盧肖英

不同炮制方法對(duì)細(xì)辛中甲基丁香酚和細(xì)辛脂素含量的影響※

盧肖英

目的比較不同炮制方法對(duì)細(xì)辛中甲基丁香酚和細(xì)辛脂素含量的影響。方法采用蜜制、酒制以及醋制等方式對(duì)細(xì)辛實(shí)施炮制處理，而后應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)其有效成分甲基丁香酚、細(xì)辛脂素含量。結(jié)果酒制的細(xì)辛甲基丁香酚含量顯著上升，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；堿制和炒焦炮制方式下，細(xì)辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細(xì)辛脂素含量均顯著提升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論不同炮制方式下細(xì)辛中的甲基丁香酚與細(xì)辛素含量會(huì)存在明顯差異，需要科學(xué)地選擇炮制方式，保證其藥物作用價(jià)值，切實(shí)發(fā)揮藥物治療效果。

炮制方法；細(xì)辛；甲基丁香酚；細(xì)辛脂素；含量

細(xì)辛為馬兜鈴科植物北細(xì)辛、漢城細(xì)辛或華細(xì)辛的干燥根和根莖，為臨床常用藥物，其祛風(fēng)止痛、清熱散寒等功效突出。甲基丁香酚與細(xì)辛脂素均為細(xì)辛的主要成分，具有鎮(zhèn)痛、祛痰等功效。而不同炮制方式下細(xì)辛中的甲基丁香酚以及細(xì)辛脂素含量會(huì)存在較大差異[1]。本研究就不同炮制方法對(duì)細(xì)辛中甲基丁香酚和細(xì)辛脂素含量的影響進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與儀器

1.1 儀器應(yīng)用安捷倫1260高效液相色譜儀（Agilent公司，美國(guó)），粉碎機(jī)（浙江省永康市金穗機(jī)械制造廠），KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器，CP114型數(shù)控超聲波清洗器，CP114型電子分析天平，HH-600型三用恒溫水箱，SHZ（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵等儀器設(shè)備。

1.2 試劑與藥品細(xì)辛藥材，甲醇、甲基丁香酚對(duì)照品以及細(xì)辛脂素對(duì)照品等，甲醇為色譜純，水為純凈水，其余試劑為分析純[2]。

1.3 方法

1.3.1 炮制方法 對(duì)細(xì)辛應(yīng)用酒制、堿制、醋制、蜜制、鹽制、甘草制、炒焦、姜制、堿醋制及米泔水制的方式進(jìn)行炮制。其中：①酒制方式為細(xì)辛25 g，加10 g黃酒拌勻，悶潤(rùn)，黃酒吸取干凈后，放在25 ℃烘箱中真空干燥，備用[3]。②醋制方式為細(xì)辛25 g，加15 g米醋拌勻，悶潤(rùn)，米醋被吸取干凈后，放在25 ℃真空烘箱中晾干，備用。③蜜制則應(yīng)用細(xì)辛25 g，融入12 g煉蜜拌勻，悶潤(rùn)，密制吸取干凈后，烘箱中25 ℃真空干燥曬干，備用[4]。④堿制則應(yīng)用細(xì)辛25 g，融入20倍0.01 mol/L的NaHCO3溶液中浸泡3次，每次24 h，浸泡后細(xì)辛放于烘箱中25 ℃真空干燥曬干，備用。⑤鹽制則取細(xì)辛25 g，加12.5 g粗鹽，適當(dāng)清水融化，和藥物攪拌均勻，悶潤(rùn)5 min，炒鍋中火抄5 min，取出、冷卻、干燥、備用[5]。⑥炒焦則取細(xì)辛25 g，中火或者武火炒至表面焦黃色，存在焦香氣。⑦甘草制則取細(xì)辛25 g，加20 ml甘草汁攪拌均勻，悶潤(rùn)，甘草汁吸收干凈后，烘箱中25 ℃真空干燥備用。⑧姜制：細(xì)辛25 g，加6 g姜汁攪拌，悶潤(rùn)，姜汁吸取干凈后，烘箱中25 ℃真空感染待干，備用。⑨堿醋制：取細(xì)辛25 g，加入40倍0.01 mol/L的NaHCO3溶液中浸泡3次，每次24 h，浸泡后細(xì)辛置入烘箱中干燥至干；10 g米醋稀釋2倍后，用醋將堿制后的細(xì)辛拌勻，悶制，干燥，備用。⑩米泔水制：細(xì)辛25 g，加20 ml米泔水拌勻，悶潤(rùn)，米泔水吸盡后，烘箱中25 ℃真空干燥待干，備用。

1.3.2 制備對(duì)照品 應(yīng)用Agilent TC-C18，以0.2%醋酸水溶液為流動(dòng)相B，實(shí)施梯度洗脫，流速為1.0 ml/min。稱取甲基丁香酚對(duì)照品0.0369 g，置于10 ml棕色量瓶中，精密量取0.5 ml對(duì)照品溶液，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制作成1 ml中含甲基丁香酚 184.5 μg。選取細(xì)辛脂素對(duì)照品0.0111 g，置于10 ml棕色量瓶中，再精密量取1 ml對(duì)照品溶液，置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升中含細(xì)辛脂素111 μg。

1.3.3 檢測(cè)方法 采用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)不同炮制方式下細(xì)辛中甲基丁香酚、細(xì)辛脂素的含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)辛不同炮制方式下甲基丁香酚含量比較酒制的細(xì)辛甲基丁香酚含量顯著較高，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見圖1。

圖1 細(xì)辛不同炮制方式下甲基丁香酚含量比較

2.2 細(xì)辛不同炮制方式下細(xì)辛脂素含量比較堿制和炒焦炮制方式下，細(xì)辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細(xì)辛脂素含量均顯著較高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見圖2。

圖2 細(xì)辛不同炮制方式下細(xì)辛脂素含量比較

3 討論

細(xì)辛是臨床中應(yīng)用價(jià)值比較突出的馬兜鈴科植物，具有華細(xì)辛、北細(xì)辛之分。細(xì)辛可謂是目前我國(guó)臨床治療中應(yīng)用歷史比較悠久的中藥材，具有祛風(fēng)散寒、止痛、通竅等作用。

細(xì)辛在臨床研究治療過程中應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)，包括多種有效成分，其中甲基丁香酚具有鎮(zhèn)痛、祛痰等功效，細(xì)辛脂素具有抗病毒、抗菌的效果。細(xì)辛能夠發(fā)揮治癌的價(jià)值，臨床應(yīng)用效果較顯著。中藥傳統(tǒng)炮制技術(shù)豐富多樣，如蜜制、鹽制、酒制以及醋制等，不同炮制方式下，對(duì)患者的臨床癥狀改善也會(huì)產(chǎn)生不同影響。

細(xì)辛炮制方式對(duì)其甲基丁香酚和細(xì)辛脂素含量的影響研究，有助于全面了解藥物的應(yīng)用價(jià)值，以其主要成分甲基丁香酚與細(xì)辛脂素含量為標(biāo)準(zhǔn)，分析炮制方式的科學(xué)性與質(zhì)量的控制效果，能有效保證細(xì)辛炮制效果的提升，也能夠?yàn)榛颊叩呐R床治療活動(dòng)奠定良好的基礎(chǔ)。

相關(guān)研究表明，炒制方式能夠降低細(xì)辛中黃樟醚，更好地保存甲基丁香酚和細(xì)辛脂素含量[6]。在實(shí)踐研究中采用多種炮制方法，探究細(xì)辛炮制的合理性與質(zhì)量的可控性價(jià)值，為細(xì)辛炮制效果的提升打下基礎(chǔ)，也為細(xì)辛的采收、加工、炮制與臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)。

流動(dòng)相的選擇方面，選擇比較甲醇-水以及乙腈-0.2%冰醋酸的分離效果等，將細(xì)辛樣品中各類色譜峰更好的展現(xiàn)出來。建立指紋圖譜方法，能夠滿足中藥色譜指紋圖譜測(cè)定的要求，在明確峰值的基礎(chǔ)上，對(duì)甲基丁香酚與細(xì)辛脂素含量進(jìn)行綜合分析，有助于更好地控制細(xì)辛炮制品的質(zhì)量。

咳嗽高敏感綜合征（CHS）是指與咳嗽反射高敏性相關(guān)、不能用其他原因解釋的慢性咳嗽，患者多具有癥狀反復(fù)發(fā)作、病情比較嚴(yán)重的特點(diǎn)。細(xì)辛在CHS治療中的應(yīng)用，能夠有效發(fā)揮其藥物作用價(jià)值。

細(xì)辛炮制方式會(huì)影響其中的藥物成分，對(duì)現(xiàn)代中藥材制作以及中藥材價(jià)值的彰顯等均能產(chǎn)生重要影響。炮制中，毒性成分會(huì)發(fā)生適當(dāng)轉(zhuǎn)變，黃樟醚、馬兜鈴酸A會(huì)存在毒性減弱的情況。炮制減毒為中藥炮制后的重要問題。不同炮制方式下，其中甲基丁香酚與細(xì)辛脂素含量也會(huì)存在明顯差異。

細(xì)辛炮制中，甲基丁香酚的保存情況直接關(guān)系到其臨床應(yīng)用的綜合效果和應(yīng)用價(jià)值等。炮制中，基于其含量損失的實(shí)際情況，可以將其進(jìn)行排序。酒制方式下含量最多，其次為醋制、甘草制以及堿醋制等。酒制炮制方式下，不但能夠保留其中的甲基丁香酚含量，且能夠增加其浸出量，醋制方式下，甲基丁香酚的保留效果也比較理想，能夠保存95%以上；甘草制和堿醋制炮制方式下，則能夠保留80%以上[7]。其他的炮制方式下，對(duì)細(xì)辛脂素浸潤(rùn)率相差較小，保留率相對(duì)較穩(wěn)定。

本研究中，細(xì)辛經(jīng)過炮制，酒制的甲基丁香酚含量顯著上升，蜜制、醋制等炮制方式下甲基丁香酚含量均降低，表明不同炮制方式下對(duì)細(xì)辛中甲基丁香酚含量會(huì)產(chǎn)生一定影響。產(chǎn)生這種情況的原因可能為蜂蜜中含有果糖、葡萄糖、氨基酸、有機(jī)酸等，細(xì)辛中的化學(xué)成分會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)變，在細(xì)辛炒制過程中，能夠加速其中化學(xué)成分的有效轉(zhuǎn)化，藥物成分會(huì)不同程度的減少[8]。堿制和炒焦炮制方式下，細(xì)辛脂素含量保持不變，蜜制、酒制等炮制方式下細(xì)辛脂素含量會(huì)顯著提升，表明了炮制方式對(duì)細(xì)辛脂素含量也會(huì)產(chǎn)生影響效果，炮制方式與細(xì)辛中成分含量之間具有密切聯(lián)系。

甲基丁香酚與細(xì)辛脂素含量的研究，對(duì)現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)理論的發(fā)展能夠產(chǎn)生重要推動(dòng)效果?；趯?shí)踐研究發(fā)現(xiàn)，酒制炮制方式下，甲基丁香酚含量不但不會(huì)減少，且會(huì)增加10%～20%，基于數(shù)據(jù)研究結(jié)果能夠看出，酒制的方式下應(yīng)用效果顯著。堿制與炒煎方式下，細(xì)辛脂素含量會(huì)顯著降低，醋制、姜制以及鹽制等方式下，細(xì)辛脂素的含量均能夠顯著增加，尤其是米泔水制、甘草制與堿醋制可使細(xì)辛脂素增加35%以上。提示不同炮制方式對(duì)保留中藥細(xì)辛有效成分甲基丁香酚與細(xì)辛脂素含量的中藥影響，也能夠?yàn)榧?xì)辛炮制后毒素的減弱研究帶來一定的借鑒價(jià)值。

綜上所述，不同炮制方式下細(xì)辛中的甲基丁香酚與細(xì)辛素含量也會(huì)存在明顯差異，需要科學(xué)選擇炮制的方式，保證其藥物作用價(jià)值，切實(shí)發(fā)揮藥物治療的效果。

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10.12010/j.issn.1673-5846.2017.07.007

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣東廣州 510120

廣東省中醫(yī)藥局面上項(xiàng)目（編號(hào)：20171183，課題名稱：基于多靶點(diǎn)協(xié)同機(jī)制探討細(xì)辛治療咳嗽高敏綜合征的藥效物質(zhì)研究）

盧肖英（1968.8-），大專學(xué)歷，主管中藥師。研究方向：中藥藥劑