陳 佩，黨 輝

（1.陜西理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 漢中 723001；2.陜西廣播電視大學(xué)，益生菌功能及應(yīng)用協(xié)同創(chuàng)新中心，陜西 西安 710119；3.陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062；4.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無(wú)錫 214122）

干酪乳桿菌對(duì)HepG2細(xì)胞抗氧化功能的影響

陳 佩1,2，黨 輝3,4

（1.陜西理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 漢中 723001；2.陜西廣播電視大學(xué)，益生菌功能及應(yīng)用協(xié)同創(chuàng)新中心，陜西 西安 710119；3.陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 710062；4.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無(wú)錫 214122）

目的：研究干酪乳桿菌（Lactobacillus casei）對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下HepG2細(xì)胞抗氧化功能的影響。方法：將培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞分為3 組：對(duì)照組（不加H2O2）、模型組（加入H2O2）、乳桿菌組（加入干酪乳桿菌和H2O2）。細(xì)胞培養(yǎng)至12 h和24 h時(shí)分別測(cè)定其上清液和細(xì)胞裂解液的抗氧化活性。利用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚對(duì)HepG2細(xì)胞進(jìn)行染色，在熒光顯微鏡下觀察不同處理對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響。結(jié)果：添加干酪乳桿菌12 h后，與模型組相比，細(xì)胞上清液中的總抗氧化力（total antioxidant capacity，T-AOC）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPx）和過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）活力分別提高了80%、30%和124%（P＜0.05），細(xì)胞裂解液中的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力顯著增加了22%（P＜0.05）；24 h后，細(xì)胞上清液中的T-AOC、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力和過(guò)氧化物酶的活力都顯著增加（P＜0.05），還原型谷胱甘肽和丙二醛的含量分別顯著降低了29%和63%（P＜0.05）。細(xì)胞裂解液中SOD活力比模型組顯著降低了20%（P＜0.05）。加入干酪乳桿菌后，細(xì)胞受損數(shù)量明顯減少，降低了56%，大部分細(xì)胞形態(tài)正常。結(jié)論：在體外條件下，干酪乳桿菌可以提高氧化應(yīng)激狀態(tài)下HepG2細(xì)胞的抗氧化能力。

干酪乳桿菌；HepG2細(xì)胞；抗氧化；氧化應(yīng)激；細(xì)胞裂解液

陳佩, 黨輝. 干酪乳桿菌對(duì)HepG2細(xì)胞抗氧化功能的影響[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(11): 220-224. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201711035. http://www.spkx.net.cn

CHEN Pei, DANG Hui. Effect of Lactobacillus casei on antioxidant function of HepG2 cells[J]. Food Science, 2017, 38(11): 220-224. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201711035. http://www.spkx.net.cn

機(jī)體在新陳代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生許多活性氧[1]，當(dāng)體內(nèi)自由基含量過(guò)高時(shí)，其與生物大分子結(jié)合可造成機(jī)體損傷，可引發(fā)癌癥、關(guān)節(jié)炎、心血管等疾病[2-3]。氧化應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的各種組織和器官的功能逐漸下降，加速機(jī)體衰老和死亡，因此老化的速度可通過(guò)氧化損傷的衰減被延遲[4]。依據(jù)自由基老化理論，可以利用抗氧化劑中斷產(chǎn)生活性氧的反應(yīng)[5]，但是長(zhǎng)期使用抗氧化劑會(huì)給機(jī)體帶來(lái)一系列的副作用，如高血糖、高血壓和癌癥等。因此尋找開(kāi)發(fā)更安全有效的天然抗氧化劑是非常必要的[6]。

乳酸菌是指發(fā)酵糖類且主要產(chǎn)物為乳酸的一類無(wú)芽孢、革蘭氏染色陽(yáng)性細(xì)菌的總稱。乳酸菌具有一系列特殊的生理功能，如調(diào)節(jié)機(jī)體腸道菌群平衡[7]、增強(qiáng)免疫力[8]、改善血脂血糖[9-10]、延緩衰老[11]等。尤其近年來(lái)，乳酸菌的抗氧化功能得到了廣泛的研究。大量研究表明，乳酸菌在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出很好的抗氧化活性，例如Lin等[12]研究了19 株乳酸菌都具有還原能力，能夠抑制抗壞血酸的自動(dòng)氧化。任大勇等[13]從15 株乳酸菌中篩選出了兩株抗氧化能力強(qiáng)的菌株，表明這兩株乳酸菌在減輕機(jī)體氧化損傷方面具有一定的應(yīng)用價(jià)值。Zhang Shuwen等[14]從傳統(tǒng)酸奶中分離得到的兩株乳桿菌均具有良好的抗氧化能力。體外篩選出的具有抗氧化作用的干酪乳桿菌和嗜酸乳桿菌，在大鼠體內(nèi)也表現(xiàn)出很好的抗氧化活性[15-16]。

本實(shí)驗(yàn)的干酪乳桿菌，是在前期研究中使用化學(xué)方法篩選出的具有較好抗氧化能力的菌株[17]。本研究擬通過(guò)HepG2細(xì)胞模型，研究干酪乳桿菌對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下細(xì)胞抗氧化活性的影響，為以后體內(nèi)研究及抗氧化機(jī)理方面的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞株 中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心；干酪乳桿菌 江南大學(xué)食品生物技術(shù)中心菌種保藏庫(kù)。

4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（4’,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）、二甲基亞楓（dimethyl sulphoxide，DMSO） 美國(guó)Sigma公司；DMEM低糖培養(yǎng)基（Dulbecco’s modified Eagle medium）、0.25%胰酶（含0.02%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA））、胎牛血清、L-谷氨酰胺、非必需氨基酸 美國(guó)Gibico公司；總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）、過(guò)氧化物酶（peroxidase，POD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）測(cè)定試劑盒 武漢博士得生物工程有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱 美國(guó)Thermo Electron Corporation公司；SW-CJ-1CV超凈臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；5415R冷凍離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司；恒溫培養(yǎng)箱上海一恒科技有限公司；VCX500超聲波破碎儀 美國(guó)Sonics&Materials公司；UV-2450紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)日本島津公司；CX41-12C02倒置顯微鏡 日本Olympus公司；DM2000顯微鏡 德國(guó)萊卡公司。

1.3 方法

1.3.1 乳桿菌菌種活化

將凍存于－80 ℃的乳桿菌接入MRS液體培養(yǎng)基中，37 ℃培養(yǎng)18 h，連續(xù)活化3 代后用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 乳桿菌的菌液制備

乳桿菌活菌液制備：將培養(yǎng)好的乳桿菌在4 ℃條件下以6 000 r/min離心10 min，棄上清液，菌體用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）離心洗滌3 次，濃度調(diào)節(jié)為1×109CFU/mL。

1.3.3 細(xì)胞培養(yǎng)

將HepG2細(xì)胞按常規(guī)方法復(fù)蘇后，置于含有10%胎牛血清、1%非必需氨基酸、1% L-谷氨酰胺和1%雙抗的低糖DMEM培養(yǎng)液中，37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，隔天更換一次培養(yǎng)液，待細(xì)胞貼壁融合率達(dá)80%左右時(shí)，用含0.02% EDTA的0.25%胰酶消化細(xì)胞，按1∶3傳代。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.4 H2O2對(duì)HepG2細(xì)胞氧化損傷模型的建立

參照文獻(xiàn)[18]的方法有所改動(dòng)，將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中的HepG2細(xì)胞按照2×105個(gè)/mL接種到96 孔板中，每孔100 ?L，37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，加入含H2O2終濃度分別為0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mmol/L的DMEM培養(yǎng)液，作用2 h，棄上清液，以3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴鹽（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT）法檢測(cè)細(xì)胞活力并以此建立氧化損傷模型。

1.3.5 MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率

參照文獻(xiàn)[19]的方法有所改動(dòng)，96 孔板中每孔加入5 g/L MTT 40 ?L，37 ℃、5% CO2，孵育4 h，吸出培養(yǎng)液，每孔加入150 ?L的DMSO溶解結(jié)晶，37 ℃培養(yǎng)箱中放置10 min，確保紫色結(jié)晶充分溶解，酶標(biāo)儀測(cè)定各孔在570 nm波長(zhǎng)處的吸光度。按下式計(jì)算細(xì)胞存活率（R）。

式中：A1為實(shí)驗(yàn)組的吸光度；A0為對(duì)照組的吸光度。

1.3.6 實(shí)驗(yàn)分組

參照文獻(xiàn)[20]的方法有所改動(dòng)，用0.25%的胰蛋白酶消化收集生長(zhǎng)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞以2×105個(gè)/mL的細(xì)胞密度接種于6 孔培養(yǎng)板，每孔2 mL培養(yǎng)液，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)24 h。分組處理：對(duì)照組，加入2 mL DMEM培養(yǎng)液；模型組，加入含0.10 mmol/L H2O2的DMEM培養(yǎng)液；乳桿菌組，同時(shí)加入含0.10 mmol/L H2O2的DMEM培養(yǎng)液和干酪乳桿菌菌液（1×109CFU/mL），繼續(xù)培養(yǎng)12 h和24 h。

1.3.7 樣品收集

細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)12 h和24 h后吸取培養(yǎng)上清裝入離心管，－80 ℃凍存?zhèn)溆?。每孔用PBS洗滌3 次，然后每孔加1 mL 1%的Triton X-100用吸管充分吹勻，2 000 r/min 離心15 min，收集上清液即為細(xì)胞裂解液，－80 ℃凍存?zhèn)溆谩?.3.8 指標(biāo)測(cè)定

T-AOC、SOD活力、GSH含量、GSH-Px活力、CAT活力、POD活力、MDA含量測(cè)定操作方法均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.9 細(xì)胞形態(tài)觀察

參照文獻(xiàn)[21]的方法有所改動(dòng)，將HepG2細(xì)胞以2×105個(gè)/mL的密度接種于6 孔培養(yǎng)板，培養(yǎng)24 h使細(xì)胞爬片，后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（造模及乳桿菌處理），實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，PBS洗滌3 次，避光加入DAPI工作液（1 μg/mL）淹沒(méi)平皿底部，染色20 min后，PBS漂洗3 次后封片，最后用熒光顯微鏡觀察。

1.4 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)平行3 組，重復(fù)3 次。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行one-way ANOVA，Tukey’s多重檢驗(yàn)（P＜0.05均為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義），數(shù)值以±s表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 H2O2對(duì)HepG2細(xì)胞存活率的影響

表1 不同濃度H對(duì)HepG2細(xì)胞存活率的影響O 22Table 1 Effect of different doses of Hon HepG2 cell survival O 22

H2O2作為一種外源性活性氧，特別容易穿透細(xì)胞膜導(dǎo)致DNA損傷，這種損傷在適宜的保護(hù)劑作用下，還可以被修復(fù)[22]。由表1可以看出，與對(duì)照組相比，0.05 mmol/L濃度的H2O2對(duì)細(xì)胞存活率的損傷不顯著，當(dāng)H2O2濃度為0.10 mmol/L時(shí)，細(xì)胞存活率顯著下降到80.74%（P＜0.05）。濃度為0.20、0.25、0.30 mmol/L時(shí)，細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比都呈顯著下降趨勢(shì)（P＜0.05），并且細(xì)胞存活率與H2O2的劑量呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性。因此，本實(shí)驗(yàn)選用H2O2濃度為0.10 mmol/L建立細(xì)胞損傷模型。丁逍等[23]選用濃度為0.30 mmol/L的H2O2建立了大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞氧化損傷模型，施紅敏等[24]選用濃度為0.60 mmol/L的H2O2建立了PC12細(xì)胞損傷模型。由此可見(jiàn)針對(duì)不同的細(xì)胞建立氧化損傷模型時(shí)，選用的H2O2濃度也有所不同。

2.2 干酪乳桿菌對(duì)HepG2細(xì)胞培養(yǎng)上清液抗氧化功能的影響

T-AOC是一個(gè)全面反映機(jī)體抗氧化能力的指標(biāo)，它包括酶促與非酶促兩個(gè)體系，這兩個(gè)體系之間相互協(xié)同發(fā)揮抗氧化的作用[25]。機(jī)體中清除自由基的系統(tǒng)主要包括SOD、GSH、GSH-Px和CAT等抗氧化物質(zhì)，它們能夠阻斷自由基的鏈?zhǔn)綌U(kuò)大反應(yīng)，有效保護(hù)細(xì)胞免受傷害。研究發(fā)現(xiàn)在人體腸道中，有一部分乳酸菌會(huì)被裂解并釋放出胞內(nèi)物質(zhì)，如GSH-Px和SOD，當(dāng)乳酸菌被裂解后，這些抗氧化酶向周圍環(huán)境釋放并發(fā)揮抗氧化作用[26]。POD主要存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體中，對(duì)細(xì)胞具有保護(hù)作用。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，它的含量直接反映體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化程度。有研究表明乳酸菌可以提高體內(nèi)GSH的含量，降低MDA的含量，具有很強(qiáng)的抗氧化能力[27]。

表2 HepG2細(xì)胞上清液在12 h和24 h時(shí)的抗氧化活性Table 2 Antioxidant activity of culture supernatants at 12 and 24 h

從表2可以看出，與對(duì)照組相比，12 h時(shí)，模型組細(xì)胞上清液中的T-AOC有所下降但差異不顯著，POD活力顯著降低（P＜0.05），GSH-Px活力增加了54.09 U/mL，SOD、CAT活力和MDA含量無(wú)顯著性差異，表明此時(shí)模型組細(xì)胞還未進(jìn)入氧化應(yīng)激狀態(tài)，說(shuō)明此時(shí)細(xì)胞自身尚能夠通過(guò)提高GSH-Px活性來(lái)促進(jìn)GSH清除H2O2，以防護(hù)機(jī)體不受氧化損傷。24 h后，細(xì)胞上清液中模型組的T-AOC比對(duì)照組顯著降低了50%（P＜0.05），GSH-Px活力顯著降低51%（P＜0.05），同時(shí)MDA含量顯著增加130%（P＜0.05），表明此時(shí)細(xì)胞已表現(xiàn)為氧化應(yīng)激狀態(tài)，引起脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，導(dǎo)致細(xì)胞活性降低。楊瑞華等[28]研究表明添加0.10 mmol/L H2O2可使細(xì)胞中的MDA含量顯著升高（P＜0.05），此與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。與模型組相比，添加干酪乳桿菌12 h后，細(xì)胞上清液中的T-AOC、GSH-Px活力和CAT活力都有顯著提高，分別提高了80%、30%和124%（P＜0.05），SOD活力有所提高，但并不顯著（P＞0.05），POD活力顯著降低了40%（P＜0.05），MDA含量增加了24%，表明干酪乳桿菌可以提高細(xì)胞抗氧化能力，但是對(duì)細(xì)胞也有一定的刺激作用。24 h后，細(xì)胞上清液中的T-AOC和SOD活力顯著增加了193%和139%（P＜0.05），GSH-Px、CAT和POD活力顯著增加（P＜0.05），GSH和MDA含量分別顯著降低了29%和63%（P＜0.05）。有研究顯示乳酸菌具有高效清除羥自由基和超氧化陰離子自由基的能力[29]，并可提高人體SOD和GSH-Px活力，降低腸道氧化應(yīng)激，增強(qiáng)抗氧化能力[30]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明干酪乳桿菌提高了抗氧化酶的合成和分泌，增強(qiáng)了細(xì)胞的抗氧化能力。

2.3 干酪乳桿菌對(duì)HepG2細(xì)胞裂解液抗氧化活性的影響

表3 細(xì)胞裂解液在12 h和24 h時(shí)的抗氧化活性Table 3 Antioxidant activity of cell lysate at 12 and 24 h

如表3所示，添加干酪乳桿菌12 h后，與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞裂解液中SOD活力、GSH含量有所降低，但差異不顯著（P＞0.05）；POD活力顯著提高了109%（P＜0.05）。結(jié)果表明此時(shí)細(xì)胞剛開(kāi)始受到刺激，胞內(nèi)POD活力增加以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。12 h后，乳桿菌組的細(xì)胞裂解液中SOD活力與對(duì)照組相比有所升高但無(wú)顯著性差異（P＞0.05），與模型組相比顯著增加了22%（P＜0.05）；POD活力與對(duì)照組相比顯著增加了118%（P＜0.05），和模型組相比也有所增加；GSH含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。表明此時(shí)細(xì)胞受到乳桿菌的氧化刺激作用，胞內(nèi)的氧化酶含量隨之升高。24 h后，與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞裂解液中的SOD活力和GSH含量分別顯著增加了43%和71%（P＜0.05）；POD活力也有所增加；乳桿菌組的SOD活力比對(duì)照組有所增加，但比模型組顯著降低了20%（P＜0.05）；POD活力比對(duì)照組和模型組分別顯著增加了129%和108%（P＜0.05）；GSH含量比對(duì)照組顯著增加了83%（P＜0.05），與模型組相比也有所增加。結(jié)果表明，此時(shí)模型組的細(xì)胞已受到強(qiáng)烈的氧化應(yīng)激，細(xì)胞內(nèi)的抗氧化物開(kāi)始大量合成，以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。另外，干酪乳桿菌通過(guò)刺激提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的活力，增強(qiáng)了細(xì)胞的抗氧化作用，對(duì)細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。李盛鈺等[31]研究發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌C88可提高Caco-2細(xì)胞的抗氧化酶活性，具有較強(qiáng)的抗氧化活性，此結(jié)果與本研究一致。

2.4 干酪乳桿菌對(duì)HepG2細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響

圖1 熒光顯微鏡下HepG2細(xì)胞核形態(tài)（10×40）Fig. 1 Morphology of nuclei in HepG2 cells examined by fluorescence microscope (10 × 40)

DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料，它可以通過(guò)完整的細(xì)胞膜，用于活細(xì)胞的染色。從圖1可看出，通過(guò)DAPI染色后在顯微鏡下可以明顯看出HepG2細(xì)胞經(jīng)過(guò)不同處理后，細(xì)胞的形態(tài)變化。圖1A顯示正常細(xì)胞的核DNA與DAPI特異性結(jié)合，呈現(xiàn)均勻彌漫的熒光，細(xì)胞核輪廓清晰可見(jiàn)，呈圓形或橢圓形，細(xì)胞質(zhì)無(wú)熒光。從圖1B可看出經(jīng)過(guò)H2O2損傷后，細(xì)胞形態(tài)明顯改變，顯微鏡下呈現(xiàn)致密濃染的塊狀凝聚強(qiáng)熒光，細(xì)胞皺縮，體積變小呈不規(guī)則形狀。如圖1C所示，加入干酪乳桿菌后，細(xì)胞受損明顯降低了56%，少數(shù)細(xì)胞發(fā)生凋亡，其細(xì)胞核發(fā)出強(qiáng)熒光，但大部分細(xì)胞形態(tài)正常，呈現(xiàn)均勻彌漫的熒光。此結(jié)果與前文結(jié)果相符，即反映出干酪乳桿菌具有抗氧化的能力，能夠減少H2O2對(duì)HepG2細(xì)胞的損傷。

3 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，干酪乳桿菌對(duì)H2O2誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激模型具有一定的抗氧化效果，可通過(guò)提高抗氧化酶活力以提高細(xì)胞的總抗氧化能力，從而減輕細(xì)胞的損傷。說(shuō)明干酪乳桿菌是具有較好抗氧化功能的益生菌，下一步可進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)的抗氧化研究。

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Effect of Lactobacillus casei on Antioxidant Function of HepG2 Cells

CHEN Pei1,2, DANG Hui3,4
(1. School of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723001, China; 2. Collaborative Innovation Center for Function and Application in Probiotics, Shaanxi Radio & TV University, Xi’an 710119, China; 3. College of Food Engineering and Nutritional Science, Shaanxi Normal University, Xi’an 710062, China; 4. School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)

Objective: This experiment was conducted to study the effect of Lactobacillus casei on antioxidant function of HepG2 cells under oxidative stress. Methods: HepG2 cells were randomly divided into 3 groups: control, model (H2O2induced oxidative stress) and treatment (H2O2plus Lactobacillus casei) groups. Antioxidant activity in culture supernatants and lysates of HepG2 cells at 12 and 48 h were measured. 4’,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining was applied to observe cell morphology in different groups by fluorescence microscopy. Results: Total antioxidant capacity (T-AOC), and glutathione peroxidase (GSH-Px) and catalase (CAT) activities in the culture supernatant, as well as superoxide dismutase (SOD) activity in the cell lysate at 12 h in the treatment group significantly increased by 80%, 30%, 124% and 22%, respectively when compared with their counterparts in the model group (P ＜ 0.05). At 24 h, the activities of T-AOC, SOD, GSH-Px, CAT and peroxidase (POD) were significantly increased (P ＜ 0.05), and the content of glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA) in the culture supernatant in the treatment group significantly decreased by 29% and 63% (P ＜0.05); a significant decrease of 20% in SOD activity in the cell lysate was observed for the treatment group compared with the model group (P ＜ 0.05). Moreover, the number of damaged cells was reduced in the treatment group than that in the model group, and most cells in the former group had normal morphology. Conclusion: The addition of Lactobacillus casei could increase antioxidant function of HepG2 cells under oxidative stress.

Lactobacillus casei; HepG2 cells; antioxidant; oxidative stress; cell lysates

10.7506/spkx1002-6630-201711035

中圖分類號(hào)：TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1002-6630（2017）11-0220-05引文格式：

2016-05-12

陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關(guān)項(xiàng)目（2015NY025）；陜西廣播電視大學(xué)重點(diǎn)課題（15D-08-A02）

陳佩（1983—），女，講師，博士，研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù)。E-mail：angelchen186@163.com