何曉靜，蔣 偉，周 雪,彭玲芝,余燕清，卓 穎*

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)超聲影像學(xué)研究所，重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，重慶400010)

(2.重慶市納米材料及傳感技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室，西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，重慶400715)

基于金屬有機(jī)骨架材料固載的碲化鎘量子點(diǎn)作為信號(hào)探針測(cè)定心肌肌鈣蛋白的電致化學(xué)發(fā)光免疫傳感器

何曉靜1*，蔣 偉1，周 雪1,彭玲芝2,余燕清2，卓 穎2*

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)超聲影像學(xué)研究所，重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，重慶400010)

(2.重慶市納米材料及傳感技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室，西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，重慶400715)

該研究基于金屬有機(jī)骨架材料（MOFs）固載的碲化鎘量子點(diǎn)(CdTe QDs)作為信號(hào)探針構(gòu)建了電致化學(xué)發(fā)光(ECL)免疫傳感器用于心肌肌鈣蛋白I（cTnI）的檢測(cè)。具體來(lái)講，在合成MOFs過(guò)程中加入CdTe QDs，制得CdTe@MOFs，隨后利用CdTe@MOFs外面的氨基與CdTe QDs的羧基交聯(lián)，制備出CdTe@MOFs/ CdTeQDs復(fù)合物，再利用該復(fù)合物中CdTe QDs剩余的羧基與二抗 （Ab2）中氨基交聯(lián)，從而制備出CdTe@MOFs/CdTeQDs/Ab2生物探針。電極敏感界面的構(gòu)建是首先在裸玻碳電極上修飾一層金納米顆粒，來(lái)固載cTnI的第一抗體（Ab1），再用BSA封閉其非特異性結(jié)合位點(diǎn)，從而制得了ECL免疫傳感器?；趭A心型反應(yīng)模式，此免疫傳感器實(shí)現(xiàn)了對(duì)cTnI的靈敏檢測(cè)且線性響應(yīng)達(dá)8個(gè)數(shù)量級(jí)（1.1 fg/mL至11 ng/mL）。

CdTe量子點(diǎn)；金屬有機(jī)骨架材料；夾心免疫法；心肌肌鈣蛋白I；電致化學(xué)發(fā)光

0 引言

心肌肌鈣蛋白[1-3]（cardiac troponin,cTn）是心肌肌肉收縮的調(diào)節(jié)蛋白，存在于心肌收縮蛋白的細(xì)肌絲上。肌鈣蛋白的作用之一是把原肌凝蛋白附著于肌動(dòng)蛋白上，三者共同組成細(xì)肌絲。cTn是由三種不同基因的亞基組成：心肌肌鈣蛋白T（cTnT）、心肌肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（cTnC），其中cTnI在外周血中含量極少。當(dāng)發(fā)生心肌損傷時(shí)，心肌細(xì)胞破裂，cTnI釋放并進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，是近年發(fā)展起來(lái)的高靈敏度、高特異性的血清標(biāo)志物，具有在血中出現(xiàn)早、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)。因此準(zhǔn)確測(cè)定人血中的cTnI對(duì)于診斷急性心肌梗死、急性冠狀動(dòng)脈綜合征的危險(xiǎn)分層、監(jiān)測(cè)各種因素所導(dǎo)致的心肌損傷，以及心臟事件的判斷預(yù)后等有重要意義。因此，在患病的早期階段，高效、低濃度、快速的檢測(cè)出cTnI尤為重要。

迄今為止，檢測(cè)cTnI的化學(xué)方法主要有熒光免疫分析法[4]、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法[5]、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法等[6]。熒光免疫分析法存在的主要問(wèn)題是抗原或者抗體在標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)后發(fā)生特異性免疫反應(yīng)后的性能可能改變，并且每次標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的標(biāo)記率很大?；瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析具有酶免疫分析的主要優(yōu)點(diǎn)，保留了化學(xué)發(fā)光的高靈敏度，但是酶的催化效果受外界條件的影響較大，不穩(wěn)定。電致化學(xué)發(fā)光技術(shù)是電化學(xué)與化學(xué)發(fā)光相結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)，它具有儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、靈敏度高、選擇性高、重現(xiàn)性好、抗干擾能力強(qiáng)、線性響應(yīng)范圍寬和分析速度快等特點(diǎn)[7]。其有著突出的優(yōu)點(diǎn)，如標(biāo)記物穩(wěn)定，靈敏度高，可實(shí)現(xiàn)多元檢測(cè)及均相免疫分析，因而日益受到別人的重視。目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于抗原、半抗原及抗體等的免疫檢測(cè)。常見(jiàn)的電致化學(xué)發(fā)光試劑[8]主要有Ru(bpy)32+及其衍生物、Luminol及其衍生物和半導(dǎo)體納米材料如量子點(diǎn)（quantum dots,QDs）等。量子點(diǎn)憑借發(fā)光效率高，ECL具有可調(diào)性，發(fā)光體系溫和穩(wěn)定，不易光漂白，具有較好的生物兼容性等備受青睞[9]。同時(shí)由于量子點(diǎn)表面可通過(guò)配位連接或聚合物修飾等方面包覆上有機(jī)分子或生物大分子，所以QDs常用做生物探針應(yīng)用到酶、抗原抗體、小分子鍵合蛋白和適配體的生物傳感器中。因此，在目前的ECL生物傳感器應(yīng)用中，實(shí)現(xiàn)對(duì)QDs的固載尤為關(guān)鍵。

金屬有機(jī)骨架材料[10]（MOFs）是一種由金屬簇與具有剛性的有機(jī)配體分子所形成的零維、一維或多維的多孔晶態(tài)化合物，一般以金屬離子為連接點(diǎn)，以有機(jī)配位體為連接點(diǎn)，以有機(jī)配體為支撐，以此來(lái)筑構(gòu)3D空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。MOFs結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定，且配體中包含多個(gè)N、O原子，有很強(qiáng)的配位能力和豐富的配位模式，通常具有較大比表面積，可調(diào)節(jié)的孔尺寸和孔形狀等特點(diǎn)。因此可應(yīng)用為理想的固載材料，事實(shí)上，在之前的報(bào)道中，MOFs已實(shí)現(xiàn)了對(duì)電活性物質(zhì)[11]、生物聚合物[12]、納米粒子、蛋白等[13]的固載。由于QDs特殊的性能，已成功地實(shí)現(xiàn)了與MOFs的不同方式組裝。常見(jiàn)的方式有“ship inabottle”、“bottlearound ship”和直接在MOFs外面修飾上QDs[14-15]。為了提高ECL免疫傳感器的靈敏度，該文結(jié)合了后兩種方式來(lái)實(shí)現(xiàn)QDs的固載。

該文以cTnI為蛋白質(zhì)模型，構(gòu)建了一種基于CdTe QDs電致化學(xué)發(fā)光超靈敏免疫傳感器。實(shí)驗(yàn)首先在合成MOFs過(guò)程中加入CdTe QDs，制得CdTe@MOFs，隨后利用CdTe@MOFs外面的氨基與CdTe QDs的羧基交聯(lián)， 制備出CdTe@MOFs/CdTeQDs復(fù)合物，再利用該復(fù)合物中CdTe QDs剩余的羧基與二抗（Ab2）中氨基交聯(lián)，從而制備出CdTe@MOFs/CdTeQDs/Ab2生物探針，該探針具有很強(qiáng)的ECL信號(hào)，用于提高檢測(cè)的靈敏度，作為該實(shí)驗(yàn)的一大亮點(diǎn)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)一定濃度范圍內(nèi)的cTnI檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)證明，根據(jù)此原理制備的電極可以有效的檢測(cè)cTnI，檢測(cè)限低，靈敏度高，線性范圍寬，結(jié)果令人滿(mǎn)意。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑

心肌肌鈣蛋白抗體（Ab1,Ab2）和心肌肌鈣抗原 （cTnI）（鄭州賽博生物工程有限責(zé)任公司提供）；過(guò)硫酸鈉（分析純AR）（成都市科龍化工試劑廠提供）；磷酸鹽緩沖液（PBS）（pH值7．4，0．1 mol/L）；CdCl2·2．5H2O、Na2TeO3、巰基丙酸（MPA）、氯金酸（HAuCl4）、鐵氰化鉀（化學(xué)試劑有限公司（中國(guó)四川））、牛血清白蛋白（BSA,96%～99%）、人體血清樣品（重慶市西南醫(yī)院提供）、無(wú)水乙醇溶液、鄰苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯（PDDA）、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC）（延長(zhǎng)生化技術(shù)有限公司-上海）；N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）（延長(zhǎng)生化技術(shù)有限公司-上海），聚乙烯吡咯烷酮 （PVP）、2-氨基對(duì)苯二甲酸 （2-NH2-DBC）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、Na2S2O8（上?？颠_(dá)氨基酸廠）、檸檬酸三鈉、硼氫化鈉、其他試劑如Na2HPO4、KH2PO4、KCl、ZnNO3·6H2O均為分析純?cè)噭?。?shí)驗(yàn)用水均為二次去離子水。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

MPI-A型毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀（西安瑞邁分析儀器有限公司、中科院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所）；CHI610A型電化學(xué)工作站（上海辰華儀器公司）；FA-2004A FA/JA系列電子天平（Metter Toledo公司）；BRANSONIC 200超聲清洗儀（德國(guó)BRANSON ULTRASCHALL公司）；烘箱；反應(yīng)釜移液槍?zhuān)ǔ啥挤街劭萍奸_(kāi)發(fā)公司）。JBZ-12H磁力攪拌器；三電極體系：玻碳電極（GCE，Φ＝4mm）及其修飾電極為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲為對(duì)電極。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 CdTeQDs的制備

CdTe QDs是根據(jù)先前報(bào)道的方法合成的[16]。首先將36．89mg CdCl2·2．5H2O溶解在50mL二次去離子水中，隨后在攪拌下加入50mg檸檬酸鈉固體，1 mL Na2TeO3溶液 （0．01 mol/L），33μL MPA，攪拌溶解后，再迅速加入100mg NaBH4。然后將上述溶液轉(zhuǎn)入圓底燒瓶中接上冷凝管，將溫度設(shè)置為130℃，回流10 h。溶液顏色逐步從無(wú)色變?yōu)殚偌t色，便制得了CdTe QDs溶液，自然冷卻后，用無(wú)水乙醇離心洗滌三次，重新將CdTe QDs分散于二次去離子水中，并將其放置于4℃下避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 MOFs/CdTeQDs/Ab2生物探針的制備

首先，將0．2 g PVP溶于11mL的DMF和7 mL乙醇中，制備溶液①；其次，將0．11155 g Zn(NO3)2·6H2O和0．02715 g 2-NH2-DBC溶于4 mLDMF中，超聲溶解，倒入上述制得的溶液①中，混合之后，超聲20min，放入反應(yīng)釜加熱12 h，設(shè)置溫度為100℃。制備的溶液用甲醇洗滌三次，將MOFs分散于二次去離子水中；

然后，取制備的CdTeQDs1mL于干凈的燒杯中，加入EDC/NHS（4∶1）后在4℃下攪拌40min,再加入500μL制備的MOFs，在4℃下攪拌過(guò)夜，制得MOFs/CdTeQDs溶液，離心洗滌1次，分散于二次去離子水中稀釋至原體積，放于冰箱4℃儲(chǔ)存。

取制備好的1mLMOFs/CdTeQDs加入干凈的燒杯中，加入EDC/NHS（4∶1）在4℃下攪拌活化40min，加入二抗（Ab2）33μL，在4℃下攪拌過(guò)夜后，便制得MOFs/CdTeQDs/Ab2溶液，離心后重新分散在二次去離子水中，置于4℃下備用。

1.3.3 沉積金電極的制備

在電極修飾之前，首先將玻碳電極（GCE，Φ =4mm）分別用0．3及0．05μm的三氧化二鋁（Al2O3）粉在麂皮上打磨、拋光，然后用蒸餾水洗凈并依次用乙醇和蒸餾水超聲清洗干凈。最后將其置于室溫下晾干燥備用。首先將清理好的電極置于氯金酸（HAuCl4，1%）中，并在-0．2的恒電位下電沉積30 s，使電極表面形成一層均勻的納米金（AuNPs）。

1.3.4 傳感器的制備

電極的自組裝過(guò)程：在金納米粒子修飾的電極表面滴入10μL的Ab1，在4℃靜止12 h，用蒸餾水漂洗，在電極表面加入15μL的BSA，于4℃下靜置40min后，于蒸餾水中漂洗，在電極表面滴入15μL的cTnI，靜置40min后漂洗，于電極上滴入15μL放置1 h后漂洗，制得修飾電極。傳感器構(gòu)建過(guò)程示意圖見(jiàn)圖1。

1.3.5 測(cè)試方法

實(shí)驗(yàn)測(cè)量采用三電極體系：經(jīng)修飾的玻碳電極為工作電極，Ag/AgCl（飽和KCl溶液）作為參比電極，鉑絲為對(duì)電極。在3mL含有0．01mol/L Na2S2O8的0．1mol/L PBS（pH=7．4）溶液中，采用MPI-A型電致化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)對(duì)所修飾電極的電致化學(xué)發(fā)光行為的研究。電位掃描范圍為-1．5V～0 V，以200mV/s電位掃描速度施加循環(huán)伏安（CV）掃描模式和電致化學(xué)發(fā)光（ECL）檢測(cè)，除特別說(shuō)明溫度均控制為室溫。

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

圖1 ECL傳感器構(gòu)建示意圖Fig．1 The operating principle of ECL sensing system

2.1.1 Ab1和cTn I作用時(shí)間對(duì)傳感器性能的影響在生化分析中，溫度對(duì)生物活性物質(zhì)也就是對(duì)抗體和抗原的活性有著重要的影響，考慮到傳感器的壽命這個(gè)非常重要的因素，通常選用室溫作為測(cè)試條件，免疫傳感器免疫反應(yīng)完成的程度與抗原抗體結(jié)合時(shí)間有關(guān)。在室溫下，實(shí)驗(yàn)中考察了一抗和抗原作用時(shí)間對(duì)修飾電極的影響，將修飾有BSA/Ab1/Dp-Au的免疫傳感器，在電極表面滴入15μL 11 ng/mL的cTnI，孵育時(shí)間分別為10min、20min、30min、40min、50min、60min、70 min、80min，利用CV循環(huán)伏安法，在0．1mol/L K3Fe(CN)6溶液中，電位掃描范圍為-0．2～0．6 V，掃數(shù)速率為100mV/s，由圖2可知，當(dāng)小于40min，隨著時(shí)間增加，電流逐漸下降；當(dāng)時(shí)間達(dá)到40 min，響應(yīng)電流趨于不變；表明抗體與抗原結(jié)合基本達(dá)到穩(wěn)定，因此實(shí)驗(yàn)對(duì)Ab1和cTnI最佳孵育時(shí)間為40min。

圖2 Ab1和cTnI作用時(shí)間對(duì)傳感器性能的影響Fig．2 Effectof the interaction time between Ab1and cTnI

2.1.2 cTn I與CdTe@MOFs/CdTeQDs/Ab2相互作用時(shí)間

在Ab1與cTnI最佳作用時(shí)間下，研究了cTnI與MOFs/CdTeQDs/Ab2相互作用時(shí)間，在修飾上有Ag/BSA/Ab1/Dp-Au的電極上，滴加MOFs/CdTeQDs/Ab220μL，分別孵育20min、40 min、60 min、80 min、100 min、120 min， 在10 mmol/L的Na2S2O8溶液中進(jìn)行ECL掃描。結(jié)果如圖3所示，當(dāng)時(shí)間小于80min，傳感器ECL強(qiáng)度隨著時(shí)間增加而增強(qiáng)；當(dāng)時(shí)間達(dá)到80min后，傳感器ECL強(qiáng)度隨著時(shí)間變化較為穩(wěn)定，cTnI與MOFs/CdTeQDs/Ab2最佳孵育時(shí)間為80min。

圖3 cTnI與MOFs/CdTeQDs/Ab2相互作用時(shí)間Fig．3 Effectof the interaction time between cTnIand MOFs/CdTeQDs/Ab2

2.2 雙抗夾心電致化學(xué)發(fā)光免疫傳感器修飾電極表征

2.2.1 修飾電極的CV表征

圖4 傳感器的CV表征（a.裸電極；b.Dp-Au/裸電極；c.Ab1/Dp-Au/裸電極；d.BSA/Ab1/Dp-Au/裸電極；e.cTnI/BSA/Ab1/Dp-Au/裸電極）Fig.4 Cyclic voltammogramsofvariousmodified electrodes in 0.1mol/LK3Fe(CN)6/K4Fe(CN)6solution:(a) bare GCE;(b)Dp-Au/GCE;(c)Ab1/Dp-Au/GCE;(d)BSA/ Ab1/Dp-Au/GCE;(e)cTnI/BSA/Ab1/Dp-Au/GCE

以修飾有不同物質(zhì)的玻碳電極為工作電極，于含有0．1mol/L的Fe(CN)63-/Fe(CN)64-溶液中，在-0．2 V～0．6 V的電位范圍內(nèi)進(jìn)行循環(huán)伏安（CV）電化學(xué)表征。由圖4可以觀察到，裸電極（曲線a）在測(cè)試底液中有一對(duì)對(duì)稱(chēng)的可逆氧化還原峰。當(dāng)在裸電極表面沉積了一層金之后，循環(huán)伏安峰電流增強(qiáng)，這是由于金納米粒子的促進(jìn)電子傳遞作用。當(dāng)電極孵育Ab1后，由于蛋白質(zhì)大分子阻礙了電子傳輸，電流減弱（曲線c），用牛血清蛋白（BSA）封閉電極表面的非特異性吸附點(diǎn)，峰電流值降低（曲線d），當(dāng)電極孵育上cTnI后，與抗體Ab1結(jié)合后，他們發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成免疫復(fù)合物，進(jìn)一步阻礙了電子傳輸，峰電流值降低（曲線e）。

2.2.2 電化學(xué)阻抗表征

電化學(xué)阻抗譜是一個(gè)有效的用來(lái)表征電極表面修飾過(guò)程以及探測(cè)電極表面特點(diǎn)的工具。阻抗圖包含了半圓，半圓的直徑對(duì)應(yīng)的是電子傳遞阻力，圖5表示了電極在不同的修飾階段的電化學(xué)阻抗情況。如圖可以看出當(dāng)電極清洗干凈沒(méi)有修飾任何東西時(shí)候，它的阻抗圖譜顯示如曲線a。當(dāng)電極修飾了Dp-Au，如曲線b半圓的直徑減小，主要是Dp-Au在電極表面增強(qiáng)了氧化還原探針的電子傳遞動(dòng)力學(xué)，電阻減小。而電極表面依次修飾了Ab1、BSA和cTnI后，電極表面的阻力依次增大 （曲線c～e），這是由于Ab1、BSA和cTnI具有阻礙電子傳輸?shù)哪芰Α?/p>

圖5 修飾電極的交流阻抗圖Fig.5 The impedance ofvariousmodified electrodes in 0.1 mol/LK3Fe(CN)6/K4Fe(CN)6solution:(a)bare GCE electrode; (b)Dp-Au/GCE;(c)Ab1/Dp-Au/GCE;(d)BSA/Ab1/Dp-Au/ GCE;(e)cTnI/BSA/Ab1/Dp-Au/GCE

2.3 免疫傳感器的響應(yīng)性能

圖6 (A)ECL信號(hào)（cTnI的濃度分別為a.1.1×10-6ng/mL，b.1.1×10-5ng/mL，c.1.1×10-4ng/mL，d.1.1×10-3ng/mL，e.0.011 ng/mL，f.0.11ng/mL,g.1.1ng/mL,h.11ng/mL）(B)線性擬合圖表Fig.6 (A)ECLsignal(cTnIconcentrationwerea.1.1×10-6ng/mL,b.1.1×10-5ng/mL,c.1.1×10-4ng/mL, d.1.1×10-3ng/mL,e.0.011 ng/mL,f.0.11 ng/mL,f.0.011 ng/mL,g.1.1 ng/mL,h.11 ng/mL)(B)Linear fitting chart

在最優(yōu)條件下，采用循環(huán)伏安法對(duì)免疫傳感器的響應(yīng)性能進(jìn)行考察。如圖6所示。將修飾有Ab2/CdTeQDs/MOFs/cTnI/BSA/Ab1/Dp-Au的免疫傳感器分別浸在不同濃度的cTnI中孵育后，在0．01mol/L的NaS2O8溶液中，測(cè)得對(duì)應(yīng)的穩(wěn)定后的ECL強(qiáng)度隨著抗原濃度的不斷增加而逐漸增加。該傳感器在1．1 fg/mL至11 ng/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程：I＝1881log c+7979（c為cTnI的濃度pg/mL），相關(guān)系數(shù)為r=0．9979，檢測(cè)限為0．33 fg/mL，信噪比為S/N=3。

2.4 免疫傳感器的穩(wěn)定性

此外，對(duì)該免疫傳感器的操作穩(wěn)定性進(jìn)行了評(píng)估。將免疫傳感器在0．01mol/L緩沖溶液中進(jìn)行連續(xù)10圈的ECL掃描。從圖7可以看出，其ECL響應(yīng)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0．11%，表明對(duì)cTnI的檢測(cè)具有良好的操作穩(wěn)定性。

圖7 ECL信號(hào)穩(wěn)定性（cTnI溶液的濃度為1．1 fg/mL）Fig．7 ECL signalstability(cTnIsolution concentration were 1．1 fg/mL)

3 結(jié)論

綜上所述，該文利用MOFs作為CdTe QDs固載基質(zhì)構(gòu)建了一個(gè)新型信號(hào)探針MOFs/ CdTeQDs/Ab2，并構(gòu)建了高靈敏的免疫傳感器實(shí)現(xiàn)了對(duì)cTnI的檢測(cè)。值得指出的是，該信號(hào)探針是在MOFs合成過(guò)程中和合成后兩次加入CdTe QDs，提高了CdTe QDs的固載量，從而該探針具有很強(qiáng)的ECL信號(hào)?；趭A心免疫反應(yīng)，cTnI免疫傳感器展現(xiàn)了在1．1 fg/mL～11 ng/mL檢測(cè)范圍內(nèi)令人滿(mǎn)意的分析性能，以及良好的穩(wěn)定性。鑒于上述優(yōu)點(diǎn)，該免疫傳感器將在疾病診斷和臨床分析領(lǐng)域具有較大的應(yīng)用潛力。

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An ECL immunesensor based onmetalorganic frameworks carried CdTequantum dotsas the signalprobe for cardiac troponin I detection

He Xiao-jing1*,JiangWei1,Zhou Xue1,Peng Ling-zhi2,Yu Yan-qing2,Zhuo Ying2*
(1.Institute ofUltrasound Imaging ofChongqingMedicalUniversity,The Second Affiliated HospitalofChongqing MedicalUniversity,Chongqing 400010,China)
(2.Chongqing Nanomaterialsand Sensing Technology Engineering Laboratory,College ofChemistry and Chemical Engineering,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China)

In thiswork,an electrogenerated chemiluminescence(ECL)immunesensorwas developed usingmetal organic frameworks(MOFs)carried CdTe quantum dots(CdTe QDs)as the signal probe for cardiac troponin I(cTnI) detection.Firstly,the as-prepared CdTe QDswere added during the synthesis of MOFs to form the CdTe@MOFs. Then,the CdTe@MOFswere further used as carriers to immobilize the CdTe QDswith the aid of EDC and NHSas coupling agents to form CdTe@MOFs/CdTeQDs nanocomposites.Subsequently,the resultant nanocomposites of CdTe@MOFs/CdTeQDswere served as tracing tags for assembling Ab2to obtain the signal probes of CdTe@MOFs/ CdTeQDs/Ab2(Ab2bioconjugates).Meanwhile,the Au nanopaticleswere firstmodified onto the surface of a glassy carbon electrode(GCE)for sensing interface construction,which afforded a large surface area formassive Ab1anchoring via Au-Sor Au-N bonding.Based on the“sandwich reaction”strategy,this immunesensor provided an ultrasensitive ECL detection of cTnIwith a linear response about8 ordersofmagnitude(from 1.1 fg/mL to 11 ng/mL).

CdTe QDs;metalorganic frameworks(MOFs);sandwich immunoassay;cTnI;electrogenerated chemiluminescence(ECL)

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81401382)；重慶市衛(wèi)生計(jì)生委醫(yī)學(xué)科研項(xiàng)目(2016MSXM024)

*通信聯(lián)系人，E-mail:He_xiaojing1006@163.com.Tel.:Fax:023-63693060