阮紅剛 付潮泓 許臘梅

·藥物研究·

慢性化膿性中耳炎膿液的病原菌分布及藥敏性分析

阮紅剛 付潮泓 許臘梅

目的 研究慢性化膿性中耳炎(CSOM)膿液中病原菌的種類分布和對抗菌藥物敏感性。方法 研究對象選取2015年2月到2016年6月間收治的CSOM患者121例，提取患者耳道分泌的膿液，進行細菌培養(yǎng)和藥敏試驗檢測，并對所有患者的培養(yǎng)陽性病原菌種類及藥物敏感性結果進行統(tǒng)計分析。結果 本研究病原菌檢出率為89.26%。其中革蘭陽性球菌比例為51.85%，以金黃色葡萄球菌為主(28.70%)；革蘭陰性球菌比例為36.11%，以銅綠假單孢菌為主(13.89%)。金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對利奈唑胺和呋喃妥因的藥物敏感性最高(100%)，銅綠假單孢菌、變形桿菌及大腸埃希菌等主要革蘭陰性球菌對大多抗菌藥物均具有較高藥敏性。結論 引起CSOM發(fā)生的病原菌主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等，不同病原菌對抗菌藥物的敏感性存在明顯差異，對病原菌種類及藥敏的檢測，可為臨床選擇合適抗菌藥物治療提高依據(jù)，具有重要臨床價值。

慢性化膿性中耳炎；病原菌種類；抗菌藥物敏感性

慢性化膿性中耳炎(CSOM)是耳鼻喉科常見的疾病，常指炎癥侵襲到耳黏膜、骨膜甚至骨質(zhì)的慢性化膿性炎癥，且多數(shù)患者并發(fā)有乳突的炎癥[1]。臨床急性炎癥久治不愈、咽鼓管功能障礙、鄰近器官的炎癥病變、自身免疫力低下等因素均可引起該病發(fā)生，臨床研究顯示，急性化膿性中耳炎致病病原菌毒性過強，及治療不當、延遲等因素是臨床引起CSOM發(fā)生的主要原因[2]。患者臨床常表現(xiàn)為耳內(nèi)持續(xù)性或間斷的膿液生成、鼓膜損傷及聽力的集聚下降，如未得到及時有效治療，后期可導致患者失聰，甚至引起中耳骨質(zhì)的破壞，出現(xiàn)顱內(nèi)及路外感染，危及患者生命[3]。臨床治療CSOM以抗菌藥物為主，通過對致病菌的抑制可取得較好療效，但隨著近年來抗菌藥物在臨床使用泛濫，許多患者自身不合理用藥，加之CSOM致病菌種類繁多，導致病原菌對藥物敏感性降低，對耐藥株的報道逐漸增加[4]。研究顯示，近年來常規(guī)抗菌藥物治療方案對CSOM的療效發(fā)現(xiàn)顯著降低，難治性病例逐年增加，因此加強對CSOM患者病原菌及對病原菌藥敏的檢測，對于臨床科學使用抗菌藥物意義重大[5]。為了解我院CSOM患者病原菌分析及藥敏特點，為臨床治療提高科學指導，提高治療療效，筆者選取108例CSOM患者進行研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象選取我院2015年2月到2016年6月間收治的CSOM患者121例，納入標準[6]：(1)均滿足臨床關于CSOM診斷標準；(2)無合并耳鼻喉科其他感染；(3)無嚴重免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等疾??；(4)無合并心腦血管肝腎肺等器官組織疾病；(5)所有患者檢查前均停止服用抗菌藥物48 h以上。其中男74例，女47例;年齡4～71歲，平均年齡(39.56±12.73)歲;病程7個月～31年，平均病程(13.84±4.67)年；其中未成年患者(<18歲)共26例，中青年患者(18～60歲)共70例，老年患者(>60歲)共25例;其中慢性單純性中耳炎患者共95例、肉芽型中耳炎患者共11例、乳突手術后中耳炎患者共9例、膽脂瘤型中耳炎患者共6例。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法:檢測前采用75.0%醫(yī)用乙醇消毒患者外耳周圍皮膚及外耳道前1/2處，將滅菌兒科棉簽置入0.9%氯化鈉溶液浸潤后，緩慢進入外耳道直至鼓室、鼓膜穿孔部位或是外耳道深處采集中耳分泌膿液，隨后將膿液置入無菌培養(yǎng)試管內(nèi)待檢查，以上步驟均嚴格執(zhí)行無菌操作，并在30 min內(nèi)將培養(yǎng)物送至細菌實驗室進行涂片鏡檢、細菌鑒定及藥敏試驗，所有實驗室培養(yǎng)步驟均準守《全國臨床檢驗操作規(guī)定》進行，采用巧克力平板、血瓊脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培養(yǎng)基對病原菌進行培養(yǎng)，并參考相關文獻標準進行鑒定。參考WHO指定的K-B法進行細菌藥檢測，采用法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)實際FOUNG3對真菌進行藥敏檢測，同樣采用該公司生成的頭孢硝噻吩紙片對葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺酶檢測，藥敏試驗結果則參照2012年CLSI擬定標準。

1.2.2 試劑[7]:巧克力平板、血瓊脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培養(yǎng)基均由英國OXOID公司生成，質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、大腸埃希菌(ATCC 25922)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、表皮葡萄球菌(ATCC 1228)、變形菌屬(ATCC 12453)均由衛(wèi)生部臨檢中心提供，采用梅里埃公司生產(chǎn)的全自動微生物分析儀VITEK2-compact進行病原菌鑒定，采用上海博訊有限公司生產(chǎn)的全自動生物安全柜。

1.3 觀察指標 分析所有患者的病原菌種類分布，及每種病原菌對抗菌藥物敏感性結果。

2 結果

2.1 所有患者病原菌種類分布 121例患者中共檢測出108株病原菌，病原菌檢出率為89.26%。其中革蘭陽性球菌共56株，所占百分比為51.85%；革蘭陰性球菌共39株，所占百分比為36.11%；真菌共13株，所占百分比為12.04%。革蘭陽性球菌中金黃色葡萄球菌為主，共31株，所占百分比為28.70%，其次是表皮葡萄球菌，共13株，所占百分比為12.04%；革蘭陰性球菌中以銅綠假單孢菌為主，共15株，所占百分比為13.89%，其次為變形桿菌，共11例，所占百分比為10.19%，再其次為大腸埃希菌，共10例，所占百分比為9.26%。見表1。

表1 所有患者病原菌種類分布

2.2 主要革蘭陽性球菌藥敏試驗結果 所有抗菌藥物中，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對利奈唑胺和呋喃妥因的藥物敏感性最高，達100%，同時萬古霉素藥敏性也較高，分別為96.77%和100%。見表2。

表2 主要革蘭陽性球菌藥敏試驗結果

2.3 主要革蘭陰性球菌藥敏試驗結果 所有抗菌物中，銅綠假單孢菌對阿米卡星、美羅培南及亞胺培南的藥敏性較高，達100%，而對頭孢西丁和氨卡西林的藥敏性為0。變形桿菌和大腸埃希菌對所有抗菌藥物均有較高的藥敏性。見表3。

3 討論

CSOM是臨床常見的疾病，具有較高的臨床發(fā)病率，臨床常表現(xiàn)為聽力進行性下降、鼓膜穿孔及反復膿液流出等癥狀，如不及時有效治療，還可引起嚴重并發(fā)癥發(fā)生，甚至出現(xiàn)嚴重的顱內(nèi)外感染，危及患者生命?？咕幬锸荂SOM的主要治療方法，短時間內(nèi)服用可取得較理想療效[8]。但研究發(fā)現(xiàn)，近年來隨著經(jīng)濟快速發(fā)展，抗菌藥物醫(yī)源性使用不當及自身不合理使用等因素，導致抗菌藥物耐藥率逐年增加，出現(xiàn)多種耐藥病原株，極大提高臨床治療難度[9]。國內(nèi)外大量對CSOM患者膿液病原菌培養(yǎng)研究顯示，大多患者均以混合感染為主，同時病原菌混合種類方式多樣化，且不同地區(qū)、不同年齡患者的病原菌種類均存在差異，造成國內(nèi)外對病原菌種類分布遲遲未達成一致[10]。準確檢測患者病原菌種類，并進行藥敏檢試驗指導抗菌藥物的使用，對臨床治療CSOM具有重要意義[11]。CSOM病原菌種類檢測顯示，病原菌感染多以革蘭陽性球菌為主，且革蘭陰性球菌也具有較大比例，其中又以金黃色葡萄球菌最為常見，同時表皮葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌感染也較多，本研究結果顯示，革蘭陽性球菌感染比例為51.85%，這與劉春玲等[12]報道的50.00%基本一致。這其中又以金黃色葡萄球菌感染最為常見，本研究結果為28.70%，與部分文獻報道存在差異，其原因可能與地域及年齡等因素有關。同時國內(nèi)學者發(fā)現(xiàn)，近年來CSOM的真菌感染率呈上升趨勢，本研究結果顯示，真菌感染率為12.04%，具有較高的診斷率，同時排除實驗室污染可能，與目前研究基本[13]一致。

表3 主要革蘭陰性球菌藥敏試驗結果

既往研究已證實，對病原菌藥敏試驗對于臨床合理使用抗菌藥物，提高CSOM治療療效具有重要作用[14]。本研究對各類革蘭陽性球菌藥敏試驗結果顯示，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對抗菌藥物敏感性種類基本相似，均對利奈唑胺、呋喃妥因及萬古霉素具有較高的藥敏性，均達到95.00%以上，同時對慶大霉素和頭孢西汀也具有一定藥敏性，但對于紅霉素及青霉素的藥敏性較低，均在20.00%以下。對各類革蘭陰性球菌藥敏試驗結果則顯示，銅綠假單孢菌、變形桿菌及大腸埃希菌等主要革蘭陰性球菌對大多抗菌藥物均具有較高藥敏性，這其中僅銅綠假單孢菌對頭孢噻肟、甲氧芐啶、頭孢西丁、氨卡西林的藥敏性較低，和變形桿菌對甲氧芐啶的36.36%的藥敏性。本研究結果證實，不同病原菌種類對抗菌藥物敏感性存在明顯差異，因此臨床治療過程中需針對不同種類病原菌采用不同抗菌藥物治療，是提高CSOM臨床治愈率的關鍵。但同時需注意各抗菌藥物存在的不良反應，如氨基糖苷類抗菌藥物對兒童存在一定腎毒性和耳毒性[15]，喹諾酮類抗菌藥物則可引起關節(jié)軟骨壞死等嚴重并發(fā)癥，同時慶大霉素則對兒童存在耳毒性，因此諸類藥物在兒童中應謹慎使用。且本研究對真菌感染患者研究發(fā)現(xiàn)，多數(shù)為中耳乳突術后常規(guī)換藥不能干耳患者，因此對于耳乳突術后長時間抗菌藥物不能治愈患者，應考慮真菌感染可能，并針對進行抗菌藥物使用，但本研究由于實驗條件限制，未對真菌進行藥敏試驗，需在日后工作中進一步完善。

綜上所述，金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等是引起CSOM的主要病原菌，不同病原菌對抗菌藥物的敏感性存在明顯差異，對病原菌種類及藥敏的檢測，可為臨床選擇合適抗菌藥物治療提高依據(jù)，具有重要臨床價值。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2017.15.040

442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學院附屬東風醫(yī)院檢驗科(阮紅剛、付潮泓),手術室(許臘梅)

付潮泓，442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學院附屬東風醫(yī)院檢驗科；

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2017-02-06)