潘晨 章玲賓 張寧 麻妙群 徐巧敏 樊理華 張曄 丁友法

右美托咪定對(duì)冠心病大鼠血小板功能的影響及心肌保護(hù)作用

潘晨 章玲賓 張寧 麻妙群 徐巧敏 樊理華 張曄 丁友法

目的探討右美托咪定對(duì)冠心病大鼠血小板功能的影響，評(píng)價(jià)其可能的心肌保護(hù)作用。方法SD大鼠30只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和右美托咪定組，各10只。高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型。右美托咪定組大鼠尾靜脈注射右美托咪定10μg/kg，連續(xù)5天，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等劑量的生理鹽水。檢測(cè)各組大鼠血漿血栓烷素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-k-PGFlα）水平，評(píng)價(jià)右美托咪定對(duì)大鼠血小板功能的影響，分析肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白-Ⅰ（TroponinⅠ）水平，評(píng)價(jià)右美托咪定對(duì)大鼠心肌保護(hù)作用。結(jié)果與模型對(duì)照組比較，右美托咪定組血漿TXB2[（28.67±5.38）pg/mL比（38.25±7.79）pg/mL]、CK-MB [（10.31±1.81）IU/L比（15.40±2.94）IU/L]、TroponinⅠ[（10.07±0.97）ng/mL比（13.66±1.36）ng/mL]水平明顯降低（P＜0.01，P＜0.05），6-k-PGFlα[（27.64±4.61）pg/mL比（21.19±7.72）pg/mL]明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論右美托咪定可能通過改善TXA2和PGI2的不平衡狀態(tài)，抑制血小板聚集，對(duì)冠心病導(dǎo)致的心肌細(xì)胞損傷起到保護(hù)作用。

大鼠；冠心??；右美托咪定；血小板功能；心肌保護(hù)

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。╟oronary heart disease，CHD）是危害人類健康的嚴(yán)重疾病之一，動(dòng)脈粥樣硬化和血栓的形成是冠心病病理生理學(xué)原因之一，其與血小板活化有著密切的關(guān)系[1]。冠心病容易導(dǎo)致心肌缺血，從而導(dǎo)致心肌細(xì)胞受損。右美托咪定是α2腎上腺素受體的選擇性激動(dòng)藥物，可以產(chǎn)生減低交感神經(jīng)活動(dòng)的作用，激活I(lǐng)1-咪唑啉受體，穩(wěn)定血流動(dòng)力學(xué)，有潛在的抗氧化作用[2-3]。α2腎上腺素受體分布于人體的諸多組織中，激活α2腎上腺受體可以激活其下游的多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)通路，有著多種藥理活性。本文通過建立冠心病模型大鼠，使用右美托咪定進(jìn)行干預(yù)，研究其對(duì)大鼠血小板的影響和心肌保護(hù)作用。

表1 各組大鼠血脂水平和體質(zhì)量比較（mmol/L，）

表1 各組大鼠血脂水平和體質(zhì)量比較（mmol/L，）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；TC：總膽固醇；HDL：高密度脂蛋白；LDL：低密度脂蛋白膽固醇；TG：甘油三酯

組別正常對(duì)照組模型組鼠數(shù)10 20 TC 0.39±0.06 0.81±0.03** HDL 0.10±0.12 0.39±0.19** LDL 0.53±0.06 0.86±0.39* TG 1.77±0.21 3.88±0.16**體質(zhì)量（g）311±11.1 458±15.13**

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物30只SPF級(jí)雄性健康SD大鼠，體質(zhì)量（250±50）g，動(dòng)物飼養(yǎng)在標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物籠中，實(shí)驗(yàn)期間自由飲食和飲水，室內(nèi)溫度保持18～25℃，由安徽醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，許可證編號(hào)：SCXK（皖）2011-002。

1.2 主要試劑和儀器右美托咪定注射液（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)13111232）；大鼠血栓素B2（TXB2）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠6-酮前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠TroponinⅠELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）。Model680型酶標(biāo)儀（日本日立公司），Model1575型全自動(dòng)洗板機(jī)（日本日立公司），7600-010型全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)BIORAD公司），高速離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，TGL-16B）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物模型制備[4-5]通過高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型。高脂飲食配方：蛋黃粉（10%）、膽固醇（2%）、豬油（10%）、丙硫氧嘧啶（0.2%）、膽酸鈉（0.5%）、正常飼料（77.3%）。每只大鼠每天使用30g高脂食物喂養(yǎng)，連續(xù)喂養(yǎng)8周，最后一次喂養(yǎng)前72h，模型組大鼠注射垂葉后體素（30U/ kg），每天1次，連續(xù)注射3天。

2.2 動(dòng)物分組與給藥將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只和模型組20只，模型組通過高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型，造模成功后，再隨機(jī)分為模型對(duì)照組和右美托咪定組，各10只。右美托

咪定組大鼠尾靜脈注射右美托咪定10μg/kg進(jìn)行干預(yù)，連續(xù)給藥5天，每天1次，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等劑量的生理鹽水。

2.3 指標(biāo)檢測(cè)干預(yù)后稱大鼠體質(zhì)量，抽取大鼠股動(dòng)脈血全自動(dòng)生化儀進(jìn)行血脂檢測(cè)，包括總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）、甘油三酯（TG）。大鼠處死前，采集頸動(dòng)脈血，以2500r/min離心15min，然后取上清液，ELISA法按照試劑盒說明書測(cè)定血漿TXB2、6-k-PGFlα、CK-MB、TroponinⅠ水平。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)以（） 表示，組間比較用t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 各組大鼠血脂水平和體質(zhì)量分析與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠體質(zhì)量明顯增加（P＜0.01），TC、HDL、LDL、TG水平明顯升高（P＜0.01，P＜0.05）。結(jié)果提示模型組大鼠血脂水平明顯高于正常對(duì)照組，說明冠心病大鼠模型建立成功。見表1。

3.2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組TXB2水平明顯升高（P＜0.01），6-k-PGFlα水平明顯降低（P＜0.05）。與模型對(duì)照組比較，右美托咪定組TXB2水平明顯降低（P＜0.01），6-k-PGFlα水平明顯升高（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較（pg/mL，）

表2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較（pg/mL，）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型對(duì)照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；TXB2：血漿血栓烷素B2；6-k-PGFlα：6-酮-前列腺素F1α

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組右美托咪定組鼠數(shù)10 10 10 TXB2 22.81±3.96 38.25±7.79** 28.67±5.38△△6-k-PGFlα 31.27±8.53 21.19±7.72* 27.64±4.61△

3.3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較

與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組CK-MB和TroponinⅠ水平明顯升高（P＜0.01，P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，右美托咪定組CK-MB和TroponinⅠ水平明降低（P＜0.01，P＜0.05）。見表3。

4 討論

冠心病是人類發(fā)病率和死亡率很高的疾病之一，冠心病主要的病理是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化，從而導(dǎo)致心肌缺血，產(chǎn)生心肌細(xì)胞的損傷[6]。CK-MB和TroponinⅠ是常見的心肌損傷的標(biāo)志物[7]。6-k-PGFlα是前列腺素I2（PGI2）的代謝產(chǎn)物，而前列腺素I2具有抑制血小板聚集的作用，因而通過檢測(cè)6-k-PGFlα的表達(dá)能夠反映出冠心病的嚴(yán)重程度。TXB2是TXA2的降解產(chǎn)物，TXA2能夠促進(jìn)血小板的聚集，可以導(dǎo)致心肌的缺血。6-k-PGFlα和TXB2的表達(dá)水平與血小板的活化有著密切的關(guān)系，TXA2和PGI2在正常情況下保持平衡狀態(tài)，而冠心病會(huì)打破這種平衡，從而使血小板產(chǎn)生黏附、聚集、釋放等作用，導(dǎo)致血栓的形成[8]。

表3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較（）

表3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較（）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型對(duì)照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；CK-MB：酸激酶同工酶；TroponinⅠ：肌鈣蛋白-Ⅰ

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組右美托咪定組鼠數(shù)10 10 10 CK-MB（IU/L）8.96±2.06 15.40±2.94* 10.31±1.81△TroponinⅠ（ng/mL）8.06±1.94 13.66±1.36** 10.07±0.97△△

右美托咪定具有鎮(zhèn)靜、神經(jīng)保護(hù)、抑制交感神經(jīng)等多種藥理作用[9-10]，但是其對(duì)冠心病的血小板活化和心肌細(xì)胞的影響目前還不清楚。本研究發(fā)現(xiàn)模型對(duì)照組TXB2表達(dá)水平較正常對(duì)照組升高，而6-k-PGFlα水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01），在使用右美托咪定進(jìn)行干預(yù)后，冠心病模型大鼠TXB2水平降低，6-k-PGFlα水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01），說明右美托咪定能夠改善冠心病導(dǎo)致的TXA2和PGI2不平衡狀態(tài)，從而影響血小板的活化。有研究顯示，右美托咪定可以通過咪唑啉I1受體激活鳥苷酸環(huán)化酶增加環(huán)磷酸鳥苷，導(dǎo)致血小板聚集抑制[11]。本研究結(jié)果提示右美托咪定通過影響TXA2和PGI2而產(chǎn)生一定的血小板抑制作用，研究顯示右美托咪定能有效改善高血糖冠心病患者TXA2和PGI2的平衡[12]，與本研究結(jié)果一致，但是具體作用機(jī)制還不明確。

CK-MB和TroponinⅠ是心肌損害的標(biāo)志物，其中TroponinⅠ是心肌細(xì)胞損害的特異性標(biāo)志物[13]。本研究發(fā)現(xiàn)模型對(duì)照組CK-MB和TroponinⅠ表達(dá)水平較正常對(duì)照組水平升高，在使用右美托咪定進(jìn)行干預(yù)后，冠心病模型大鼠CK-MB和TroponinⅠ降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。提示右美托咪定對(duì)冠心病模型大鼠有一定的心肌保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其潛在的抗氧化作用有關(guān)，還可以穩(wěn)定血流動(dòng)力學(xué)從而減輕心肌損傷[14-15]。

綜上所述，右美托咪定可以改善冠心病模型大鼠的TXA2和PGI2的不平衡狀態(tài)，產(chǎn)生一定的抑制血小板聚集作用，對(duì)于冠心病模型大鼠心肌損害也有一定的保護(hù)作用，其具體作用機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。

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（收稿：2016-11-05修回：2017-03-03）

Effect of Dexmedetomidine on Platelet function and Its Myocardial Protective Effect in Coronary Heart Disease Model Rats

PAN Chen,ZHANG Lingbin,ZHANG Ning,MA Miaoqun,XU Qiaomin,FAN Lihua, ZHANG Ye,DING Youfa.Lishui People's Hospital,Lishui(323000),China

Objective To investigate the effect of dexmedetomidine on platelet function in rats with coronary heart disease and evaluate its possible role in myocardial protection.Methods Thirty SD rats were randomly assigned to control group（C,n=10）,model group（M,n=10）,and dexmedetomidine group（Dex,n=10）.High-fat diet feeding and intraperitoneal injection of pituitrin was performed on rats in model group and dexmedetomidine group to built coronary heart disease model.Rats in dexmedetomidine group were given intravenous injection of dexmedetomidine of 10μg/kg for 5 days,once a day.Control group and model group were given equivalent volume of normal saline.Serum TXB2 and 6-k-PGFl alpha were detected to evaluate the effect of dexmedetomidine on platelet function,serum CK-MB and troponin I were measured to assess the effect of dexmedetomidine on myocardial injury.Results Compare to model group,the level of serum TXB2（28.67±5.38pg/mL vs 38.25±7.79pg/mL）, CK-MB（10.31±1.81IU/L vs 15.40±2.94IU/L）,Troponin I（10.07±0.97ng/mL vs 13.66±1.36ng/mL）significantly decreased（P＜0.01,P＜0.05）,6-k-PGFl alpha increased（27.64±4.61pg/mL vs 21.19±7.72pg/mL,P＜0.05）in dexmedetomidine group.Conclusion Dexmedetomidine can improve the unbalance of TXA2 and PGI2 and suppress platelet aggregation to attenuate myocardial injury in rats.

rats;coronary heart disease;dexmedetomidine;platelet function;myocardial protection

浙江省麗水市高層次人才資助項(xiàng)目（No.2014RC35）

浙江省麗水市人民醫(yī)院藥學(xué)部（潘晨）、麻醉科（章玲賓、張寧、麻妙群、徐巧敏、樊理華、張曄）、檢驗(yàn)科（丁友法）（麗水323000）

章玲賓，E-mail：13372380895@126.com