杭 飚，杭 胤，馬亞萍，夏冰洋，黃 敏，李楠楠，

·調(diào)查研究·

學(xué)齡前兒童尿促性腺激素參考范圍社區(qū)調(diào)查

杭 飚1，杭 胤1，馬亞萍2，夏冰洋2，黃 敏1，李楠楠2，

岳春曉1，張小英1，貢大偉1，周寒陽1，徐莊劍2*

目的 建立學(xué)齡前兒童(3～7歲)尿黃體生成素(ULH)和尿促卵泡素(UFSH)參考范圍，觀察其性別、年齡特點。方法 于2015年5—7月，以江蘇省無錫市濱湖區(qū)胡埭社區(qū)3～7歲學(xué)齡前兒童為研究對象，依據(jù)2006年世界衛(wèi)生組織(WHO)生長發(fā)育標準，分別計算兒童年齡別身高Z評分(HAZ)、年齡別體質(zhì)量Z評分(WAZ)和年齡別體質(zhì)指數(shù)(BMI)Z評分(BAZ)，3種指標均在-2SD～2SD為符合本調(diào)研入組的體格發(fā)育標準。睡前排空膀胱，留取過夜晨尿，記錄留尿時段，應(yīng)用免疫化學(xué)發(fā)光法檢測ULH和UFSH，同時檢測肌酐(Cr)。結(jié)果 共納入1 105例研究對象，其中3歲90例、4歲390例、5歲373例、6～7歲252例。男、女童ULH檢出率分別為5.30%(31/585)和11.54%(60/520)，UFSH檢出率分別為99.83%(584/585)和99.04%(515/520)。男童和女童ULH、UFSH水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.755，P<0.001；Z=-19.644，P<0.001)。不同年齡女童UFSH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲UFSH水平均分別低于3歲、4歲(P<0.05)。1 105例學(xué)齡前兒童中，-2SD

兒童，學(xué)齡前；促性腺激素細胞；尿；黃體生成素；卵泡刺激素；社區(qū)

杭飚，杭胤，馬亞萍，等.學(xué)齡前兒童尿促性腺激素參考范圍社區(qū)調(diào)查[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2017，20(20)：2506-2512.[www.chinagp.net]

HANG B,HANG Y,MA Y P,et al.Investigation of reference ranges of urine gonadotropin in preschool children in community[J].Chinese General Practice，2017，20(20)：2506-2512.

隨著社會經(jīng)濟的迅猛發(fā)展和生態(tài)環(huán)境面臨的嚴峻形勢，兒童性發(fā)育異常問題已引起政府、社會各界和醫(yī)學(xué)專家的關(guān)注。促性腺激素釋放激素(GnRH)或促性腺激素釋放激素類似物(GnRHa)激發(fā)試驗是評估兒童下丘腦-垂體-性腺軸(HPGA)功能的生化金標準[1-2]。該類試驗雖經(jīng)歷多年的研究和簡化[1]，甚至認為無需激發(fā)試驗的自發(fā)性血黃體生成素(LH)也對HPGA功能具有一定的判斷價值[3]，但這些簡化方法均不能解決抽血這一有創(chuàng)性的缺點，影響兒童及家長依從性的同時，也不利于流行病學(xué)調(diào)研等。

尿樣留取無創(chuàng)、便捷，無創(chuàng)性尿促性腺激素測定可明顯增加兒童及家長依從性，也有利于兒童流行病學(xué)調(diào)研。尿促性腺激素判斷兒童HPGA功能的研究始于1968年[4]。但由于當時檢測技術(shù)的靈敏度及檢測步驟繁瑣，以及費時、費工等缺點，其未能得到臨床應(yīng)用及流行病學(xué)推廣。隨著第三代促性腺激素檢測技術(shù)的出現(xiàn)，如免疫化學(xué)發(fā)光法(ICMA)等，其檢測效能顯著提高，給尿促性腺激素在兒童的臨床和流行病學(xué)調(diào)研等再次帶來新機遇。

近年ICMA檢測兒童尿促性腺激素逐漸得到重視。本研究團隊在2004年采用ICMA檢測中樞性性早熟(CPP)女童尿促性腺激素，結(jié)果表明，當夜間12 h尿LH(ULH)含量≥0.113 U時，判斷CPP的靈敏度和特異度分別為71.4%和90.5%，其對女童CPP具有篩查價值，臨床價值優(yōu)于自發(fā)性血LH[5-7]。在國外，2012年5月報道ICMA檢測正常兒童尿促性腺激素可用于其臨床青春期狀態(tài)評估[8]；2012年10月和2013年3月分別報道尿促性腺激素可為早產(chǎn)兒出生后HPGA功能狀態(tài)評估提供準確信息[9-10]；2014年5月報道，當ULH的截斷值為1.16 U/L時，區(qū)別快速進展型和緩慢進展型性早熟的靈敏度和特異度分別為83%和72%[11]。然而，目前尚未見學(xué)齡前各年齡段兒童尿促性腺激素參考范圍及其性別、年齡特點的研究。因此，本研究擬在社區(qū)中，以3～7歲正常學(xué)齡前兒童為研究對象，建立其過夜清晨尿促性腺激素參考范圍，以利于性早熟早期篩查、性發(fā)育異常性疾病的流行病學(xué)調(diào)研及適宜檢測技術(shù)推廣，并促進社區(qū)兒童保健和健康，也為相關(guān)疾病的流行病學(xué)研究提供新方法。

1 對象與方法

1.1 知情同意 本研究經(jīng)江南大學(xué)附屬醫(yī)院(無錫市第四人民醫(yī)院)倫理委員會批準(批件號LS2013052)，研究對象均按照“知情同意、自愿參加”的原則，對兒童以講座等形式進行廣泛宣教，并取得監(jiān)護人的知情同意后實施。

1.2 納入與排除標準 納入標準：血常規(guī)和尿常規(guī)均無異常，在留取尿液期間無發(fā)熱、咳嗽等急性感染性疾病，無慢性疾病病史，未服用過影響HPGA功能的諸如糖皮質(zhì)激素等藥物以及影響肝、腎功能的藥物等。排除標準：經(jīng)醫(yī)院既往診斷或新診斷的慢性疾病或重大疾病，如嚴重心、肝、腎等器質(zhì)性疾病，或惡性血液系統(tǒng)疾病，或性早熟(女孩在8歲前、男孩在9歲前呈現(xiàn)第二性征[12])、腎上腺早現(xiàn)、肥胖等內(nèi)分泌代謝疾病，或癲癇、糖尿病、腫瘤和精神疾病等。

1.3 研究對象 于2015年5—7月，以江蘇省無錫市濱湖區(qū)胡埭社區(qū)3～7歲學(xué)齡前兒童為研究對象。

1.4 主要儀器及試劑 主要儀器：Access全自動微粒子ICMA分析儀(Dxi800)，美國Beckman公司；HITACHI7170A全自動生物化學(xué)分析儀，日本HITAC公司。主要試劑：LH試劑盒(產(chǎn)品目錄號33510，批號522810)和卵泡刺激素(FSH)試劑盒(產(chǎn)品目錄號33520，批號523609)，美國Beckman公司。

1.5 研究方法

1.5.1 分組 研究對象依據(jù)年齡分為3歲、4歲、5歲、6～7歲共4個年齡組。

1.5.2 體格發(fā)育評估

1.5.2.1 體格發(fā)育標準及測量 體格參數(shù)依據(jù)2006年世界衛(wèi)生組織(WHO)生長發(fā)育標準[13]作為評價標準，分別計算兒童年齡別身高Z評分(height for age Z-score,HAZ)、年齡別體質(zhì)量Z評分(weight for age Z-score,WAZ)和年齡別體質(zhì)指數(shù)(BMI)Z評分(BMI for age Z-score,BAZ)，Z評分=(X-Md)/S，其中X為分析指標的個體觀察值，Md、S為參考標準中位數(shù)與標準差。3種指標按照Z評分分為6個等級，分別為<-2SD、-2SD～<-1SD、-1SD～<0、0～<1SD、1SD～2SD、>2SD，根據(jù)HAZ、WAZ和BAZ評分，3種指標均在-2SD～2SD為符合本次調(diào)研入組的體格發(fā)育標準。其中，HAZ和WAZ分別代表長期營養(yǎng)指標和短期營養(yǎng)指標。采用統(tǒng)一校正的身高儀、電子體重秤和直尺進行測量。

1.5.2.2 性征發(fā)育指標的評估 對照Tanner分期標準及標準圖譜[14]對入組男童外生殖器、陰毛的發(fā)育情況以及入組女童乳房、外生殖器和陰毛的發(fā)育情況進行分期評定。男童睪丸≥4 ml為發(fā)育，女童出現(xiàn)乳核為發(fā)育。男、女童發(fā)育均分為Tanner Ⅰ～Ⅴ期，其中Tanner Ⅰ期是指未發(fā)育，為符合本次調(diào)研入組的性征發(fā)育標準。

1.5.3 尿樣的收集、處理與檢測

1.5.3.1 尿樣收集 留取過夜清晨尿，囑前一日清淡飲食，每位兒童均于留尿前一晚飲用液體量<60～80 ml/kg。睡前排空膀胱并記錄起始時間，清晨起床后將首次小便全部排入統(tǒng)一發(fā)放的尿液收集盒，并記錄結(jié)束時間，按要求當日上午8點前送至社區(qū)醫(yī)院，收集后記錄留取尿樣始末時間點及尿量。

1.5.3.2 尿樣處理 取尿樣15 ml，其中5 ml尿樣在采集后1 h內(nèi)完成尿pH檢測，另外10 ml尿樣存放于4 ℃冰箱，在尿液留取后12～24 h完成ULH、尿FSH(UFSH)及肌酐(Cr)檢測。

1.5.3.3 尿樣檢測 尿pH使用IQ200自動尿液分析儀進行檢測。ICMA檢測ULH和UFSH水平的可報告范圍的下限均為0.20 U/L。ULH水平分別為1 U/L、2 U/L、10 U/L、25 U/L和100 U/L時，其批內(nèi)差分別為5.2%、5.4%、5.5%、4.4%和5.9%，批間差分別為3.4%、3.8%、5.5%、4.4%和5.9%，總不精密度分別為5.8%、6.3%、6.4%、6.0%和7.5%。UFSH水平分別為1 U/L、10 U/L和50 U/L時，其批內(nèi)差分別為9.1%、6.7%和4.9%，批間差均為0，總不精密度分別為10.7%、8.2%和7.7%。

計算尿促性腺激素含量時，將尿量統(tǒng)一折算為夜間12 h后計算其12 h含量，計算公式為：12 h ULH含量或UFSH含量=〔ULH或UFSH水平(U/L)×尿量(ml)×12〕/(尿樣收集時段×1 000)，單位為U。ULH/Cr或UFSH/Cr=〔ULH或UFSH水平(U/L)/Cr水平(μmol/L)〕×106，單位為U/mol。

取尿液0.5 ml，按順序編號后放入全自動生化檢測儀，自動檢測Cr。

1.6 質(zhì)量控制 由經(jīng)過培訓(xùn)后的專業(yè)醫(yī)護人員對兒童進行體格和性征發(fā)育的測量，并對結(jié)果進行核對和控制，若質(zhì)疑數(shù)據(jù)立即復(fù)測；由兩名實驗室專業(yè)人員分別進行尿促性腺激素和Cr測定。為保證數(shù)據(jù)的準確性，由兩名數(shù)據(jù)錄入員獨立進行數(shù)據(jù)雙份錄入并校對。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)(M)表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；多組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗，組間兩兩比較采用Kruskal-Wallis單因素方差分析檢驗[15]。采用百分位數(shù)法中的單側(cè)1-α(α=0.05)制定參考范圍，鑒于尿促性腺激素過高為異常，故用百分位數(shù)法計算上側(cè)界值即第95百分位數(shù)(

2 結(jié)果

2.1 基本情況 共納入1 105例研究對象，其中男585例、女520例，3歲90例、4歲390例、5歲373例、6～7歲252例。1 105例兒童均處于青春發(fā)育期前，即Tanner Ⅰ期。

2.2 尿促性腺激素檢測結(jié)果 兒童尿樣pH為5.0～8.0。ULH或UFSH檢測值<0.2 U/L者，定義為未檢出。1 105例中，ULH檢出91例，檢出率為8.24%，其中男童31例，女童60例，檢出率分別為5.30%和11.54%；UFSH檢出1 099例，檢出率為99.46%，其中男童584例，女童515例，檢出率分別為99.83%和99.04%。

2.3 不同性別尿促性腺激素比較

2.3.1 不同性別ULH和UFSH水平比較 男童ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.20 U/L；女童ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.31 U/L。男童和女童ULH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.755，P<0.001)。男童UFSH水平為2.54 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<7.96 U/L；女童UFSH水平中位數(shù)為7.46 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<21.49 U/L。男童和女童UFSH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-19.644，P<0.001)。

2.3.2 不同性別ULH/Cr和UFSH/Cr比較 男童ULH/Cr中位數(shù)為18.822 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<43.053 U/mol；女童ULH/Cr中位數(shù)為21.005 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<55.595 U/mol。男童和女童ULH/Cr比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.044，P=0.002)。男童UFSH/Cr中位數(shù)為441.119 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<1 111.273 U/mol；女童UFSH/Cr中位數(shù)為1 371.708 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<3 621.152 U/mol。男童和女童UFSH/Cr中位數(shù)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-22.832，P<0.001)。

2.3.3 不同性別ULH含量和UFSH含量比較 男童ULH含量中位數(shù)為0.022 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.052 U；女童ULH含量中位數(shù)為0.020 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.060 U。男童和女童ULH含量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.611，P=0.107)。男童UFSH含量中位數(shù)為0.536 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<1.446 U；女童UFSH含量中位數(shù)為1.585 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<3.908 U。男童和女童UFSH含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-21.615，P<0.001)。

2.4 不同年齡尿促性腺激素比較

2.4.1 不同年齡ULH和UFSH水平比較 不同年齡男童ULH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同年齡女童ULH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表1)。不同年齡男童UFSH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同年齡女童UFSH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲UFSH水平均分別低于3歲、4歲，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

表1 不同年齡學(xué)齡前兒童ULH水平比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 1 Comparison of ULH concentrations in different age of preschool normal children

年齡(歲)男童(n=585)女童(n=520)例數(shù)ULH(U/L)例數(shù)ULH(U/L)Z值P值3530.10(<0.10)370.10(<0.12)0.2730.78542080.10(<0.10)1820.10(<0.33)3.850<0.00152060.10(<0.21)1670.10(<0.30)1.9380.0536～71180.10(<0.30)1340.10(<0.30)0.1420.887χ2值3.9937.246P值0.2620.064

注：ULH=尿黃體生成素

表2 不同年齡學(xué)齡前兒童UFSH水平比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 2 Comparison of UFSH concentrations in different age of preschool normal children

注：與3歲比較，aP<0.05；與4歲比較，bP<0.05；UFSH=尿促卵泡素

2.4.2 不同年齡ULH/Cr和UFSH/Cr比較 不同年齡男童ULH/Cr比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲ULH/Cr低于4歲，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同年齡女童ULH/Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表3)。不同年齡男童UFSH/Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同年齡女童UFSH/Cr比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲UFSH/Cr均分別低于3歲、4歲，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

表3 不同年齡學(xué)齡前兒童ULH/Cr比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 3 Comparison of ULH/Cr in different age of preschool normal children

年齡(歲)男童(n=585)女童(n=520)例數(shù)ULH/Cr(U/mol)例數(shù)ULH/Cr(U/mol)Z值P值35320.026(<51.273)3721.073(<67.117)0.6190.536420820.930(<44.632)18221.372(<49.348)0.1750.861520617.373(<37.206)a16719.966(<66.201)3.0800.0026～711817.800(<44.449)a13421.096(<61.043)2.3260.020χ2值13.9870.864P值0.0030.834

注：與4歲比較，aP<0.05；Cr=肌酐

表4 不同年齡學(xué)齡前兒童UFSH/Cr比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 4 Comparison of UFSH/Cr in different age of preschool normal children

年齡(歲)男童(n=585)女童(n=520)例數(shù)UFSH/Cr(U/mol)例數(shù)UFSH/Cr(U/mol)Z值P值353536.989(<1200.723)372045.642(<5864.138)7.573<0.0014208471.208(<1191.221)1821651.593(<3963.434)14.613<0.0015206419.274(<961.458)1671200.398(<3482.161)ab13.095<0.0016～7118433.763(<1281.933)1341139.268(<2314.795)ab9.434<0.001χ2值3.22257.508P值0.359<0.001

注：與3歲比較，aP<0.05；與4歲比較，bP<0.05

2.4.3 不同年齡ULH和UFSH含量比較 不同年齡男童ULH含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲ULH含量均分別高于3歲，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同年齡女童ULH含量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表5)。不同年齡男童UFSH含量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同年齡女童UFSH含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中5歲、6～7歲UFSH含量低于4歲，6～7歲UFSH含量低于3歲，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表6)。

表5 不同年齡學(xué)齡前兒童ULH含量比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 5 Comparison of ULH contents in different age of preschool normal children

年齡(歲)男童(n=585)女童(n=520)例數(shù)ULH含量(U)例數(shù)ULH含量(U)Z值P值3530.019(<0.053)370.020(<0.060)0.5210.60342080.022(<0.048)1820.020(<0.050)0.2730.78552060.024(<0.053)a1670.020(<0.070)1.0120.3116～71180.025(<0.060)a1340.030(<0.060)0.8840.377χ2值8.3605.244P值0.0390.155

注：與3歲比較，aP<0.05

表6 不同年齡學(xué)齡前兒童UFSH含量比較〔M(95%醫(yī)學(xué)參考范圍)〕

Table 6 Comparison of UFSH contents in different age of preschool normal children

年齡(歲)男童(n=585)女童(n=520)例數(shù)UFSH含量(U)例數(shù)UFSH含量(U)Z值P值3530.470(<1.155)371.790(<6.036)7.598<0.00142080.510(<1.340)1821.780(<4.308)13.910<0.00152060.553(<1.397)1671.510(<3.464)b12.184<0.0016～71180.641(<1.753)1341.390(<3.403)ab7.989<0.001χ2值4.59815.672P值0.2040.001

注：與3歲比較，aP<0.05；與4歲比較，bP<0.05

2.5 不同HAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH比較 1 105例學(xué)齡前兒童中，-2SD

2.5.1 不同HAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH水平比較 長期營養(yǎng)狀況差者ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.26 U/L；長期營養(yǎng)狀況好者ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.25 U/L。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者ULH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.018，P=0.309)。長期營養(yǎng)狀況差者UFSH水平中位數(shù)為4.06 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<18.33 U/L；長期營養(yǎng)狀況好者ULH水平中位數(shù)為3.87 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<16.56 U/L。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者UFSH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.114，P=0.265)。

2.5.2 不同HAZ學(xué)齡前兒童ULH/Cr和UFSH/Cr比較 長期營養(yǎng)狀況差者ULH/Cr中位數(shù)為19.656 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<45.912 U/mol；長期營養(yǎng)狀況好者ULH/Cr中位數(shù)為19.866 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<47.229 U/mol。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者ULH/Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-0.469，P=0.639)。長期營養(yǎng)狀況差者UFSH/Cr中位數(shù)為758.173 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2 951.256 U/mol；長期營養(yǎng)狀況好者UFSH/Cr中位數(shù)為665.535 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2 583.665 U/mol。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者UFSH/Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.942，P=0.052)。

2.5.3 不同HAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH含量比較 長期營養(yǎng)狀況差者ULH含量中位數(shù)為0.020 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.050 U；長期營養(yǎng)狀況好者ULH含量中位數(shù)為0.025 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.055 U。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者ULH含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.967，P<0.001)。長期營養(yǎng)狀況差者UFSH含量中位數(shù)為0.881 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2.770 U；長期營養(yǎng)狀況好者UFSH含量中位數(shù)為0.849 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<3.263 U。長期營養(yǎng)狀況差和長期營養(yǎng)狀況好者UFSH含量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-0.778，P=0.436)。

2.6 不同WAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH比較 1 105例學(xué)齡前兒童中，-2SD

2.6.1 不同WAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH水平比較 短期營養(yǎng)狀況差者ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.26 U/L；短期營養(yǎng)狀況好者ULH水平中位數(shù)為0.10 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.27 U/L。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者ULH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-0.472，P=0.637)。短期營養(yǎng)狀況差者UFSH水平中位數(shù)為4.45 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<17.11 U/L；短期營養(yǎng)狀況好者UFSH水平中位數(shù)為3.60 U/L，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<17.71 U/L。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者UFSH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.991，P=0.046)。

2.6.2 不同WAZ學(xué)齡前兒童ULH/Cr和UFSH/Cr比較 短期營養(yǎng)狀況差者ULH/Cr中位數(shù)為20.199 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<47.539 U/mol；短期營養(yǎng)狀況好者ULH/Cr中位數(shù)為19.233 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<46.639 U/mol。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者ULH/Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-1.780，P=0.075)。短期營養(yǎng)狀況差者UFSH/Cr中位數(shù)為816.144 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2 889.059 U/mol；短期營養(yǎng)狀況好者UFSH/Cr中位數(shù)為616.173 U/mol，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2 569.034 U/mol。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者UFSH/Cr比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.426，P=0.001)。

2.6.3 不同WAZ學(xué)齡前兒童ULH和UFSH含量比較 短期營養(yǎng)狀況差者ULH含量中位數(shù)為0.020 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.050 U；短期營養(yǎng)狀況好者ULH含量中位數(shù)為0.025 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<0.058 U。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者ULH含量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-3.533，P<0.001)。短期營養(yǎng)狀況差者UFSH含量中位數(shù)為0.900 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<2.823 U；短期營養(yǎng)狀況好者UFSH含量中位數(shù)為0.836 U，95%醫(yī)學(xué)參考范圍為<3.311 U。短期營養(yǎng)狀況差和短期營養(yǎng)狀況好者UFSH含量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-0.370，P=0.712)。

3 討論

有報道應(yīng)用放射免疫分析法對Tanner Ⅰ期17例3～4歲、18例5～6歲正常男童過夜清晨UFSH進行檢測，并將其折算為24 h含量(U)，結(jié)果顯示3～4歲男童UFSH含量為(1.8±1.1)U/24 h，5～6歲為(2.0±0.8)U/24 h[16]。本研究應(yīng)用ICMA對Tanner Ⅰ期正常學(xué)齡前男童進行尿促性腺激素檢測，結(jié)果顯示3歲(53例)和5歲(206例)男童UFSH含量分別為(0.519±0.301)U/12 h和(0.635±0.366)U/12 h，換算為24 h UFSH含量與文獻報道差異較大，考慮主要與檢測技術(shù)和納入例數(shù)不同有關(guān)。另外，本研究結(jié)果亦顯示，男童UFSH水平、UFSH/Cr、UFSH含量無年齡差異，需擴大樣本進一步研究。

有報道應(yīng)用放射免疫分析法對Tanner Ⅰ期21例3～4歲、18例5～6歲正常女童過夜清晨UFSH進行檢測，并將其折算為24 h含量(U)，結(jié)果顯示3～4歲和5～6歲女童UFSH含量分別為(2.0±0.5)U/24 h和(2.5±0.8)U/24 h[17]。本研究應(yīng)用ICMA檢測的37例3歲、167例5歲正常女童過夜清晨12 h UFSH含量分別為(2.186±1.359)U/12 h和(1.656±0.986)U/12 h。經(jīng)換算24 h尿促性腺激素含量的絕對值也比文獻報道的高，可能也與檢測技術(shù)和納入例數(shù)不同有關(guān)。本研究結(jié)果亦顯示，各年齡組UFSH水平、UFSH/Cr、UFSH含量有隨年齡下降的趨勢，3歲、4歲女童UFSH均分別高于5歲、6～7歲。表明學(xué)齡前女童在3～4歲仍有小青春期的促性腺激素證據(jù)。目前女童小青春期的年齡界限為從出生約至2歲[18]。小青春期為新生兒-嬰幼兒期一種特有的生理現(xiàn)象，其對人類的性發(fā)育起著至關(guān)重要的作用，該期性激素過高或結(jié)束延遲可出現(xiàn)性早熟，其性激素缺乏或低下可導(dǎo)致青春期性發(fā)育不良。而國內(nèi)女童小青春期發(fā)育程度、結(jié)束年齡及其與青春啟動時間的關(guān)系等均缺乏相關(guān)流行病學(xué)證據(jù)，本研究為兒童小青春期的流行病學(xué)調(diào)研提供了學(xué)齡前的初步尿促性腺激素資料，對小青春期的相關(guān)研究，包括小青春期年齡界定等，提供了無創(chuàng)的從促性腺激素角度洞察的新視角。

有學(xué)者采用免疫熒光分析法對不同性別、不同年齡段的兒童尿促性腺激素進行研究，結(jié)果顯示2～8歲女童UFSH水平高于相應(yīng)年齡男童[19]。本研究結(jié)果顯示，不同年齡組女童UFSH水平、UFSH/Cr、UFSH含量均分別高于相應(yīng)年齡組男童，與文獻報道的青春期前女童血FSH水平高于男童相一致[20]。

研究表明，短期的飲食限制可增加UFSH分泌，其機制與饑餓時酮癥增加腎臟UFSH清除率、增加近曲小管UFSH的重吸收有關(guān)[21]。本研究中，WAZ代表短期營養(yǎng)狀況，短期營養(yǎng)狀況差的學(xué)齡前兒童UFSH水平高于營養(yǎng)狀況好者，提示短期營養(yǎng)狀況差與短期飲食限制一樣，可導(dǎo)致UFSH水平升高；HAZ代表長期營養(yǎng)狀況，本研究結(jié)果顯示長期營養(yǎng)狀況并未對UFSH造成影響，提示長期營養(yǎng)不良對UFSH無明顯影響。提示短期營養(yǎng)狀況差可升高正常學(xué)齡前兒童UFSH水平，UFSH水平不受長期營養(yǎng)狀況的影響。

與既往研究的小樣本量青春期前兒童ULH的低檢出類似[11,22]，本研究結(jié)果顯示，正常學(xué)齡前兒童ULH檢出率(8.24%)遠低于UFSH檢出率(99.46%)，其主要原因是學(xué)齡前兒童ULH水平低[8]，在相當部分青春期前兒童中，現(xiàn)有的ICMA檢測靈敏度尚不能檢出ULH。免疫熒光分析法檢測青春期前兒童ULH情況與ICMA類似[23]。為進行統(tǒng)計學(xué)處理，本研究將ULH低于0.20 U/L的檢測值均視為0.10 U/L。由此可見，在青春期前兒童中，ICMA檢測的ULH(可報告范圍的下限0.20 U/L)價值有限，其UFSH檢測可能具有一定的前景，而隨著促性腺激素檢測技術(shù)的發(fā)展，學(xué)齡前兒童ULH價值有望得到提升。

總之，本研究建立了學(xué)齡前兒童尿促性腺激素參考范圍，并顯示學(xué)齡前兒童尿促性腺激素參考范圍具有性別和年齡等特點；學(xué)齡前女童UFSH隨年齡升高有下降趨勢，6歲時趨緩；短期營養(yǎng)狀況差的兒童UFSH水平升高；而長期營養(yǎng)狀況則不影響UFSH。本研究還為兒童小青春期的流行病學(xué)研究，包括小青春期年齡界定等，提供了無創(chuàng)的從促性腺激素角度洞察的新視角，也為性早熟等兒童性發(fā)育異常疾病的早期診治提供參考依據(jù)。

本文鏈接：

兒童性早熟等兒童性發(fā)育異常疾病發(fā)病率呈逐年上升趨勢，但臨床診斷和監(jiān)測的生化指標目前多采用血液檢測，其依從性差，也不利于大樣本或流行病學(xué)研究。近年來國際上有關(guān)尿液檢測的臨床應(yīng)用研究逐漸增多，但尿促性腺激素檢測臨床應(yīng)用的前提是需要建立其各年齡段的參考范圍，目前國內(nèi)外尚未見大樣本研究，尤其是學(xué)齡前兒童。本研究以社區(qū)兒童為研究對象，建立尿促性腺激素青春期前參考范圍，旨在為其臨床應(yīng)用和相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。

作者貢獻：徐莊劍進行文章的構(gòu)思與設(shè)計、對文章整體負責(zé)，監(jiān)督管理；杭飚、杭胤、馬亞萍、夏冰洋、徐莊劍進行研究的實施與可行性分析；夏冰洋、黃敏、李楠楠、岳春曉、張小英、貢大偉、周寒陽進行數(shù)據(jù)收集；馬亞萍、夏冰洋進行數(shù)據(jù)整理；馬亞萍、夏冰洋、徐莊劍進行統(tǒng)計學(xué)處理；馬亞萍、徐莊劍進行結(jié)果的分析與解釋、撰寫論文、進行論文的修訂、負責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校。

本文無利益沖突。

[1]KANDEMIR N,DEMIRBILEK H,?Z?N Z A,et al.GnRH stimulation test in precocious puberty:single sample is adequate for diagnosis and dose adjustment[J].J Clin Res Pediatr Endocrinol,2011,3(1):12-17.DOI:10.4274/jcrpe.v3i1.03.

[2]YAZDANI P,LIN Y,RAMAN V,et al.A single sample GnRHa stimulation test in the diagnosis of precocious puberty[J].Int J Pediatr Endocrinol,2012,2012(1):23.DOI:10.1186/1687-9856-2012-23.

[3]HOUK C P,KUNSELMAN A R,LEE P A.Adequacy of a single unstimulated luteinizing hormone level to diagnose central precocious puberty in girls[J].Pediatrics,2009,123(6):e1059-1063.DOI:10.1542/peds.2008-1180.

[4]KULIN H E,RIFKIND A B,ROSS G T.Human luteinizing hormone(LH) activity in processed and unprocessed urine measured by radioimmunoassay and bioassay[J].J Clin Endocrinol Metab,1968,28(4):543-546.DOI:10.1210/jcem-28-4-543.

[5]謝書艷,徐莊劍,馬亞萍,等.晝夜尿促性腺激素與兒童下丘腦-垂體-性腺軸啟動的關(guān)系[J].實用兒科臨床雜志,2011,26(20):1560-1563.DOI:10.3969/j.issn.1003-515X.2011.20.008. XIE S Y，XU Z J，MA Y P,et al.Correlation between urinary gonadotropin and onset of hypothalamic-pituitary -gonadal axis during daytime and nighttime in children[J].Journal of Applied Clinical Pediatrics，2011，26(20)：1560-1563.DOI:10.3969/j.issn.1003-515X.2011.20.008.

[6]張婷婷,徐莊劍,馬亞萍,等.夜尿促性腺激素檢測對女童性早熟的診斷價值[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2012,16(3):47-49,56.DOI:10.3969/j.issn.1672-2353.2012.03.014. ZHANG T T，XU Z J，MA Y P,et al.Nocturnal urinary gonadotropin in diagnosis of precocious puberty in girls[J].Journal of Clinical Medicine in Practice，2012，16(3)：47-49，56.DOI:10.3969/j.issn.1672-2353.2012.03.014.

[7]張文杰,徐莊劍,林士霞,等.夜尿促性腺激素與兒童下丘腦-垂體-性腺軸啟動的關(guān)系[J].實用兒科臨床雜志,2010,25(8):561-563. ZHANG W J，XU Z J，LIN S X,et al.Correlation between nocturnal urinary gonadotropin and onset of hypothalamic-pituitary-gonadal axis in children[J].Journal of Applied Clinical Pediatrics，2010，25(8)：561-563.

[8]MCNEILLY J D,MASON A,KHANNA S,et al.Urinary gonadotrophins:a useful non-invasive marker of activation of the hypothalamic pituitary-gonadal axis[J].Int J Pediatr Endocrinol,2012,2012(1):10.DOI:10.1186/1687-9856-2012-10.

[9]DE JONG M,ROTTEVEEL J,HEIJBOER A C,et al.Urine gonadotropin and testosterone levels in male very-low-birthweight infants[J].Horm Res Paediatr,2012,78(3):173-179.DOI:10.1159/000342860.

[10]DE JONG M,ROTTEVEEL J,HEIJBOER A C,et al.Urine gonadotropin and estradiol levels in female very-low-birth-weight infants[J].Early Hum Dev,2013,89(3):131-135.DOI:10.1016/j.earlhumdev.2012.09.007.

[11]ZUNG A,BURUNDUKOV E,ULMAN M,et al.The diagnostic value of first-voided urinary LH compared with GNRH-stimulated gonadotropins in differentiating slowly progressive from rapidly progressive precocious puberty in girls[J].Eur J Endocrinol,2014,170(5):749-758.DOI:10.1530/EJE-14-0010.

[12]中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會內(nèi)分泌遺傳代謝學(xué)組,《中華兒科雜志》編輯委員會.中樞性性早熟診斷與治療共識(2015)[J].中華兒科雜志,2015,53(6):412-418.DOI:10.3760/cma.j.issn.0578-1310.2015.06.004. Chinese Society of Pediatric Endocrinology and Metabolism,Editorial Board of Chinese Journal of Pediatrics.The consensus of diagnosis and therapy for central precocious puberty(2015)[J].Chinese Journal of Pediatrics,2015,53(6):412-418.DOI:10.3760/cma.j.issn.0578-1310.2015.06.004.

[13]WHO Multicentre Growth Reference Study Group.WHO child growth standards based on length/height,weight and age[J].Acta Paediatr Suppl，2006，450：76-85.

[14]顏純，王慕逖.小兒內(nèi)分泌學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：79-80. YAN C，WANG M D.Pediatric endocrinology[M].Beijing：People′s Medical Publishing House，2006：79-80.

[15]CHAN C S，PETERSON J D，GERTLER T S，et al.Strain-specific regulation of striatal phenotype in Drd2-eGFP BAC transgenic mice[J].J Neurosci,2012，32(27)：9124-9132.DOI:10.1523/JNEUROSCI.0229-12.2012.

[16]PENNY R,GOLDSTEIN I P,FRASIER D.Overnight follicle stimulating hormone(FSH) and luteinizing hormone(LH) excretion in normal males[J].J Clin Endocrinol Metab,1976,43(6):1394-1399.

[17]PENNY R,GOLDSTEIN I P,FRASIER S D.Overnight gonadotropin excretion in normal females[J].J Clin Endocrinol Metab,1977,44(4):780-783.

[18]QUIGLEY C A.Editorial:the postnatal gonadotropin and sex steroid surge-insights from the androgen insensitivity syndrome[J].J Clin Endocrinol Metab,2002,87(1):24-28.DOI:10.1210/jcem.87.1.8265.

[19]DEMIR A,VOUTILAINEN R,JUUL A,et al.Increase in first morning voided urinary luteinizing hormone levels precedes the physical onset of puberty[J].J Clin Endocrinol Metab,1996,81(8):2963-2967.DOI:10.1210/jcem.81.8.8768859.

[20]徐莊劍,胡瑜,王桂珍,等.318名0～6歲兒童基礎(chǔ)促性腺激素水平的測定[J].中華兒科雜志,2003,41(2):148.DOI:10.3760/j.issn:0578-1310.2003.02.025. XU Z J，HU Y，WANG G Z，et al.Basal levels for gonadotropins in 318 children from birth to 6 years of age[J].Chinese Journal of Pediatrics，2003，41(2)：148.DOI:10.3760/j.issn:0578-1310.2003.02.025.

[21]HOFFER L J,BEITINS I Z,KYUNG N H,et al.Effects of severe dietary restriction on male reproductive hormones[J].J Clin Endocrinol Metab,1986,62(2):288-292.

[22]謝書艷.GnRHa激發(fā)試驗時晝夜尿促性腺激素與兒童下丘腦-垂體-性腺軸的啟動[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2011. XIE S Y.Correlation between urinary gonadotropin and onset of hypothalamic-pituitary-gonadal axis during daytime and nighttime in children during gonadotropin-releasing hormone analog stimulation testing[D].Suzhou：Soochow University，2011.

[23]DEMIR A,DUNKEL L,STENMAN U H,et al.Age-related course of urinary gonadotropins in children[J].J Clin Endocrinol Metab,1995,80(4):1457-1460.DOI:10.1210/jcem.80.4.7714124.

(本文編輯：賈萌萌)

Investigation of Reference Ranges of Urine Gonadotropin in Preschool Children in Community

HANGBiao1,HANGYin1,MAYa-ping2,XIABing-yang2,HUANGMin1,LINan-nan2,YUEChun-xiao1,ZHANGXiao-ying1,GONGDa-wei1,ZHOUHan-yang1,XUZhuang-jian2*

1.TheCommunityHealthServiceCenterofHudaiTowninBinhuDistrict,Wuxi214161,China2.AffiliatedHospitalofJiangnanUniversity,theFourthPeople′sHospitalofWuxi,Wuxi214062,China

*Correspondingauthor:XUZhuang-jian，Professor；E-mail：xxx1959xzj@126.com

Objective It aimed to establish normal reference ranges of urine luteinizing hormone(ULH) and urine follicle-stimulating hormone(UFSH) in preschool children(3-7 years old).And the characteristics of gender and age were investigated.Methods From May to July in 2015,the preschool children(3-7 years old) in Hudai community of Binhu district,Wuxi city,Jiangsu province were enrolled as subjects.According to the standards of growth and development from World Health Orgnization(WHO) in 2006,the height for age Z-score,weight for age Z-score and BMI for age Z-score were calculated.Three indicators all in -2SD-2SD were regarded as meeting the physical development criteria of the study.The bladder was drained before going to bed,the first morning urine were collected.The urine retention time was recorded.ULH and UFSH were detected by immunochemical chemiluminescence.Creatinine(Cr) was simultaneously detected.Results There were 1 105 children in line with inclusion criteria and their urine specimens were collected correctly.Among them,90 were 3 years old,390 were 4 years old,373 were 5 years old,and 252 were 6-7 years old.The detection rates of ULH in male and female were 5.30%(31/585) and 11.54%(60/520),respectively.And the detection rates of UFSH were 99.83%(584/585) and 99.04%(515/520),respectively.There were significant differences in the ULH and UFSH levels between male and female(Z=-3.755,P<0.001;Z =-19.644,P<0.001).There were significant differences in the UFSH levels among different age female(P<0.05).The UFSH levels in female of 5 years old or 6-7 years old were lower than those of female in 3 years old and 4 years old,respectively(P<0.05).In 1 105 preschool children,-2SD

Child,preschool;Gonadotrophs;Urine;Luteinizing hormone;Follicle stimulating hormone;Community

江蘇省婦幼健康科研項目(F201637)；無錫市衛(wèi)生局婦幼保健科研項目(FYKY201404)——0～7歲兒童尿促性腺激素和性激素水平的調(diào)查；無錫市衛(wèi)生局科研項目(ME201411)——0～7歲兒童性征發(fā)育初步調(diào)研；無錫市醫(yī)院管理中心科研項目(YGZXM14015)——曲普瑞林激發(fā)試驗?zāi)驒z法在女童HPGA功能評估中的價值

R 17

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.20.016

2016-10-27；

2017-04-13)

1.214161江蘇省無錫市濱湖區(qū)胡埭鎮(zhèn)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心

2.214062江蘇省無錫市，江南大學(xué)附屬醫(yī)院 無錫市第四人民醫(yī)院

*通信作者：徐莊劍，教授；E-mail：xxx1959xzj@126.com