黃紅梅 王 芳 蘇 菊 茅向軍

1.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550002；2.貴州省藥品檢驗(yàn)所，貴州 貴陽(yáng) 550004；3.遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴州 遵義 550005；4.貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550004

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咳速停糖漿中6味藥材的薄層鑒別

黃紅梅1,2王 芳3蘇 菊4茅向軍2*

1.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550002；2.貴州省藥品檢驗(yàn)所，貴州 貴陽(yáng) 550004；3.遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，貴州 遵義 550005；4.貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550004

目的：采用TLC法對(duì)咳速停糖漿中的罌粟殼、麻黃、枇杷葉、百尾參、虎耳草、黃精6味藥材進(jìn)行定性鑒別，以完善咳速停糖漿現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下的薄層鑒別。方法：采用TLC法對(duì)制劑中的6味藥材進(jìn)行薄層鑒別。結(jié)果：建立的鑒別方法專屬性強(qiáng)、各色譜斑點(diǎn)清晰且分離度較好、陰性對(duì)照均無干擾。結(jié)論：該鑒別方法專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)便，可提高該復(fù)方制劑的質(zhì)量控制水平。

咳速停糖漿；罌粟殼；麻黃；枇杷葉；百尾參；虎耳草；黃精；薄層鑒別

咳速停糖漿系貴州百靈集團(tuán)有限公司的特色苗藥，其處方包括罌粟殼、麻黃、百尾參等9味藥材，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、潤(rùn)肺止咳、益胃生津的功效，主要用于感冒及急、慢性支氣管炎引起的咳嗽、咽干、咳痰、氣喘等癥?？人偻Ｌ菨{的現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只對(duì)吉祥草、桔梗、桑白皮3味藥材進(jìn)行薄層鑒別[1]，而對(duì)處方中的其余6味藥材(罌粟殼、麻黃、枇杷葉、百尾參、虎耳草、黃精)尚未進(jìn)行系統(tǒng)的薄層色譜鑒別研究。已有文獻(xiàn)報(bào)道[2]咳速停膠囊中5味藥材(罌粟殼、麻黃、枇杷葉、百尾參、虎耳草)的TLC鑒別研究，但其不能全面反映咳速停糖漿的內(nèi)在信息，尚不足以運(yùn)用于控制產(chǎn)品的質(zhì)量，且展開體系毒性較大。薄層鑒別作為一種快速、可靠的定性分析手段，可快速準(zhǔn)確地檢測(cè)、分析中藥的質(zhì)量。中藥的質(zhì)量是中藥安全性和有效性的客觀表征，且其可影響到中藥治病的療效，故保證中藥的質(zhì)量是確保臨床療效的關(guān)鍵因素之一[3-4]。為完善咳速停糖漿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保臨床用藥的安全性和有效性，筆者在現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)下增添了罌粟殼、麻黃、枇杷葉、百尾參、虎耳草、黃精6味藥材的薄層鑒別，以期提高其質(zhì)量控制水平。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)、101-OA型電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司)、HH-6型電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)、ZF7三用紫外分析儀(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)、XS205型電子分析天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)。

1.2 試藥 鹽酸麻黃堿(批號(hào)：171241-201508)、嗎啡(批號(hào)：171201-201123)對(duì)照品均購(gòu)買自中國(guó)藥品生物制品檢定所；罌粟殼(批號(hào)：120957-201507)、麻黃(批號(hào)：121051-201005)、枇杷葉(批號(hào)：121261-201303)、黃精(批號(hào)：121341-201404)等對(duì)照藥材均購(gòu)買自中國(guó)食品藥品檢定研究院；虎耳草、白尾參藥材由貴州百靈集團(tuán)有限公司提供，并經(jīng)貴州省食品藥品檢驗(yàn)所中藥標(biāo)本館李楊老師鑒定。硅膠G薄層板(批號(hào)：20160712；青島海洋化工廠分廠)、咳速停糖漿(批號(hào)：20150610、20150511、20150703)由貴州百靈有限公司提供，所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 罌粟殼TLC鑒別 取100mL咳速停糖漿，加15mL氨水、50mL三氯甲烷，超聲處理40min[5]，置于分液漏斗中，分取下層溶液，水浴揮干，殘?jiān)?mL甲醇使其完全溶解，制得供試品溶液；取罌粟殼對(duì)照藥材1g、缺罌粟殼的陰性樣品溶液同法制備對(duì)照藥材溶液和陰性樣品溶液；精密稱取嗎啡對(duì)照品0.1mg，加甲醇制成0.1mg/mL對(duì)照品溶液。按照2015版《中國(guó)藥典》薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn)[6]，分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液10、5、5、10μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-氨水(8.5∶1∶0.5)為展開劑[7]，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀溶液顯色后觀察。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖1。

2.2 麻黃TLC鑒別 取70mL咳速停糖漿，加10mL氨水、50mL乙酸乙酯，超聲處理30min[6]，置于分液漏斗中，分取上層溶液，水浴揮干，殘?jiān)?mL甲醇使完全溶解，制得供試品溶液。同法制備麻黃對(duì)照藥材溶液及缺麻黃的陰性樣品溶液。精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品0.1mg，加甲醇制成0.1mg/mL對(duì)照品溶液。按照2015版《中國(guó)藥典》，分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液10、5、5、10μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-氨水(4∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以顯色劑茚三酮溶液，在105℃下加熱2min后觀察。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖2。

2.3 枇杷葉TLC鑒別 取咳速停糖漿40mL，加水飽和正丁醇溶液振搖提取3次，每次30mL，合并正丁醇提取液，水浴揮干，殘?jiān)?mL甲醇使完全溶解，制得供試品溶液[8-9]；同法制得陰性樣品溶液；稱取枇杷葉對(duì)照藥材1g，加入水飽和正丁醇溶液45mL超聲處理30min，過濾，濾液水浴揮干，殘?jiān)蛹状际雇耆芙?，制成?duì)照藥材溶液。分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、陰性樣品溶液，點(diǎn)樣量10μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(8∶4∶0.1)為展開劑[8]，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇為顯色劑，于紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖3。

2.4 百尾參TLC鑒別[10]取咳速停糖漿50mL，加氨水5mL、乙酸乙酯50mL，超聲處理30min，取上層溶液，水浴揮干，殘?jiān)?mL甲醇使完全溶解，制成供試品溶液；同法制備百尾參對(duì)照藥材溶液及缺百尾參的陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、陰性樣品溶液，點(diǎn)樣量10μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，于紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖4。

2.5 虎耳草TLC鑒別[11-14]取咳速停糖漿50mL，加入5mL鹽酸，水浴回流1h，放冷至室溫后，加乙酸乙酯振搖提取3次，每次30mL，合并提取液，水浴揮干，殘?jiān)?mL甲醇溶解，制成供試品溶液；同法制備虎耳草對(duì)照藥材溶液及缺虎耳草的陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材樣品溶液、陰性樣品溶液，點(diǎn)樣量10μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，于紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖5。

2.6 黃精TLC鑒別 取咳速停糖漿50mL，加50mL乙醇超聲處理30min，加入9mL鹽酸，水浴回流1h，迅速冷卻，以石油醚(60℃～90℃)振搖提取3次，每次30mL，合并提取液，水浴蒸干[15]，殘?jiān)?mL甲醇使完全溶解，即得供試品溶液；同法制備黃精對(duì)照藥材溶液及缺黃精的陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液、陰性樣品溶液，點(diǎn)樣量10μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶0.1)為展開劑[6]，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸，于105℃下加熱顯色后觀察。結(jié)果，供試品色譜圖中，在與對(duì)照藥材色譜圖相應(yīng)的位置處顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖6。

3 討論

實(shí)驗(yàn)在摸索罌粟殼的展開體系過程中，發(fā)現(xiàn)甲苯-丙酮-乙醇-氨水(20∶20∶3∶1)、乙酸乙酯-甲醇-氨水(8.5∶1∶0.5)這兩種展開體系展開，都能找到專屬性色譜斑點(diǎn)，且各色譜斑點(diǎn)清晰、分離度好，但從試劑對(duì)人體的傷害程度方面考慮，乙酸乙酯-甲醇-氨水(8.5∶1∶0.5)作為鑒別罌粟殼的展開體系較佳；在研究枇杷葉檢視方法的過程中，對(duì)比噴顯色劑后加熱與噴顯色劑后在365nm下檢視結(jié)果發(fā)現(xiàn)，前者無專屬性的色譜斑點(diǎn)，而后者的各斑點(diǎn)清晰、分離度好；虎耳草的薄層鑒別收載于2003版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》，但該標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下的提取方法較為繁瑣，且其展開體系中有易致毒的苯[14]；筆者在虎耳草的鑒別實(shí)驗(yàn)過程中簡(jiǎn)化了提取方法，同時(shí)把苯替換成低毒性的石油醚。

實(shí)驗(yàn)參考了相關(guān)文獻(xiàn)資料和標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)優(yōu)化了各提取方法、提取溶劑、展開體系、顯色方法等，找到6味藥材的專屬性薄層鑒別方法，并對(duì)方法進(jìn)行耐用性考察，結(jié)果表明該方法耐用性好。因此，該薄層鑒別方法可用于咳速停糖漿其余6味藥材的TLC鑒別，為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提升研究提供參考依據(jù)。

[1]WS-10215(ZD-0215)-2002-2011Z,國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].

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[4]徐維統(tǒng)，張仁俠.淺談?dòng)绊懼兴幆熜У挠绊懸蛩豙J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2010,6(5):132.

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The TLC Identification of the 6 Chinese Medicines of Kesuting Syrup

HUANG Hongmei1,2WANG Fang3SU Ju4MAO Xiangjun2*

1.Guiyang College of Traditional Chinese Medical, Pharmaceutical College, Guiyang 550002,China; 2.Guizhou Provincial Food and Drug Inspection Institute, Guiyang 550004,China; 3.Zunyi College of Medical,Pharmaceutical College, Zunyi 550005,China;4.Guizhou Medical University, Pharmaceutical College, Guiyang 550004,China

Objective To perfect the TLC identification of the exiting quality standard of Kesuting syrup, the 6 chinese medicines Pericarpium Papaveris, Ephedra sinica, Eriobotrya japonica Thunb, Disporum cantoniense, Saxifraga stolonifera, Polygonatum sibiricum Red were identified by TLC.Methods The 6 chinese medicines were identified by applying TLC.Results The identification methods was established which has strong specificity, the TLC spots are clear, separating degree is perfect and blank test has not any interference.Conclusion The identification methods have strong specificity, good repeat, simple operation and will improve the level of the quality control of compound preparation.

Kesuting Syrup; Pericarpium Papaveris; Ephedra Sinica; Eriobotrya Japonica Thunb; Disporum Cantoniense; Saxifraga Stolonifera; Polygonatum Sibiricum Red; TLC Identification

國(guó)家藥典委員會(huì)2015年度藥品標(biāo)準(zhǔn)提高工作[NO.:88]。

黃紅梅(1993-)，女，漢族，碩士研究生在讀，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。E-mail:1515979920@qq.com

茅向軍(1964-)，男，漢族，主任藥師，研究方向?yàn)橹兴幖懊褡逅庂|(zhì)量控制與研究。E-mail：1074459931@qq.com

R284

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1007-8517(2017)13-0016-03

2017-04-27 編輯：穆麗華)