周藝華，鄭源海，林元峰

(福建醫(yī)科大學附屬漳州市醫(yī)院，1、產(chǎn)前診斷機構；2、檢驗科，福建漳州363000)

·調(diào)查報告·

77例染色體核型異常分布情況分析

周藝華1，鄭源海2，林元峰2

(福建醫(yī)科大學附屬漳州市醫(yī)院，1、產(chǎn)前診斷機構；2、檢驗科，福建漳州363000)

目的通過產(chǎn)前診斷分析胎兒染色體核型，了解異常染色體核型情況。方法符合產(chǎn)前診斷指征的孕婦共1657例，孕16～24周的抽取羊水，孕24周后的抽取臍帶血，進行細胞培養(yǎng)及染色體核型分析。結果1590例羊水細胞培養(yǎng)和67例臍帶血細胞培養(yǎng)，共檢出異常核型77例，染色體異常檢出率為4.65%。其中采集羊水1590例，染色體異常數(shù)為67例，異常率4.21%；采集臍帶血67例，染色體異常數(shù)為10例，異常率14.9%。77例異常染色體核型中有38例的21-三體、11例18-三體、3例易位、6例45，X、12例倒位、2例47，XXY、2例47，XXX、2例缺失、1例Mar。結論高危孕婦進行產(chǎn)前診斷，可檢出異常染色體核型，是安全有效的產(chǎn)前檢測手段。

高危孕婦；產(chǎn)前診斷；染色體核型

染色體異常是先天缺陷常見原因之一，在新生兒中的發(fā)生率為0.11%～0.12%。其中以21-三體綜合征和18-三體綜合征為主要的三體染色體異常核型[1，2]。染色體異常所導致的疾病，是不可逆的，可造成嚴重的發(fā)育和智力等問題，可造成嚴重的家庭及社會的經(jīng)濟負擔和心理負擔。特別是近年來，二孩政策的推行，越來越多的高齡產(chǎn)婦進入再生育周期。且目前對出生缺陷缺乏臨床有效的治療措施，因此，做好產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷，保證優(yōu)生優(yōu)育是一項勢在必行的工作，染色體核型分析具有一定的產(chǎn)前診斷和遺傳咨詢意義。常用的產(chǎn)前診斷主要有通過超聲檢查和血清學篩查相結合的方法，超聲檢查能發(fā)現(xiàn)一些實質(zhì)性器官的異常，但無法觀察到胎兒是否有染色體異常清楚，進行染色體核型的分析如取臍帶血或者羊水進行細胞培養(yǎng)后進行染色體核型分析，可以發(fā)現(xiàn)是否存在染色體異常。染色體核型分析是確診染色體病的金標準。本文通過回顧性分析1657例具有產(chǎn)前診斷指征的孕婦，進行染色體核型分析，觀察染色體異常率及是否存在染色體病例。

1 資料與方法

1.1 臨床資料研究對象為就診于漳州市醫(yī)院產(chǎn)前診斷門診，符合產(chǎn)前診斷指征的1657例妊娠孕婦，年齡20～45歲，平均年齡為28.2±5.7歲，孕齡16～35周，平均孕周為21.8±4.5周。

1.2 方法針對具有產(chǎn)前診斷指征35歲以上的高齡產(chǎn)婦、生育過染色體異常兒、超聲發(fā)現(xiàn)胎兒異常、曾有不良孕產(chǎn)史的、孕婦夫婦雙方或者一方有染色體平衡易位或者染色體倒位、唐篩高危的孕婦，告知家屬進行產(chǎn)前診斷的必要性及相關風險性，并讓孕婦及家屬簽署知情同意書。由經(jīng)驗豐富的臨床醫(yī)生在超聲引導下選擇合適位點取材（孕16～24周抽取羊水，孕24周后抽取臍帶血）。

1.3 核型分析在B超定位引導下，經(jīng)腹壁行羊水穿刺，抽取羊水20ml，離心，取沉淀0.5ml，加入5ml羊水培養(yǎng)基于（37°C 5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)8～9d（37°C 5%CO2），收獲羊水細胞，常規(guī)方法制備染色體，采用G顯帶，顯微鏡下進行核型分析，每例計數(shù)20個中期分裂象，至少分析5個核型，遇嵌合體增加計數(shù)，必要時輔以C顯帶、N顯帶進一步進行分析。

在B超定位引導下，經(jīng)腹壁行臍靜脈穿刺，抽取臍血1～2ml于肝素鈉抗凝管，混勻。將臍血接種于外周血培養(yǎng)基，常規(guī)淋巴細胞培養(yǎng)3d、收獲、制片和G顯帶，染色體核型分析，每例計數(shù)20個中期分裂象，至少分析5個核型，遇嵌合體增加計數(shù)，必要時輔以C顯帶、N顯帶進一步進行分析。

1.4 數(shù)據(jù)分析應用EXCEL進行數(shù)據(jù)整理，統(tǒng)計分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，組間率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

1657例高危孕婦中，共檢出77例異常染色體，異常率4.65%。其中采集羊水1590例，染色體異常數(shù)為67例，異常率4.21%，采集臍帶血67例，染色體異常數(shù)為10例，異常率14.9%，臍帶血檢出的染色體異常率明顯高于羊水的異常率（χ2=8.75，P＜0.05）。異常染色體核型詳見表1、表2。

表1 異常染色體核型分布情況

表2 檢出異常染色體核型的孕婦的產(chǎn)前診斷指征

3 討論

染色體異常是先天缺陷兒較多見的遺傳性疾病，我國每年出生染色體異常的新生兒約10萬人[3]，由于染色體病缺乏特異的臨床治療措施，一旦出現(xiàn)缺陷新生兒，可造成嚴重的家庭、社會心理和經(jīng)濟負擔。為此開展產(chǎn)前篩查，評估發(fā)育中胎兒的結構或功能是否異常，根據(jù)篩查結果，有必要的進一步進行產(chǎn)前診斷，防止染色體異?；純旱某錾Ｈ旧w核型分析，是目前用于檢測分析染色體是否異常及其相關多態(tài)性的金標準，對具有產(chǎn)前診斷指征的孕婦，如大于35歲以上的高齡產(chǎn)婦、反復早孕期自然流產(chǎn)、死胎、既往出生缺陷病史、曾暴露于有毒危害環(huán)境等等情況的孕婦根據(jù)其孕周情況進行采集羊水或者臍帶血進行細胞培養(yǎng)及染色體核型分析。一般孕周在16～24周時，通過超聲引導下，由有經(jīng)驗的臨床醫(yī)生抽取10～20ml的羊水，由于羊水內(nèi)富含胎兒脫落細胞，進行細胞培養(yǎng)后，分析染色體核型。而對于孕周大于24周，錯過羊水穿刺檢查的最佳時間，且具有產(chǎn)前診斷指征的孕婦，通常行臍帶穿刺，抽取臍帶血進行染色體檢測。孕周大于25周后，羊水細胞由于逐漸老化，胎脂的增多，細胞不易貼壁，導致細胞培養(yǎng)較為困難，孕晚期一般采集臍血進行染色體檢測分析，臍帶血與羊水細胞比較，臍帶血的培養(yǎng)更簡單，周期更短，且不受孕周的限制，因而更易獲得滿意分析檢測效果[4，5]。本研究中采集羊水的為1590例，染色體異常數(shù)為67例，異常率4.21%，而采集臍帶血的67例中染色體異常數(shù)為10例，異常率14.9%。臍帶血的異常率明顯高于羊水的染色體異常率。但是臍帶血的穿刺要求更高、手術難度大，且有流產(chǎn)等并發(fā)癥比羊水穿刺多，因此要求經(jīng)驗豐富的醫(yī)師執(zhí)行，并注意風險性。

染色體核型分析主要根據(jù)染色體結構和數(shù)目的變異情況來判斷是否患有某種因染色體片段缺失、重復或倒置等引起的遺傳病。本文中的1657例高危孕婦中，共檢出77例異常染色體，異常率4.65%。略高于吳漢鋒等[6]的研究染色體異常檢出率為3.87%，略低于全國出生缺陷的總發(fā)生率為11.07%[7]?？赡苡捎谘芯繕颖玖康牟町惢蛘吒啐g產(chǎn)婦構成比的差異等因素引起。其中有67例染色體異常來自于羊水標本和10例來自臍帶血標本，67例羊水標本檢測出的異常染色體核型分布為33例的21-三體、9例18-三體、3例易位、5例45，X、10例倒位、2例47，XXY、2例47，XXX、2例缺失、1例Mar；10例臍帶血染色體異常核型分別為5例21-三體、2例18-三體、1例45，X、2例倒位。本文數(shù)據(jù)結果顯示異常染色體核型主要以21-三體和18-三體為主，與國內(nèi)其他人研究數(shù)據(jù)相符合[8]。染色體異常主要有數(shù)目異常及結構異常，染色體數(shù)目的異常主要整倍體數(shù)目異常和非整倍體數(shù)目異常[9]。本研究中有38例21-三體、11例18-三體、6例45，X、2例47，XXY、2例47，XXX。對于21-三體、18-三體這種常染色體異常，一般建議終止妊娠；而對于45，X、47，XXY、47，XXX等性染色體數(shù)目異常，如45，X又稱Turner綜合征，可表現(xiàn)為先天性卵巢發(fā)育不良，是女性原發(fā)性閉經(jīng)常見原因。47，XXY稱為克氏綜合征，是以睪丸發(fā)育障礙和不育為主要特征，無生育能力，精液檢查無活動精子。部分患者智力發(fā)育低于正常，為輕度智能障礙。47，XXX稱為超雌綜合征，可表現(xiàn)為卵巢功能異常，間歇性閉經(jīng)，乳房發(fā)育不良等[10，11]。對于檢測出性染色體異常的個體可能沒有表型異常，但在成年后可能出現(xiàn)不孕不育，應向夫婦雙方結合實際情況，告知風險并讓其進行知情選擇，有條件的可保留胎兒。

染色體結構異常是由于染色體或染色單體在經(jīng)過斷裂、置換、互換等機制，可產(chǎn)生染色體畸變或者染色單體畸變，主要有易位、缺失、倒位、重復等。本文中有3例易位、12例倒位、2例缺失和1例Mar小體。如果為染色體遺傳性平衡易位，其父母無表型的話胎兒可基本無害，一般建議繼續(xù)妊娠，但應結合產(chǎn)前超聲情況對胎兒生長發(fā)育實行跟蹤觀察。但若為新發(fā)的平衡易位往往有異常的表型，此種攜帶者，其表型和智力可表現(xiàn)為正常，但其子代有16/18概率為染色體缺失或重復而導致流產(chǎn)、畸胎、死胎等，子代胎兒有可能存在生育問題[12，13]。而染色體倒位或者缺失，臨床一般建議做父母外周血染色體檢查，由于有不平衡配子的產(chǎn)生，攜帶者有生育畸形兒的風險，影響生精功能及性腺發(fā)育有關。對于Mar小體，也是一種染色體結構畸變，本研究中也有一例Mar小體異常情況，一般出現(xiàn)Mar小體如有超聲檢測異常產(chǎn)前指征者，一般建議終止妊娠，若孕婦知情選擇保留者，建議出生后應加強隨訪[14，15]。

二孩政策的放開，越來越多的高齡孕婦的出現(xiàn)，優(yōu)生優(yōu)育，保證人口質(zhì)量，預防先天缺陷兒的出生，由于目前臨床對出生缺陷缺乏有效的治療措施。對于有產(chǎn)前高危指征的孕婦進行產(chǎn)前診斷，根據(jù)不同的孕周采集羊水穿刺或者臍帶血穿刺進行染色體核型確診，通過異常染色體核型分析，對臨床指導提供遺傳咨詢具有重要決定性的正確依據(jù)。產(chǎn)前診斷能更好的輔助產(chǎn)前篩查和診斷達到減少缺陷兒出生的目的，提高出生人口素質(zhì)。開展產(chǎn)前篩查和后續(xù)隨訪，可盡量避免出生缺陷兒給個人、家庭、社會和國家的負擔。

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R596.1，R714.53

A

1674-1129(2017)03-0431-03

2017-01-09；

2017-04-26)

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.03.048