胡亞耘，董 慧

（1.武漢市第一醫(yī)院 內(nèi)分泌科，湖北 武漢 430000；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，湖北 武漢 430030）

小檗堿對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響

胡亞耘1，董 慧2

（1.武漢市第一醫(yī)院 內(nèi)分泌科，湖北 武漢 430000；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，湖北 武漢 430030）

目的探討小檗堿對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響及可能的作用機(jī)制。方法采用小檗堿干預(yù)后，用MTT法、放射免疫法及Western blotting確定小檗堿干預(yù)的合適濃度范圍及檢測NIT-1細(xì)胞胰島素水平和腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）蛋白的表達(dá)。結(jié)果小檗堿在濃度為100 μmol/L時(shí)對基礎(chǔ)培養(yǎng)基和高糖培養(yǎng)基干預(yù)的NIT-1細(xì)胞的增殖存在顯著性抑制作用(P＜0.05)；而小檗堿在濃度為30 μmol/L時(shí)就明顯抑制高脂培養(yǎng)基誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞的增殖(P＜0.05)。小檗堿分別對基礎(chǔ)、高糖和高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞短時(shí)相干預(yù)（1 h）后，顯示葡萄糖刺激胰島素分泌（GSIS）被明顯抑制 (P＜0.05)；小檗堿對高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞長時(shí)相干預(yù)（24 h）后顯示基礎(chǔ)胰島素分泌和GSIS均有一定的增加(P＜0.05，P＜0.01)。小檗堿可以促進(jìn)高糖高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞AMPK蛋白的表達(dá)。結(jié)論小檗堿不僅僅作為一種AMPK激活來調(diào)節(jié)胰島素分泌，其也可能通過其他的通路進(jìn)一步影響胰島素分泌。

小檗堿；NIT-1細(xì)胞；胰島素

本文引用：胡亞耘，董 慧.小檗堿對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，37（7）：730-735.

在2型糖尿病的發(fā)病過程中，胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能受損作為兩個(gè)重要的發(fā)病環(huán)節(jié)參與其中[1]。在糖尿病前期，胰島β細(xì)胞一方面代償性分泌胰島素會引起機(jī)體的高胰島素血癥，另一方面當(dāng)代償性分泌進(jìn)展為失代償后，出現(xiàn)胰島β細(xì)胞功能受損，從而導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生。這一點(diǎn)與2型糖尿病中胰島素分泌由相對不足最終逐漸進(jìn)展為胰島素分泌絕對不足是相符合的。胰島β細(xì)胞的功能主要通過分泌胰島素從而起到調(diào)節(jié)血糖的作用；而目前促進(jìn)胰島細(xì)胞分泌與釋放胰島素是磺脲類和格列奈類降糖藥物的主要作用機(jī)制[2]。但也有報(bào)道二甲雙胍及羅格列酮等降糖藥物通過激活A(yù)MPK途徑抑制胰島素分泌從而起到很好的降糖作用，一是可以增加胰島素的敏感性從而改善胰島細(xì)胞功能[3-5]，二是可以延緩胰島細(xì)胞功能的耗竭，保證正常功能的胰島細(xì)胞的數(shù)量。除了促進(jìn)胰島細(xì)胞胰島素的分泌，保護(hù)胰島β細(xì)胞功能也有望成為糖尿病治療中的一個(gè)新的治療方向和研究熱點(diǎn)。

小檗堿（berberine），又被稱為黃連素，目前臨床上已被廣泛應(yīng)用于2型糖尿病的治療，但其降糖調(diào)脂的作用機(jī)制還并未被完全闡明。已經(jīng)證實(shí)小檗堿能通過改善脂肪細(xì)胞、肝細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞等外周組織的胰島素敏感性來實(shí)現(xiàn)治療2型糖尿病的功效[6]，而小檗堿對胰島β細(xì)胞胰島素的分泌及其功能的影響尚未闡明。前期有試驗(yàn)提出小檗堿可作為胰島素促泌劑促進(jìn)胰島素的分泌[7]。而Zhou L等[8]也得出小檗堿可能通過 AMPK途徑抑制胰島細(xì)胞胰島素的分泌的結(jié)論。因此，為明確小檗堿對β細(xì)胞功能的影響，我們采用軟脂酸和高糖分別誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞，進(jìn)一步觀察小檗堿對NIT-1胰島β細(xì)胞胰島素分泌的急慢性調(diào)節(jié)作用和機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑

小檗堿、腺苷酸活化蛋白激酶即AMPK激活劑（5-Aminoimidazole-4-carboxamide-β-D-ribofuranoside，AICAR）、腺苷酸活化蛋白激酶抑制劑即AMPK inhibitor(Compound C)、胰蛋白酶、軟脂酸（PA）、牛血清白蛋白（BSA），均購自美國 Sigma 公司；胎牛血清（FBS）、1640 培養(yǎng)基、DMEM 高糖培養(yǎng)基、二甲基亞砜，均購自美國Thermo公司；MTT試劑盒、血清胰島素放免試劑盒，均購自北方生物技術(shù)研究所（中國）。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)

NIT-1細(xì)胞為華中科技大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院的NIT-1細(xì)胞株的傳代細(xì)胞，將傳代后的細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用分別含有100 U/mL青霉素，100 U/mL鏈霉素，10%胎牛血清的1 640培養(yǎng)基在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。NIT-1細(xì)胞生長到 70%～80% 融合后，棄原培養(yǎng)基，分別加入高糖或者高脂培養(yǎng)基中誘導(dǎo)24 h后建立高糖模型和高脂模型。

1.3 MTT實(shí)驗(yàn)

采用MTT法檢測細(xì)胞增殖。將NIT-1細(xì)胞以1×105的密度接種于96孔板中，待細(xì)胞融合至60%～70%后，分別在完全培養(yǎng)基（空白對照組，Con）、高糖培養(yǎng)基（高糖模型組，Mod）和高脂培養(yǎng)基（高脂模型組，Mod）中培養(yǎng)，然后加入含有不同濃度的小檗堿（1 μmol/L，3 μmol/L，10 μmol/L，30 μmol/L，100 μmol/L）進(jìn)行干預(yù)，其中每組各設(shè)定4個(gè)復(fù)孔。干預(yù)24 h后加入 5 g/L MTT 溶液 50 μL，在 37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中放置4 h后，倒掉培養(yǎng)液，加入100 μL DMSO，混合均勻后，將酶標(biāo)儀設(shè)定為490 nm檢測吸光度。

1.4 胰島素分泌實(shí)驗(yàn)

將細(xì)胞以1×105的密度接種到24孔板中，待細(xì)胞生長至60%～70%融合后分別給予不同的培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基、高糖培養(yǎng)基、高脂培養(yǎng)基）培養(yǎng)24 h后予以干預(yù)，具體方法如下：棄去板中的培養(yǎng)基，用無糖的克林緩沖液（KRBH）[NaCl 118.5 mmol/L，CaCl2·2H2O 2.54 mmol/L，KH2PO41.19 mmol/L，KCl 4.74 mmol/L，NaHCO325 mmol/L，MgSO41.19 mmol/L，Hepes10 mmol/L，1 g/L 牛血清蛋白，pH 7.4]清洗 1次，然后再用相同濃度的KRBH預(yù)孵育30 min以使細(xì)胞處于基礎(chǔ)代謝狀態(tài)，棄去KRBH，再將各種條件不同的KRBH （含葡萄糖 2.8 mmol/L、含葡萄糖16.7 mmol/L、含小檗堿并同時(shí)含有葡萄糖 2.8 mmol/L或者16.7 mmol/L、含軟脂酸0.4 mmol/L、含小檗堿并同時(shí)含有軟脂酸 0.4 mmol/L）孵育1 h，收集上清液保存于-20℃待測，用放射免疫試劑盒測定。

1.5 AMPK蛋白表達(dá)測定

將NIT-1細(xì)胞用高糖高脂誘導(dǎo)24 h后提取蛋白，檢測蛋白濃度。每組各取總蛋白30 μg，分別經(jīng)恒定電壓分離（100 V，2 h）和恒定電流（278 mA）進(jìn)行轉(zhuǎn)膜45 min，轉(zhuǎn)膜至NC膜上后用TBST溶液在室溫環(huán)境中封閉2 h。加入一抗在4℃過夜，用TBST漂洗5次，每次10 min，然后加入二抗室溫反應(yīng)1 h，TBST漂洗5次，每次10 min。最后用Odyssey系統(tǒng)掃描后進(jìn)行分析。其中一抗為鼠抗AMPK（1∶4 000稀釋），二抗為熒光標(biāo)記的兔抗鼠（1∶20 000稀釋）。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 MTT法檢測小檗堿對NIT-1細(xì)胞增殖的影響

結(jié)果表明，空白對照組：與對照組BBR 0 μmol/L相比，小檗堿在 1、3、10、30 μmol/L 時(shí)對細(xì)胞的增殖無明顯影響，在100 μmol/L時(shí)明顯降低NIT-1細(xì)胞的存活率 （P＜0.05）。高糖模型組：與對照組BBR 0 μmol/L相比，小檗堿在1 μmol/L時(shí)對細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，在3、10、30 μmol/L時(shí)細(xì)胞的增殖略有下降，小檗堿在100 μmol/L時(shí)細(xì)胞的存活率明顯下降 （P＜0.05）。高脂模型組：與對照組BBR 0 μmol/L相比，小檗堿在1、3、10 μmol/L時(shí)NIT-1細(xì)胞存活率略有下降，小檗堿在30、100 μmol/NIT-1細(xì)胞存活率明顯下降（P＜0.05）。 各組細(xì)胞吸光度見表 1。

表1 MTT法檢測小檗堿在不同培養(yǎng)基中對NIT-1細(xì)胞的增殖抑制作用 （n=4）

2.2 小檗堿對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響

2.2.1 10 μmo/L小檗堿對NIT-1細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)、葡萄糖刺激胰島素分泌（GSIS）和軟脂酸刺激胰島素分泌（PSIS）的影響

結(jié)果表明，與對照組相比，10 μmo/L小檗堿對NIT-1細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)、GSIS和PSIS均有抑制作用。見表2。

表2 10 μmo/L小檗堿對NIT-1細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)（Glu 2.8 mmol/L）、GSIS（Glu 16.7 mmol/L）和 PSIS（PA 0.4 mmol/L）的影響 （n=4，mu/L）

2.2.2 10 μmo/L小檗堿干預(yù)24 h對高糖誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響 結(jié)果表明，與模型組比較，小檗堿組的基礎(chǔ)分泌量和糖刺激分泌量均增加（P＜0.05，P＜0.01）； 陽性對照組即 AMPK 激動劑AICAR組的基礎(chǔ)分泌量減少（P＜0.01）；陰性對照組即AMPK抑制劑Compound C組糖刺激分泌量增加（P＜0.05）。 見表 3。

表3 10 μmo/L小檗堿干預(yù)24 h對高糖誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響 （n=4,mu/L）

2.2.3 10 μmo/L小檗堿干預(yù)24 h對高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響 結(jié)果表明，與模型組比較，小檗堿組的基礎(chǔ)分泌量和糖刺激分泌量均增加（P＜0.01）；與模型組比較，陽性對照AMPK 激動劑AICAR組基礎(chǔ)分泌量和糖刺激分泌量均有一定降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；陰性對照即AMPK抑制劑Compound C組基礎(chǔ)分泌量和糖刺激分泌量均增加（P＜0.05）。 見表 4。

表4 10 μmo/L小檗堿干預(yù)24 h對高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的影響 （n=4,mu/L）

2.3 小檗堿對NIT-1細(xì)胞AMPK蛋白表達(dá)的影響

2.3.1 小檗堿對高糖誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞AMPK蛋白表達(dá)的影響 將NIT-1細(xì)胞分為對照組、模型組、小檗堿組、陽性對照組（AICAR）、陰性對照組（Compound C）及雷帕霉素（Rapamycin，RAPA）組。各組細(xì)胞分別給予完全培養(yǎng)基及含有小檗堿（10 μmol/L）、AICAR （0.5 mmol/L）、Compound C（10 μmol/L）、RAPA（50 nmol/L）的高糖培養(yǎng)基進(jìn)行干預(yù)，干預(yù)24 h后運(yùn)用Western-blot法檢測AMPK蛋白的表達(dá)。 結(jié)果表明，25 mmol/L葡萄糖作用24 h后，模型組的AMPK蛋白表達(dá)較對照組明顯降低 （P＜0.05，P＜0.01）； 而與模型組比較， 小檗堿、AICAR、RAPA均可以一定程度促進(jìn)AMPK蛋白的表達(dá) （P＜0.05，P＜0.01），Compound C 則抑制 AMPK蛋白的表達(dá)（P＜0.05，P＜0.01）。 見圖 1-2。

2.3.2 小檗堿對高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞AMPK蛋白表達(dá)的影響 將NIT-1細(xì)胞給予完全培養(yǎng)基及分別含有小檗堿（10 μmol/L）、AICAR（0.5 mmol/L）、Compound C（10 μmol/L）、RAPA（50 nmol/L）的高脂培養(yǎng)基干預(yù)24 h，采用Western-blot檢測AMPK蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明，0.25 mmol/L軟脂酸作用24 h后，模型組的AMPK蛋白表達(dá)較對照組明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）；與模型組比較，小檗堿、AICAR、RAPA均可以一定程度促進(jìn)AMPK蛋白的表達(dá) （P＜0.05，P＜0.01），Compound C 則抑制 AMPK 蛋白的表達(dá)（P＜0.05，P＜0.01）。 見圖 3-4。

圖1高糖誘導(dǎo)的NIT-1胰島細(xì)胞中各組AMPK蛋白的表達(dá) （n=4）

圖2高糖誘導(dǎo)的NIT-1胰島細(xì)胞中各組AMPK蛋白的表達(dá) （n=4）

圖3高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞各組AMPK蛋白的表達(dá) （n=4）

圖4高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞各組AMPK蛋白的表達(dá) （n=4）

3 討論

當(dāng)今，伴隨著社會人口老齡化的發(fā)展、飲食結(jié)構(gòu)的不合理、肥胖人數(shù)的增加，2型糖尿?。═2DM）發(fā)病率一直呈上升趨勢。T2DM發(fā)病的重要特征是胰島素抵抗（insulin resistance，IR）和胰島β細(xì)胞功能不足。胰島素抵抗一方面是糖尿病進(jìn)展和血糖難以控制的一個(gè)重要原因，另一方面因?yàn)榇鷥斝苑置谝葝u素也會導(dǎo)致殘存的胰島β細(xì)胞的數(shù)量和生理功能進(jìn)一步降低最終失代償出現(xiàn)胰島β細(xì)胞功能的喪失，表現(xiàn)為胰島素分泌的絕對不足。因此降糖藥如何通過調(diào)節(jié)胰島β細(xì)胞胰島素的分泌，一方面穩(wěn)定地控制血糖，另一方面能較好地保護(hù)胰島β細(xì)胞的功能也成為臨床治療糖尿病時(shí)的一個(gè)關(guān)注熱點(diǎn)。

小檗堿，又名黃連素，是中藥黃連的主要成份；黃連性苦味寒，具有清熱燥濕的療效。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為機(jī)體濕熱內(nèi)蘊(yùn)、耗傷陰津、陰虛燥熱從而導(dǎo)致消渴病，故黃連是我國中醫(yī)治療糖尿病的經(jīng)典用藥。近年來小檗堿也廣泛應(yīng)用于糖尿病的治療，并取得了肯定的療效。戴建峰等[9]試驗(yàn)后提出，經(jīng)黃連素治療后,2型糖尿病大鼠 “三多一少”癥狀明顯改善,血糖、血壓、血脂明顯降低。但現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究對小檗堿的降糖機(jī)制還并未完全闡明。小檗堿在外周組織可能是通過抑制肝臟的糖原異生和（或）促進(jìn)葡萄糖酵解而發(fā)揮降血糖作用。在胰島細(xì)胞中，小檗堿對胰島素分泌的調(diào)節(jié)作用作為一種降糖機(jī)制也是研究熱點(diǎn)，王永剛等[10]提出黃連及其黃連素具有一定的降糖作用,并且推論黃連素和黃連總堿的降糖作用可能不是通過胰島素的分泌和釋放，而是通過受體后效應(yīng)增加胰島素敏感性。到目前為止，小檗堿對胰島β細(xì)胞胰島素釋放和分泌的影響存在著無影響、促進(jìn)分泌或抑制分泌這三種互相矛盾的報(bào)道，至今沒有定論[2]。

我們的前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小檗堿可以通過促進(jìn)胰島素分泌起到降糖作用。目前研究表明小檗堿是AMPK的激活劑[11-13]。在外周組織如肝臟、脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞中激活A(yù)MPK后對物質(zhì)代謝起到了重要作用[14-17]；在胰腺組織中，邵莉等[16-19]人發(fā)現(xiàn)抑制AMPK活性可以促進(jìn)胰島素分泌，而降糖藥二甲雙胍可通過激活A(yù)MPK活性抑制胰島素分泌。故得出一個(gè)推論性假設(shè)：AMPK的激活與胰島素的分泌可能呈負(fù)相關(guān)。故本實(shí)驗(yàn)旨在探討小檗堿是否僅作為一種AMPK激活劑來調(diào)節(jié)NIT-1胰島細(xì)胞胰島素的分泌作用，以期能進(jìn)一步研究小檗堿如何通過調(diào)節(jié)胰島細(xì)胞胰島素分泌來降血糖的作用機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著小檗堿濃度的增加，對NIT-1細(xì)胞生長抑制作用逐漸增強(qiáng)，并且在100 μmol/L時(shí)對NIT-1細(xì)胞出現(xiàn)明顯抑制作用。分別用葡萄糖和軟脂酸誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞成為高糖和高脂胰島β細(xì)胞模型后，小檗堿在濃度為30 μmol/L時(shí)即有明顯毒性。NIT-1細(xì)胞與正常胰島β細(xì)胞功能相似，可作為分析胰島分泌功能的一種理想的細(xì)胞模型[20]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在正常NIT-1胰島細(xì)胞中，小檗堿可以降低基礎(chǔ)分泌量、糖刺激分泌量及軟脂酸刺激的胰島素分泌量，且隨著小檗堿濃度的增加，其對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的抑制作用加強(qiáng)。分別用葡萄糖和軟脂酸誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞成為高糖和高脂胰島β細(xì)胞模型后，分別用小檗堿進(jìn)行短時(shí)相干預(yù)（1 h）和長時(shí)相干預(yù)（24 h），結(jié)果表明，在短時(shí)相干預(yù)中小檗堿可以抑制正常對照組及模型組的糖刺激胰島素分泌；而小檗堿干預(yù)24 h后顯示小檗堿一定程度促進(jìn)模型組的胰島素分泌包括基礎(chǔ)分泌量和糖刺激分泌量。

綜上所述，在正常組NIT-1細(xì)胞中，小檗堿可以抑制基礎(chǔ)分泌量、糖刺激分泌量和軟脂酸刺激胰島素分泌量，且隨著濃度的增加抑制作用增強(qiáng)，提示小檗堿可能通過激活A(yù)MPK活性，降低胰島素分泌的作用從而保護(hù)胰島細(xì)胞功能。小檗堿對高糖、高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的急相作用（1 h），表明小檗堿可以抑制高糖、高脂模型NIT-1細(xì)胞的糖刺激胰島分泌量，而小檗堿對高糖、高脂誘導(dǎo)的NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的持續(xù)作用（24 h），則表明一定程度上小檗堿又可以促進(jìn)高糖、高脂模型NIT-1細(xì)胞的胰島素分泌包括基礎(chǔ)和糖刺激胰島素分泌量。小檗堿對NIT-1細(xì)胞胰島素分泌的急相和持續(xù)作用分別表現(xiàn)為抑制和促進(jìn)作用，提示小檗堿對胰島素分泌的調(diào)節(jié)可能具有非常復(fù)雜的機(jī)制，不僅有可能作為胰島素增敏劑來通過抑制胰島素分泌，改善胰島素抵抗，保護(hù)胰島β細(xì)胞，減緩病情的進(jìn)展；而且有可能在長期用藥過程中作為溫和的胰島素促泌劑，通過保護(hù)胰島β細(xì)胞、促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素來調(diào)節(jié)糖代謝，緩解臨床癥狀。綜上使得小檗堿在2型糖尿病的臨床治療中存在廣闊的應(yīng)用前景。而且小檗堿可能并不僅僅作為一種AMPK激活劑來調(diào)節(jié)胰島素分泌的機(jī)制，其調(diào)節(jié)胰島素分泌機(jī)制的同時(shí)，也可能與cAMP及鈣離子通道等其他途徑存在著一定的聯(lián)系，還需要我們進(jìn)一步研究和探討。

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（本文編輯 李 杰）

Effect of Berberine on Insulin Secretion in NIT-1 Cells

HU Yayun1,DONG Hui2
(1.The First Hospital of Wuhan,Wuhan,Hubei 430000,China；2.Institute of Integrative Traditional Chinese and Western Medicine of Tongji Hospital,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan,Hubei 430030,China)

ObjectiveTo investigate the effect of berberine on insulin secretion of NIT-1 cells and the possible molecular mechanism.MethodsThe proper concentrations of berberine,insulin secretion level of NIT-1 cells,protein expression of AMP-activated protein kinase (AMPK)were detected by MTT,radioimmunoassay,and Western blotting.ResultsIn ordinary culture medium and in high glucose contained cultured medium,berberine significantly inhibited the proliferation of NIT-1 cells at the concentration of 100 μmol/L (P＜0.05).However,berberine significantly inhibited the proliferation of NIT-1 cells in high fat cultured medium.Berberine,at the concentration of 10 μmol/L,acutely (at 1 hour incubation)decreased but chronically (at 24 hours incubation)increased insulin secretion from NIT-1 cells in high glucose and palmitic acid contained culture medium (P＜0.01,P＜0.05).Berberine could promote the expression of AMPK protein in NIT-1 cells induced by high glucose and high fat.ConclusionBerberine not only acts as a AMPK activator to regulate insulin secretion,but also may affect insulin secretion through other pathways.

berberine;NIT-1 cells;insulin

R285

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2017.07.009

2015-12-10

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81673757,30973896)。

胡亞耘，女，碩士，研究方向：內(nèi)分泌及代謝方向，E-mail：407347509@qq.com。