包桂蘭 白月輝 湯文莉 王秀枝 梁鳳娟 田偉剛 劉月英

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

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五味沙棘散的抗感染及免疫調(diào)節(jié)作用

包桂蘭 白月輝 湯文莉 王秀枝 梁鳳娟 田偉剛 劉月英

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

目的 研究五味沙棘散的抗感染及免疫調(diào)節(jié)作用。方法 應(yīng)用醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)炎性模型觀察五味沙棘散的抗感染作用，通過給小鼠腹腔內(nèi)注射雞紅細(xì)胞，分別測(cè)試小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力和小鼠血清溶血素水平，觀察其免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果 與空白對(duì)照組比較，五味沙棘散(0.5、1.0、2.0 g/kg)各劑量組對(duì)醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)具有抑制作用，對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)及血清溶血素形成均有明顯提高(P<0.05)。結(jié)論 五味沙棘散具有抗感染和免疫調(diào)節(jié)作用。

五味沙棘散；抗感染；免疫調(diào)節(jié)

五味沙棘散為蒙醫(yī)臨床常用驗(yàn)方。具有清熱祛痰，止咳定喘功效，臨床主治肺熱久嗽，痰多喘促，胸中滿悶，胸脅作痛等癥，急慢性支氣管炎見上述證候者〔1〕。實(shí)驗(yàn)表明五味沙棘散具有明顯止咳、化痰及平喘作用〔2〕。為深入探討五味沙棘散的藥理作用及其機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)探討了五味沙棘散對(duì)炎癥模型小鼠的抗感染和對(duì)免疫功能的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、藥品與試劑、儀器 昆明種小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，由吉林大學(xué)動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育場(chǎng)提供,許可證號(hào)碼SCXK(吉)2011-0004。五味沙棘散(內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)120612)；醋酸潑尼松(天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)110210)；鹽酸左旋咪唑片(西南藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)130922)。SYSMESKX-21型血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(日本產(chǎn))；UV-730分光光度計(jì)(日本)；Olympus顯微鏡(日本)；熒光顯微鏡(上海)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 五味沙棘散對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響〔3〕取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。分別為空白對(duì)照組(30 ml/kg)、潑尼松組、五味沙棘散低、中、高劑量組(0.5，1.0,2.0 g/kg)。各組灌胃給藥40 min后，尾靜脈注射伊文氏藍(lán)0.1 ml/10 g，然后立即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/只，20 min后斷頭處死小鼠，再腹腔注入5 ml生理鹽水，輕揉腹部，剪開腹腔，吸取洗脫液于離心機(jī)上3 000 r/min離心10 min，UV-730分光光度計(jì)590 nm測(cè)定OD值(表示被測(cè)物被吸掉的光密度)。

1.2.2 五味沙棘散對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)的影響〔4〕取小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只。分別為空白對(duì)照組(30 ml/kg)、左旋咪唑組(50 mg/kg)、五味沙棘散低、中、高劑量組(0.5，1.0，2.0 g/kg)。灌胃每天1次給藥，6 d后腹腔注射5%雞紅細(xì)胞0.4 ml/只，13 h后頸椎脫臼法處死小鼠，剪開腹部暴露腹腔臟器，吸取2 ml生理鹽水沖洗，收取沖洗液搖勻，吸取0.5 ml滴于載玻片上，37℃恒溫孵箱內(nèi)孵育30 min后取出，生理鹽水內(nèi)漂洗，晾干后及時(shí)用95%乙醇固定15 min，HE染色并封片，用光學(xué)顯微鏡觀察，計(jì)數(shù)200個(gè)巨噬細(xì)胞內(nèi)吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)(吞噬率)及吞噬的雞紅細(xì)胞數(shù)(吞噬指數(shù))。

1.2.3 五味沙棘散對(duì)血清溶血素水平的影響〔4〕取小鼠50只，與1.2.2同法分組、給藥。灌胃每天1次給藥，5 d后每只小鼠腹腔注射5%雞紅細(xì)胞0.3 ml進(jìn)行免疫，各組小鼠再連續(xù)給藥6 d后，每鼠從眼眶后靜脈叢取血0.5 ml，3 000 r/min離心，取血清20 μl加入盛有1.0 ml生理鹽水的試管內(nèi)，加入5%雞紅細(xì)胞0.5 ml，再加1∶10豚鼠血清稀釋液0.5 ml，混勻后置37℃水浴保溫30 min，取出后冰水浴10 min終止反應(yīng)，2 000 r/min離心10 min，取上清液1.0 ml，加都氏液(血紅蛋白稀釋液)3.0 ml混勻，靜置10 min，在波長546 nm比色，用OD值表示血清溶血素含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS12.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 五味沙棘散對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響 五味沙棘散低、中、高劑量組巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)較空白對(duì)照組均有明顯提高(P<0.05)，說明五味沙棘散能增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力。見表1。

表1 各組巨噬細(xì)胞吞噬能力比較

與空白對(duì)照組比較：1)P<0.05

2.2 五味沙棘散對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 空白對(duì)照組、潑尼松組、五味沙棘散低、中、高劑量組OD值分別為0.287 5±0.061 3，0.180 7±0.076 5，0.195 9±0.078 4，0.179 5±0.033 0，0.177 3±0.031 1。五味沙棘散對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加均有不同程度的降低作用(P<0.05,P<0.01)。

2.3 五味沙棘散對(duì)小鼠血清溶血素水平的影響 五味沙棘散中、低、高劑量組血清溶血素水平(0.265±0.017、0.271±0.015、0.273±0.021)與空白對(duì)照組比較有明顯的增高(0.257±0.021，P<0.05)，說明五味沙棘散能促進(jìn)小鼠血清溶血素的生成。

3 討 論

五味沙棘散為蒙醫(yī)驗(yàn)方，其中沙棘為君藥起主導(dǎo)作用，直接針對(duì)主癥和病患部位。沙棘中含有異鼠李素及其糖苷、槲皮素、山萘酚等7種黃銅物質(zhì)，具有止咳、平喘祛痰、降低膽固醇、清除自由基等的功效〔5～7〕。梔子性味苦，寒；歸心、肺、三焦經(jīng)，具有瀉火解毒，清熱利濕，涼血散瘀等功效。木香具有行氣止痛，健脾消食等功效。甘草具有補(bǔ)脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥等功效等。全方共奏止咳定喘，清熱祛痰，調(diào)整陰陽之功效。五味沙棘散低、中、高劑量組對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增強(qiáng)均有抑制作用，對(duì)免疫功能有一定的增強(qiáng)作用。表明此驗(yàn)方具有一定的抗感染和免疫增強(qiáng)作用。

1 楊阿敏.蒙藥使用指南〔M〕.呼和浩特：內(nèi)蒙古教育出版社,2001：33.

2 包桂蘭，杜智敏，趙中華，等.五味沙棘散止咳祛痰平喘作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009；18(3)：243-7.

3 雷 玲，王 強(qiáng)，白莜露，等.安息香的抗炎解熱作用研究〔J〕.中藥藥理與臨床,2012；28(2):109-10.

4 黃 利，李利民，唐麗燕，等.白術(shù)水煎劑對(duì)小鼠免疫功能的影響〔J〕.中藥藥理與臨床,2012；28(2)：114-5.

5 馬瑜紅.沙棘的有效成分及藥理研究進(jìn)展〔J〕.四川生理科學(xué)雜志，2005;27(2):75.

6 李振海，劉祥忠，付 佳，等.沙棘對(duì)輻射損傷大鼠免疫功能及清除自由基酶活力的影響〔J〕.佳木斯醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1996;19(4)：30-2.

7 于曉莉，潘雨利，侯永坤,等.沙棘提取物抗老齡鼠衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2001;27(5)：501-2.

〔2016-04-23修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢(mèng)園)

內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2012MS1210)

包桂蘭(1965-)，女，教授，碩士，碩士生導(dǎo)師，主要從事中蒙藥抗感染免疫藥理學(xué)研究。

R285.5

A

1005-9202(2017)14-3399-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.008