素旁系通路或激素平衡機(jī)制上出現(xiàn)異常，導(dǎo)致對(duì)低濃度激素敏感。在1和5 μmol/L的6-BA、IAA處理下，對(duì)突變體的促進(jìn)率明顯大于野生型。GA3與此相反(圖3-Ⅱ)。

誤差線為標(biāo)準(zhǔn)偏差；多重比較采用Duncan’s新復(fù)極差法，不同的大寫字母為野生型內(nèi)差異顯著(P<0.05)，不同的小寫字母為突變體內(nèi)差異顯著(P<0.05)，下同 The error bar is the standard deviation;based on Duncan ’s multiple comparison test, different capital letters mean significant difference among various periods in wild type(P<0.05), different small letters mean significant difference among various periods in mutant type(P<0.05),the same below
圖1 野生型與突變體大豆株高和葉柄長(zhǎng)度動(dòng)態(tài)比較
Fig.1 Dynamic comparison of plant height and petiole length between wild type and mutant type

左圖為野生型葉柄橫切(10×)，右圖為突變體葉柄橫切(10×) The wild type petiole crosscutting on the left, The mutant type petiole crosscutting on the right
圖2 野生型與突變體大豆葉柄橫切(10×)
Fig.2 Soybean petiole crosscutting between wild type and mutant type

表1 野生型與突變體葉柄橫切顯微結(jié)構(gòu)Table 1 Petiole crosscutting microstructure between wild type and mutant type

注：多重比較采用Duncan’s新復(fù)極差法，*和**分別表示差異顯著(P<0.05)和差異極顯著(P<0.01)。
Note：Based on Duncan’s multiple comparison test, * and ** means significantly different at theP<0.05 andP<0.01respectively.

從BR處理結(jié)果可以看到，突變體大豆主根長(zhǎng)的變化與野生型大豆主根長(zhǎng)的變化有明顯差別(圖3-Ⅳ)。0.1 μm的BR處理對(duì)主根長(zhǎng)的促進(jìn)作用還并不明顯，但在1 μm的BR處理下，野生型大豆主根長(zhǎng)長(zhǎng)度有明顯增加，且對(duì)主根長(zhǎng)伸長(zhǎng)的促進(jìn)效果是所有激素處理中最大的。隨著外源BR濃度的升高，促進(jìn)作用有所下降，但仍具有顯著性差異。這表明正常大豆主根長(zhǎng)長(zhǎng)度是會(huì)隨著外源BR濃度的變化而變化的，并會(huì)受到外源BR的強(qiáng)烈促進(jìn)。但與此不同的是，在突變體中，無(wú)論何種濃度的BR處理都不會(huì)對(duì)主根長(zhǎng)產(chǎn)生影響，突變體根系喪失對(duì)外源BR濃度變化的響應(yīng)，這表明該大豆突變體根系存在應(yīng)答B(yǎng)R信號(hào)通路上的缺陷，這種缺陷是造成該大豆突變體表型的主要原因。

Ⅰ.6-BA處理 6-BA hormone treatment；Ⅱ.GA3處理 GA3hormone treatment；Ⅲ.IAA處理 IAA hormone treatment；Ⅳ.BR處理 BR hormone treatment
圖3 不同激素處理對(duì)突變體大豆與野生型大豆根系的影響
Fig.3 Effects of different phytohormones on soybean root growth between wild type and mutant type

3 討 論

新育大豆突變體株高變矮，葉柄縮短，整體呈現(xiàn)緊湊株型特征，葉柄木質(zhì)部導(dǎo)管細(xì)胞和髓細(xì)胞直徑明顯小于野生型。該突變體與表現(xiàn)為株高和節(jié)間縮短、葉柄長(zhǎng)短不變的矮化突變體‘東澤11號(hào)’是不同類型的突變體；與大豆短葉柄突變體‘D76-1609’‘NJ90L-1SP’和‘SS98206’的關(guān)系還需進(jìn)一步確認(rèn)。

該突變體對(duì)外源激素BR響應(yīng)異常，說(shuō)明該大豆矮化短柄突變體存在BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑上的缺陷。BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受阻將導(dǎo)致細(xì)胞橫向生長(zhǎng)能力和分裂能力下降[17]，這與葉柄切片的觀察結(jié)果相符。對(duì)BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究表明，同一受體蛋白會(huì)存在于多種植物激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，形成特殊的植物激素平衡機(jī)制，維持彼此含量平衡[18]。該突變體對(duì)低濃度6-BA、IAA、GA3敏感，這可能是該突變體中某些激素平衡被打破，激素間互作異常所致。

目前，與BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)研究已有報(bào)道。在擬南芥中DWF1蛋白是一種Ca2+/CAM結(jié)合蛋白，當(dāng)DWF1蛋白與CAM不能正常結(jié)合時(shí)，就會(huì)表現(xiàn)為矮化表型[19-20]。并且已發(fā)現(xiàn)多個(gè)編碼BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的基因，如 bri1、 cbb2等和多個(gè)參與BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白如bri1，V-ATPase等，其中 bri1基因編碼的bri1蛋白是BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中最主要的成分，這種蛋白是膜受體蛋白，具有ser/thr激酶活性，參與下游信號(hào)的傳遞[21]。而在單子葉模式植物水稻中，與BR合成相關(guān)基因有 brd1、brd2等[22-23]，參與BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因有 d10、 d10等[24-25]， BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體蛋白有3個(gè)，分別是Osbri1、OsBRLl、OsBRL3，其中OsBRI1的功能缺失會(huì)導(dǎo)致對(duì)BR的不敏感[26]，另外在水稻BR不敏感型突變體‘d10-4’[27]的研究中發(fā)現(xiàn)，有一種名為PCAM的蛋白表達(dá)上調(diào)，這表明PCAM在BR的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起負(fù)調(diào)控作用[28]。本研究鑒定的突變體到底是哪個(gè)基因發(fā)生突變，還有待進(jìn)一步研究。

本矮化短柄大豆突變體作為矮化大豆遺傳資源，對(duì)于挖掘與株型性狀相關(guān)基因功能、大豆理想株型構(gòu)建和大豆分子育種中都具有潛在價(jià)值。

Reference：

[1] INAMULLAH E A.Adaptive responses of soybean and cotton to diurnal changes in solar radiation and leaf movement[J].AsianJournalofPlantSciences,2006,5(6):1007-1011.

[2] YOU M G.Genetic analysis of short petiole and abnormal pulvinus in soybean[J].Euphytica,1998,102(3):329-333.

[3] KHUSH G S.Rice Research in Asia[M].New York：Oxford University Press,1996:59-71.

[4] KILEN T C.Inheritance of a short petiole trait in soybean[J].CropScience,1983,23(6):1208-1209.

[5] YOU M G,ZHAO T J,GAI J Y,etal.Genetic analysis of short petiole and abnormal pulvinus in soybean[J].Euphytica,1998,102(3):329-333.

[6] 虞慧芳,曹家樹(shù),王永勤.植物矮化突變體的激素調(diào)控[J].生命科學(xué),2002,14(2):85-88.

YU H F,CAO J SH,WANG Y Q,etal.Hormones regulation in plant dwarfing mutants[J].ChineseBulletinofLifeSciences,2002,14(2):85-88(in Chinese with English abstract).

[7] CHOE S,SCHMITZ R J,FUJIOKA S,etal.Arabidopsisbrassinosteroid-insensitive dwarf12 mutants are semidominant and defective in a glycogen synthase kinase 3beta-like kinase[J].PlantPhysiology,2002,130(3):1506-1515.

[8] SCHULTZ L,HUUB L,KERCKHOFFS J,etal.Molecular characterization on the brassinosteroid-deficient 1 kb mutant of pea[J].PlantMolecularBiology,2001,47(4):491-498.

[9] BISHOP G J,HARRISON K,JONES J.The tomato dwarf gene isolated by heterologous transposon tagging encodes the first member of a new cytochrome P450 family[J].PlantCell,1996,8(6):959-969.

[10] SASAKI A,ITOH H,GOMIK,etal.Accumulation of phosphorylated repressor for gibberellin signaling in an F-box mutant[J].Science,2003,299(5614):1896-1898.

[11] 李 葳,朱保葛,徐民新,等.矮桿和半矮桿大豆突變體植株生長(zhǎng)對(duì)外源GA3的響應(yīng)[J].作物學(xué)報(bào),2008(7):1240-1246.

LI W,ZHU B G,XU M X,etal.Responses of plant growth of dwarf and semi-dwarf soybean mutants to exogenous GA3[J].ActaAgronomicaSinica,2008(7):1240-1246(in Chinese with English abstract).

[12] 張 達(dá),王軍虹,王豫穎,等.矮化大豆突變體的GA3調(diào)控[J].大豆科學(xué),2008,27(3):456-460.

ZHANG D,WANG J H,WANG Y Y,etal.GA3 regulation in the dwarfing mutant soybean[J].SoybeanScience,2008,27(3):456-460(in Chinese with English abstract).

[13] AESCHBACHER R A,HAUSER M T,FELDMANN K A,etal.TheSABREgene is required for normal cell expansion inArabidopsis[J].Genes&Development,1995,9(3):330-340.

[14] WOLBANG C M,ROSS J J.Auxin promotes gibberellin biosynthesis in decapitated tobacco plants[J].Planta,2001,214(1):153-157.

[15] 侯雷平,李梅蘭.油菜素內(nèi)酯(BR)促進(jìn)植物生長(zhǎng)機(jī)理研究進(jìn)展[J].植物學(xué)通報(bào),2001,18(5):560-566.

HOU L P,LI M L.Progress of studies on the plant growth promoting mechanism of brassinolide (BR)[J].ChineseBulletinofBotany,2001,18(5):560-566(in Chinese with English abstract).

[16] 馬良勇.水稻株高相關(guān)基因的遺傳分析和QTL定位[D].杭州：浙江大學(xué),2007.

MA L Y.Genetical analysis and QTL mapping for plant height related traits in rice(OryzasativaL.) [D].Hangzhou:Zhejiang University,2007(in Chinese with English abstract).

[17] BEST N B,HARTWIG T,BUDKA J,etal.Nana plant2 encodes a maize ortholog of theArabidopsisbrassinosteroid biosynthesis gene DWARF1,identifying developmental interactions between brassinosteroids and gibberellins[J].PlantPhysiology,2016,171(4):2633-2647.

[18] YANG T,DAVIES P J,REID J B.Genetic dissection of the relative roles of auxin and gibberellin in the regulation of stem elongation in intact light-grown peas[J].PlantPhysiology,1996,110(3):1029-1034.

[19] KLAHRE U,NOGUCHI T,FUJIOKA S,etal,TheArabidopsisDIMINUTO/DWARF1 gene encodes a protein involved in steroid synthesis[J].PlantCell,1998,10(10):1677-1690.

[20] DU L,POOVAIAH B W.Ca2+/calmodulin is critical for brassinosteroid biosynthesis and plant growth[J].Nature,2005,437(7059):741-750.

[21] CLOUSE S D,LANGFORD M,McMORRIS T C.A brassinosteroid-insensitive mutant inArabidopsisthalianaexhibits multiple defects in growth and development[J].PlantPhysiology,1996,111(3):671-678.

[22] HONG Z,UEGUCHI-TANAKA M,SHIMIZU-SATO S,etal.Loss-of-function of a rice brassinosteroid biosynthetic enzyme,C-6 oxidase,prevents the organized arrangement and polar elongation of cells in the leaves and stem[J].PlantJournal,2002,32(4):495-508.

[23] HONG Z,UEGUCHI-TANAKA M,FUJIOKA S,etal.The rice brassinosteroid-deficient dwarf mutant,defective in the rice homolog ofArabidopsisDIMINUTO/DWARF1, is rescued by the endogenously accumulated alternative bioactive brassinosteroid,dolichosterone[J].PlantCell,2005,17(8):2243-2254.

[24] YAMAMURO C,IHARA Y,WU X,etal.Loss of function of a rice brassinosteroid insensitive1 homolog prevents internode elongation and bending of the lamina joint[J].PlantCell,2000,12(9):1591-1606.

[25] ARITE T,IWATA H,OHSHIMA K,etal.DWARF10,an RMS1/MAX4/DAD1 ortholog,controls lateral bud outgrowth in rice[J].PlantJournal,2007,51(6):1019-1029.

[26] YIN Y,WANG Z Y,MORA-GARCIA S,etal.BES1 accumulates in the nucleus in response to brassinosteroids to regulate gene expression and promote stem elongation[J].Cell,2002,109(2):181-191.

[27] HONG Z,UEGUCHI-TANAKA M,SHIMIZU-SATO S,etal.Loss-of-function of a rice brassinosteroid biosynthetic enzyme,C-6 oxidase,prevents the organized arrangement and polar elongation of cells in the leaves and stem[J].PlantJournal,2002,32(4):495-508.

[28] 黃 新,王鳳茹.PCAM 蛋白功能分析及其與油菜素內(nèi)酯(BR)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)系[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2012,20(12):1407-1413.

HUANG X,WANG F R.Function analysis of putative calmodulin (PCAM) and the relationship between PCAM and brassinosteroid(BR) signal transductionin[J].JournalofAgriculturalBiotechnology,2012,20(12):1407-1413(in Chinese with English abstract).

(責(zé)任編輯：郭柏壽 Responsible editor:GUO Baishou)

Phynotypic Observation and Response to Exogenous Hormones in a Soybean Dwarf-mutant at Seedlings Stage.

LI Yuanlong1,WANG Zhonghua1and FENG Xianzhong2.

(1.College of Agronomy, Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100, China; 2.Northeast Institute of Geography and Agroecology, Chinese Academy of Sciences, Changchun 130000, China)

We adopted the mutant soybean which was generated by the60CO-γ ray induce ‘Hedou 12’. Comparative study on the first compound leaf petiole length, seedling plant height and petiole microstructure between wild type and mutant type. In order to explore preliminarily the type of mutation gene, four different hormone treatments were carried out on roots. Result shows that the mutant type has shorter petiole length and lower plant height compared with the wild type, as well as, present a compact phenotype. Petiole crosscutting observation reveal that the mutant cells of xylem and pith become smaller. The mutant roots were very sensitive to 6-BA, GA3, IAA, However, had no response to BR, indicating that the mutant might be BR signal transduction disorder, subsequent target gene discovery should be based on the related genes of BR signal transduction pathway. Soybean dwarf short petiole mutant may have potential application value in the soybean ideotype transformation and soybean molecular breeding.

Soybean; Dwarf mutant; Short petiole; Roots; Plant exogenous hormones; Microstructure

2016-09-04 Returned 2016-09-13

The National Natural Science Foundation of China(No.31571692):Northwest Agriculture and Forestry University Tang Zhongying Breeding Fund Project.

LI Yuanlong, male,master student. Research area:crop genetics and breeding.E-mail:845686931@qq.com.

WANG Zhonghua, male,Ph.D,doctoral supervisor,professor.Research area:crop genetics and breeding. E-mail: zhonghuawang@nwsuaf.edu.cn

日期：2017-06-29

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/61.1220.S.20170629.1107.006.html

2016-09-04

2016-09-13

國(guó)家自然科學(xué)基金(31571692)；西北農(nóng)林科技大學(xué)唐仲英育種基金。

李元龍，男，碩士研究生，研究方向?yàn)樽魑镞z傳育種。E-mail：845686931@qq.com 通信作者：王中華，男，博士，博導(dǎo)，教授，研究方向?yàn)樽魑镞z傳育種。E-mail：zhonghuawang@nwsuaf.edu.cn 馮獻(xiàn)忠，男，博士，博導(dǎo)，研究員，研究方向?yàn)榇蠖构δ芑蚪M學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)、分子設(shè)計(jì)。E-mail：fengxianzhong@neigae.ac.cn

S529

A

1004-1389(2017)07-1014-06

FENG Xianzhong, male,Ph.D,doctoral supervisor,research fellow.Research area:functional genomics of soybean, systems biology. E-mail:fengxianzhong@neigae.ac.cn