鄧 卉，屈 東，鄒成義，余 丹，楊加豹，陳 瑾，汪林書(shū)

(1.四川省畜牧科學(xué)研究院飼料研究所，四川 成都 610066；2. 動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610066)

?

發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、機(jī)體抗氧化及免疫功能的影響

鄧 卉1,2，屈 東1,2，鄒成義1,2，余 丹1,2，楊加豹1,2，陳 瑾1,2，汪林書(shū)1,2

(1.四川省畜牧科學(xué)研究院飼料研究所，四川 成都 610066；2. 動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610066)

【目的】本試驗(yàn)旨在研究發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、機(jī)體抗氧化和免疫功能的影響?！痉椒ā窟x用健康、體重相近的杜×長(zhǎng)×大三元雜交生長(zhǎng)豬64頭，隨機(jī)分成4組，每組4個(gè)重復(fù)，每重復(fù)4頭豬。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1、2、3組分別飼喂在基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %豆粕的試驗(yàn)日糧。預(yù)試期7 d，正試期31 d。【結(jié)果】① 試驗(yàn)各組平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均高于對(duì)照組，試驗(yàn)3組ADG、ADFI和試驗(yàn)2組ADFI均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，各組生長(zhǎng)豬料重比(F/G)無(wú)顯著差異(P>0.05),試驗(yàn)3組F/G最低，較對(duì)照組低6.07 %(P>0.05)。② 試驗(yàn)3組血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和總抗氧化能力(T-AOC)含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，丙二醛(MDA)含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。各組血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性均無(wú)顯著差異(P>0.05)。③試驗(yàn)3組血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和白細(xì)胞介素2(IL-2)含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。各組血清免疫球蛋白M(IgM)、白細(xì)胞介素1(IL-1)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)?！窘Y(jié)論】綜上所述，在本試驗(yàn)條件下，發(fā)酵菜籽粕可提高生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能，改善機(jī)體的抗氧化與免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

生長(zhǎng)豬；發(fā)酵菜籽粕；生長(zhǎng)性能；抗氧化；免疫

【研究意義】菜籽粕營(yíng)養(yǎng)豐富，是四川最具潛力和特色的優(yōu)勢(shì)蛋白飼料資源之一。由于菜籽粕中含有的多種抗?fàn)I養(yǎng)因子降低了動(dòng)物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分的吸收率，從而限制了其在飼料中的大量使用?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】消除菜籽粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子的方法包括化學(xué)處理法、物理方法、微生物發(fā)酵法，其中采用微生物發(fā)酵法可有效降解菜籽粕中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子，并能積累有益代謝產(chǎn)物，提高菜籽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。據(jù)研究表明，發(fā)酵菜籽粕應(yīng)用于生長(zhǎng)豬日糧中可提高其生長(zhǎng)性能，改善養(yǎng)分和氨基酸表觀消化率，降低飼養(yǎng)成本[1]。【本研究切入點(diǎn)】本試驗(yàn)在前人研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步考察基礎(chǔ)日糧中添加發(fā)酵菜籽粕等氮替代不同比例豆粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、機(jī)體抗氧化和免疫功能的影響?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】旨在為菜籽粕應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)的合理開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)日糧

參照NRC(2012)25～50 kg生長(zhǎng)豬營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)配制日糧，其原料組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。對(duì)照組為玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組參照基礎(chǔ)日糧分別用不同比例發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %的豆粕。所有日糧的能量和蛋白水平保持一致。本試驗(yàn)所用發(fā)酵菜籽粕采用釀酒酵母菌、淺層通風(fēng)分級(jí)固態(tài)發(fā)酵、溫控28～35 ℃、發(fā)酵36～48 h制得。主要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)為：水分9.8 %、粗蛋白質(zhì)42.2 %、鈣1.42 %、磷1.71 %、粗纖維17.4 %、賴氨酸1.4 %、蛋氨酸0.67 %、蘇氨酸1.63 %、色氨酸0.2 %。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

表2 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。 Note：Means within a same row with different superscript letter are significantly different at 0.05 level, and without superscript letter or with the same are not different. The same as below.

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

采用單因子隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，選擇健康、胎次相近，初始體重為28 kg左右的杜×長(zhǎng)×大三元雜交生長(zhǎng)豬64頭，隨機(jī)分成4組，每組4個(gè)重復(fù)，每重復(fù)4頭豬。分別飼喂以上4種試驗(yàn)飼糧，預(yù)試期7 d，正試期31 d。采用常規(guī)飼養(yǎng)管理，嚴(yán)格執(zhí)行消毒制度。試驗(yàn)豬自由采食、自由飲水。每日記錄豬只采食、排糞、發(fā)病及異常情況。試驗(yàn)期間，各組管理?xiàng)l件相同，圈舍保持通風(fēng)、干燥和衛(wèi)生。

1.3 樣品的采集與制備

試驗(yàn)結(jié)束空腹稱重后，每組隨機(jī)抽取4頭試驗(yàn)豬，前腔靜脈采血。血樣經(jīng)37 ℃水浴40 min后，3000 r/min離心15 min,分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20 ℃冷凍保存，待測(cè)抗氧化和免疫功能指標(biāo)。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定指標(biāo) 測(cè)定試驗(yàn)豬只初始體重、末重和全期采食量。以重復(fù)為單位計(jì)算豬只平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清抗氧化和免疫指標(biāo) 血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活性和總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量以及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細(xì)胞介素1(IL-1)、白細(xì)胞介素2(IL-2)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量均采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)試劑盒和Scandrop100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。試劑盒由美國(guó)R&D Systems公司提供。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

用Excel對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理，再用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，若有顯著差異則用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，試驗(yàn)各組ADG和ADFI均高于對(duì)照組，試驗(yàn)3組ADG、ADFI和試驗(yàn)2組ADFI均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；各組間F/G無(wú)顯著差異(P>0.05)，但試驗(yàn)各組隨發(fā)酵菜粕替代比例增加，料重比呈逐漸降低趨勢(shì)，試驗(yàn)3組料重比最低，較對(duì)照組低6.07 %(P>0.05)。

2.2 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表3可以看出，試驗(yàn)3組SOD活性和T-AOC含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，MDA含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。各組血清GSH-Px和CAT活性均無(wú)顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)各組隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加，血清GSH-Px、SOD、CAT活性和T-AOC含量呈逐漸升高趨勢(shì)，血清MDA含量則呈逐漸降低趨勢(shì)。

表3 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

表4 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響

2.3 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響

發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響見(jiàn)表4。試驗(yàn)3組血清IgA、IgG和IL-2含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。各組血清IgM、IL-1、IL-6和TNF-α含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)各組隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加，血清IgA、IgM、IgG、IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α含量均呈逐漸升高趨勢(shì)。

3 討 論

3.1 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響

菜籽粕采用微生物發(fā)酵技術(shù)處理后，其所含的硫甙、單寧、植酸等有毒有害物質(zhì)和抗?fàn)I養(yǎng)因子含量顯著降低，蛋白質(zhì)品質(zhì)顯著改善，大大提高了其飼用價(jià)值。吳明文[2]等用發(fā)酵菜籽粕替代豆粕飼喂仔豬，發(fā)現(xiàn)仔豬的ADG顯著升高，F(xiàn)/G顯著降低。景義峰[3]等的試驗(yàn)結(jié)果表明，以11 %發(fā)酵菜籽粕替代8.5 %的豆粕飼喂育肥豬，在一定程度上改善了豬的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)發(fā)酵菜籽粕等氮替代2.5 %、5 %、7.5 %豆粕各試驗(yàn)組均提高生長(zhǎng)豬的ADG、ADFI，且7.5 %替代組對(duì)豬的ADG、ADFI改善顯著， 5 %替代組對(duì)豬ADFI影響顯著。

3.2 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

需氧生物細(xì)胞內(nèi)具有抗氧化防御系統(tǒng)，該系統(tǒng)的酶類(SOD、CAT、GSH-Px等)可因體內(nèi)自由基化合物數(shù)量的增加而被誘導(dǎo)合成，它們的含量和活性會(huì)影響機(jī)體內(nèi)活性氧自由基的水平[4-6]。上述系統(tǒng)酶類活性升高說(shuō)明其保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷程度增強(qiáng)。T-AOC是衡量機(jī)體抗氧化能力的綜合指標(biāo)。MDA作為脂質(zhì)過(guò)氧化作用的終產(chǎn)物，測(cè)定其含量能直接反映細(xì)胞膜被氧化的程度,血清MDA含量顯著升高意味著機(jī)體自由基增多，細(xì)胞受損程度增強(qiáng)[7]。發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬是否具有抗氧化功能目前少有報(bào)道。本試驗(yàn)檢測(cè)了豬血清SOD、CAT、GSH-Px活性和T-AOC、MDA含量，探討了發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬抗氧化功能的影響。結(jié)果表明，發(fā)酵菜籽粕等氮替代7.5 %豆粕顯著升高血清SOD活性和T-AOC含量，顯著降低血清MDA含量。各替代組對(duì)血清GSH-Px和CAT活性無(wú)顯著影響，隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加血清T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px表達(dá)水平呈逐漸升高趨勢(shì)，MDA呈降低趨勢(shì)，說(shuō)明發(fā)酵菜籽粕可激活生長(zhǎng)豬機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)活性而具有抗氧化功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

3.3 發(fā)酵菜籽粕對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響

體液免疫是動(dòng)物特異免疫的一個(gè)重要方面，IgA、IgG、IgM是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體，也是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。IgA有多種抗體活性，具有抗菌、抗毒素、抗病毒等作用。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是抗感染的主要抗體，其功能主要在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用，抗菌、抗病毒，能有效預(yù)防感染性疾病。IgM是體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，最先發(fā)揮抗感染作用。白細(xì)胞介素(IL)是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子，在傳遞信息，激活與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞，介導(dǎo)T、B細(xì)胞活化、增殖與分化及在炎癥反應(yīng)中起重要作用。IL-1主要通過(guò)刺激炎癥和自身免疫病相關(guān)基因的表達(dá)等，在免疫調(diào)節(jié)及炎癥進(jìn)程中扮演著重要的角色。IL-2是具有多向性作用的細(xì)胞因子，主要促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化，對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用。IL-6是一種具有多重免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，有增強(qiáng)免疫的功能[8-9]。病毒、細(xì)菌感染均能誘導(dǎo)體內(nèi)IL-6表達(dá)增加[10]。TNF-α是一種由內(nèi)毒素激活的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等分泌的一種多活性的細(xì)胞因子，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的具有抗腫瘤和炎癥作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子[11]。TNF-α是機(jī)體免疫防護(hù)的重要介質(zhì)，正常水平的TNF-α可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、抗感染、促進(jìn)組織修復(fù)、引起腫瘤細(xì)胞凋亡等[10]。劉長(zhǎng)松等[12]以21日齡商品肉雞為研究對(duì)象，試驗(yàn)表明發(fā)酵菜籽粕替代12 %豆粕血清免疫指標(biāo)IgA、IgM、IgG含量無(wú)顯著影響，但目前關(guān)于發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉豬機(jī)體免疫指標(biāo)的影響研究較少。本試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵菜籽粕等氮替代7.5 %豆粕顯著升高生長(zhǎng)豬血清IgA、IgG和IL-2含量，各替代組對(duì)血清IgM、IL-1、IL-6和TNF-α含量均無(wú)顯著影響，隨發(fā)酵菜籽粕替代比例增加各血清免疫指標(biāo)含量均呈逐漸升高趨勢(shì)，說(shuō)明發(fā)酵菜籽粕能改善生長(zhǎng)豬機(jī)體免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

4 結(jié) 論

結(jié)合豬的生長(zhǎng)性能、血清抗氧化和免疫指標(biāo)，本試驗(yàn)條件下，發(fā)酵菜籽粕可提高生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能，改善機(jī)體的抗氧化與免疫功能，且等氮替代7.5 %豆粕效果顯著。

[1]羅振幅.菜粕的固態(tài)發(fā)酵工藝參數(shù)研究及在生長(zhǎng)豬上應(yīng)用效果評(píng)估[D]. 長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[2]吳明文，張立娟，閔林剛，等. 發(fā)酵菜粕對(duì)仔豬生產(chǎn)性能影響的試驗(yàn)研究[J]. 飼料廣角，2010(2)：23-24.

[3]景義峰，吳曉峰，熊 凌. 發(fā)酵菜粕對(duì)育肥豬生產(chǎn)性能的影響[J]. 養(yǎng)殖與飼料，2012(4)：40-42.

[4]AI JASSABI S. Effect of methylglyoxal on antioxidant enzymes of the liver and of the mice[J]. Biol Sci, 2004, 4(5): 605-608.

[5]HOLOVSKA K, BOLDIZAROVA K, CEKONOVA S, et al. Antioxidant enzyme activities in liver tissue of chickens fed diets supplemented with various forms and amounts of selenium[J]. Anim Feed Sci, 2003, 12(1): 143-152.

[6]WILLS E D. Mechanisms of lipid peroxide formation in animal tissues[J]. Biochem J, 1966, 99: 667-676.

[7]張旭輝，王寶維，王 雷，等.共軛亞油酸對(duì)鵝抗氧化功能與脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2007，19(3)：299-304.

[8]RAVAGLIA G, FORTI P, MAIOLI F, et al. Associations of the 174g/cinter-leukin-6 gene promoter polymorphism with blood inter-leukin-6 and mortality in the elderly[J]. Biogerontology, 2005(6): 415-423.

[9]BONIFACE K, LECRON J C, BERNARD F X, et al. Keratinocytes as targets for interleukin-10-related cytokines:a putative role in the pathogenesis of psoriasis[J]. Eur Cytokine Netw, 2005, 16: 309-319.

[10]田中秋，鄧立普. TNF-α、IL-6在全身炎癥反應(yīng)綜合征表達(dá)的研究進(jìn)展[J]. 蛇志，2008，20(4)：275-278.

[11]胡 蓉. COPD患者治療前后血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8檢測(cè)的臨床意義[J]. 放射免疫學(xué)雜志，2007，20(6)：503-505.

[12]劉長(zhǎng)松，潘忠禮，何榮海，等. 混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及免疫功能的影響[J]. 中國(guó)家禽，2015，37(24)：24-27.

(責(zé)任編輯 陳 虹)

Effects of Fermented Rapeseed Meal on Performance,Antioxidant and Immunology Function of Growing Pigs

DENG Hui1,2, QU Dong1,2, ZOU Cheng-yi1,2,YU Dan1,2,YANG Jia-bao1,2,CHEN Jin1,2, WANG Lin-shu1,2

(1.Feed Institute of Sichuan Animal Science Academy, Sichuan Chengdu 610066, China; 2.Animal Breeding and Genetics Key Laboratory of Sichuan Province, Sichuan Chengdu 610066, China)

【Objective】The experiments were conducted to evaluate the effects of fermented rapeseed meal on the performance, immunology and antioxidant function of growing pigs. 【Method】A total of 64 healthy crossbred (Duroc × Landrace × Yorkshire) growing pigs with similar weight were randomly allotted to 4 dietary treatments with 4 replicates in each treatment and 4 pigs in each replicate. In 4 treatments, control group was corn-soybean basal diet, three experimental groups were fermented rapeseed meal replaced soybean meal in the basal diet at 2.5 %, 5 %,7.5 %,respectively(each dietary treatment was isonitrogenous).【Result】(i)The average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) in experimental groups were higher than that in control group. ADG, ADFI in group 3 and ADFI in group 2 were significantly higher than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in ratio of feed to gain(F/G) among all treatment groups, but F/G in group 3 was the minimum, 6.07 % lower than the control group (P>0.05). (ii)The serum superoxide dismutase(SOD)activity and total antioxidant capability(T-AOC) in group 3 were significantly higher than that in control group(P<0.05), the serum malondialdehyde(MDA) content was significantly lower than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in serum glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase(CAT)activity among all groups (P>0.05).(iii)The serum immunoglobulin A(IgA),immunoglobulin G(IgG) and interleukin-2(IL-2) contents in group 3 were significantly higher than that in control group(P<0.05). There were no significant differences in serum immunoglobulin M(IgM),interleukin-1(IL-1),interleukin-6(IL-6) and tumour necrosis factor-α(TNF-α)contents among all groups (P>0.05). 【Conclusion】In conclusion, under the condition of this trial, the fermented rapeseed meal can improve the performance, antioxidant and immunology function of growing pigs, and its optimal replacement level was 7.5 %.

Growing pigs; Fermented rapeseed meal; Performance; Antioxidant; Immunology

1001-4829(2017)7-1662-05

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.034

2016-07-20

四川省公益性科研院所基本科研項(xiàng)目“發(fā)酵菜粕對(duì)肉豬機(jī)體抗氧化與免疫功能影響的研究”(SASA2015A14)；四川省公益性科研院所基本科研項(xiàng)目“芥子堿降解分離菌株安全性及作用機(jī)理研究”(2016YSKY0143)

鄧 卉(1986-)，女，四川南充人，助理研究員，研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)和飼料科學(xué)，E-mail: 48744616@qq.com。

S816.15

A