閆春霞

摘要：以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度6-BA、IBA、KT植物生長調節(jié)劑，對藤本月季多特蒙特的組培快繁技術進行了研究，同時進行了試管苗移栽基質篩選試驗。結果表明，適宜的誘導發(fā)芽培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培養(yǎng)基以MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L效果最好，以上培養(yǎng)基且使芽生長健壯；適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg/L，生根率可達92.5%，且根粗壯發(fā)達；在移栽試驗中，適宜的移栽基質為蛭石+泥炭（1∶1），在每年5、6和9月適宜進行試管苗移栽，其移栽成活率可高達94.5%。

關鍵詞：藤本月季；多特蒙特；組織培養(yǎng)；擴繁

中圖分類號：S685.12 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2017）10-1960-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.10.040

Technology of Climbing Rose Dortmund Tissue Culture and Rapid Propagation

YAN Chun-xia

（Garden Branch of Science and Technology，Xinjiang Agricultural Vocational Technical College，Changji 831100，Xinjiang，China）

Abstract： Taking MS as basic medium，adding plant growth regulator 6-BA，IBA，KT of different concentration，studying the technology of Dortmund Climbing Rose tissue culture and rapid propagation，and carried out test tube plantlet transplantation and substrate screening experiment. Results showed that medium suitable for Induced germination is MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L. Best medium for multiplication is MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L. Medium mentioned above can make sprout a robust growth. Best medium for root growth is 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，with a thick and robust rooting rate of 92.5%. In transplantation experiment，the best medium is vermiculite+peat，and the best tube plantlet transplantation period is May，June and September，with a survival ratio above 94.5%.

Key words：climbing rose；dortmund；tissue culture；propagation

藤本月季為薔薇科薔薇屬攀緣植物，是近年來選育出的可用于城市園林綠化的新的月季品種。其三季開花，花朵繁多，略加修剪可形成圓球狀、圓柱狀、拱門形、花山等景觀，是城市垂直綠化美化中的優(yōu)良品種。藤本月季目前常采用扦插和嫁接繁殖，但其過程漫長，用工量大。

近年來，組織培養(yǎng)法快速繁殖各種花卉苗木的技術得到了廣泛應用。藤本月季多特蒙特為北方較耐寒、且在栽培中各項生長指標較好的品種。本試驗以適宜新疆地區(qū)種植的藤本月季品種多特蒙特為試驗材料，進行了誘導、繼代及生根的組織培養(yǎng)特性研究，優(yōu)化了適合該藤本月季品種組培快繁的最佳配比的培養(yǎng)基和移栽基質，為北疆地區(qū)適宜栽培的藤本月季組培快繁提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

以二年生藤本月季多特蒙特植株母枝為基礎材料，選擇生長健壯、無病蟲害植株、芽體飽滿的當年生枝條中段為外植體。將選取的外植體剪去葉片、保留葉柄，自來水沖洗干凈后，在超凈工作臺上將其剪成保留2～3個芽的莖段，放入高溫滅菌的瓶中，加入75%乙醇溶液浸搖30 s后，用0.1%的升汞溶液消毒8～10 min，再用無菌水徹底沖洗5次待接種。

1.2 培養(yǎng)基

1）誘導培養(yǎng)基：A1.MS+6-BA 0.5 mg/L；A2.MS+6-BA 1.0 mg/L；A3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；A4.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L。

2）增殖培養(yǎng)基：B1.MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L； B2.MS+KT 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L； B3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；B4.MS+KT 1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L。

3）生根培養(yǎng)基：C1.1/2MS；C2.1/2MS+IBA 0.05 mg/L；C3.1/2MS+IBA 0.1 mg/L；C4.1/2MS+IBA 0.5 mg/L。

4）移栽基質：D1.基質∶蛭石；D2.基質∶珍珠巖； D3.基質∶蛭石+泥炭（1∶1）；D4.基質∶河沙。

1.3 方法

1.3.1 誘導培養(yǎng) 用鑷子去除消毒莖段上的葉柄，使腋芽顯出，再將莖端切成長1.5 cm的單芽小段，分別接種于誘導培養(yǎng)基A1、A2、A3、A4，每個處理重復3次，每個重復接種25個單芽莖段，接種7～15 d后觀察芽萌發(fā)情況。

1.3.2 芽的增殖繼代培養(yǎng) 將已萌發(fā)且芽高1.5 cm以上的叢生芽切成單芽，轉接到增值繼代培養(yǎng)基B1、B2、B3、B4中，每個處理接種30個單芽，接種5～7 d后觀察離體芽的增殖情況。

1.3.3 試管苗的生根培養(yǎng) 將繼代培養(yǎng)苗中生長健壯，苗高在2 cm以上的無根苗切成單株，轉接到生根培養(yǎng)基C1、C2、C3、C4中，每個處理接種40個單株，接種7 d后觀察幼苗的生根情況。

1.3.4 移栽 當繼代培養(yǎng)的升根苗根系生長良好時，可將試管苗在室內揭開封膜口煉苗2～3 d，然后輕輕取出試管苗，用溫水洗凈根部黏附的培養(yǎng)基，在溫室中，移栽于厚度達15 cm的栽培基質苗床中。選用的栽培基質分別為D1、D2、D3、D4，均經高錳酸鉀徹底消毒。從4月下旬開始到10月中旬為止，每月進行移栽試驗，每個處理均為80棵苗。幼苗栽植后用低濃度的多菌靈溶液澆濕基質，遮陰保濕，移栽20 d后統(tǒng)計幼苗成活率。

1.3.5 培養(yǎng)條件 MS培養(yǎng)基中蔗糖為30.0 g/L， 1/2MS培養(yǎng)基中蔗糖為20.0 g/L，瓊脂均為3.8 g/L，pH 5.8，培養(yǎng)溫度為（25±2） ℃，光照度2 000～2 500 lx，光照時間10～12 h/d。

2 結果與分析

2.1 腋芽的誘導培養(yǎng)

藤本月季多特蒙特的莖端在接種3 d后腋芽開始萌動，但萌芽率及生長情況因植物生長調節(jié)劑濃度的不同而異。由表1可知，培養(yǎng)基MS+6-BA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L中由于只加入了細胞分裂素（6-BA），誘導產生的叢生芽數(shù)、腋芽萌發(fā)率和平均芽高均明顯低于培養(yǎng)基A3。培養(yǎng)基A3中細胞分裂素和較低濃度的生長素（NAA）配合使用有利于腋芽的萌發(fā)，腋芽萌發(fā)率高達117.3%，平均芽高2.60 cm， 且叢生芽生長健壯。培養(yǎng)基A4中生長素濃度增大，腋芽萌發(fā)率下降至93.3%，平均芽高 2.01 cm，且叢生芽長勢一般。綜上所述，以萌芽率及生長情況作為評價標準，培養(yǎng)基A3（MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L）為藤本月季多特蒙特腋芽誘導的適宜培養(yǎng)基。

2.2 增殖繼代培養(yǎng)

由表2可知，培養(yǎng)基B1由于生長素（IBA）濃度偏低而增殖芽數(shù)較少，增殖系數(shù)明顯低于其他培養(yǎng)基。隨著6-BA和NAA濃度的增加，培養(yǎng)基B2和B3增殖芽數(shù)增多，增殖系數(shù)分別達2.7和2.2，且芽生長健壯。培養(yǎng)基B4中將6-BA更換為KT，增殖芽和增殖系數(shù)均明顯提高，且明顯高于其他培養(yǎng)基，芽生長健壯，同時在芽基部不斷有不定芽萌動的跡象。因此，培養(yǎng)基B4（MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L），既可實現(xiàn)芽的高效增殖，又能保證分化出的芽健壯生長，為藤本月季多特蒙特適宜的增殖繼代培養(yǎng)基。

2.3 生根培養(yǎng)

從表3可以看出，未使用任何植物生長調節(jié)劑的培養(yǎng)基C1中，幼苗培養(yǎng)12 d后開始生根，生根率僅有28%，明顯低于其他培養(yǎng)基，平均生根數(shù)為4條，且根生長細弱。培養(yǎng)基C2和C3中根數(shù)達到6條和10條，幼苗培養(yǎng)8～10 d開始生根，且以培養(yǎng)基C4中幼苗根系發(fā)達，質量較高。培養(yǎng)基1/2MS中加入IBA作為生根調節(jié)劑，幼苗生根效果明顯好于加入NAA的培養(yǎng)基，生根率達到92.5%，明顯高于培養(yǎng)基C1和C2、C3，且其平均根數(shù)為12條，幼苗培養(yǎng)7 d即開始生根，小苗長勢良好，根粗壯、根系發(fā)達。因此，適合藤本月季多特蒙特品種的最佳生根培養(yǎng)基為C4 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，其生根率達到92.5%。

2.4 移栽成活情況

由圖1可知，4個栽培基質處理均在5、6和9月移栽成活率較高，幼苗生長健壯，新葉黑而亮；而4、7、8和10月的移栽成活率相對較低，幼苗生長細弱，這可能與氣溫及地溫的高低有關。5、6和9月氣溫適中（20～30 ℃），有利于試管苗的移栽；4、10月氣溫偏低（20 ℃以下），而7、8月氣溫偏高（30 ℃以上），均不利于試管苗的移栽。4個不同基質處理中，以栽培基質D3即采用蛭石+泥炭（1∶1）的處理試管苗移栽成活率都較高，其中又以5月最高，達到94.5%，7月最低，僅有65.0%。

3 小結與討論

結果表明，在藤本月季多特蒙特的誘導培養(yǎng)中需較低濃度的細胞分裂素（6-BA）和生長素（IBA），適宜的誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培養(yǎng)階段細胞分裂素選用KT比6-BA更適宜芽的增殖，最佳的繼代增殖培養(yǎng)基為MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；生長素IBA作為生根激素，幼苗生根效果要比NAA效果更好；最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg/L。在試管苗移栽試驗中，氣溫和栽培基質均對試管苗的移栽成活率影響明顯，5、6和9月氣溫適中（20～30 ℃），試管苗的移栽成活率均較高，氣溫偏低（20 ℃以下）或偏高（30 ℃以上）都不利于試管苗的移栽。蛭石+泥炭（1∶1）通氣保水，是試管苗移栽的最佳栽培基質，且適宜在5、6和9月移栽，成活率可高達94.5%；珍珠巖雖透氣，但保水性太差，而泥炭吸水力過強，根系因水分過多而腐爛。

采用組培快繁技術可生產出根系發(fā)達、生長健壯的批量優(yōu)質藤本月季商品苗，滿足生產的需求，但本試驗只是對藤本月季多特蒙特1個品種進行了研究，因此該技術在其他品種上的應用還有待進一步的研究。

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