柳 新，謝云鵬，王海濤△

（1.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北 唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院）

ADAM17、EGFR在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及臨床意義

柳 新1，謝云鵬2，王海濤1△

（1.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北 唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院）

目的:探討子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的表達(dá)和臨床意義。方法：應(yīng)用免疫組化染色法檢測20例正常子宮內(nèi)膜、20例不典型增生子宮內(nèi)膜和50例子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17和EGFR的表達(dá)情況。結(jié)果：子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的陽性表達(dá)率均明顯高于正常子宮內(nèi)膜和不典型增生子宮內(nèi)膜（P＜0.01）；子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR表達(dá)與肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），與年齡、是否絕經(jīng)無關(guān)（P＞0.05）；子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17與EGFR的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.691，P＜0.01）。結(jié)論：ADAM17、EGFR在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中可能起重要作用。

子宮內(nèi)膜癌；ADAM17；EGFR；免疫組織化學(xué)

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率呈不斷上升趨勢并趨于年輕化，嚴(yán)重威脅著女性健康[1]。ADAM17是解聚素-金屬蛋白酶家族成員，又名腫瘤壞死因子轉(zhuǎn)換酶，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中均發(fā)揮重要作用。表皮生長因子受體（EGFR）為Ι型跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，在人體多種癌變組織中均有陽性表達(dá)或突變。本研究通過檢測子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的表達(dá)情況，并分析二者的相關(guān)性，初步探討ADAM17、EGFR在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的作用及臨床意義，以期為子宮內(nèi)膜癌的預(yù)防、治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例資料2014年至2016年承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院確診為子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)切除蠟塊標(biāo)本50例為研究組，病理類型均為腺癌，手術(shù)前均未行放、化療及激素等治療，排除功能性卵巢腫瘤及惡性腫瘤轉(zhuǎn)移等。取同期不典型增生子宮內(nèi)膜和正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本各20例為對照組。入組對象一般資料：正常子宮內(nèi)膜組20例，年齡28-54歲，平均43.6歲；不典型增生組20例，年齡30-58歲，平均45.5歲；子宮內(nèi)膜癌組50例，年齡38-70歲，平均52.4歲，12例肌層浸潤深度＜1/2、38例浸潤＞1/2，16例存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（占32%）。

1.2 實驗試劑即用型SABC免疫組化試劑盒、濃縮型兔抗人EGFR多克隆抗體，武漢博士德生物工程有限公司；濃縮型兔抗人ADAM17多克隆抗體，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；DAB顯色試劑盒，福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3 ADAM17和EGFR表達(dá)的檢測所取標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片。采用免疫組化法檢測ADAM17（1:50）、EGFR（1:50）的表達(dá)情況，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。

1.4 結(jié)果判定ADAM17和EGFR蛋白的陽性表達(dá)均為棕黃色顆粒；ADAM17陽性產(chǎn)物位于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的胞膜，EGFR的陽性表達(dá)以子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的胞膜為主，部分胞漿可見染色。

每例標(biāo)本選擇3張切片，每張切片隨機(jī)選取5個高倍視野（×400），按照陽性細(xì)胞的百分率劃分等級[2]：無染色細(xì)胞為“-”，染色細(xì)胞數(shù)＜20%為“+”，染色細(xì)胞數(shù)20%-50%為“++”，染色細(xì)胞數(shù)＞50%為“+++”。染色結(jié)果判斷：“-”和“+”為陰性表達(dá)，“++”和“+++”為陽性表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，選用卡方檢驗進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，ADAM17、EGFR的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同子宮內(nèi)膜組織ADAM17、EGFR的表達(dá)情況子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的陽性表達(dá)率均明顯高于正常子宮內(nèi)膜和不典型增生子宮內(nèi)膜（P＜0.01）。見表1：

表1 不同子宮內(nèi)膜組織ADAM17、EGFR的表達(dá)

2.2 ADAM17、EGFR表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的表達(dá)均與年齡、是否絕經(jīng)無關(guān)（P＞0.05）；與肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。見表2。

表2 ADAM17、EGFR表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17與EGFR表達(dá)的相關(guān)性 子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17和EGFR的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.691， P＜0.01）。見表3：

表3 子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17與EGFR表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

解聚素-金屬蛋白酶（adisintegrin and metalloprotease，ADAM）是一類細(xì)胞膜表面糖蛋白家族，近年來的研究表明其與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系[3]。ADAM17是該家族中的重要成員，是一種有多個結(jié)構(gòu)域的I型跨膜蛋白，具有解聚酶和金屬蛋白酶的活性。因ADAM17具有蛋白酶剪切樣作用，可以激活或釋放多種結(jié)構(gòu)和功能不同的生物活性分子，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的侵襲、運(yùn)動等多種生物學(xué)行為，在降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的過程中也發(fā)揮著重要作用[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17的陽性表達(dá)率明顯高于正常子宮內(nèi)膜和不典型增生子宮內(nèi)膜；且子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17的表達(dá)與肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，ADAM17可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中扮演了重要角色。

EGFR是細(xì)胞膜表面的一種糖蛋白，屬于酪氨酸激酶受體家族成員，為Ι型酪氨酸激酶跨膜受體[6]。除造血系統(tǒng)外，EGFR在人體多種組織器官細(xì)胞的細(xì)胞膜上廣泛分布。EGFR被配體激活后可啟動細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)，經(jīng)過胞質(zhì)中的銜接蛋白、酶的級聯(lián)反應(yīng)等，指導(dǎo)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、粘附和遷移。EGFR過表達(dá)可導(dǎo)致其對細(xì)胞的調(diào)節(jié)失常，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致腫瘤形成[7]。EGFR可促進(jìn)多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，且與食管癌的惡性程度、分化及浸潤程度密切相關(guān)，近年來已成為腫瘤研究的重要分子靶點[8]。有研究發(fā)現(xiàn)，EGFR高表達(dá)與腫瘤患者的高復(fù)發(fā)率和較短的生存期有著較為密切的關(guān)系，是一個評估預(yù)后的有力指標(biāo)[9-10]。本研究顯示，子宮內(nèi)膜癌組織EGFR的陽性表達(dá)率明顯高于正常子宮內(nèi)膜和不典型增生子宮內(nèi)膜；并且，子宮內(nèi)膜癌組織EGFR表達(dá)與肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示EGFR高表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，深入研究該因子對發(fā)現(xiàn)治療子宮內(nèi)膜癌的分子靶點具有重要意義。

EGFR的激活需要ADAM17介導(dǎo)[11]。有研究發(fā)現(xiàn)，ADAM17在腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮的重要作用是通過剪切EGFR的配體等因子，從而形成一條自分泌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路實現(xiàn)的[12]。本研究與上述研究結(jié)果相似，不但發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌組織ADAM17、EGFR的陽性表達(dá)率均明顯升高，且子宮內(nèi)膜癌組織二者的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。因此提示，ADAM17、EGFR在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中可能具有協(xié)同作用，但二者相互作用的機(jī)制是什么，有待于進(jìn)一步地深入研究。

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EXPRESSION AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF ADAM17 AND EGFR IN ENDOMETRIAL CARCINOMA

LIU Xin, XIE Yun-peng, WANG Hai-tao
(School of Basic Medical Sciences, North China University of Science and Technology, Hebei Tangshan 063000, China)

Objective:To investigate the expression and clinical significance of adisintegrin and metalloprotease-17 (ADAM17) and epidermal growth factor receptor(EGFR) in endometrial carcinoma. Methods: Immunohistochemical staining was used to detect the ADAM17 and EGFR expression in 20 cases of normal endometrium, 20 cases of atypical hyperplasia endometrium and 50 cases of endometrial carcinoma. Results: The positive expression rate of ADAM17 and EGFR in endometrial carcinoma were all obviously higher than normal endometrium and atypical hyperplasia endometrium (P＜0.01). In endometrialcarcinoma, the expression of ADAM17 and EGFR were related to muscular infltration depth and lymph node metastasis (P＜0.05), but not related to age and whether menopause (P＞0.05). In endometrial carcinoma, the expression of ADAM17 was positively correlated to EGFR (r=0.691, P＜0.01). Conclusions: ADAM17 and EGFR may play important role in development and metastasis of endometrial carcinoma.

Endometrial carcinoma; ADAM17; EGFR; Immunohistochemistry

R737.33

A

1004-6879（2017）04-0273-03

2016-10-05）

△ 通訊作者