鄧 卉，屈 東，鄒成義，余 丹，楊加豹，陳 瑾，汪林書

(1.四川省畜牧科學研究院飼料研究所，四川 成都 610066；2. 動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川 成都 610066)

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發(fā)酵菜籽粕對生長豬生長性能、機體抗氧化及免疫功能的影響

鄧 卉1,2，屈 東1,2，鄒成義1,2，余 丹1,2，楊加豹1,2，陳 瑾1,2，汪林書1,2

(1.四川省畜牧科學研究院飼料研究所，四川 成都 610066；2. 動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川 成都 610066)

【目的】本試驗旨在研究發(fā)酵菜籽粕對生長豬生長性能、機體抗氧化和免疫功能的影響?！痉椒ā窟x用健康、體重相近的杜×長×大三元雜交生長豬64頭，隨機分成4組，每組4個重復，每重復4頭豬。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧，試驗1、2、3組分別飼喂在基礎日糧中添加發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %豆粕的試驗日糧。預試期7 d，正試期31 d?！窘Y果】① 試驗各組平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均高于對照組，試驗3組ADG、ADFI和試驗2組ADFI均顯著高于對照組(P<0.05)，各組生長豬料重比(F/G)無顯著差異(P>0.05),試驗3組F/G最低，較對照組低6.07 %(P>0.05)。② 試驗3組血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和總抗氧化能力(T-AOC)含量顯著高于對照組(P<0.05)，丙二醛(MDA)含量顯著低于對照組(P<0.05)。各組血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)活性均無顯著差異(P>0.05)。③試驗3組血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和白細胞介素2(IL-2)含量顯著高于對照組(P<0.05)。各組血清免疫球蛋白M(IgM)、白細胞介素1(IL-1)、白細胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量均無顯著差異(P>0.05)?！窘Y論】綜上所述，在本試驗條件下，發(fā)酵菜籽粕可提高生長豬生長性能，改善機體的抗氧化與免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

生長豬；發(fā)酵菜籽粕；生長性能；抗氧化；免疫

【研究意義】菜籽粕營養(yǎng)豐富，是四川最具潛力和特色的優(yōu)勢蛋白飼料資源之一。由于菜籽粕中含有的多種抗營養(yǎng)因子降低了動物對其營養(yǎng)成分的吸收率，從而限制了其在飼料中的大量使用。【前人研究進展】消除菜籽粕中抗營養(yǎng)因子的方法包括化學處理法、物理方法、微生物發(fā)酵法，其中采用微生物發(fā)酵法可有效降解菜籽粕中主要的抗營養(yǎng)因子，并能積累有益代謝產(chǎn)物，提高菜籽粕的營養(yǎng)價值。據(jù)研究表明，發(fā)酵菜籽粕應用于生長豬日糧中可提高其生長性能，改善養(yǎng)分和氨基酸表觀消化率，降低飼養(yǎng)成本[1]?！颈狙芯壳腥朦c】本試驗在前人研究基礎上進一步考察基礎日糧中添加發(fā)酵菜籽粕等氮替代不同比例豆粕對生長豬生長性能、機體抗氧化和免疫功能的影響?！緮M解決的關鍵問題】旨在為菜籽粕應用于養(yǎng)殖業(yè)的合理開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗日糧

參照NRC(2012)25～50 kg生長豬營養(yǎng)需要標準配制日糧，其原料組成和營養(yǎng)水平見表1。對照組為玉米-豆粕型基礎日糧，試驗1組、試驗2組、試驗3組參照基礎日糧分別用不同比例發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %的豆粕。所有日糧的能量和蛋白水平保持一致。本試驗所用發(fā)酵菜籽粕采用釀酒酵母菌、淺層通風分級固態(tài)發(fā)酵、溫控28～35 ℃、發(fā)酵36～48 h制得。主要營養(yǎng)指標為：水分9.8 %、粗蛋白質42.2 %、鈣1.42 %、磷1.71 %、粗纖維17.4 %、賴氨酸1.4 %、蛋氨酸0.67 %、蘇氨酸1.63 %、色氨酸0.2 %。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

表2 發(fā)酵菜籽粕對生長豬生長性能的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。 Note：Means within a same row with different superscript letter are significantly different at 0.05 level, and without superscript letter or with the same are not different. The same as below.

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理

采用單因子隨機區(qū)組設計，選擇健康、胎次相近，初始體重為28 kg左右的杜×長×大三元雜交生長豬64頭，隨機分成4組，每組4個重復，每重復4頭豬。分別飼喂以上4種試驗飼糧，預試期7 d，正試期31 d。采用常規(guī)飼養(yǎng)管理，嚴格執(zhí)行消毒制度。試驗豬自由采食、自由飲水。每日記錄豬只采食、排糞、發(fā)病及異常情況。試驗期間，各組管理條件相同，圈舍保持通風、干燥和衛(wèi)生。

1.3 樣品的采集與制備

試驗結束空腹稱重后，每組隨機抽取4頭試驗豬，前腔靜脈采血。血樣經(jīng)37 ℃水浴40 min后，3000 r/min離心15 min,分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20 ℃冷凍保存，待測抗氧化和免疫功能指標。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能測定指標 測定試驗豬只初始體重、末重和全期采食量。以重復為單位計算豬只平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清抗氧化和免疫指標 血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)活性和總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量以及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細胞介素1(IL-1)、白細胞介素2(IL-2)、白細胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量均采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)試劑盒和Scandrop100型紫外可見分光光度計。試劑盒由美國R&D Systems公司提供。

1.5 統(tǒng)計分析

用Excel對數(shù)據(jù)進行初步處理，再用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析，若有顯著差異則用Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性的判斷標準。試驗數(shù)據(jù)采用平均值±標準差(mean±SD)表示。

2 結果與分析

2.1 發(fā)酵菜籽粕對生長豬生長性能的影響

由表2可以看出，試驗各組ADG和ADFI均高于對照組，試驗3組ADG、ADFI和試驗2組ADFI均顯著高于對照組(P<0.05)；各組間F/G無顯著差異(P>0.05)，但試驗各組隨發(fā)酵菜粕替代比例增加，料重比呈逐漸降低趨勢，試驗3組料重比最低，較對照組低6.07 %(P>0.05)。

2.2 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清抗氧化指標的影響

由表3可以看出，試驗3組SOD活性和T-AOC含量顯著高于對照組(P<0.05)，MDA含量顯著低于對照組(P<0.05)。各組血清GSH-Px和CAT活性均無顯著差異(P>0.05)。試驗各組隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加，血清GSH-Px、SOD、CAT活性和T-AOC含量呈逐漸升高趨勢，血清MDA含量則呈逐漸降低趨勢。

表3 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清抗氧化指標的影響

表4 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清免疫指標的影響

2.3 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清免疫指標的影響

發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清免疫指標的影響見表4。試驗3組血清IgA、IgG和IL-2含量顯著高于對照組(P<0.05)。各組血清IgM、IL-1、IL-6和TNF-α含量均無顯著差異(P>0.05)。試驗各組隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加，血清IgA、IgM、IgG、IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α含量均呈逐漸升高趨勢。

3 討 論

3.1 發(fā)酵菜籽粕對生長豬生長性能的影響

菜籽粕采用微生物發(fā)酵技術處理后，其所含的硫甙、單寧、植酸等有毒有害物質和抗營養(yǎng)因子含量顯著降低，蛋白質品質顯著改善，大大提高了其飼用價值。吳明文[2]等用發(fā)酵菜籽粕替代豆粕飼喂仔豬，發(fā)現(xiàn)仔豬的ADG顯著升高，F(xiàn)/G顯著降低。景義峰[3]等的試驗結果表明，以11 %發(fā)酵菜籽粕替代8.5 %的豆粕飼喂育肥豬，在一定程度上改善了豬的生產(chǎn)性能。本試驗發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %豆粕各試驗組均提高生長豬的ADG、ADFI，且7.5 %替代組對豬的ADG、ADFI改善顯著， 5 %替代組對豬ADFI影響顯著。

3.2 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清抗氧化指標的影響

需氧生物細胞內具有抗氧化防御系統(tǒng)，該系統(tǒng)的酶類(SOD、CAT、GSH-Px等)可因體內自由基化合物數(shù)量的增加而被誘導合成，它們的含量和活性會影響機體內活性氧自由基的水平[4-6]。上述系統(tǒng)酶類活性升高說明其保護細胞免受自由基損傷程度增強。T-AOC是衡量機體抗氧化能力的綜合指標。MDA作為脂質過氧化作用的終產(chǎn)物，測定其含量能直接反映細胞膜被氧化的程度,血清MDA含量顯著升高意味著機體自由基增多，細胞受損程度增強[7]。發(fā)酵菜籽粕對生長豬是否具有抗氧化功能目前少有報道。本試驗檢測了豬血清SOD、CAT、GSH-Px活性和T-AOC、MDA含量，探討了發(fā)酵菜籽粕對生長豬抗氧化功能的影響。結果表明，發(fā)酵菜籽粕等氮替代7.5 %豆粕顯著升高血清SOD活性和T-AOC含量，顯著降低血清MDA含量。各替代組對血清GSH-Px和CAT活性無顯著影響，隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加血清T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px表達水平呈逐漸升高趨勢，MDA呈降低趨勢，說明發(fā)酵菜籽粕可激活生長豬機體抗氧化酶系統(tǒng)活性而具有抗氧化功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

3.3 發(fā)酵菜籽粕對生長豬血清免疫指標的影響

體液免疫是動物特異免疫的一個重要方面，IgA、IgG、IgM是介導體液免疫的主要抗體，也是衡量機體免疫功能的重要指標。IgA有多種抗體活性，具有抗菌、抗毒素、抗病毒等作用。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是抗感染的主要抗體，其功能主要在機體免疫中起保護作用，抗菌、抗病毒，能有效預防感染性疾病。IgM是體液免疫應答中最早出現(xiàn)的抗體，最先發(fā)揮抗感染作用。白細胞介素(IL)是由多種細胞產(chǎn)生并作用于多種細胞的一類細胞因子，在傳遞信息，激活與調節(jié)免疫細胞，介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。IL-1主要通過刺激炎癥和自身免疫病相關基因的表達等，在免疫調節(jié)及炎癥進程中扮演著重要的角色。IL-2是具有多向性作用的細胞因子，主要促進淋巴細胞生長、增殖和分化，對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用。IL-6是一種具有多重免疫調節(jié)功能的細胞因子，有增強免疫的功能[8-9]。病毒、細菌感染均能誘導體內IL-6表達增加[10]。TNF-α是一種由內毒素激活的巨噬細胞和淋巴細胞等分泌的一種多活性的細胞因子，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的具有抗腫瘤和炎癥作用最強的細胞因子[11]。TNF-α是機體免疫防護的重要介質，正常水平的TNF-α可以調節(jié)免疫應答、抗感染、促進組織修復、引起腫瘤細胞凋亡等[10]。劉長松等[12]以21日齡商品肉雞為研究對象，試驗表明發(fā)酵菜籽粕替代12 %豆粕血清免疫指標IgA、IgM、IgG含量無顯著影響，但目前關于發(fā)酵菜籽粕對肉豬機體免疫指標的影響研究較少。本試驗結果表明，發(fā)酵菜籽粕等氮替代7.5 %豆粕顯著升高生長豬血清IgA、IgG和IL-2含量，各替代組對血清IgM、IL-1、IL-6和TNF-α含量均無顯著影響，隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加各血清免疫指標含量均呈逐漸升高趨勢，說明發(fā)酵菜籽粕能改善生長豬機體免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

4 結 論

結合豬的生長性能、血清抗氧化和免疫指標，本試驗條件下，發(fā)酵菜籽粕可提高生長豬生長性能，改善機體的抗氧化與免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

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(責任編輯 陳 虹)

Effects of Fermented Rapeseed Meal on Performance,Antioxidant and Immunology Function of Growing Pigs

DENG Hui1,2, QU Dong1,2, ZOU Cheng-yi1,2,YU Dan1,2,YANG Jia-bao1,2,CHEN Jin1,2, WANG Lin-shu1,2

(1.Feed Institute of Sichuan Animal Science Academy, Sichuan Chengdu 610066, China; 2.Animal Breeding and Genetics Key Laboratory of Sichuan Province, Sichuan Chengdu 610066, China)

【Objective】The experiments were conducted to evaluate the effects of fermented rapeseed meal on the performance, immunology and antioxidant function of growing pigs. 【Method】A total of 64 healthy crossbred (Duroc × Landrace × Yorkshire) growing pigs with similar weight were randomly allotted to 4 dietary treatments with 4 replicates in each treatment and 4 pigs in each replicate. In 4 treatments, control group was corn-soybean basal diet, three experimental groups were fermented rapeseed meal replaced soybean meal in the basal diet at 2.5 %, 5 %,7.5 %,respectively(each dietary treatment was isonitrogenous).【Result】(i)The average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) in experimental groups were higher than that in control group. ADG, ADFI in group 3 and ADFI in group 2 were significantly higher than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in ratio of feed to gain(F/G) among all treatment groups, but F/G in group 3 was the minimum, 6.07 % lower than the control group (P>0.05). (ii)The serum superoxide dismutase(SOD)activity and total antioxidant capability(T-AOC) in group 3 were significantly higher than that in control group(P<0.05), the serum malondialdehyde(MDA) content was significantly lower than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in serum glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase(CAT)activity among all groups (P>0.05).(iii)The serum immunoglobulin A(IgA),immunoglobulin G(IgG) and interleukin-2(IL-2) contents in group 3 were significantly higher than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in serum immunoglobulin M(IgM),interleukin-1(IL-1),interleukin-6(IL-6) and tumour necrosis factor-α(TNF-α)contents among all groups (P>0.05). 【Conclusion】In conclusion, under the condition of this trial, the fermented rapeseed meal can improve the performance, antioxidant and immunology function of growing pigs, and its optimal replacement level was 7.5 %.

Growing pigs; Fermented rapeseed meal; Performance; Antioxidant; Immunology

1001-4829(2017)7-1662-05

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.034

2016-07-20

四川省公益性科研院所基本科研項目“發(fā)酵菜粕對肉豬機體抗氧化與免疫功能影響的研究”(SASA2015A14)；四川省公益性科研院所基本科研項目“芥子堿降解分離菌株安全性及作用機理研究”(2016YSKY0143)

鄧 卉(1986-)，女，四川南充人，助理研究員，研究方向為動物營養(yǎng)和飼料科學，E-mail: 48744616@qq.com。

S816.15

A