陸瑾+郭立瑋+付廷明+朱國(guó)龍+戴真南+展冠軍+陳麗麗

[摘要] 采用乳化溶劑揮發(fā)法制備聚乳酸（PLA）-α-細(xì)辛腦納米粒，并與靜脈注射給藥比較，研究PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后藥物的體內(nèi)分布及腦組織的靶向性。結(jié)果顯示：鼻腔給藥和靜脈注射后的腦靶向系數(shù)分別為1.65與1.16，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后的絕對(duì)生物利用度為74.2%，腦靶向效率為142.24%，鼻-腦傳遞百分比為29.83%。熒光標(biāo)記法顯示，PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒經(jīng)鼻腔給藥后，香豆素-6在腦組織中的熒光強(qiáng)度最大，達(dá)到腦靶向給藥的目的；PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒靜脈注射給藥后，香豆素-6在肝組織中的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)高于鼻腔給藥，表明PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻腔給藥可降低藥物導(dǎo)致的肝毒性。此外，PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒經(jīng)鼻腔給藥后，香豆素-6在肺組織中的熒光強(qiáng)度較弱，解決了氣流粉碎法制備的α-細(xì)辛腦干粉經(jīng)鼻腔給藥到達(dá)肺部量較多的缺點(diǎn)。體內(nèi)研究表明：與靜脈注射相比，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后的腦靶向性優(yōu)于靜脈注射。

[關(guān)鍵詞] PLA-α-細(xì)辛腦納米粒； 鼻腔； 藥物動(dòng)力學(xué)； 腦靶向

[Abstract] PLA-α-asarone nanoparticles were prepared by using organic solvent evaporation method， and their in vivo distribution and brain targeting after intranasal administration were studied as compared with intravenous administration. The results showed that brain targeting coefficient of PLA-α-asarone nanoparticles after intranasal and intravenous administration was 1.65 and 1.16 respectively. The absolute bioavailability， brain-targeting efficiency and the percentage of nasal-brain delivery of PLA-α-asarone nanoparticles were 74.2%， 142.24 and 29.83%， respectively after intranasal administration. The results of fluorescence labeling showed that the fluorescent intensity of coumarin-6 in the brain tissue was the highest after intranasal administration of PLA-α-asarone fluorescent nanoparticles， achieving the purpose of brain-targeted drug delivery. The fluorescent intensity of coumarin-6 in liver tissue after intravenous administration of PLA-α-asarone nanoparticles was much higher than that after intranasal administration， indicating that intranasal administration of PLA-α-asarone nanoparticles could decrease drug-induced hepatotoxicity. In addition， the fluorescent intensity of coumarin-6 in lung tissue was weaker after intranasal administration， which solved the shortcomings of intranasal administration of α-asarone dry powder prepared by airflow pulverization method. In vivo studies indicated that PLA-α-asarone nanoparticles after intranasal administration had a stronger brain targeting as compared with intravenous administration.

[Key words] PLA-α-asarone nanoparticles； intranasal； pharmacokinetic； brain targeting

α-細(xì)辛腦是天南星科植物石菖蒲Acorus tatarinowii Schott的主要活性成分之一，研究報(bào)道：α-細(xì)辛腦通過(guò)作用于NO水平治療阿爾茨海默病[1]，通過(guò)抑制海馬神經(jīng)元的活性及γ-氨基丁酸（GABA）受體的表達(dá)[2]治療癲癇，同時(shí)其可透過(guò)血腦屏障。因此，α-細(xì)辛腦具有治療中樞性神經(jīng)系統(tǒng)疾病的前景。目前，α-細(xì)辛腦主要有2種給藥方式，以膠囊劑或片劑的形式給藥，生物利用度分別僅有2.73%，5.56%[3]；若采用靜脈注射給藥，由于α-細(xì)辛腦較高的脂溶性使其在制備過(guò)程中加入了吐溫、丙二醇等助溶劑，而吐溫、丙二醇等助溶劑又是導(dǎo)致細(xì)辛腦注射液過(guò)敏性休克等嚴(yán)重不良反應(yīng)的重要原因之一[4-5]。

納米粒作為膠態(tài)藥物載體具有小粒子的特征，可以穿過(guò)生物膜屏障，有的甚至可避免網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，在不增加藥物向血液轉(zhuǎn)運(yùn)的情況下可促進(jìn)藥物由鼻至腦的直接轉(zhuǎn)運(yùn)，從而提高藥物的腦內(nèi)濃度[6-8]。本課題組將α-細(xì)辛腦通過(guò)乳化溶劑揮發(fā)法將其制備成PLA-α-細(xì)辛腦納米粒，并對(duì)其進(jìn)行了表征及鼻黏膜毒性的研究[9]。為評(píng)價(jià)藥物在體內(nèi)的靶向性，本研究采用與靜脈注射對(duì)比的方式，進(jìn)一步研究PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后α-細(xì)辛腦在體內(nèi)的分布情況。

1 材料

SM-1000D超聲波細(xì)胞破碎儀（南京舜瑪儀器設(shè)備有限公司）；HJ-6A六聯(lián)數(shù)顯控溫磁力攪拌器（江蘇金運(yùn)市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠）；-70 ℃超低溫冰箱（海爾）；Allegra 64R高速冷凍離心機(jī)（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司）；I-6冷凍干燥機(jī)（Ehrisa公司）；LibrorAEL-40SM 1/10萬(wàn)電子天平（島津）；微型移液器（Eppendor公司）；MTN-2000W氮?dú)鉂饪s儀（奧特賽恩斯儀器有限公司）；KQ3200醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；50 μL微量進(jìn)樣針（濟(jì)南賽暢科學(xué)儀器有限公司）；WH-90A型微型混合器（上海亞榮生化儀器廠）；E6/10-8G型超細(xì)勻漿機(jī)（上海弗魯克流體機(jī)械制造有限公司）；ACQUITYTM UPLC超高效液相色譜系統(tǒng)，XevoTM TQ質(zhì)譜系統(tǒng)（美國(guó)Waters公司）； ACQUITYTM UPLC BEH C₁₈色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm，美國(guó)Waters公司）；CRi Maestro IN-VIVO Imaging System小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)（美國(guó)）。

α-細(xì)辛腦對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100298-201203）；吲哚美辛對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100258-200904）；α-細(xì)辛腦原料藥（湖北藝康源化工有限公司，批號(hào)130104，純度>98%）；聚乳酸（PLA，相對(duì)分子質(zhì)量1萬(wàn)，批號(hào)14011105，山東醫(yī)療器械研究所）；聚乙烯醇1788（polyvinyl alcohol，PVA1788，上海阿拉丁試劑有限公司）；香豆素-6（coumarin-6，Sigma-Aldrich）；甲醇（色譜純，Merck），冰醋酸（美國(guó)ROE scientific INC.，HPLC），正丁醇（上海中試化工總公司，AR，20090423），水為重蒸水，丙酮、二氯甲烷為分析純。

Sprague Dawley（SD）大鼠，體重200～250 g，雄性，SPF級(jí)（上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司），許可證號(hào)SCXK（滬）2008-0016。大鼠飼養(yǎng)在SPF級(jí)的環(huán)境下，溫度18～26 ℃，相對(duì)濕度40%～70%，12 h光照/黑暗交替，實(shí)驗(yàn)前自由飲水飲食。

2 方法

2.1 PLA-α-細(xì)辛腦納米粒制備

精密稱取一定量α-細(xì)辛腦原料藥和PLA溶于10 mL的有機(jī)溶劑（二氯甲烷-丙酮=9∶1）中，配制成PLA質(zhì)量濃度為14.76 g·L^-1，α-細(xì)辛腦藥物質(zhì)量濃度為4.89 g·L^-1的有機(jī)相，將有機(jī)相用注射器緩緩注入20 mL不斷攪拌的濃度為1%的PVA水溶液中，滴畢，繼續(xù)攪拌2 min后于超聲波細(xì)胞破碎儀在600 W功率下超聲4 min，磁力攪拌器攪拌6 h以上揮去有機(jī)溶劑后，5 000 r·min^-1預(yù)離心5 min除去沉淀，離心液再以21 000 r·min^-1離心45 min得納米粒沉淀，該沉淀用重蒸水洗滌2次以除去PVA，適量水分散，冷凍干燥48 h得粉末狀樣品。臨用前使用重蒸水配成10 g·L^-1及50 mg·L^-1的混懸液，分別供鼻腔給藥及尾靜脈注射。通過(guò)該方法制備得到的PLA-α-細(xì)辛腦納米粒平均粒徑為265.4 nm，PDI指數(shù)0.038，載藥量12.40%，包封率55.86%。

2.2 PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒制備

參照2.1項(xiàng)下方法，在PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒制備過(guò)程中除有機(jī)相中加入0.1%的香豆素-6，其他步驟同2.1。

2.3 給藥方式與劑量

2.3.1 PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒血藥動(dòng)力學(xué)研究 12只SD大鼠隨機(jī)分成2組，每組6只，分別進(jìn)行PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥及尾靜脈注射。實(shí)驗(yàn)前禁食（不禁水）12 h。鼻腔給藥方式如下：大鼠乙醚吸入麻醉后仰臥姿勢(shì)放置，給藥前將40 μL質(zhì)量濃度為10 g·L^-1PLA-α-細(xì)辛腦納米?；鞈乙何胛⒘窟M(jìn)樣針，微量進(jìn)樣針前端套上塑料皮管對(duì)鼻腔進(jìn)行保護(hù)，將微量進(jìn)樣針前端插入大鼠鼻腔，深度不超過(guò)8 mm，2個(gè)鼻孔分別給藥20 μL，整個(gè)給藥過(guò)程在麻醉后1 min內(nèi)完成。靜脈給藥方式如下：大鼠乙醚吸入麻醉后裝入靜脈注射籠，靜脈注射器吸入約0.8 mL質(zhì)量濃度為50 mg·L^-1的PLA-α-細(xì)辛腦納米粒進(jìn)行尾靜脈注射，所有大鼠平均給藥劑量約為1.6 mg·kg^-1（該劑量是根據(jù)α-細(xì)辛腦納米?；鞈乙鹤畲鬂舛纫约按笫蟊乔灰后w給藥量而定），該給藥劑量也與文獻(xiàn)[10]基本一致。

2.3.2 PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒腦藥動(dòng)力學(xué)研究 48只SD大鼠隨機(jī)分成2組，每組24只。給藥方式與劑量同2.3.1，進(jìn)行PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射與鼻腔給藥后腦藥動(dòng)力學(xué)研究。

2.3.3 PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒的藥代動(dòng)力學(xué)研究 24只SD大鼠隨機(jī)分成2組，每組12只。給藥方式同2.3.1，根據(jù)香豆素-6在納米粒中的含量，將熒光納米粒配制成適當(dāng)?shù)臐舛裙┐笫蟊乔唤o藥和尾靜脈注射（香豆素-6的含量為10 μg）。

2.4 樣品采集與處理

2.4.1 血藥動(dòng)力學(xué)研究樣品采集與處理 鼻腔給藥和尾靜脈注射后分別于給藥后1，3，5，10，15，30，45，60，90，120，180，240 min眼眶后靜脈叢取血0.5 mL，置于肝素鈉抗凝管中，3 500 r·min^-1離心15 min，分離血漿，于-70 ℃冰箱冷凍保存待測(cè)。檢測(cè)前，取出血漿至室溫解凍后，精密吸取150 μL于干凈離心管中，加入20 μL質(zhì)量濃度為1 mg·L^-1吲哚美辛[11]內(nèi)標(biāo)液后，再加入1 000 μL水飽和正丁醇，微型混合器渦旋3 min進(jìn)行萃取，14 000 r·min^-1離心10 min，取800 μL上清液至另一干凈的離心管中，在40 ℃的水浴中用氮?dú)鉂饪s儀吹干，殘?jiān)尤?00 μL復(fù)溶液（0.1%甲酸水-甲醇6∶4），渦旋2 min后，14 000 r·min^-1離心10 min，取上清液進(jìn)樣5 μL分析。

2.4.2 腦藥動(dòng)力學(xué)研究樣品采集與處理 給藥后每組分別于5，15，30，45，90，180 min處死4只大鼠，從頭蓋骨下取出全腦組織，所有樣品于-70 ℃冷凍保存待測(cè)。檢測(cè)前，取出樣品，精密稱取混勻后的腦組織0.3 g于0.5 mL離心管，加入900 μL蒸餾水，勻漿機(jī)勻漿后取勻漿液150 μL，加入20 μL質(zhì)量濃度為1 mg·L^-1吲哚美辛內(nèi)標(biāo)液，渦旋混勻后，加入1 000 μL水飽和正丁醇，渦旋震蕩5 min，14 000 r·min^-1離心10 min，吸取800 μL上清液氮?dú)獯蹈?。殘?jiān)尤?00 μL復(fù)溶液（0.1%甲酸水-甲醇=6∶4），渦旋震蕩5 min，14 000 r·min^-1離心10 min后，取上清進(jìn)樣5 μL分析。

2.4.3 熒光標(biāo)記法樣品采集 給藥后每組分別于5，30，90，180 min處死3只大鼠，取下心、肝、脾、肺、腎及腦組織，所有樣品于-70 ℃冷凍保存待測(cè)。

2.5 檢測(cè)方法

2.5.1 色譜條件及質(zhì)譜條件 ACQUITYTM UPLC BEH C₁₈色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流動(dòng)相0.1%甲酸水（A）-甲醇（B），0.5～1.0 min，90%A；1.0～2.0 min，90%～65%A；2.0～4.8 min，65%～35%A；4.8～5.0 min，35%～10%A；5.0～5.5 min，10%～90%A；5.5～6.0 min，90%A；流速0.3 mL·min^-1；柱溫35 ℃；進(jìn)樣量5 μL。質(zhì)譜條件為：α-細(xì)辛腦母離子相對(duì)分子質(zhì)量209.0，子離子相對(duì)分子質(zhì)量181.0，錐電壓34 V，碰撞能量16 V，保留時(shí)間4.0 min，離子模式ES⁺；吲哚美辛母離子相對(duì)分子質(zhì)量360.0，子離子相對(duì)分子質(zhì)量140.9，錐電壓48 V，碰撞能量20 V，保留時(shí)間4.6 min，離子模式ES⁺。

2.5.2 熒光標(biāo)記物的檢測(cè)方法 取出-70 ℃冷凍保存的大鼠組織樣品心、肝、脾、肺、腎及腦，將每只動(dòng)物的組織樣品放入小動(dòng)物活體熒光成像儀中，對(duì)其進(jìn)行熒光成像，以504 nm作為發(fā)射波長(zhǎng)，確定示蹤納米粒在大鼠體內(nèi)不同組織的分布情況。

2.6 數(shù)據(jù)分析

2.6.1 血藥濃度數(shù)據(jù)處理 采用藥動(dòng)學(xué)計(jì)算程序DAS 2.2.1，計(jì)算α-細(xì)辛腦的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示。鼻腔給藥的絕對(duì)生物利用度見(jiàn)下。

2.6.2 腦組織濃度數(shù)據(jù)處理 采用藥動(dòng)學(xué)計(jì)算程序DAS 2.2.1，計(jì)算α-細(xì)辛腦的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。藥物靶向指數(shù)[12]（DTI），藥物靶向效率[13]（DTE），鼻腦直接傳遞百分比[14]（DTP）計(jì)算公式見(jiàn)下。其中，Bi.n.為藥物經(jīng)鼻腔給藥后的AUCbrain，Bx為藥物經(jīng)鼻腔給藥后通過(guò)血液循環(huán)透過(guò)血腦屏障進(jìn)入腦部的AUCbrain，Bi.v.為藥物靜脈注射后的AUCbrain，Pi.v.為藥物靜脈注射后的AUCplasma，Pi.n.為藥物鼻腔給藥后的AUCplasma，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示。

3 結(jié)果

3.1 血藥動(dòng)力學(xué)研究

α-細(xì)辛腦在血漿中的含量測(cè)定方法學(xué)考察結(jié)果顯示：該液質(zhì)檢測(cè)條件下，空白血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品峰，α-細(xì)辛腦及吲哚美辛的峰分離良好，相互間無(wú)干擾，方法專屬性好。其中，α-細(xì)辛腦與內(nèi)標(biāo)物吲哚美辛的保留時(shí)間分別為4.0，4.6 min，見(jiàn)圖1。線性方程Y=0.029C-0.021 9，r=0.999 3（4.955～991 μg·L^-1）。定量限和檢測(cè)限分別為2.5，0.5 μg·L^-1。日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、溶液穩(wěn)定性、回收率及基質(zhì)效應(yīng)考察均符合要求。

PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻腔、靜脈注射給藥后，α-細(xì)辛腦在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)曲線見(jiàn)圖2。2種給藥方式均在第一時(shí)間達(dá)到了最大血藥濃度，且鼻腔給藥的血藥濃度均小于靜脈注射。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥與靜脈注射的Cmax分別為（216.2±45.2），（433.2±158.3） μg·L^-1。

PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射的AUC0-t與AUC0-∞均大于鼻腔給藥，且具有顯著性差異。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射后與鼻腔給藥后的MRT0-t無(wú)顯著性差異。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后的絕對(duì)生物利用度為74.2%，低于α-細(xì)辛腦干粉鼻腔給藥的絕對(duì)生物利用度[15]，見(jiàn)表2。

3.2 腦藥動(dòng)力學(xué)研究

α-細(xì)辛腦在腦組織中的含量測(cè)定方法學(xué)考察結(jié)果顯示：該液質(zhì)檢測(cè)條件下，空白腦組織中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品峰，α-細(xì)辛腦及吲哚美辛的峰分離良好，相互間無(wú)干擾，方法專屬性好，α-細(xì)辛腦與吲哚美辛的保留時(shí)間分別為4.0，4.6 min，見(jiàn)圖3。線性方程Y=0.027 6C+0.340 9，r=0.997 4（4.955～991 ng·g^-1）。定量限和檢測(cè)限分別為2.5，0.5 ng·g^-1。日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、穩(wěn)定性、回收率及基質(zhì)效應(yīng)考察均符合要求。

PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻腔給藥、靜脈注射后α-細(xì)辛腦在5，15，30，60，90，180 min在腦組織中的分布見(jiàn)圖4，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后α-細(xì)辛腦在腦組織中的濃度大于靜脈注射后α-細(xì)辛腦在腦組織中的濃度，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后α-細(xì)辛腦在腦組織中的Cmax與靜脈注射后的α-細(xì)辛腦在腦組織中的Cmax分別為（219.3±48.8），（166.3±21.2） ng·g^-1。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射后α-細(xì)辛腦在腦組織中的AUC0-t與AUC0-∞均小于鼻腔給藥，但無(wú)顯著性差異。此外，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射后與鼻腔給藥后α-細(xì)辛腦在腦組織中的MRT0-t均無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表3。

PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射與鼻腔給藥后藥物的腦靶向系數(shù)（AUCbrain/AUCplasma）分別為1.16和1.65，PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻給藥后的藥物腦靶向效率（DTE）為142.24%，鼻-腦傳遞百分率（DTP）為29.83%。

3.3 熒光標(biāo)記法研究

香豆素-6是一種脂溶性熒光染料，其檢測(cè)靈敏度較高，常用于納米粒遞藥系統(tǒng)的體內(nèi)外示蹤和相關(guān)機(jī)制的研究[16-18]。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，香豆素-6作為熒光探針不會(huì)影響載體本身的各項(xiàng)特性，可以較好的反應(yīng)納米粒的行為，且香豆素-6泄漏程度較低，一般情況下小于5%[19-21]。

PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒靜脈注射后5 min時(shí)，其在肝組織中的熒光強(qiáng)度最大，其次為腦組織，而心、脾、肺、腎幾乎無(wú)熒光。30 min時(shí)，與5 min相比，肝、腦組織中的熒光強(qiáng)度減弱，心、脾、肺、腎出現(xiàn)少量熒光，但肝組織中的熒光強(qiáng)度與其他組織相比，仍是最強(qiáng)的，90 min時(shí)，心、脾、肺中的熒光面積相對(duì)增大，強(qiáng)度仍較弱，180 min時(shí)，熒光強(qiáng)度在所有組織中都降低。PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒鼻腔給藥后5 min時(shí)，其在腦組織中的熒光強(qiáng)度最大，其次為肝組織。與5 min相比，30 min時(shí)腦、肝組織中的熒光強(qiáng)度減弱，心、肺、腎熒光強(qiáng)度增加，但脾中幾乎無(wú)熒光。90 min時(shí)，腦組織中的熒光強(qiáng)度與其他組織相比，仍是最強(qiáng)的，與30 min時(shí)相比，心和腎中的熒光面積相對(duì)減小，180 min時(shí)，組織中的熒光強(qiáng)度在4個(gè)時(shí)間點(diǎn)中最低，見(jiàn)圖5，6。

此外，在5 min和30 min時(shí)，PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒靜脈注射后香豆素-6在肝組織中的熒光強(qiáng)度明顯強(qiáng)于PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒鼻腔給藥后香豆素-6在肝組織中的熒光強(qiáng)度；而PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒靜脈注射后香豆素-6在腦組織中的熒光強(qiáng)度明顯弱于PLA-α-細(xì)辛腦熒光納米粒鼻腔給藥后香豆素-6在腦組織中的熒光強(qiáng)度。從某種程度上可以認(rèn)為：納米粒靜脈注射后具有較強(qiáng)的肝靶向性，而鼻腔給藥后腦靶向性更強(qiáng)。

4 討論

本文采用與靜脈注射對(duì)比的給藥方式，研究了PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻給藥后α-細(xì)辛腦在體內(nèi)的分布及腦靶向性，結(jié)果表明：PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后的腦靶向性強(qiáng)于PLA-α-細(xì)辛腦納米粒靜脈注射后的腦靶向性。腦靶向系數(shù)分別為1.65，1.16。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒鼻腔給藥后的絕對(duì)生物利用度為74.2%，與文獻(xiàn)[22]相一致，表明不同的給藥途徑能改變藥物的腦靶向性。PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻腔給藥后進(jìn)入腦組織主要存在2種通路，即一部分藥物通過(guò)呼吸部黏膜吸收進(jìn)入血液循環(huán)后，透過(guò)血腦屏障而進(jìn)入腦組織，另一部分藥物通過(guò)嗅黏膜或嗅神經(jīng)通路直接進(jìn)入腦組織，后者避開(kāi)了血腦屏障，這與文獻(xiàn)[23-24]報(bào)道相一致。張龍開(kāi)等[25]將β-細(xì)辛醚制備成微乳進(jìn)行鼻腔給藥用于治療阿爾茨海默病，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鼻腔給予含藥微乳系統(tǒng)后腦靶向性良好，β-細(xì)辛醚微乳鼻腔給藥后得到的AUCbrain/AUCplasma均高于靜脈注射給藥，這與本文的結(jié)果也相一致。藥物經(jīng)鼻腔給藥后達(dá)藥峰濃度的時(shí)間較短，可以起到速效的作用[26]。此外，目前還有將α-細(xì)辛腦制備成鼻用mPEG-PLA微粒[27]及納米粒離子敏感型鼻用原位凝膠[28]的研究。

本課題組在之前的研究中采用氣流粉碎的方式，將α-細(xì)辛腦粉末制備成α-細(xì)辛腦鼻用干粉吸入劑，通過(guò)鼻腔給藥的方式可以較好的將藥物導(dǎo)入腦部，但是由于該干粉的粒徑范圍較寬，有部分干粉通過(guò)吸入到達(dá)了肺部，且藥物濃度與靜脈注射到達(dá)肺部的量相當(dāng)[15]。本文的研究結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)：PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)鼻腔給藥后，香豆素-6在肺組織中的熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于靜脈注射后的熒光強(qiáng)度，解決了α-細(xì)辛腦鼻用干粉吸入劑到達(dá)肺部量較多的缺點(diǎn)。但是，哪些因素影響PLA-α-細(xì)辛腦納米粒經(jīng)過(guò)不同的通路到達(dá)腦組織還需進(jìn)一步研究。

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