王秀文 易基群 梁繼珍 潘兆軍 朱 平

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CIK細胞對一線化療后晚期非小細胞肺癌維持治療的療效分析

王秀文 易基群 梁繼珍 潘兆軍 朱 平

目的 探討細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞(CIK) 維持治療一線化療后晚期非小細胞肺癌(NSCLC)的療效及安全性。方法 收集96例ⅢB～Ⅳ非小細胞肺癌患者，一線治療為4～6個周期的含鉑兩藥方案化療，將療效達穩(wěn)定或以上的患者隨機分兩組，一組給予CIK免疫治療，一組給予支持治療，比較兩組的PFS、有效率、外周血T淋巴細胞亞群、KPS評分及評估安全性。結(jié)果 CIK組和對照組的中位PFS分別為8.0個月(95% CI 7.3～8.7)和6.0個月(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002)。CIK組疾病控制率為81.25%，顯著高于對照組的62.50%(P<0.05)。CIK治療組患者外周血CD3+、CD3+/CD4+細胞比率較治療前顯著上升，對照組T淋巴細胞亞群沒有變化。CIK 細胞治療后患者KPS 評分為(71.53±7.96)分，較治療前顯著提高 (P<0.05)。CIK 治療組中3例出現(xiàn)一過性發(fā)熱，3例皮疹，2例肌肉痛。結(jié)論 CIK維持治療一線化療后穩(wěn)定的晚期非小細胞肺癌患者，可提高PFS及近期疾病控制率，改善免疫功能及生活質(zhì)量，安全性好。

CIK；非小細胞肺癌；維持治療

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:473～476)

化療是晚期NSCLC的主要治療手段[1]，傳統(tǒng)治療模式是患者先經(jīng)4～6個周期的一線化療，復(fù)發(fā)后再接受二線化療。但50%～60%的患者因疾病進展時體力狀態(tài)變差而無法接受二線化療[2]。對完成4～6個周期的一線化療后疾病無進展，繼續(xù)治療可能推遲疾病進展、延長生存期和改善生活質(zhì)量[3]。

單藥維持治療的不良反應(yīng)遠小于含鉑兩藥方案，耐受性好，其療效得到了多項臨床研究的肯定[4]。除細胞毒及分子靶向藥物的維持治療外，過繼免疫治療備受關(guān)注。CIK源于 CD3+和 CD56+T 細胞，同時具備 T 淋巴細胞的抗腫瘤活性和 NK 細胞的殺傷活性。CIK/DC-CIK被廣泛用于肝癌、乳腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、腎細胞癌等，并取得初步成效[5]。針對CIK治療的低毒高效特點，本研究對晚期NSCLC一線化療后穩(wěn)定的患者進行CIK維持治療研究，探討CIK維持治療對該類患者的免疫功能、療效及安全性的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2010年3月至2013年3月在本院腫瘤科初治且無手術(shù)指征的ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者,采用標(biāo)準(zhǔn)的長春瑞濱、吉西他濱、紫杉醇、多西他聯(lián)合賽順鉑/卡鉑等方案一線化療，且4～6個周期化療后無進展(即CR+PR+SD)入組，共96例。入組患者隨機分兩組，患者的一般情況見表1。兩組患者在年齡、性別、分期以及病理類型等方面差異無顯著?；颊呔?jīng)組織病理學(xué)確診為肺癌，KPS評分≥50分，預(yù)計生存期>3個月，治療前血常規(guī)、心電圖正常，肝腎功能各指標(biāo)正常。本臨床應(yīng)用程序均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審查批準(zhǔn)，接受生物治療患者均簽署知情同意書。

表1 兩組患者的臨床資料/例

1.2 方法

1.2.1 CIK細胞的制備及回輸 CIK組患者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者外周血80 ml，肝素抗凝，在符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)的實驗室，用Ficoll淋巴細胞分離液分離并收集單個核細胞。用自體血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，加IFN-γ1 000 U/ml，置于37 ℃、5%CO2孵箱中培養(yǎng)，24 h后加入IL-2 1 000 U/ml 和抗CD3單抗50～100 ng/mL。

此后每2～3天更換培養(yǎng)液并補加IL-2。培養(yǎng)至第8 天時取部分細胞進行細菌及霉菌檢測，如結(jié)果陰性則繼續(xù)培養(yǎng)。第13 天檢測細胞殺傷活性，用臺盼藍染色計數(shù)，總數(shù)達2×109以上后收集細胞，懸浮于1%白蛋白生理鹽水中回輸，回輸?shù)? 天起每日皮下注射rhIL-2增強CIK細胞活性。

1.2.2 維持治療與隨訪 維持治療在4～6個周期一線化療結(jié)束后2周進行，實驗組每例患者治療2個療程，每療程回輸細胞總數(shù)>1×1010。每個周期中分5 次于培養(yǎng)的第15、17、19、21、23天回輸給患者；對照組患者在化療后給予一般對癥支持治療。療程間隔15天。治療結(jié)束后隨訪觀察1年。

1.2.3 觀察指標(biāo) 檢測外周血T淋巴細胞表型：化療結(jié)束后2周及CIK治療2個療程結(jié)束后2周采集患者外周血2 ml，F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離淋巴細胞，流式細胞儀檢測T 細胞亞群變化。生活質(zhì)量評估：以Karnofsky為標(biāo)準(zhǔn)比較化療后2周與CIK細胞免疫治療結(jié)束后2周患者的生活質(zhì)量。

1.3 評價療效

48例患者均可評價療效，通過 CT、MRI、PET-CT等檢查進行療效評價，每3個月復(fù)查評估，有病情進展隨時進行療效評價。2個周期的CIK細胞維持治療后影像學(xué)評價按 RECIST 評價標(biāo)準(zhǔn)分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)和疾病進展(PD)。以CR+PR計算客觀有效率;以CR+PR+SD計算疾病控制率。無進展生存期(PFS)定義為自首次CIK維持治療開始至疾病進展或無法耐受不良反應(yīng)。觀察評估時間至2013年2月。

1.4 隨訪及統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 療效評價

2個周期CIK細胞治療結(jié)束后經(jīng)影像學(xué)評價，CIK治療組完全緩解2例，13例部分緩解，17例穩(wěn)定，客觀緩解率(ORR)與對照組比較無顯著差異。但CIK治療組疾病控制率(DCR)較對照組明顯提高，存在顯著性差異(P<0.05)(表2)。

表2 近期療效比較/例

與治療前比較，*為P<0.05。

48例患者中有3例未完成2個療程的CIK細胞治療。CIK治療組的中位PFS是8.0個月(95% CI 7.3～8.7)，對照組的中位PFS是6.0個月(95% CI 4.8～7.2)，兩者的生存曲線存在顯著性差異(P=0.002)(圖1)。CIK組的PFS時間比對照組長。

圖1 兩組患者無進展生存時間曲線

2.2 外周血淋巴細胞亞群的變化

48例患者中有3例未完成2個療程的CIK細胞輸注，每個療程細胞回輸數(shù)量在1.0×1010以上。CIK細胞維持干預(yù)治療后患者CD3+、CD3+/CD4+細胞亞群比率較干預(yù)前提高，存在統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.002,P=0.008)，CD3+/CD8+細胞亞群比率在CIK治療后提高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.072)。對照組治療前后CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+細胞亞群百分?jǐn)?shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表3)。

2.3 CIK治療前后肺癌患者生活質(zhì)量變化

CIK組治療前后48 例肺癌患者的KPS評分為(64.98±9.46)分和(71.53±7.96)分，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，CIK治療后患者體力狀況改善；而對照組的48例患者治療前后的 KPS 評分為(65.72±7.49)分和(64.8±8.76)分，無統(tǒng)計學(xué)差異。

2.4 CIK細胞治療的安全性評價

CIK細胞回輸過程中及回輸后最常見的不良反應(yīng)為發(fā)熱，共3例，以低熱為主，自行緩解或?qū)ΠY處理后緩解，未出現(xiàn)高熱、 寒戰(zhàn)。3例出現(xiàn)皮疹，2例出現(xiàn)肌肉酸痛，未予處理自行緩解，未出現(xiàn)明顯肝腎功能異常、骨髓抑制等不良反應(yīng)。

3 討論

肺癌作為發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤，大部分為非小細胞肺癌，其中有相當(dāng)部分患者在確診時已失去手術(shù)機會[6]。以鉑類為基礎(chǔ)聯(lián)合第三代化療藥物是目前臨床上晚期非小細胞肺癌的一線治療方案。多項大規(guī)模臨床試驗和Meta分析結(jié)果表明，不同的一線方案在總體生存率及有效率方面并無顯著性差異[7]。NSCLC一線標(biāo)準(zhǔn)化療方案已經(jīng)達成共識，但療效已達到平臺。NSCLC患者經(jīng)一線標(biāo)準(zhǔn)化療而且獲得客觀緩解或疾病穩(wěn)定后進行維持治療，已獲得廣泛的認(rèn)可。理想的維持治療藥物應(yīng)具備單藥治療有效、不良反應(yīng)少、使用方便等特點。CIK細胞治療是近年發(fā)展起來的腫瘤過繼免疫治療的全新策略[8]，CIK 細胞能調(diào)節(jié)和增強患者自身免疫功能，抑制腫瘤生長和清除殘留微小病灶的作用，可以有效提高腫瘤的生存率和治愈率，防止腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移[9]。國內(nèi)外的實驗結(jié)果證實，CIK細胞治療具有毒副反應(yīng)少和延長生存期等優(yōu)點，是1種低毒有效的治療[10-11]。Hontscha 等[10]對多項臨床試驗歸納發(fā)現(xiàn)，CIK治療的384 例惡性腫瘤患者中，24例獲得完全緩解，27 例患者部分緩解。多項研究發(fā)現(xiàn)DC-CIK或CIK細胞聯(lián)合化療用于晚期非小細胞肺癌患者，可以提高化療的臨床療效，延長PFS，毒副反應(yīng)少，提高生活質(zhì)量[11]。鑒于CIK細胞治療在晚期SNCLC的療效及低毒的特點，DC-CIK或CIK細胞免疫治療用于維持治療成為肺癌研究的新熱點。

本研究顯示一線化療后穩(wěn)定的晚期非小細胞肺癌經(jīng)CIK細胞治療2個周期，CIK治療組疾病控制率較對照組明顯提高，多數(shù)接受CIK治療的患者疾病維持穩(wěn)定，羅虎等[12]亦報告CIK治療顯著提高肺癌患者治療的有效率及疾病控制率。本研究中CIK組的PFS時間較對照組延長2個月，存在統(tǒng)計學(xué)差異。Runmei 等[13]報道CIK聯(lián)合化療組比單純化療組治療晚期NSCLC的中位PFS顯著提高(13 vs 6個月)。Shi 等[14]研究 DC-CIK 細胞用于晚期非小細胞肺癌接受常規(guī)的兩藥聯(lián)合方案化療后的維持治療，結(jié)果顯示DC-CIK 維持治療可以延長 PFS(3.20 vs 2.56個月，P<0.05)，該實驗與本研究都表明晚期肺癌化療后進行CIK維持治療有效地提高PFS。本研究發(fā)現(xiàn)CIK治療后患者的CD3+、CD3+/CD4+細胞亞群百分率明顯升高，外周血T 細胞亞群發(fā)生變化，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，對癥治療組無顯著改變，表明患者治療后免疫功能得到改善。Congguo等[15]研究發(fā)現(xiàn)肺癌患者CIK治療干預(yù)后4組患者T淋巴細胞亞群百分?jǐn)?shù)均出現(xiàn)顯著提高，免疫功能增強，與本研究結(jié)果一致。同時在本研究中48例肺癌患者CIK治療后的 KPS 評分較治療前也有顯著提高，表明CIK治療明顯改善患者的生活質(zhì)量，是CIK治療的優(yōu)勢所在。CIK治療組少數(shù)患者出現(xiàn)發(fā)熱、皮疹、肌肉痛等，均易緩解，未出現(xiàn)肝腎功能、骨髓抑制等不良反應(yīng)，安全性高，耐受性好。

表3 48例患者治療前后外周血T細胞表型變化

注：與治療前比較，*為P<0.05。

綜上所述，CIK細胞維持治療一線化療后穩(wěn)定的晚期肺癌患者能夠顯著提高其近期疾病控制率，延長PFS，改善免疫功能和生存質(zhì)量，安全性好。CIK細胞維持治療作為1種新的治療手段可能是未來晚期肺癌治療的方向，推薦用于常規(guī)4～6個周期化療結(jié)束穩(wěn)定的晚期肺癌患者。

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(編輯：吳小紅)

Effect of Cytokine-induced Killer Cells in Maintenance Therapy of Patients withAdvanced Non-small Cell Lung Cancer after Effective First-line Chemotherapy

WANG Xiuwen,YI Jiqun,LANG Jizhen,et al.

Guangzhou Red Cross Hospital,Medical College,Jinan University,Guangzhou,510220

Objective To evaluate the safety and effectiveness of cytokine induced-killer cells in maintenance therapy of advanced non-small cell lung cancer after effective first-line chemotherapy.Methods After 4～6 cycles of the 2-drug regimen treatment with platinum,the 96 patients with advanced non-small cell lung cancer in phase ⅢB or Ⅳ reached stable or much better condition.The patients were then randomly divided into 2 groups.One group was treated with CIK therapy(CIK group),and the other was treated with optimal supportive care(control group).Progression-free survival(PFS),therapeutic effects,quality of life(Karnofsky score),the changes of immune system including subsets of T cells and side effects were compared between the 2 groups.Results The median progression-free survival of the CIK group and the control group was 8.0 months(95% CI 7.3～8.7) and 6.0 months(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002),respectively.The disease control rate(DCR) were 81.25% in the CIK group，which was significantly higher than those of the control group(62.50%,P<0.05).The ratios of CD3+ and CD3+/CD4+T cells significantly increased(P<0.05) after CIK cells therapy,while there was no significant change in the control group.KPS score significantly increased in the CIK group,which was 71.53±7.96(P<0.05).In CIK group,fever was fond in 3 cases,skin rash in 3 cases,and muscular aches in 2 cases.Conclusion The maintenance therapy of CIK cell immuntherapy is safe and effective for advanced non-small cell lung cancer patients after chemotherapy.It can improve PFS,DCR,quality of life and the immune functions of patients.

Cytokine-induced killer cells;Non-small cell lung cancer;Maintenance therapy

廣東省科技計劃項目[編號：(2011)70號-85]

510220 廣州市紅十字會醫(yī)院，暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬廣州紅十字會醫(yī)院

易基群

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.037

R734.2

A

1001-5930(2017)03-0473-04

2016-04-25

2016-12-15)