王 楠，王璐瑤，楊國(guó)輝，陳聚伍

(1. 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診外科，河南 鄭州 450052；2. 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔科，河南 鄭州 450052)

骨肉瘤組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)及其臨床意義

王 楠1，王璐瑤2，楊國(guó)輝1，陳聚伍1

(1. 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診外科，河南 鄭州 450052；2. 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔科，河南 鄭州 450052)

目的 探討骨肉瘤組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)及其臨床意義。方法 采用免疫組化S-P法檢測(cè)68例骨肉瘤和30例正常骨組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)，并分析兩者與骨肉瘤的臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。結(jié)果 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的陽(yáng)性率均高于正常骨組織(P<0.05)。骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)均與患者的軟組織浸潤(rùn)、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.637，P<0.05)。結(jié)論 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2存在高表達(dá)，兩者可能協(xié)同參與了骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等。

骨肉瘤；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；基質(zhì)金屬蛋白酶-2

骨肉瘤是一種青少年高發(fā)的原發(fā)性惡性骨腫瘤，發(fā)病率居原發(fā)性惡性骨腫瘤的前列。骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移受多因素的影響，多種因子參與其具體過(guò)程。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是作用較強(qiáng)的一種促血管生成因子，是惡性腫瘤新生血管形成的關(guān)鍵影響因素[1]?；|(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)是MMPs家族成員之一，廣泛參與腫瘤組織的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等[2]。作者采用免疫組化S-P法檢測(cè)骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2蛋白表達(dá)，并分析兩者與骨肉瘤臨床病理特征之間的關(guān)系。

近年來(lái)，在一些發(fā)達(dá)國(guó)家興起了一種新型防水材料——ECM多功能彈性水泥防水材料。這種防水材料克服了傳統(tǒng)的水泥脆性大的缺點(diǎn)，具有優(yōu)良的彈性和較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)的柔韌性，同時(shí)具有上述各種防水涂料的多種優(yōu)良性能，而且施工簡(jiǎn)單、維修方便，可廣泛應(yīng)用于各種防水工程。但這種防水材料的造價(jià)高昂，目前在我國(guó)尚未普及。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入組鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2013年1月至2016年6月收治的經(jīng)病理學(xué)確診的骨肉瘤患者68例，男41例，女27例；年齡9～46歲，其中≤18歲者42例，>18歲者26例；腫瘤大小:≤4 cm者37例，>4 cm者31例；腫瘤部位：四肢49例，軀干19例；組織類型：骨母細(xì)胞型30例，軟骨母細(xì)胞型26例，纖維母細(xì)胞型12例；臨床分期(Eneeking分期)：Ⅱ級(jí)43例，Ⅲ級(jí)25例；有軟組織浸潤(rùn)48例，無(wú)軟組織浸潤(rùn)20例。并選取同期在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院的非瘤性骨折患者30例作為對(duì)照，其中男20例，女10例，年齡10～50歲。2組患者的性別、年齡等具有可比性(P>0.05)。

閱讀，能夠讓我的孩子上天入地；閱讀，能夠讓我的語(yǔ)文課來(lái)往古今。所以，我始終堅(jiān)持這樣的教學(xué)理念：閱讀，造就樂(lè)學(xué)善思的孩子；閱讀，造就智趣豐盈的語(yǔ)文課堂。

1.2 主要試劑 S-P免疫組化試劑盒、DAB顯色劑、VEGF鼠抗人單克隆抗體、MMP-2鼠抗人單克隆抗體等均購(gòu)自北京中山金橋生物技術(shù)有限公司。

1.4 免疫組化結(jié)果判定 VEGF、MMP-2定位于細(xì)胞質(zhì)中，以細(xì)胞染色呈棕黃或黃褐色為陽(yáng)性，選取至少10個(gè)高倍鏡(×400)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，評(píng)價(jià)染色強(qiáng)度，然后根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)評(píng)分和染色強(qiáng)度評(píng)分綜合評(píng)判染色結(jié)果[3]。

1.3 VEGF、MMP-2的檢測(cè) 按照S-P免疫組化試劑盒說(shuō)明采用免疫組化S-P法檢測(cè)骨肉瘤和正常骨組織中VEGF、MMP-2蛋白表達(dá)，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知VEGF、MMP-2陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。

2.2 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)均與患者的軟組織浸潤(rùn)、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.1 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá) 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的陽(yáng)性率分別為70.59%(48/68)、73.53%(50/68)，均高于正常骨組織的10.00%(3/30)、16.67%(5/30)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

2 結(jié)果

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，VEGF、MMP-2的陽(yáng)性率等計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析法，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。

“貴州大學(xué)當(dāng)時(shí)有兩個(gè)優(yōu)勢(shì)學(xué)科，一個(gè)是計(jì)算機(jī)軟件，另一個(gè)是農(nóng)藥學(xué)。按當(dāng)時(shí)政策，可以傾斜照顧一個(gè)學(xué)科，另一個(gè)需參加正常評(píng)審。后來(lái)，貴州大學(xué)的農(nóng)藥學(xué)先通過(guò)評(píng)審，并將消息通知了計(jì)算機(jī)學(xué)科評(píng)議組。我作為評(píng)議組秘書，并沒(méi)有急于轉(zhuǎn)達(dá)這個(gè)消息，從而使得計(jì)算機(jī)軟件學(xué)科也順利通過(guò)評(píng)審?！?/p>

表1 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2表達(dá)的相關(guān)性 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.637，P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2表達(dá)的相關(guān)性

注：r=0.637，P<0.05

3 討論

骨肉瘤是一種青少年高發(fā)的原發(fā)性惡性骨腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為受多因素的影響，多種基因和蛋白參與其具體過(guò)程。骨肉瘤的診斷和治療隨著影像學(xué)、病理學(xué)技術(shù)的進(jìn)步以及治療手段的豐富得到了快速發(fā)展。目前，其確診主要依靠病理學(xué)檢查，治療主要是手切除輔以化療、靶向治療等。但是骨肉瘤臨床上的確診和復(fù)發(fā)仍是難以解決的問(wèn)題。所有腫瘤的增大和疾病進(jìn)展均離不開新生血管的形成。VEGF是作用較強(qiáng)的一種促血管生成因子，在多種實(shí)體瘤的進(jìn)展中具有重要作用[4-5]。MMP-2在細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解中發(fā)揮關(guān)鍵作用，而細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解是腫瘤周圍浸潤(rùn)的生物學(xué)基礎(chǔ)，因此MMP-2廣泛參與腫瘤組織的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等[6]。作者采用免疫組化S-P法檢測(cè)骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2蛋白表達(dá)，并分析兩者與骨肉瘤臨床病理特征之間的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的陽(yáng)性率均高于正常骨組織(P<0.05)。骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)均與患者的腫瘤大小、軟組織浸潤(rùn)、臨床分期有關(guān)(P<0.05)。骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.637，P<0.05)。這與有關(guān)研究[7-8]結(jié)果相似。

目前防汛抗旱業(yè)務(wù)工作中，對(duì)實(shí)況和預(yù)報(bào)降水過(guò)程都缺少定量化描述。天眼系統(tǒng)將在未來(lái)兩三年內(nèi)，定量化分析歷史降水過(guò)程，結(jié)合氣象部門對(duì)降水過(guò)程強(qiáng)度等級(jí)劃分的相關(guān)規(guī)定，研究確定降水過(guò)程定量化描述方法，逐步實(shí)現(xiàn)實(shí)況和預(yù)報(bào)降水過(guò)程的定量化描述應(yīng)用，為防汛抗旱業(yè)務(wù)工作提供更好地指導(dǎo)作用。

綜上所述，骨肉瘤組織中VEGF、MMP-2存在高表達(dá)，兩者可能協(xié)同參與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等。

[1] 趙文靜，錢紅燕，李靖，等. 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞體外管腔形成中量效和時(shí)效局限性的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床, 2016,29(4):284-290.

[2] 尹磊,高惠妮,龐超,等. 眼瞼基底細(xì)胞癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2、基質(zhì)金屬蛋白酶-7的表達(dá)[J]. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2016，29(6):465-467.

[3] 王光茂，原銀萍，趙翠秀,等. 結(jié)腸癌組織MMP-2和MMP-9及VEGF表達(dá)臨床意義的研究[J]. 中華腫瘤防治雜志，2011，18(16):1267-1269.

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Expressions of Vascular Endothelial Growth Factor and Matrix Metalloproteinase-2 in the Osteosarcoma

WANG Nan1, WANG Luyao2, YANG Guohui1, CHEN Juwu1

(1.DepartmentofEmergencySurgery,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China;2.DepartmentofStomatology,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)

Objective To investigate the expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) in the osteosarcoma and their clinical significance.Methods Immunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of VEGF and MMP-2 in the 68 cases of osteosarcoma and 30 cases of normal bone tissues, their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.Results The positive rate of VEGF and MMP-2 in the osteosarcoma were higher than those in the normal bone tissue (P<0.05). The expressions of VEGF and MMP-2 in the osteosarcoma were related with tumor size, soft tissue infiltration and clinical stage (P<0.05). In the osteosarcoma, the expression of VEGF was negatively related with MMP-2 (r=0.637,P<0.05).Conclusion high expressions of VEGF and MMP-2 in the osteosarcoma are related to the development, infiltration and metastasis of osteosarcoma.

osteosarcoma; vascular endothelial growth factor; matrix metalloproteinase-2

國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(編號(hào)：81603471)

王楠(1982-)，男，博士在讀，主治醫(yī)師，主要從事骨外科臨床工作。E-mail：alpha19820607@163.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.03.003

R738.1；R730.23

A

1673-5412(2017)03-0192-03

2016-10-29)