竇 娟 趙 青

（河南省焦作婦幼保健院，河南 焦作 454001）

426例孕婦接受無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測（NIPT）的因素分析

竇 娟 趙 青

（河南省焦作婦幼保健院，河南 焦作 454001）

目的 分析無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)臨床應(yīng)用孕周、年齡、覆蓋范圍，探討其適用人群及方法。方法 2015年9月至2016年5月在我院接受無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測者，利用新一代測序技術(shù)和生物信息學(xué)方法，對胎兒染色體非整倍體進(jìn)行產(chǎn)前檢測，高風(fēng)險(xiǎn)者進(jìn)行介入性產(chǎn)前診斷確診。分析被檢測者孕周、年齡分布及檢測指征。結(jié)果 426例檢測者年齡分布于22～47歲，檢測孕周12～26周，呈連續(xù)分布；檢測指征包括：血清學(xué)篩查高風(fēng)險(xiǎn)，有絕對或相對介入性產(chǎn)前診斷禁忌證者；有產(chǎn)前診斷適應(yīng)證，但因焦慮、恐懼等因素拒絕穿刺者；血清學(xué)篩查臨界風(fēng)險(xiǎn)者及自愿要求者。結(jié)論 無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測對檢測孕周和年齡覆蓋范圍廣，可作為侵入性產(chǎn)前診斷的補(bǔ)充。對其適用人群仍有待界定、規(guī)范，做好檢測前后的遺傳咨詢工作至關(guān)重要。

無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測；染色體疾病；孕周；年齡

大約有8%的受精卵是非整倍體染色體畸形的胎兒，其中50%在妊娠早期流產(chǎn)，占死胎和新生兒死亡的7%～8%。存活下來但伴有缺陷的染色體畸形占新生兒的0.64%。以唐氏綜合征為代表的染色體是產(chǎn)前篩查的重點(diǎn)[1]。我國為出生缺陷的高發(fā)國，據(jù)統(tǒng)計(jì)，每2000萬個新生兒中，先天致愚致殘缺陷兒占出生總數(shù)的4%～6%。這些患染色體疾病的寶寶先天智力低下、生長發(fā)育遲緩、容貌特殊、手腳畸形、有點(diǎn)還伴有其他畸形。染色體三體綜合征是染色體疾病中發(fā)病率最高的一類[2]。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)某條染色體的數(shù)目不是正常的2條而是3條，也即染色體總數(shù)目為47條時就會導(dǎo)致三體綜合征。我國政府每年支付大量經(jīng)費(fèi)用于唐氏綜合征患兒的救濟(jì)，存活下來的出生缺陷兒多為智力障礙或終身殘疾，無法治愈，由此給社會和家庭造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和精神痛苦。無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)的臨床應(yīng)用會為我國出生缺陷兒的產(chǎn)前檢測做出極大貢獻(xiàn)。

1 對象與方法

1.1 對象選擇：2015年9月至2016年5月在我院門診就診的孕婦中，自愿接受NIPT的孕婦共有426例，包括血清學(xué)篩查出21三體、18三體、13三體高風(fēng)險(xiǎn)及臨界風(fēng)險(xiǎn)要求進(jìn)行NIPT者，預(yù)產(chǎn)期孕婦年齡35歲或因其他原因要求進(jìn)行NIPT者，拒絕接受侵入性產(chǎn)前診斷者。適應(yīng)證為妊娠孕周在12～26周，未接受過異體輸血，細(xì)胞治療，移植手術(shù)等，孕婦體質(zhì)量不超過100 kg。

1.2 方法

1.2.1 中孕血清學(xué)篩查：條件為孕15～21+6周，單胎，預(yù)產(chǎn)期孕婦年齡＜35歲，無不良孕產(chǎn)史，無糖尿病史。檢測孕婦靜脈血中雌三醇，甲胎蛋白（AFP），B-HCG的中位數(shù)的倍數(shù)，結(jié)合孕婦年齡、孕齡等情況計(jì)算出唐氏綜合征的風(fēng)險(xiǎn)度。能檢出60%～70%的唐氏綜合征和部分其他非整倍體染色體畸形。對高風(fēng)險(xiǎn)者建議行侵入性產(chǎn)前診斷。唐氏綜合征高風(fēng)險(xiǎn)值≥1/270，臨界風(fēng)險(xiǎn)1/270～1/500，低風(fēng)險(xiǎn)＜1/500。18-三體綜合征高風(fēng)險(xiǎn)值≥1/350，臨界風(fēng)險(xiǎn)1/350～1/500，低風(fēng)險(xiǎn)＜1/500。

1.2.2 無創(chuàng)DNA檢查：符合條件自愿要求做NIPT者，專用抗凝管取孕婦靜脈血10 mL，冰塊冷藏保存運(yùn)輸，24 h內(nèi)運(yùn)到檢測公司。主要針對21、18、13三體非整倍體出具檢測報(bào)告，如有性染色體異常口頭告知，若報(bào)告為未見異常，可以繼續(xù)妊娠，若哪一項(xiàng)為異常需進(jìn)一步做產(chǎn)前診斷確診。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：用SPSS18.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用百分率方法，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 檢測者年齡及孕周分布：行NIPT的孕婦，年齡22～42歲，≥35歲的人數(shù)最多201例，占檢測總數(shù)的47.1%，其中40歲以上64例占15%。檢測孕周12～26周，16～22周197例占46.2%。見表1。

表1 NIPT年齡及孕周分布

2.2 NIPT結(jié)果及影響因素分析：自愿進(jìn)行NIPT者，其中6例結(jié)果顯示異常，包括2例唐氏綜合征，1例18-三體綜合征，2例性染色體異常，1例染色體部分缺失。高齡妊娠201例占47.1%，其中2例結(jié)果為性染色體異常（0.99%），1例為唐氏綜合征（0.49%），1例為18-三體綜合征（0.49%），均經(jīng)羊膜腔穿刺，行胎兒染色體核型分析確診，并行引產(chǎn)術(shù)。126例為血清學(xué)篩查高風(fēng)險(xiǎn)，自愿行無創(chuàng)DNA檢查，其中發(fā)現(xiàn)1例為唐氏綜合征（0.79%），后經(jīng)產(chǎn)前診斷證實(shí)并引產(chǎn)。63例血清學(xué)篩查臨界風(fēng)險(xiǎn)，NIPT未發(fā)現(xiàn)異常，目前隨訪尚無異常報(bào)告。23例其他原因自愿行NIPT的，有1例為染色體部分型缺失，或者復(fù)雜核型嵌合體（0.43%），其為試管嬰兒，珍貴兒，不愿做進(jìn)一步檢查并繼續(xù)妊娠，自愿承擔(dān)后果，隨訪工作繼續(xù)進(jìn)行。見表2。

3 討 論

3.1 NIPT檢測年齡及孕周：無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)是一項(xiàng)新型的、針對胎兒染色體非整倍體疾病的產(chǎn)前檢測新技術(shù)。該技術(shù)僅需抽取孕婦靜脈血，抽提血液中游離DNA，通過深度測序，并結(jié)合生物信息學(xué)分析的方法，這些游離DNA濃度3%～13%，其主要來自胎盤，并在分娩后數(shù)小時內(nèi)從母體血液中清除。因此NIPT檢測對孕周覆蓋范圍較大本院426例NIPT，檢測的孕周范圍為12～26周，檢測的預(yù)產(chǎn)期年齡為22～47歲。

表2 NIPT檢測例數(shù)的報(bào)告

3.2 NIPT目標(biāo)疾?。涸谖覈?，已有幾家具有較強(qiáng)技術(shù)綜合實(shí)力的公司擁有了此項(xiàng)技術(shù)的研發(fā)能力。通過與醫(yī)院合作，自2010年以來該項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)逐漸開展，惠及廣大孕婦。該方法能準(zhǔn)確檢測唐氏綜合征（T21）、愛德華氏綜合征（T18）、帕套氏綜合征（T13）三大染色體疾病。本院研究發(fā)現(xiàn)NIPT除對唐氏綜合征，18-三體綜合征，13-三體綜合征有特異性，并對性染色體檢查較高的檢出率，而且靈敏度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)。

3.3 NIPT檢測人群：2012年11月20日，美國婦產(chǎn)科學(xué)會（ACOG）與美國母胎醫(yī)學(xué)會（SMFM）共同發(fā)表委員會指導(dǎo)意見：推薦NIPT可作為胎兒非整倍體染色體疾病高危人群的初篩檢測，并按照以下適應(yīng)證，可推薦NIPT作為非整倍體高危人群的初篩檢測[3-4]：①高齡（年齡≥35歲），不愿選擇有創(chuàng)產(chǎn)前診斷的孕婦；②唐篩結(jié)果為高風(fēng)險(xiǎn)或者單項(xiàng)指標(biāo)值改變，不愿選擇有創(chuàng)產(chǎn)前診斷的孕婦；③孕期B超胎兒NT值增高或其他解剖結(jié)構(gòu)異常，不愿選擇有創(chuàng)產(chǎn)前診斷的孕婦；④不適宜進(jìn)行有創(chuàng)產(chǎn)前診斷的孕婦，如病毒攜帶者、胎盤前置、胎盤低置、羊水過少、RH血型陰性、流產(chǎn)史、先兆流產(chǎn)、珍貴兒、錯過有創(chuàng)產(chǎn)前診斷時間等；⑤羊水穿刺細(xì)胞培養(yǎng)失敗不愿意再次接受或不能再進(jìn)行有創(chuàng)產(chǎn)前診斷的孕婦；⑥希望排除胎兒21-三體、18-三體、13-三體綜合征，自愿選擇行無創(chuàng)產(chǎn)前檢測的孕婦；⑦血清篩查陽性的孕婦以及對產(chǎn)前診斷有心理障礙的孕婦[5]。該聲明說明在美國婦產(chǎn)科界已經(jīng)形成行業(yè)共識，明確支持NIPT可用于高齡、高危人群的初篩。本研究426例NIPT，其中327例有產(chǎn)前診斷適應(yīng)證，占76.7%，但因恐懼，擔(dān)心侵入性診斷帶來流產(chǎn)、感染風(fēng)險(xiǎn)而拒絕產(chǎn)前診斷，選擇NIPT。有侵入性產(chǎn)前診斷的相對或絕對禁忌的16例，占3.7%。臨界風(fēng)險(xiǎn)76例，占17.8%。還有23例無指征自愿選擇NIPT，占0.53%。

綜上所述，NIPT技術(shù)在篩查染色體非整倍體疾病方面有安全、無創(chuàng)傷、無流產(chǎn)、無感染風(fēng)險(xiǎn)，檢測孕周年齡范圍廣泛，靈敏度高、特異性好、高精準(zhǔn)等優(yōu)點(diǎn)，可以減少很多假陽性假陰性的發(fā)生。但是目前價(jià)格較高，若是未來成本降低了，相信會取代唐氏篩查。

[1] 張劭勤.541例孕婦接受無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測(NIPT)的因素分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2015,23(6):17-18.

[2] 謝幸.婦產(chǎn)科學(xué)[M]. 8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013.

[3] 邊旭明.胎兒染色體,非整倍體的無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2013,29(5):330-333.

[4] 楊燦峰.關(guān)于降低唐氏篩查假風(fēng)險(xiǎn)率的方法和幾點(diǎn)建議[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2010,18(4):67-69.

[5] 段紅蕾.江蘇省13041例無創(chuàng)產(chǎn)前檢測的指征及結(jié)果分析[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,17(12):813-816.

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1671-8194（2017）17-0127-02