秦 松，范成五，張 萌，胡 崗，張 恒，石俊雄

(1.貴州省土壤肥料研究所，貴州省農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境工程研究中心，貴州 貴陽 550006；2.貴州省煙草科學(xué)研究所，貴州 貴陽 550003； 3.貴州省耕地保育與農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，貴州 貴陽 550006)

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貴州3種香型烤煙中致香物質(zhì)成分及含量對(duì)施肥的響應(yīng)

秦 松1，2，范成五1，3，張 萌1，胡 崗1，張 恒2，石俊雄2

(1.貴州省土壤肥料研究所，貴州省農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境工程研究中心，貴州 貴陽 550006；2.貴州省煙草科學(xué)研究所，貴州 貴陽 550003； 3.貴州省耕地保育與農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，貴州 貴陽 550006)

【目的】探索不同香型烤煙中致香物質(zhì)對(duì)施肥的響應(yīng)，為合理施肥提高烤煙的香氣質(zhì)量提供理論依據(jù)?！痉椒ā?012-2014年在貴州開陽、天柱和威寧進(jìn)行田間小區(qū)試驗(yàn)，研究施肥對(duì)貴州3種香型烤煙中致香物質(zhì)成分組成及其含量的影響?！窘Y(jié)果】施肥明顯影響不同香型烤煙中致香物質(zhì)的種類，其中施肥使2013年清香型和2014年偏清香型烤煙中致香物質(zhì)數(shù)量分別增加15種和4種，使2013年中間香型和2012年偏清香型烤煙中致香物質(zhì)分別減少4種和2種；施肥對(duì)烤煙中致香物質(zhì)含量以及分配比例也產(chǎn)生明顯影響，清香型烤煙醇類、醛類、酮類含量分別降低37.3 %、37.9 %、30.2 %，中間香型烤煙醛類下降33.3 %，偏清香型烤煙醛類、烷類分別降低49.0 %、 60.9 %。但這種影響差異會(huì)因烤煙香氣類型、種植年限、施肥狀況等而有所不同；此外，經(jīng)過類比分析發(fā)現(xiàn)，施肥除共同影響3個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)烤煙中17種致香物質(zhì)的含量外，還對(duì)其他多種致香物質(zhì)含量產(chǎn)生不同程度的影響。【結(jié)論】 貴州3種香型烤煙中致香物質(zhì)成分組成及其含量對(duì)施肥的具有明顯響應(yīng)。

施肥；烤煙；不同香型；致香物質(zhì)

【研究意義】氣候、土壤等生態(tài)環(huán)境條件對(duì)烤煙致香物質(zhì)含量、評(píng)吸質(zhì)量具有顯著影響[1-2]。施肥作為煙草栽培技術(shù)過程中最重要的環(huán)節(jié)，其不僅影響烤煙的生長(zhǎng)和產(chǎn)量的形成，對(duì)煙葉致香物質(zhì)含量也有很大影響[3-5]。如何通過合理的施肥措施提高煙葉致香物質(zhì)含量已成為烤煙種植中急需解決的問題?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】汪耀富等[3]研究發(fā)現(xiàn)，與不施肥處理相比，氮、磷、鉀肥配施處理的煙葉致香物質(zhì)總量和不同種類致香物質(zhì)含量明顯升高，尤其對(duì)類胡蘿卜素類致香物質(zhì)含量的提高具有顯著的增效作用。貴州作為我國(guó)優(yōu)質(zhì)烤煙的主要產(chǎn)區(qū)，其地勢(shì)西高東低，海拔跨度大，氣候差異明顯，形成不同的生態(tài)類型[6-7]。近年來由于長(zhǎng)期連作和大量施用化肥造成的煙葉油份減少、香氣不足、品質(zhì)下降等問題日益突出[8]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前，關(guān)于貴州烤煙致香物質(zhì)含量已有一定研究，李繼新[6]等對(duì)貴州4個(gè)不同海拔的代表性煙區(qū)進(jìn)行煙葉致香物質(zhì)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在煙葉外觀質(zhì)量基本相同條件下，煙葉的質(zhì)量風(fēng)格存在明顯差異，形成不同的煙葉質(zhì)量特色。然而，當(dāng)前針對(duì)貴州不同香氣類型烤煙致香物質(zhì)成分組成及其含量方面的研究還相對(duì)缺乏，尤其是從施肥角度來分析不同香氣類型烤煙致香物質(zhì)的研究較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】通過2012-2014年的田間試驗(yàn)，研究施肥對(duì)3種香型烤煙中致香物質(zhì)成分組成及其含量的影響，分析比較不同香型烤煙致香物質(zhì)成分差異。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)點(diǎn)概況

試驗(yàn)于2012-2014年分別在威寧、開陽和天柱進(jìn)行。2012和2014年天柱試驗(yàn)點(diǎn)均位于天柱縣社學(xué)鄉(xiāng)，試驗(yàn)地單作煙草，煙草類型偏清香型。2013年，威寧試驗(yàn)點(diǎn)位于威寧縣黑石鎮(zhèn)，前作綠肥，煙草類型清香型；開陽試驗(yàn)點(diǎn)位于開陽縣龍崗鎮(zhèn)，前作小麥，煙草類型中間香型。各試驗(yàn)點(diǎn)基本情況見表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

分別于各試驗(yàn)點(diǎn)選擇當(dāng)?shù)氐湫椭矡熖飰K3塊，試驗(yàn)設(shè)置不施肥(CK)和常規(guī)施肥(F)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)，小區(qū)面積為100 m2，隨機(jī)區(qū)組排列。常規(guī)施肥處理：威寧點(diǎn)基肥施用烤煙專用基肥(N∶P2O5∶K2O=10∶10∶25，下同)50 kg/667m2，農(nóng)家肥500 kg/667m2，追肥為專用肥(N∶P2O5∶K2O=13∶0∶26，下同)15 kg/667m2，油枯10 kg/667m2；開陽點(diǎn)基肥施用烤煙專用基肥30 kg/667m2，追肥為專用肥15 kg/667m2；天柱點(diǎn)基肥施用烤煙專用基肥50 kg/667m2，普鈣25 kg/667m2，油枯20 kg/667m2，追肥為專用肥15 kg/667m2?；室圃詴r(shí)施用，追肥距煙移栽后35～40 施用。

各試驗(yàn)點(diǎn)烤煙移栽時(shí)間根據(jù)當(dāng)?shù)胤N植日期和氣候條件決定，烤煙移栽規(guī)格均為雙行凹?jí)欧N植，行距為110 cm，窩距為55 cm，移栽密度為1100株/667m2，田間日常管理按照當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)進(jìn)行。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

測(cè)定項(xiàng)目包括煙葉中的醇類、醛類、酸類、酮類、烷類、烯類和酯類等香氣物質(zhì)。

測(cè)定方法：稱取2.000 g/煙葉樣品至50 mL離心試管中，準(zhǔn)確加入20 mL二氯甲烷萃取液，渦旋1 min，并超聲提取30 min。用載有5 g 無水硫酸鈉的濾紙過濾。移取濾液至濃縮瓶中，在40 ℃濃縮至1 mL，轉(zhuǎn)移至2 mL色譜瓶中，加入10 μl苯乙酸甲酯(Methyl phenylacetate，30 mg/mL)內(nèi)標(biāo)，用GC-MS進(jìn)行定性定量分析。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)均采用Excel 2003軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 烤煙致香物質(zhì)成分

從表2看出，烤煙致香物質(zhì)數(shù)量在69～84種，按照官能團(tuán)分為16～20類，其中，醇類13～17種，醛類1～4種，酸類6～9種，酮類3～8種，烷類15～28種，烯類7～12種，酯類2～5種，其他種類8～19種。不同香型烤煙致香物質(zhì)成分組成看，施肥處理的清香型烤煙致香物質(zhì)數(shù)量增加15種，其中酮類致香物質(zhì)增加4種，烷類致香物質(zhì)增加5種，其他致香物質(zhì)增加5種；施肥降低中間香型烤煙中的致香物質(zhì)數(shù)量，其中醇類、酸類和其他類致香物質(zhì)分別減少2、2和3種，但烯類致香物質(zhì)卻增加3種；施肥對(duì)2012和2014年偏清香型烤煙致香物質(zhì)數(shù)量存在差異，其中2012年偏清香型烤煙致香物質(zhì)數(shù)量減少2種，而2014年則增加4種，但是總體來看施肥使偏清香型烤煙醇類和烯類致香物質(zhì)增加2～3種，烷類和其他類致香物質(zhì)減少2～4種，表明施肥對(duì)不同種類致香物質(zhì)可能會(huì)因烤煙種植年份的不同而存在一定差異。

表1 試驗(yàn)點(diǎn)的基本情況

表2 施肥和不施肥處理不同香型烤煙的致香物質(zhì)成分組成

2.2 致香物質(zhì)的總體含量

從表3看出，與不施肥(CK)相比，施肥后清香型烤煙致香物質(zhì)總量影響不大，但醇類、醛類、酮類以及烯類致香物質(zhì)含量明顯降低，降幅分別為37.3 %、37.9 %、30.2 %和50.1 %，而其他類致香物質(zhì)則增加55.6 %；施肥對(duì)中間香型烤煙的醛類、酮類和烷類致香物質(zhì)的影響較大，醛類致香物質(zhì)含量較CK下降33.3 %，而酮類和烷類致香物質(zhì)則分別提高44.7 %和79.7 %；施肥對(duì)2012和2014年偏清香型烤煙致香物質(zhì)含量的影響存在差異，2012年施肥后偏清香型烤煙的醛類和其他類致香物質(zhì)含量較CK分別降低49.0 %和60.0 %，烯類提高45.4 %，而2014年施肥后偏清香型烤煙的烷類和烯類致香物質(zhì)含量分別降低60.9 %和36.0 %，醛類致香物質(zhì)含量則提高73.3 %。

2.3 致香物質(zhì)的分配比例

從表4看出，施肥主要影響烤煙中醇類、醛類、烷類以及其他類致香物質(zhì)的分配比例。與不施肥相比，施肥處理的清香型烤煙醇類致香物質(zhì)分配比例降低10.78個(gè)百分點(diǎn)，其他類致香物質(zhì)比例提高12.56個(gè)百分點(diǎn)；施肥對(duì)中間香型烤煙的致香物質(zhì)分配比例影響較小，僅對(duì)烷類致香物質(zhì)有顯著影響，較CK處理相比提高10.19個(gè)百分點(diǎn)；施肥對(duì)2012年和2014年偏清香型烤煙致香物質(zhì)分配比例的影響有所不同，其中施肥顯著降低2012年偏清香型烤煙中其他類致香物質(zhì)分配比例，降幅為15.48個(gè)百分點(diǎn)，2014年偏清香型烤煙的醛類致香物質(zhì)分配比例較CK處理相比增加0.05個(gè)百分點(diǎn)，而烷類致香物質(zhì)分配比例則顯著降低了10.92個(gè)百分點(diǎn)。

表3 施肥和不施肥處理不同香型烤煙的致香物質(zhì)含量

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下同。

Note: Different lowercase letters in the same column indicate significance of difference atP<0.05 level. The same as below.

表4 施肥和不施肥處理不同香型烤煙致香物質(zhì)的分配比例

Table 4 Distribution proportion of aroma components in flue-cured tobacco varieties with different aroma type under fertilization and no fertilization treatment

香型Aromatype年份(年)Year處理Treatment致香物質(zhì)分配比例(%)Distributionproportionofaromacomponents醇類醛類酸類酮類烷類烯類酯類其他清香型Fen?flavor2013不施肥(CK)29．06a0．08a12．51a1．06a25．07a9．70a3．16a19．35b施肥18．28b0．06a9．95a0．79a31．05a5．10a2．85a31．91a中間香型Middleflavor2013不施肥(CK)14．84a0．03a9．11a2．08a17．08b6．28a1．95a48．63a施肥16．25a0．03a7．23a2．57a27．27a5．83a1．61a39．22a偏清香型Partialfen?flavor2012不施肥(CK)22．81a0．15a17．10a1．46a22．32a5．06a1．53a29．56a施肥24．22a0．12a20．28a2．26a28．06a8．79a2．19a14．08b2014不施肥(CK)23．86a0．04b15．02b5．28a23．06a8．71a1．88a22．15a施肥26．12a0．09a23．41a4．71a12．14b6．00a2．21a25．31a

2.4 致香物質(zhì)含量

2.4.1 清香型烤煙 根據(jù)檢測(cè)結(jié)果(表5)，施肥對(duì)清香型烤煙中致香物質(zhì)影響較大的化合物共有21種，丁類1種、醇類4種、酸類3種、酮類1種、烷類6種、烯類5種及酯類1種。施肥顯著增加清香型烤煙中煙堿含量，增幅為57.8 %；對(duì)膽固醇、二氧化二戊烯、2-甲基丁酸、氧化石竹烯、3-甲基丁酸、二十二烷和二十八烷含量也有明顯的提升作用，分別提高65.3 %、30.3 %、37.6 %、23.5 %、250.7 %、159.0 %和149.8 %；而棕櫚酸、植物甾醇、豆固醇、苯乙酸甲酯、反式角鯊烯、癸烷、雙戊烯、角鯊烯、喇叭茶醇、十二烷、十四烷、二十七烷和巨豆三烯酮A含量則明顯降低。

表5 施肥和不施肥處理清香型烤煙的致香物質(zhì)含量

表6 施肥和不施肥處理中間香型烤煙的致香物質(zhì)含量

2.4.2 中間香型烤煙 從表6看出，施肥對(duì)中間香型烤煙中22種化合物的影響較為明顯。其中，丁類1種、醇類4種、酸類3種、酮類1種、烷類4種、烯類6種、酯類1種、醌類1種及吡啶類1種。施肥顯著增加了中間香型烤煙中膽固醇、豆固醇、苯乙酸甲酯、泛醌、喇叭茶醇、二十七烷、二十九烷、三十烷、氧化石竹烯和角鯊烯含量，其中豆固醇、苯乙酸甲酯、泛醌、喇叭茶醇和氧化石竹烯含量增幅分別達(dá)到68.1 %、200.7 %、76.1 %、178.2 %和156.0 %；煙堿、棕櫚酸、莰烯、二氧化二戊烯、十二烷、2-甲基丁酸、雙戊烯、異戊酸、2,3-聯(lián)吡啶、1,5-二甲基-1,5-環(huán)辛二烯、香葉基香葉醇和巨豆三烯酮A含量出現(xiàn)下降，其中二氧化二戊烯、雙戊烯、異戊酸、2,3-聯(lián)吡啶、1,5-二甲基-1,5-環(huán)辛二烯和巨豆三烯酮A含量降幅最為明顯，分別達(dá)89.4 %、91.7 %、84.7 %、93.5 %、95.0 %和64.6 %。

2.4.3 偏清香型烤煙 從表7看出，施肥對(duì)偏清香型烤煙中14種化合物的影響較大。其中丁類1種，醇類4種，酸類2種，酮類1種，烷類2種，烯類2種，酯類1種，吡啶類1種。但是，施肥對(duì)2012年和2014年偏清香型烤煙中致香物質(zhì)含量又有所不同，其中施肥顯著增加了2012年偏清香型烤煙中癸烷、2,3-聯(lián)吡啶和巨豆三烯酮A含量，增幅分別為36.4 %、87.0 %和46.9 %，使煙堿、雙戊酸和香葉基香葉醇含量明顯降低，降幅為81.8 %、37.0 %和54.8 %；施肥后，2014年偏清香型烤煙中十二烷、2,3-聯(lián)吡啶、香葉基香葉醇和巨豆三烯酮A含量明顯提升，增幅分別為84.2 %、36.1 %、68.8 %和66.9 %，煙堿、植物甾醇、豆固醇、苯乙酸甲酯、亞麻酸和喇叭茶醇含量明顯降低，降幅分別為67.6 %、55.2 %、47.6 %、97.4 %和97.4 %。

3 討 論

煙葉品質(zhì)是評(píng)價(jià)煙葉的使用及價(jià)值的重要因素，致香物質(zhì)組成和含量是衡量煙葉品質(zhì)和香氣狀況最直接、最可靠的標(biāo)準(zhǔn)[8]。香氣的量、質(zhì)、型是由多種致香物質(zhì)的含量、比例及其相互作用共同決定的[8-9]，因此評(píng)價(jià)烤煙的香氣狀況要從烤煙致香物質(zhì)組成、含量和比例等多方面綜合考慮[10]。然而，影響煙葉致香物質(zhì)種類、含量和比例的重要因素包括主要遺傳因素、生態(tài)環(huán)境、栽培措施和烘烤調(diào)制4個(gè)主要方面[8]，施肥作為烤煙的重要栽培技術(shù)手段，也是對(duì)煙葉致香物質(zhì)調(diào)節(jié)幅度較大的因子[11]。研究發(fā)現(xiàn)，NPK合理配施是提高烤煙致香物質(zhì)含量的重要措施[8]，而增施有機(jī)肥對(duì)提高煙葉致香物質(zhì)也有明顯效果[12]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，清香型烤煙不施處理的致香物質(zhì)分配比例為烷類>醇類>其他>酸類，施肥后致香物質(zhì)分配比例變?yōu)槠渌?烷類>醇類>酸類；偏清香型烤煙2012年不施肥處理的致香物質(zhì)分配比例為其他>醇類>烷類>酸類>烯類>酯類>酮類>醛類>，施肥后變?yōu)橥轭?醇類>酸類>其他>烯類>酮類>酯類>醛類，2014年不施肥處理的致香物質(zhì)分配比例為醇類>烷類>其他>酸類，施肥后則變?yōu)榇碱?其他>酸類>烷類；但施肥對(duì)中間香型烤煙中致香物質(zhì)的分配比例則沒有影響。表明施肥不僅影響烤煙中致香物質(zhì)的成分組成和含量，對(duì)煙葉中致香物質(zhì)的分配比例也產(chǎn)生一定影響，而且這種影響差異會(huì)因烤煙香氣類型、種植年限、施肥狀況等不同[10]。

表7 施肥和不施肥處理偏清香型烤煙的致香物質(zhì)含量

4 結(jié) 論

(1)施肥使清香型和偏清香型烤煙中致香物質(zhì)數(shù)量分別增加15種和4種，使中間香型烤煙中致香物質(zhì)減少4種；施肥使清香型烤煙醇類、醛類、酮類含量分別降低37.3 %、37.9 %和30.2 %，中間香型烤煙醛類下降33.3 %，偏清香型烤煙醛類、烷類分別降低49.0 %和60.9 %。

(2)施肥對(duì)清香型、中間香型和偏清香型烤煙中致香物質(zhì)影響較大的化合物分別為21、22和14種。含量增幅分別為23.5 %～250.7 %、68.1 %～200.7 %和36.4 %～97.4 %。

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(責(zé)任編輯 聶克艷)

Effects of Fertilization on Aroma Components and Content ofThree Flue-cured Tobacco Varieties with Different Aroma Type

QIN Song1,2, FAN Cheng-wu1,3, ZHANG Meng1, HU Gang1, ZHANG Heng1, SHI Jun-xiong2

(1.Guizhou Research Center for Agricultural Resources and Environment Engineering, Guizhou Institute of Soil and Fertilizer, Guizhou Guiyang 550006, China; 2.Guizhou Tobacco Institute, Guizhou Guiyang 550003, China; 3.Guizhou Observation and Experimental Station of Farmland Preservation and Agricultural Environment Sciences, Guizhou Guiyang 550006, China)

【Objective】 This study aimed to discuss effects of fertilization on aroma components of flue-cured tobacco varieties with different aroma type and provide the theoretical basis for improvement of aroma quality in flue-cured tobacco.【Method】 The effects of fertilization on aroma components of flue-cured tobacco varieties with three different aroma types were studied by the field plot test in Kaiyang, Tianzhu and Weining county, Guizhou during 2012-2014.【Result】Fertilization affected the kinds of aroma components in flue-cured tobacco varieties with different aroma type obviously.The increased number of aroma components in the flue-cured tobacco variety with fen-flavor type in 2013 and flue-cured tobacco variety with partial fen-flavor type in 2014 is 15 and 4 under fertilization treatment respectively. The decreased number of aroma components in the flue-cured tobacco variety with middle flavor type in 2013 and flue-cured tobacco variety with partial fen-flavor type in 2012 was 4 and 2 under fertilization treatment respectively. Fertilization affected the content and distribution proportion of aroma components in flue-cured tobacco varieties with different aroma types obviously. The content of alcohols, aldehydes and ketones in the flue-cured tobacco variety with fen-flavor type decreased by 37.3 %, 37.9 % and 30.2 % under fertilization treatment respectively. The content of aldehydes in the flue-cured tobacco variety with middle flavor type decreased by 33.3 % under fertilization treatment. The content of aldehydes and alkanes in the flue-cured tobacco variety with partial fen-flavor type decreases by 49.0 % and 60.9 % under fertilization treatment respectively. The influence difference was related to flue-cured tobacco’ aroma type, planting years and fertilization level. The analogy analysis showed that fertilization not only affected the content of 17 common aroma components in flue-cured tobacco in three test sites but also the content of other aroma components to varying degrees.【Conclusion】Fertilization has the significant effects on aroma components and aroma content in flue-cured tobacco varieties with three different aroma types.

Fertilization; Flue-cured tobacco; Different aroma type; Aroma component

1001-4829(2017)7-1612-07

10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.025

2016-06-02

貴州省煙草公司項(xiàng)目“貴州植煙土壤有機(jī)碳氮特征及其與煙葉香氣的關(guān)系研究”(201107)

秦 松(1967-)，男，貴州安順人，研究員，從事農(nóng)業(yè)資源利用與農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)研究，E-mail:qs3761735@163.com。

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