劉亞洋，李 鶴，朱源生

· 心血管病臨床觀察/研究·

芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能、免疫功能及micro RNA155水平的影響

劉亞洋1，李 鶴2，朱源生1

目的 研究芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能和免疫功能、微小RNA(micro RNA)155等的影響。方法 將冠心病慢性心力衰竭病人60例，隨機(jī)分為對照組(30例)及芪參益氣滴丸治療組(30例)。兩組均給予常規(guī)治療，治療組加用芪參益氣滴丸，療程為90 d。觀察治療前后左室收縮末期容積(LVESV)及舒張末容積(LVEDV)、左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，腦鈉肽水平、6 min步行距離、免疫細(xì)胞亞群、micro RNA155等指標(biāo)。結(jié)果 兩組治療后左室射血分?jǐn)?shù)、左心室舒張末期容積、左室收縮末期容積均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。兩組治療后N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)、6 min步行距離均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。治療組治療后micro RNA155表達(dá)量較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與治療前比較，對照組治療后，CD4、CD8、CD4/CD8無明顯改變(P>0.05)，治療組治療后，CD4、CD4/CD8有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CD8無明顯變化(P>0.05)。血清micro RNA155表達(dá)水平與lg(NT-proBNP)呈正相關(guān)(r=0.695，P<0.01)；與LVEF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.539，P<0.01)；與CD4呈負(fù)相關(guān)(r=-0.581，P<0.05)。結(jié)論 冠心病心力衰竭病人血清micro RNA155水平升高，免疫細(xì)胞亞群比例發(fā)生改變，常規(guī)藥物治療基礎(chǔ)上加用芪參益氣滴丸治療能進(jìn)一步改善心臟功能，糾正免疫失衡。

冠心病；心力衰竭；芪參益氣滴丸；微小RNA155

心力衰竭是多種心臟疾病的最終發(fā)展?fàn)顟B(tài)，目前冠心病已成為心力衰竭常見的病因。冠心病因心肌長期血液供應(yīng)不足或冠脈血管閉塞后未早期建立有效血運(yùn)重建，導(dǎo)致心臟功能下降、心肌代謝異常，可激活一系列炎癥反應(yīng)乃至心臟重構(gòu)，免疫系統(tǒng)相關(guān)網(wǎng)絡(luò)也參與其中。

芪參益氣滴丸是提取黃芪、丹參、三七、降香等有效成分制成，該藥對冠心病病人的癥狀、生活質(zhì)量均有改善。本研究探討常規(guī)西藥治療和中西醫(yī)結(jié)合對心臟功能改善情況的差異，并研究對免疫系統(tǒng)的影響情況。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年3月—2016年10月在濰安市第二人民醫(yī)院門診就診的冠心病所致慢性心力衰竭病人60例，診斷標(biāo)準(zhǔn)符合Framingham 標(biāo)準(zhǔn)：左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)<45%和/或左心室舒張末期內(nèi)徑>55 mm(男)或>50 mm(女)。排除伴有肺源性心臟病、風(fēng)濕性心臟病、嚴(yán)重內(nèi)分泌疾病、嚴(yán)重肝腎功能異常、嚴(yán)重感染性疾病、妊娠、血液透析、惡性疾病。隨機(jī)分為兩組，對照組(30例)及和參益氣滴丸治療組(30例)。對照組給予利尿劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、β受體阻滯劑、洋地黃等常規(guī)基礎(chǔ)治療。治療組：在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用芪參益氣滴丸，每次0.5 g，每日3次。連續(xù)治療3個(gè)月。收集所有研究對象的臨床資料，包括性別、年齡、吸煙史、體重指數(shù)等，同時(shí)收集N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)等指標(biāo)及超聲心動(dòng)圖檢查。

1.2 方法

1.2.1 生化指標(biāo) 所有病人清晨抽取空腹全血樣品5 mL，于室溫下4 000 r/min離心3 min，留取上層血清液，保存于-80 ℃冰箱備用。按miRNA提取試劑盒說明書提供的方法抽提總RNA，熒光定量PCR檢測血漿微小RNA(micro RNA)155的表達(dá)。micro RNA155的相對表達(dá)水平采用2-△△CT方法計(jì)算。T細(xì)胞CD4、CD8亞群檢測采用抗體致敏的紅細(xì)胞花環(huán)法檢出。

1.2.2 心功能指標(biāo) 采用多普勒超聲心動(dòng)圖檢查測定治療前后左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)、左心室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期容積(LVESV)等，所有數(shù)值均測定3個(gè)心動(dòng)周期取其均值。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床資料比較 治療前，治療組與對照組在年齡、性別、高血壓病、糖尿病史、體重指數(shù)、吸煙史、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。詳見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2 兩組病人心功能和生化指標(biāo)比較 兩組治療后LVEF、LVESV、LVEDV均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組LVEF、LVESV較對照組改善明顯(P<0.05)。兩組治療后NT-proBNP、6 min步行距離均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組病人心功能和生化指標(biāo)比較(±s)

2.3 兩組病人micro RNA155及免疫功能比較 治療組治療后，micro RNA155表達(dá)水平較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與治療前比較，對照組治療后，CD4、CD8、CD4/CD8無明顯改變(P>0.05)，治療組治療后，CD4、CD4/CD8有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CD8無明顯變化(P>0.05)；兩組治療后比較，治療組CD4、CD4/CD8較對照組改善明顯(P<0.05)。詳見表3。

組別時(shí)間()治療組治療前±±±±治療后 ±)) ±))± ±))對照組治療前±±±±治療后±±±± 與同組治療前比較，)<；與對照組治療后比較，)<。

2.4 micro RNA155與LVEF、NT-proBNP、CD4、CD8相關(guān)性分析 結(jié)果顯示，micro RNA155表達(dá)水平與 lg(NT-proBNP)呈正相關(guān)(r=0.695，P<0.01)；與LVEF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.539，P<0.01)；與CD4負(fù)相關(guān)(r=-0.581，P<0.05)。

3 討 論

micro RNA是一類高度保守的內(nèi)源性非編碼單鏈的小RNA分子，在血漿中保持穩(wěn)定水平，通過多個(gè)水平調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)，參與炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等病理進(jìn)程[1]。其在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展病理進(jìn)程中發(fā)揮重要作用[2]，在心力衰竭病理生理中起重要作用，參與如纖維化等疾病發(fā)展進(jìn)程。micro RNA155是micro RNAs家族中的一員，研究證實(shí)micro RNA155是心臟炎癥及和心肌肥大的重要介質(zhì)[3]；研究顯示敲除micro RNA155后左室功能改善，能縮小心肌梗死后面積，減少膠原降解，抑制成纖維細(xì)胞增殖及分化為心肌成纖維細(xì)胞，改善心臟重構(gòu)，micro RNA155過表達(dá)則產(chǎn)生相反的效應(yīng)[4]。本研究顯示在心力衰竭人群中micro RNA155水平升高，治療后其水平下降，提示其可能作為心力衰竭的標(biāo)志物應(yīng)用于臨床，與BNP水平的正相關(guān)性及與LVEF的負(fù)相關(guān)性也佐證這種可能。

慢性心力衰竭與炎癥反應(yīng)、神經(jīng)體液因子、免疫系統(tǒng)改變、心肌能量耗竭等密切相關(guān)，而這些因素之間又相互聯(lián)系、相互影響，形成關(guān)聯(lián)的網(wǎng)絡(luò)和病理系統(tǒng)。T淋巴細(xì)胞是人體細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞，分為CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞亞群。CD4+細(xì)胞是輔助性T細(xì)胞，CD8+細(xì)胞為殺傷性細(xì)胞，介導(dǎo)細(xì)胞免疫。淋巴細(xì)胞亞群比例失衡與慢性心力衰竭相關(guān)[5]，慢性心力衰竭病人淋巴細(xì)胞減少，CD4+細(xì)胞亞群減少，在老年心力衰竭人群中可出現(xiàn)CD8+細(xì)胞增加[6]。micro RNA155在巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞及T細(xì)胞等免疫細(xì)胞中表達(dá)，在細(xì)胞活化中起重要作用。micro RNA155可直接作用于多個(gè)靶點(diǎn)，如轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子、蛋白受體及酶類等，進(jìn)一步影響免疫細(xì)胞功能，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮正向或負(fù)向調(diào)節(jié)作用[7-9]。

芪參益氣滴丸由黃芪、丹參、三七、降香等藥物組成，具有活血止痛、益氣通脈之功，用于治療氣虛血瘀型胸痹心痛。在心力衰竭防治中有其獨(dú)特的療效[10]。有研究提示，芪參益氣滴丸可通過影響炎癥反應(yīng)途徑抑制心室肥厚和纖維化[11-12]。Lin等[13]研究發(fā)現(xiàn)，芪參益氣滴丸可通過調(diào)節(jié)能量代謝途徑改善缺血再灌注損傷所致心肌結(jié)構(gòu)及功能異常。Chen等[14]研究提示，大鼠心肌缺血再灌注損傷時(shí)芪參益氣滴丸可通過抗氧化應(yīng)激及線粒體保護(hù)發(fā)揮心臟保護(hù)作用，改善心室功能和能量代謝。

本研究結(jié)果表明，經(jīng)芪參益氣滴丸治療后LVEF、LVESV較治療前有明顯改善，說明芪參益氣滴丸可增強(qiáng)左室收縮功能，6 min步行距離提示芪參益氣滴丸能明顯改善病人的心臟功能。本研究結(jié)果提示，冠心病心力衰竭病人應(yīng)用芪參益氣滴丸治療組較對照組CD4、CD4/CD8明顯升高，提示該藥物可影響免疫細(xì)胞亞群的動(dòng)態(tài)平衡，從而改善心力衰竭病人的免疫功能。micro RNA155影響免疫系統(tǒng)功能，micro RNA155與CD4水平負(fù)相關(guān)，提示micro RNA155可能與淋巴細(xì)胞亞群比例失衡相關(guān)。芪參益氣滴丸治療心力衰竭后micro RNA155表達(dá)量明顯下調(diào)，CD4升高。本研究提示芪參益氣滴丸治療心力衰竭可能是通過多個(gè)層面影響免疫系統(tǒng)。

綜上所述，冠心病心力衰竭病人micro RNA155升高，免疫細(xì)胞亞群比例發(fā)生改變，常規(guī)藥物治療基礎(chǔ)上加用芪參益氣滴丸治療能進(jìn)一步改善心臟功能，糾正心力衰竭病人的免疫系統(tǒng)失衡狀態(tài)。

[1] Costantino S，Paneni F，Lüscher T，et al.MicroRNA profiling unveils hyperglycaemic memory in the diabetic heart[J].Eur Heart J，2016，37(6)：572-576.

[2] Marques F，Vizi D，Khammy O，et al.The transcardiac gradient of cardio-microRNAs in the failing heart[J].Eur J Heart Fail，2016，18(8)：1000-1008.

[3] Seok H，Chen J，Kataoka M，et al.Loss of microRNA-155 protects the heart from pathological cardiac hypertrophy[J].Circ Res，2014，114(10)：1585-1595.

[4] He W，Huang H，Xie Q，et al.miR-155 knockout in fibroblasts improves cardiac remodeling by targeting tumor protein p53-inducible nuclear protein 1[J].J Cardiovasc Pharmacol Ther，2016，21(4)：423-435.

[5] Laroumanie F，Douin-Echinard V，Pozzo J，et al.CD4+T cells promote the transition from hypertrophy to heart failure during chronic pressure overload[J].Circulation，2014，129(21)：2111-2124.

[6] Moro-García MA，Echeverría A，Galán-Artímez MC，et al.Immunosenescence and inflammation characterize chronic heart failure patients with more advanced disease[J].Int J Cardiol，2014，174(3)：590-599.

[7] Lind EF，Elford AR，Ohashi PS.Micro-RNA 155 is required for optimal CD8+T cell responses to acute viral and intracellular bacterial challenges[J].J Immunol，2013，190(3)：1210-1216.

[8] Dudda J C，Salaun B，Ji Y，et al.MicroRNA-155 is required for effector CD8+T cell responses to virus infection and cancer[J].Immunity，2013，38(4)：742-753.

[9] Vigorito E，Kohlhaas S，Lu D，et al.miR-155：an ancient regulator of the immune system[J] Immunol Rev，2013，253(1)：146-157.

[10] 王拴虎，毛靜遠(yuǎn)，侯雅竹，等.西藥常規(guī)加用芪參益氣滴丸治療慢性心力衰竭隨機(jī)對照試驗(yàn)的系統(tǒng)評價(jià)[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，33(11)：1468-1475.

[11] Li YC，Liu YY，BH Hu，et al.Attenuating effect of post-treatment with QiShen YiQi Pills on myocardial fibrosis in rat cardiac hypertrophy[J].Clinical Hemorheology & Microcirculation，2012，51(3)：177-191.

[12] Ma S，Ma J，Ding C，et al.GW25-e4167 QiShen YiQi Pills ameliorates ventricular fibrosis and dysfunction via regulation the expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in the isoproterenol-induced myocardial fibrosis rats[J].J Am Coll Cardiol，2014，64(16)：C81.

[13] Lin SQ，Wei XH，Huang P，et al.Qi Shen YiQi Pills? prevent cardiac ischemia-reperfusion injury via energy modulation[J].Int J Cardiol，2013，168(2)：967-974.

[14] Chen JR，Wei J，Wang LY，et al.Cardioprotection against ischemia/reperfusion injury by QiShen YiQi Pill? via ameliorate of multiple mitochondrial dysfunctions[J].Drug Design，Development and Therapy，2015，9：3051-3066.

(本文編輯薛妮)

1.江蘇省淮安市第二人民醫(yī)院(江蘇淮安 223002)，E-mail：yayangliu@qq.com；2.江蘇省淮安市中醫(yī)院

信息：劉亞洋，李鶴，朱源生.芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能、免疫功能及micro RNA155水平的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2017，15(11)：1342-1344.

R542.2 R289.5

B

10.3969/j.issn.1672-1349.2017.11.015

1672-1349(2017)11-1342-03

2017-03-06)