宋燕，肖君

（航天中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京100049）

雅培i2000梅毒螺旋體特異性抗體檢測(cè)閾值及假陽性結(jié)果分析

宋燕，肖君

（航天中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京100049）

目的探討雅培i2000化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法（CMIA）篩查梅毒螺旋體特異性抗體的測(cè)量閾值，并對(duì)CMIA檢測(cè)出的假陽性樣本進(jìn)行分析。方法對(duì)航天中心醫(yī)院2014年7月到2016年11月間49 720例樣本進(jìn)行CMIA法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體，篩查出的陽性樣本進(jìn)行TPPA確證實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用SPSS13.0對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果49 720例樣本中CMIA法篩查出919例陽性樣本。919例陽性樣本進(jìn)行TPPA確證，檢測(cè)出真陽性樣本650例，假陽性樣本269例。CMIA法S/CO值＞10的樣本，真陽性率為100.0%。年齡小于20歲的患者和婦產(chǎn)科就診的患者假陽性率較高，分別高達(dá)88.9%和50.0%，與其他組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論CMIA法檢測(cè)梅毒特異性抗體的敏感性高，可作為篩查實(shí)驗(yàn)。CMIA法檢測(cè)梅毒特異性抗體的S/CO值在1～10之間的樣本需要進(jìn)行TPPA確證，而S/CO＞10的樣本無需TPPA驗(yàn)證，可直接發(fā)陽性報(bào)告。年齡小于20歲的患者及婦產(chǎn)科就診患者假陽性率較高，檢測(cè)報(bào)告需慎重發(fā)出。

梅毒螺旋體；化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析；梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗(yàn)法

梅毒是由蒼白密螺旋體引起的一種慢性全身性傳染性疾病，病程長(zhǎng)，臨床表現(xiàn)多樣，可累及多個(gè)器官組織，近年來梅毒的發(fā)病率有快速上升的趨勢(shì)，使得梅毒成為一個(gè)十分嚴(yán)重的社會(huì)公共衛(wèi)生問題[1]。血清學(xué)檢測(cè)是梅毒診斷的主要依據(jù)。美國雅培公司的Architect-i2000 SR全自動(dòng)免疫分析儀采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法(CMIA)檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體，具有敏感性高等優(yōu)點(diǎn)，尤其是操作簡(jiǎn)便快速，成為實(shí)驗(yàn)室常用的篩查方法，但是該方法檢測(cè)梅毒存在一定的假陽性率，假陽性結(jié)果可對(duì)患者造成潛在的家庭矛盾，激化醫(yī)患關(guān)系。梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗(yàn)法(TPPA）檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體具有較高的敏感性和特異性，如果呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，基本可確診為感染梅毒，故常被用來作為梅毒檢測(cè)的確證實(shí)驗(yàn)，但是該方法操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，不適宜大批標(biāo)本的篩查[2-3]。

綜合考慮兩種梅毒特異性抗體的檢測(cè)方法及本醫(yī)院的實(shí)際情況，本實(shí)驗(yàn)室的梅毒檢測(cè)流程是采用敏感度更高的CMIA法進(jìn)行篩查，篩查出來的所有陽性樣本免費(fèi)進(jìn)行TPPA確證，但由于TPPA經(jīng)濟(jì)成本高，且操作繁瑣，給實(shí)驗(yàn)室人員增加了很多工作量。基于此，我們對(duì)本實(shí)驗(yàn)室近兩年來的i2000檢測(cè)的樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，探索化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體的測(cè)量閾值，希望在保證檢測(cè)質(zhì)量的前提下，節(jié)省成本并減輕實(shí)驗(yàn)室人員的工作量，同時(shí)對(duì)假陽性數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集航天中心醫(yī)院2015年1月到2016年11月的患者49 720例血清標(biāo)本，使用雅培i2000進(jìn)行梅毒特異性抗體檢測(cè)，篩查出的陽性樣本進(jìn)行TPPA確證。

1.2 儀器和試劑美國雅培Architect-i2000 SR全自動(dòng)免疫分析儀和相應(yīng)Syphilis TP配套試劑，包括校準(zhǔn)品和質(zhì)控品；梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗(yàn)法(TPPA）試劑盒賽樂迪亞，由日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供。所有操作均參照試劑盒和儀器說明書進(jìn)行。

1.3 檢測(cè)流程CMIA法篩查出的梅毒檢測(cè)結(jié)果S/CO小于1的樣本無需進(jìn)行TPPA進(jìn)行驗(yàn)證，只對(duì)S/CO大于1的疑似陽性樣本進(jìn)行TPPA確證。對(duì)篩查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算出假陽性率和陽性預(yù)測(cè)值，并分析雅培i2000檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體的測(cè)量閾值，要求當(dāng)測(cè)量結(jié)果大于閾值時(shí)，TPPA確證結(jié)果真陽性率為100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，不同組之間率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測(cè)梅毒特異性抗體比較49 720例血清樣本檢測(cè)梅毒特異性抗體，當(dāng)以廠家給定的參考值即S/CO的臨界值是1時(shí)，篩查陽性樣本共919例，陽性率為1.8%(919/49 720）。通過TPPA法對(duì)上述919例樣本進(jìn)行確證，得到真陽性樣本650例，陰性樣本269例，真陽性率為70.7%(650/919），CIMA法篩查梅毒螺旋體特異性抗體假陽性率為0.5%(269/49 720）。CMIA法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體敏感性是100%(650/ 650)。采用SPSS13.0對(duì)兩種方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.826，P=0.000）。然后根據(jù)陽性樣本的S/CO值劃分為1～3、3～5、5～7、7～10及＞10五段，結(jié)果顯示，隨著S/CO值的增加，梅毒特異性抗體的真陽性率逐漸增高，當(dāng)S/CO＞10時(shí)，真陽性率可達(dá)100%，不同值段的真陽性率見表1。

表1 650例陽性樣本在不同S/CO值段的TPPA結(jié)果分布(例)

2.2 不同年齡組患者梅毒假陽性率的分布將CMIA法篩查出來的919例陽性樣本數(shù)據(jù)進(jìn)一步分析，根據(jù)年齡將患者劃分為不同的年齡組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同年齡組的患者假陽性率存在一定的差異，在小于20歲年齡組里，患者假陽性率高達(dá)88.9%，見表2。采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)一步檢測(cè)不同年齡組間的假陽性率是否存在差異，結(jié)果顯示CMIA法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體在三組患者間的假陽性率均存在差異，P值均小于0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表3。

表2 不同年齡組患者梅毒假陽性率的分布(例)

表3 不同年齡組間假陽性率的χ2檢驗(yàn)結(jié)果

2.3 不同就診科室患者梅毒特異性抗體假陽性率919例CMIA法篩查陽性患者包括男性508例，假陽性例數(shù)136例，假陽性率為26.8%(136/508），女性411例，假陽性例數(shù)133例，假陽性率為32.4%(133/ 411），采用SPSS13.0 χ2檢驗(yàn)檢測(cè)不同性別患者組間梅毒螺旋體特異性抗體假陽性情況，χ2=3.427，P=0.064，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。919例梅毒特異性抗體初篩陽性患者，根據(jù)就診科室不同分為內(nèi)科組、外科組、婦產(chǎn)科組和皮膚性病科組，不同組間患者的假陽性率不同，其中婦產(chǎn)科組的假陽性率最高，皮膚性病科組患者的假陽性率最低，見表4。采用SPSS13.0 χ2檢驗(yàn)進(jìn)一步檢測(cè)不同就診科室間的假陽性率是否存在差異，結(jié)果顯示，除了內(nèi)科組和外科組間的假陽性率之間比較，χ2=3.414，P=0.065，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他各組間χ2檢驗(yàn)的P值均小于0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表5。

表4 不同就診科室患者梅毒特異性抗體假陽性率的分布情況（例）

表5 不同就診科室組間假陽性率的χ2檢驗(yàn)結(jié)果

3 討論

《中華人民共和國傳染病防治法》將梅毒列為乙類傳染病，近年來，該傳染病發(fā)病率快速上升，2009年梅毒報(bào)告例數(shù)已經(jīng)上升到甲乙類傳染病的第三位[4]。梅毒的臨床癥狀不典型、多樣，可累及多個(gè)器官，給人體造成嚴(yán)重傷害，這都提示我們梅毒的防治工作非常嚴(yán)峻。目前梅毒患者是梅毒的唯一傳染源，因此及早準(zhǔn)確的篩查可讓患者得到及時(shí)有效的治療，并能降低感染率。

人感染梅毒后產(chǎn)生的梅毒螺旋體特異性抗體，主要是IgG類抗體，可終生穩(wěn)定存在于體內(nèi)，因此，檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體多用來作為該病的篩查方法。多篇文獻(xiàn)報(bào)道證實(shí)，美國雅培公司的Architect-i2000 SR全自動(dòng)免疫分析儀采用CMIA的檢測(cè)方法篩查梅毒，具有很高的靈敏性，其靈敏度甚至高達(dá)100%[5-8]，使其成為很多實(shí)驗(yàn)室首選篩查手段，本實(shí)驗(yàn)室的研究也證實(shí)了這一結(jié)論。但該檢測(cè)方法特異性相對(duì)較差，會(huì)存在假陽性結(jié)果，假陽性結(jié)果會(huì)給患者及其家庭帶來精神傷害，甚至導(dǎo)致醫(yī)療糾紛。TPPA法檢測(cè)梅毒特異性抗體具有特異性高的優(yōu)點(diǎn)，甚至高達(dá)99.9%[9]，彌補(bǔ)了CMIA法的不足，兩者結(jié)合可以避免上述糾紛及矛盾。

本實(shí)驗(yàn)室采取的梅毒檢測(cè)策略是用美國雅培公司的i2000CMIA法篩查，篩查陽性樣本均免費(fèi)加做TPPA確證實(shí)驗(yàn)，這樣就能保證給臨床提供一個(gè)準(zhǔn)確的結(jié)果，由于TPPA操作繁瑣，這在一定程度上增加了工作人員負(fù)擔(dān)。本文通過對(duì)過去近3年的數(shù)據(jù)分析結(jié)論顯示，CMIA法篩查梅毒特異性抗體的敏感性為100%，是理想的篩查實(shí)驗(yàn)。以儀器廠家提供的S/CO= 1為臨界值時(shí)，樣本真陽性率為70.7%，但如果將S/ CO=10設(shè)為閾值時(shí)，檢測(cè)真陽性率可達(dá)100%，故以后對(duì)于S/CO＞10的樣本，無需進(jìn)一步加做TPPA，可直接發(fā)陽性報(bào)告，這在一定程度上可以減輕工作負(fù)擔(dān)。

文獻(xiàn)報(bào)道CMIA法檢測(cè)標(biāo)本出現(xiàn)假陽性的原因有很多種[10]，針對(duì)本實(shí)驗(yàn)室假陽性樣本數(shù)據(jù)我們做了分析，結(jié)論顯示對(duì)于年齡小于20歲的患者組，假陽性率最高，可達(dá)88.9%，與其他年齡組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。分析原因可能是這部分患者年齡較小，相對(duì)性生活少，感染概率低。根據(jù)科室給患者分組，數(shù)據(jù)顯示婦產(chǎn)科組患者假陽性率最高為50.0%，而皮膚性病科組患者假陽性率僅為9.5%，分析原因可能是婦產(chǎn)科患者由于生理狀態(tài)發(fā)生變化，機(jī)體可能產(chǎn)生了一些異常物質(zhì)可與試劑中的抗體發(fā)生非特異結(jié)合，故假陽性率較高，而皮膚性病科就診的患者多有高危生活史，就診目的明確，故假陽性率較低。

根據(jù)本次研究可得出以下結(jié)論：①雅培i2000檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體敏感性高，可繼續(xù)作為我們實(shí)驗(yàn)室的篩查方法；②CMIA法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體如果S/CO＞10，可不用做TPPA法驗(yàn)證，直接發(fā)陽性報(bào)告；③CMIA法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體如果S/CO值在1～10之間，需要加做TPPA確證實(shí)驗(yàn)；④婦產(chǎn)科患者及年齡小于20歲的患者CMIA法篩查梅毒假陽性率較高，這部分患者檢測(cè)結(jié)果需要額外注意，報(bào)告發(fā)出時(shí)需更加慎重。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)室梅毒螺旋體特異性抗體檢測(cè)流程在保證檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)優(yōu)化了檢測(cè)流程，并減少了實(shí)驗(yàn)室人員的工作量，大大提高檢測(cè)效率。同時(shí)對(duì)于婦產(chǎn)科患者或年齡較小的患者在檢測(cè)報(bào)告發(fā)出時(shí)更加慎重，爭(zhēng)取為臨床提供準(zhǔn)確及時(shí)的報(bào)告。

[1]徐峰,張洪為.梅毒感染及其流行特征的回顧性研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(10):1295-1296.

[2]朱曉華.梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版),2013,7(1):110-111.

[3]薄春敏,張靜,俞瓊炎,等.梅毒的檢測(cè)方法及臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(19):2363-2364.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.中國預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃(2010年～2020年)[S].北京:衛(wèi)生部,2010.

[5]鄭炘,劉紋,劉曉敏.ARCHITECT i2000 SR全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(18):2246-2247.

[6]趙娟,譚延國.化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒抗體的實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2008,22(10):626-627.

[7]譚延國,張巖,李畸.微粒子化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒抗體的臨床應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,32(l):90-91.

[8]Marangoni A,Moroni A,Accardo S,et al.Laboratory diagnosis of syphilis with automated immunoassays[J].Journal of Clinical LaboratoryAnalysis,2009,23(l):l-6.

[9]李志艷,劉平,高健,等.梅毒螺旋體抗體篩查方法的比較性研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,35(12):1176-1179.

[10]張保平,劉珊,韓艷秋.使用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)26707例血清抗梅毒螺旋體特異性抗體以及結(jié)果假陽性率分析[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2015,30(2):70-73.

Measurement threshold of specific antibody of Treponema pallidum and the false positive results by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer.

SONG Yan,XIAO Jun.
Department of Clinical Laboratory,Aerospace Center Hospital,Beijing 100049,CHINA

ObjectiveTo study the measurement threshold of specific antibody of Treponema pallidum(TP) with chemiluminescent magnetic microparticle immunoassay(CMIA)by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer,and to analyze the samples with false positive results in CMIA.MethodsA total of 49 720 samples were screened for specific antibody of Treponema pallidum with CMIA by Abbott ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer inAerospace Center Hospital from July 2014 to November 2016,and Treponema pallidum particle agglutination assay(TPPA)was used as confirmation method.Results were analyzed with SPSS13.0.ResultsA total of 919 positive samples were screened by CMIA in 49 720 samples,among of which,650 cases of true positive samples and 269 cases of false positive samples were confirmed by TPPA method.True positive rate was 100.0%for patients whose S/CO value of CMIA method was more than 10.The false positive rates were 88.9%and 50.0%in patients less than 20 years old and patients in Department of Obstetrics and Dynecology,respectively,and significant differences were found when compared with other groups.ConclusionCMIA has high sensitivity in the detection of specific antibody of Treponema pallidum,so it can be used as screening method for TP.After CMIA,TPPA is not necessary for patients whose S/CO value is higher than 10,but is necessary for those with S/CO value of 1 to 10.False positive rate is higher in patients from Department of Obstetrics and Gynecology and patients with age less than 20 years old,so more attention should be paid to the test report

Treponema pallidum(TP);Chemiluminescent microparticle immunoassay(CMIA);Treponema pallidum particle agglutination assay(TPPA)

R759.1

A

1003—6350（2017）12—1962—03

2017-01-05)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.12.023

宋燕。E-mail：songyan07@126.com