相棟

摘要 采用菌絲生長(zhǎng)抑制法室內(nèi)測(cè)定了7種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌的毒力。結(jié)果表明：供試的7種殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌絲生長(zhǎng)都有一定的抑制作用，化學(xué)殺菌劑23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑對(duì)番茄晚疫病菌毒力最強(qiáng)，其 EC50值為 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑，其 EC50值為 1.07 μg/mL；80%烯酰嗎啉水分散粒劑的毒力最差，其 EC50值為 2093.97 μg/mL；生物殺菌劑解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336均對(duì)番茄晚疫病菌均有很強(qiáng)的抑菌活性。因此，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑、解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336為理論上防治番茄晚疫病菌抑菌效果較好的藥劑，用量少且毒性低，驗(yàn)證后可在生產(chǎn)中推廣使用。

關(guān)鍵詞 設(shè)施番茄；殺菌劑；番茄晚疫病菌；毒力測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào) S482.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2016）16-0106-02

番茄晚疫?。≒hytophthora infestans）是由卵菌（Oomycete）[1]中的致病疫霉[Phytophthora infestans（Mont.）de Bary] 侵染所致，是全世界番茄和馬鈴薯生產(chǎn)上的重大病害之一[2]，嚴(yán)重威脅番茄生產(chǎn)[3]。從20世紀(jì)80年代開(kāi)始，西藏大面積新建溫室或大棚進(jìn)行設(shè)施蔬菜生產(chǎn)，極大地滿(mǎn)足了當(dāng)?shù)厝嗣駥?duì)各種蔬菜的需求，西藏蔬菜播種面積由1985年占當(dāng)年農(nóng)作物播種面積的1.61%提高到2011年的9.49%[4]。設(shè)施條件下番茄和馬鈴薯的栽培四季不斷，從而給病原菌提供了合適的發(fā)生和傳播條件、場(chǎng)所，現(xiàn)已成為周年發(fā)生的重要病害之一，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。生產(chǎn)上對(duì)該病害的防治仍主要依靠化學(xué)農(nóng)藥，但化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期使用易造成病原菌抗藥性增強(qiáng)，研究表明，許多國(guó)家出現(xiàn)某一類(lèi)藥劑的致病疫霉抗性群體[5-6]，同時(shí)一味地增加化學(xué)農(nóng)藥的用量和次數(shù)，不僅增加成本，還造成番茄產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留超標(biāo)。為此，必須在有效控制番茄病害的同時(shí)，盡可能減少化學(xué)農(nóng)藥使用[7]，因此，本試驗(yàn)以西藏設(shè)施番茄晚疫病菌為對(duì)象，通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定，篩選出幾種對(duì)該病菌抑制作用較好的殺菌劑，以期為該病害的田間防治提供參考，減輕農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的損失。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試病原菌株。2015年5—9月采自西藏林芝市各地具有典型晚疫病的番茄病樣，帶至西藏大學(xué)農(nóng)牧科學(xué)院植物病理學(xué)與微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，在黑麥培養(yǎng)基上進(jìn)一步分離、鑒定，獲得的純培養(yǎng)菌株。

1.1.2 供試藥劑。試驗(yàn)選擇了生產(chǎn)上可購(gòu)買(mǎi)到、防治番茄晚疫病常用的殺菌劑，包括化學(xué)殺菌劑：64%惡霜靈·錳鋅可濕性粉劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)）、80%烯酰嗎啉水分散粒劑（陜西萬(wàn)邦生物科學(xué)技術(shù)有限公司生產(chǎn)）、23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)）、50%腐霉利可濕性粉劑（海南正業(yè)中農(nóng)高科股份有限公司生產(chǎn)）、58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑（青島孚潤(rùn)德植?？萍加邢薰荆恍滦蜕餁⒕鷦?×1010 cfu/g枯草芽孢桿菌Bs Y1336（臺(tái)灣百泰生物科技股份有限公司）、1.2×108 cfu/g解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619（江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所研制，江蘇省蘇科農(nóng)化有限公司生產(chǎn)），共7種。

1.1.3 供試培養(yǎng)基。黑麥蔗糖培養(yǎng)基：取50 g黑麥種子在適量去離子水中浸泡24～36 h，搗碎機(jī)搗碎，55～60 ℃水浴1～2 h，經(jīng)2層紗布過(guò)濾，上清液補(bǔ)水至1 L，加入蔗糖20 g、瓊脂粉15 g，121 ℃高壓蒸汽滅菌。

1.2 測(cè)定方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[8]測(cè)定7種供試藥劑對(duì)番茄晚疫病菌菌絲生長(zhǎng)的抑菌活性。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將供試藥劑配制成一定濃度的母液，然后按一定濃度和比例加入到融化好的黑麥培養(yǎng)基，制成含藥量為 0.5、10、50、200、500 mg/L的含藥平板培養(yǎng)基。用5 mm打孔器在預(yù)培養(yǎng)的菌落邊緣的同一圓周上打取菌餅，菌絲面朝下接種到含藥培養(yǎng)基平板中央，每個(gè)濃度4次重復(fù)，以不含藥劑加等量無(wú)菌水的黑麥培養(yǎng)基為空白對(duì)照。在 18 ℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)7 d后，采用十字交叉法測(cè)定菌落直徑并記錄。根據(jù)以下公式計(jì)算生長(zhǎng)抑制率：

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用spss軟件統(tǒng)計(jì)分析，求出各藥劑對(duì)供試病菌的毒力回歸曲線(xiàn)方程y=a+bx、相關(guān)系數(shù)r以及有效抑制中濃度（EC50）。最后根據(jù)EC50值，比較不同藥劑對(duì)該菌生長(zhǎng)的影響。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，供試藥劑均對(duì)番茄晚疫病菌表現(xiàn)出一定的抑制作用。不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同濃度之間表現(xiàn)出不同的殺菌效果。64%惡霜·錳鋅可濕性粉劑、585甲霜·錳鋅可濕性粉劑、23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑、枯草芽孢桿菌Bs Y1336、解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619在所設(shè)置濃度下對(duì)致病疫霉的抑制效果差異非常明顯，說(shuō)明番茄晚疫病菌對(duì)不同濃度的這幾種藥劑敏感性差異極顯著，即在防治中不同藥劑濃度的防治效果差別明顯。殺菌劑對(duì)病菌的EC50值代表殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌的毒力高低，由表2可知，5種供試化學(xué)殺菌劑中，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑對(duì)番茄晚疫病菌毒力最強(qiáng)，其 EC50值為 0.37 μg/mL；其次是58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑，其 EC50值為 1.07 μg/mL；80%烯酰嗎啉水分散粒劑的毒力最差，其 EC50值為2 093.97 μg/mL。供試的 2種生物殺菌劑中，解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619對(duì)番茄晚疫病菌的抑菌活性?xún)?yōu)于枯草芽孢桿菌Bs Y1336，但兩者對(duì)番茄晚疫病菌均有很強(qiáng)的抑菌活性。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定篩選出了幾種對(duì)番茄晚疫病較為敏感的殺菌劑，為該病害的防治提供了理論依據(jù)。室內(nèi)毒力測(cè)定可以比較幾種藥劑毒力的大小，該結(jié)果可為田間試驗(yàn)提供依據(jù)?；瘜W(xué)藥劑是控制番茄晚疫病發(fā)生和減少損失的有效途徑之一。目前，在防治卵菌上的效劑主要用苯基酰胺類(lèi)殺菌劑（PAFs）[9]，該類(lèi)殺菌劑的典型藥劑為甲霜靈，其次為烯酰嗎啉（DMM），并且烯酰嗎啉與苯基酰胺類(lèi)藥劑無(wú)交互抗性[10]。本次室內(nèi)毒力測(cè)定試驗(yàn)選擇的藥劑中，23.4%雙炔酰菌胺懸浮劑和58%甲霜·錳鋅可濕性粉劑理論上為防治番茄晚疫病較好的化學(xué)殺菌劑，由陜西萬(wàn)邦生物科學(xué)技術(shù)有限公司生產(chǎn)的80%烯酰嗎啉水分散粒劑與張成玲等[11]測(cè)定的毒力效果相差較大，說(shuō)明不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的藥劑質(zhì)量有明顯差異；解淀粉芽孢桿菌生防菌株 B-1619和枯草芽孢桿菌Bs Y1336 2種生物殺菌劑對(duì)番茄晚疫病菌均有很強(qiáng)的抑菌活性。但總的看來(lái)，本試驗(yàn)所選用的各藥劑除80%烯酰嗎啉水分散粒劑和50%腐霉利可濕性粉劑外，其余5種菌劑對(duì)番茄晚疫病菌均具有較顯著的抑菌活性，并且烯酰嗎啉還有待進(jìn)一步驗(yàn)證，在該病害的藥劑防治中可據(jù)情況選用。

本試驗(yàn)所選化學(xué)類(lèi)殺菌劑均為本地區(qū)市場(chǎng)上易購(gòu)藥劑，室內(nèi)的毒力測(cè)定結(jié)果僅僅說(shuō)明殺菌劑與病原菌直接接觸時(shí)，藥劑對(duì)病原菌絲生長(zhǎng)的抑制作用，其優(yōu)點(diǎn)是條件易于控制、操作簡(jiǎn)便迅速，但不能完全顯示不同藥劑對(duì)病菌孢子萌發(fā)的抑制及田間防治效果，也不能反映出藥劑的滲透能力及內(nèi)吸性等，所以這些藥劑還需要在大田中進(jìn)一步試驗(yàn)篩選后推廣應(yīng)用。

4 參考文獻(xiàn)

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