周敏

（江蘇食品藥品職業(yè)技術(shù)學(xué)院，淮安 223003）

白藜蘆醇對(duì)IgA大鼠腎組織TH2型炎性因子及血清CIC的影響

周敏

（江蘇食品藥品職業(yè)技術(shù)學(xué)院，淮安 223003）

旨在考察白藜蘆醇對(duì)IgA大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13三種TH2型炎性因子及血清循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）的影響。將10只正常大鼠作為正常組，另40只采用胎牛血清白蛋白（BGG）處理9周制備4組IgA腎病（IgAN）大鼠模型，9周末進(jìn)行白藜蘆醇給藥，并根據(jù)給藥劑量的不同分別定義為模型組（未給藥）、低劑量組（15 g生藥/kg）、中劑量組（30 g生藥/kg）、高劑量組（45 g生藥/kg），12周末剖殺，采用免疫熒光染色檢驗(yàn)造模有效性，采用RT-PCR檢測(cè)腎組織IL-4、IL-5、IL-13表達(dá)水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）測(cè)定血清CIC濃度。結(jié)果顯示，造模成功；與正常組比較，模型組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平極顯著增高（P＜0.001），與模型組比較，低、中、高劑量組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平均依次降低，各細(xì)胞因子指標(biāo)組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與正常組比較，模型組血清CIC濃度顯著升高（P＜0.01），低、中、高劑量組均高于正常組，但與正常組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與模型組比較均顯著更低（P＜0.05），并依次呈逐漸降低趨勢(shì)。白藜蘆醇可明顯下調(diào)IgA大鼠腎組織總促炎性因子IL-5的表達(dá)，炎性反應(yīng)減弱后抗炎性因子IL-4與IL-13也隨之降低，同時(shí)白藜蘆醇也能顯著降低IgA大鼠血清CIC濃度。

白藜蘆醇；IgA腎?。籘H2型炎性因子；循環(huán)免疫復(fù)合物

IgA腎?。↖gA nephropathy，IgAN）是一類以IgA在腎小球系膜區(qū)發(fā)生沉積為主要病理特征的腎小球疾病，其臨床表現(xiàn)比較多樣，相對(duì)以鏡下或肉眼血尿最為常見，同時(shí)可伴不同程度蛋白尿及腎功能受損等癥狀［1］。當(dāng)前普遍認(rèn)為，IgAN在全球范圍內(nèi)居各種原發(fā)性腎小球腎炎發(fā)病的首位，而且在確診為IgAN的5-25年內(nèi)，大概有30%左右的患者將不可逆地進(jìn)展為終末期腎病（End-stage renal disease，ESRD）［2，3］。IgA免疫系統(tǒng)發(fā)生異常是導(dǎo)致IgAN發(fā)病的重要因素［4］。其中輔助性T淋巴細(xì)胞（T-heleper lymphocyte，Th）的失調(diào)已被證實(shí)為產(chǎn)生致病性IgA1（IgA亞型之一）的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)［5］。Th分泌的細(xì)胞因子主要包括Th1與Th2兩個(gè)亞群，目前大多數(shù)研究支持IgAN的發(fā)病及病情進(jìn)展應(yīng)與Th1/Th2平衡向Th2偏倚有關(guān)，而Th2所分泌的細(xì)胞因子則主要包括IL-4、IL-5及IL-13［6］。白藜蘆醇（Esveratrol）又名茋三酚（3，4'，5-三羥基二苯乙烯），是植物在諸如機(jī)械性損傷、遭受強(qiáng)紫外線照射以及真菌感染等不利條件下所產(chǎn)生的“植物補(bǔ)體”，其分子式為C14H12O3，相對(duì)分子量為228.25。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，白藜蘆醇具有包括抗炎在內(nèi)的多種藥理作用［7］。本研究通過考察白藜蘆醇對(duì)IgA大鼠腎組織TH2型細(xì)胞因子及血清循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulating immunocomplex，CIC）的影響，旨在為臨床應(yīng)用白藜蘆醇治療IgAN提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級(jí)SD大鼠購(gòu)自山東大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心；白藜蘆醇購(gòu)自上海得恩德醫(yī)藥科技有限公司，純度95.0%；胎牛血清白蛋白（BGG）與羊抗大鼠IgA、IgG、IgM和C3購(gòu)自美國(guó)Abcam公司；IL-4、IL-5、IL-13及β-actin mRAN內(nèi)參購(gòu)自康偉世紀(jì)公司；Olympus熒光顯微鏡購(gòu)自上海賴氏電子科技有限公司；TRIzol購(gòu)自美國(guó)invitroge公司；RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自Promega公司；基因擴(kuò)增儀器購(gòu)自（BIOER，Hangzhou Techology.co，China）；PCR引物由北京華大基因公司設(shè)計(jì)合成；凝膠電泳儀及成像系統(tǒng)購(gòu)自Bio-RAD公司；CIC酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒購(gòu)自北京科盈美生物科技公司。

1.2 方法

1.2.1 分組與造模 清潔級(jí)SD大鼠50只，雌、雄各25只，7周齡，體質(zhì)量180-220 g。隨機(jī)選取10只作為正常組，另40只為造模組。參考當(dāng)前國(guó)內(nèi)外最常使用的IgA大鼠造模方法進(jìn)行造模，即應(yīng)用抗原低于食管黏膜內(nèi)皮細(xì)胞施加直接性刺激，繼而將巨噬細(xì)胞激活并最終獲得IgAN模型［8］。具體方法為：以0.9%氯化鈉注射液溶解BGG，配制成含BGG 0.1%的溶液給予造模組連續(xù)飲用8周，8周后再連續(xù)3 d采用尾靜脈注射方式追加BGG，1次/d，單次注射劑量1 mg；正常組依次分別給予等量0.9%氯化鈉注射液飲用及尾靜脈注射。于第9周末在造模組中任意選30只并隨機(jī)分為3組（每組各10只）進(jìn)行白藜蘆醇ig給藥，各組給藥劑量分別為15 g生藥/kg（低劑量組）、30 g生藥/kg（中劑量組）及45 g生藥/kg（高劑量組），未給藥的10只大鼠定義為模型組。實(shí)驗(yàn)期間所有大鼠除上述給藥方案外均正常飲食生活，蒸餾水喂養(yǎng)。

1.2.2 標(biāo)本制作 所有大鼠于第12周末剖殺并取材。以50 mg/kg腹腔注射3%戊巴比妥鈉，麻醉后沿腹中線將腹部皮膚與腹肌剪開，將腸管推開并充分暴露腹主動(dòng)脈后穿刺采血，以轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心處理血液樣本，離心時(shí)間10 min，收集血清用于CIC濃度檢測(cè)。完成血液樣本采集后應(yīng)立即再進(jìn)行腎組織樣本采集，將腎周圍殘存結(jié)締組完全剝離后于距腎門1 mm處切取腎組織，然后置于-70℃冰箱冷藏備用。

1.2.3 免疫熒光染色 采用直接法染色，取腎皮質(zhì)冰凍切片3 μm，吹干后采用丙酮固定5 min，接著采用磷酸緩沖鹽溶液（PBS）沖洗3次，5 min/次，將采用羊抗大鼠免疫熒光IgA、IgM和C3（1∶10）稀釋熒光標(biāo)記的抗體滴加至組織切片，在37℃溫度條件下孵育45 min，孵育結(jié)束后再采用PBS液洗3次，5 min/次，完成后用緩沖液甘油封片并采用Olympus20倍熒光顯微鏡鏡檢。鏡下熒光強(qiáng)度分5個(gè)強(qiáng)度梯度：（-）無熒光，（±）弱熒光且不清晰，（+）弱熒光清晰，（++）明亮熒光，（+++）強(qiáng)熒光。熒光越強(qiáng)則表示CIC沉積越嚴(yán)重。

1.2.4 腎組織IL-4、IL-5、IL-13的RT-PCR檢測(cè)將冰凍腎組織在研缽中碾碎，采用TRIzol一步法提取總RNA［9］。接著以所獲總RNA為模版，采用Promega公司試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)并得到相應(yīng)的cDNA，在PCR儀上擴(kuò)增。應(yīng)用primer Premier 5.0軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，所有序列引物由北京華大基因公司合成（表1）。PCR反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5 min；95℃ 45 s，59℃ 45 s，64℃ 50 s，72℃ 45 s，共30個(gè)循環(huán)；72℃ 10 min終止反應(yīng)。將PCR產(chǎn)物片段進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，用凝膠成像系統(tǒng)拍照并采用Image J軟件進(jìn)行灰度分析。

表1 IL-4、IL-5、IL-13及內(nèi)參β-actin的PCR引物序列

1.2.5 血清CIC檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）進(jìn)行測(cè)定，具體操作嚴(yán)格參照試劑盒說明書即可。1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料以（±s）表示，組間數(shù)據(jù)比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)，以P＜0.05為比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫熒光染色鏡檢結(jié)果

免疫熒光染色鏡檢結(jié)果顯示，正常組大鼠腎小球系膜區(qū)IgA、IgG、IgM及C3均呈陰性，模型組大鼠腎小球系膜區(qū)表現(xiàn)有明顯IgA沉積，熒光強(qiáng)度（++）-（+++），個(gè)別波及毛細(xì)血管壁并伴有IgG、IgM、C3沉積；低、中、高劑量組熒光強(qiáng)度較模型組依次減弱，其中高劑量組部分IgA熒光強(qiáng)度（±）-（-）。該結(jié)果提示造模成功，見圖1。

圖1 免疫熒光染色鏡檢結(jié)果

2.2 各組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

RT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明，與正常組比較，模型組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平極顯著增高（P＜0.001），與模型組比較，低、中、高劑量組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平均依次降低，各細(xì)胞因子指標(biāo)組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見圖2和圖3。

2.3 各組大鼠血清CIC檢測(cè)結(jié)果

CIC檢測(cè)結(jié)果顯示（表2），與正常組比較，模型組血清CIC濃度顯著升高（P＜0.01），低、中、高劑量組均高于正常組，但與正常組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與模型組比較均顯著更低（P＜0.05），并依次呈逐漸降低趨勢(shì)。

3 討論

IgAN及其所導(dǎo)致的慢性腎臟疾病及ESRD不僅對(duì)患者本身而言是一個(gè)非常嚴(yán)重的健康問題，而且其家庭也往往因此遭受沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，進(jìn)一步提高IgAN臨床治療的有效性是腎病內(nèi)科醫(yī)生所面臨的重大課題之一。當(dāng)前西醫(yī)對(duì)IgAN尚缺乏特異性的治療方法，同時(shí)也沒有一個(gè)被普遍認(rèn)可的治療指南，臨床主要采用轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）或血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑（ARB）等藥物給予支持治療，效果不理想則建議聯(lián)合應(yīng)用激素治療。另有研究表明，激素聯(lián)合硫唑嘌呤治療IgAN不比激素單藥治療更有效反而增加藥物不良反應(yīng)的發(fā)生［10］。隨著IgAN相關(guān)中醫(yī)理論研究的不斷深入，某些中醫(yī)藥已在IgAN的治療方面愈發(fā)表現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)，不僅能較好控制其近期臨床癥狀，而且能在很大程度上幫助患者激素減量并削弱西藥的毒副反應(yīng)［11，12］。近期研究證實(shí)，白藜蘆醇在其他類型腎病的應(yīng)用中已初具成效［13］。那么基于其抗炎作用是否對(duì)IgAN同樣具有臨床應(yīng)用價(jià)值即是本研究重點(diǎn)關(guān)注的問題。

圖2 各組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

圖3 各組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13細(xì)胞因子的相對(duì)表達(dá)

IgAN的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全探明，但考慮與免疫功能異常及遺傳等因素有關(guān)，其中前者占主要地位［14］。IgA等抗體是由經(jīng)T細(xì)胞調(diào)節(jié)下活化的B細(xì)胞產(chǎn)生的。IL-4與IL-13是活化的Th2細(xì)胞所分泌的兩種非常重要的抗炎性細(xì)胞因子，它們對(duì)單核-巨噬細(xì)胞表面抗原的表達(dá)具調(diào)節(jié)作用，能對(duì)NO產(chǎn)生及抗體所介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）作用發(fā)揮抑制效應(yīng)，同時(shí)還能下調(diào)諸如IL-1、TNF-A、IL-12等多種促炎細(xì)胞因子以及巨嗜細(xì)胞炎癥蛋白（MIP）、IL-8等趨化因子的合成水平，另外也能促進(jìn)具抗炎作用的IL-ra與IL-1Ⅱ型受體的表達(dá)繼而間接抑制IL-1的生物學(xué)功能［15］。基于強(qiáng)大的抗炎特性，IL-4與IL-13均被認(rèn)為對(duì)原發(fā)性腎小球疾病相關(guān)炎性反應(yīng)具重要保護(hù)意義。IL-5則是由Th2細(xì)胞所分泌的另一種促炎性細(xì)胞因子，其在機(jī)體的炎性反應(yīng)中發(fā)揮信息傳遞功能，并能促進(jìn)B細(xì)胞分化及增殖［16］。故可間接增加IgA表達(dá)［17］。本研究結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平極顯著增高（P＜0.001），提示在IgAN病情進(jìn)展過程中，可能基于機(jī)體免疫應(yīng)答，不僅促炎性因子IL-5會(huì)有所增高，而且IL-4與IL-13抗炎性因子也同步增高。而與模型組比較，白藜蘆醇低、中、高劑量組大鼠腎組織IL-4、IL-5、IL-13的相對(duì)表達(dá)水平均依次降低，各細(xì)胞因子指標(biāo)組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），則進(jìn)一步提示在接受白藜蘆醇治療后，致炎細(xì)胞因子IL-5被下調(diào)，繼而將阻斷由致炎因子所致腎組織損害并減輕炎性反應(yīng)，當(dāng)炎性反應(yīng)降低后作為抗炎因子的IL-4、IL- 13其表達(dá)水平也隨之降低。

CIC是抗原與抗體在循環(huán)中所結(jié)合形成的免疫復(fù)合物，腎臟是其發(fā)生沉積的敏感靶標(biāo)。腎臟所接受的心輸出量為25%左右，抗原與抗體形成的復(fù)合物在流經(jīng)腎臟時(shí)將導(dǎo)致腎小球內(nèi)部呈高比例CIC狀態(tài)，繼而促使更大量的CIC可透過含大量帶負(fù)電荷成分（如硫酸類肝素與多糖蛋白等）的腎小球毛細(xì)血管壁，故導(dǎo)致帶正電荷的CIC易于在此發(fā)生沉積［18］。另外，CIC本身所具有的大分子量特征而不易被吞噬細(xì)胞吞噬也是其發(fā)生沉積的重要原因［19］。當(dāng)CIC沉積于腎組織系膜區(qū)后，即可通過吸引或活化炎性細(xì)胞及腎小球固有細(xì)胞，繼而開始釋放多種炎性介質(zhì)并引起細(xì)胞或組織損傷［20］。本次實(shí)驗(yàn)顯示，與模型組比較，白藜蘆醇低、中、高劑量組CIC濃度均顯著更低（P＜0.05），這與IL-4、IL-13 mRNA表達(dá)情況一致。該結(jié)果也可以從另一角度做出推論：抗炎因子IL-4、IL-13的分泌增加可能正是因?yàn)镮gA等免疫復(fù)合物沉積于系膜區(qū)，刺激局部產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，同時(shí)啟動(dòng)了相應(yīng)的抗炎機(jī)制所致。而白藜蘆醇則通過調(diào)節(jié)IL-4、IL-13的表達(dá)進(jìn)而間接亦或直接影響Th1/Th2的平衡，減少活化Th2細(xì)胞，同時(shí)調(diào)節(jié)B細(xì)胞的增殖與活化減少抗體過度分泌，最終導(dǎo)致CIC形成量減少起到治療IgAN的效果。

表2 各組大鼠血清CIC檢測(cè)結(jié)果（n=10）

4 結(jié)論

白藜蘆醇可明顯下調(diào)IgA大鼠腎組織總促炎性因子IL-5的表達(dá)，炎性反應(yīng)減弱后抗炎性因子IL-4與IL-13也隨之降低，同時(shí)白藜蘆醇也能顯著降低IgA大鼠血清CIC濃度，提示白藜蘆醇對(duì)IgAN不僅具積極免疫調(diào)節(jié)作用，而且也能較好阻遏其病機(jī)，可為IgAN患者的臨床治療提供新的思路。

［1］ 馬勇, 羅靜, 郭琿. 1, 25-二羥維生素D3對(duì)IgA腎病大鼠腎組織中白細(xì)胞介素-4表達(dá)的影響［J］. 中國(guó)藥物與臨床, 2016, 16（1）：12-15.

［2］ Donadio JV, Grande JP. IgA nephropathy［J］. N Engl J Med, 2002, 347（10）：738-748.

［3］ Lai KN, Chan LY, Guo H, et al. Additive effect of PPAR-gamma agonist and ARB in treatment of eqperimental IgA nephropathy［J］. Pediatr Nephrol, 2011, 26（2）：257-266.

［4］ 劉擘, 徐安平, 曾玉純, 等. 血尿酸水平與IgA腎病患者臨床及病理的關(guān)系［J］. 廣東醫(yī)學(xué), 2015, 36（13）：2068-2070.

［5］ Chintalacharuvu SR, Yamashita M, Bagheri N, et al. T cell cytokine polarity as a determinant of immunog-lobulin A（IgA）glycosylation and the severity of experimental IgA nephropathy［J］. Clin Exp Immunol, 2008, 153（3）：456-462.

［6］ Maeda S, Yanagihara Y. Inflammatory cytokines（IL-4, IL-5 and IL-13）［J］. Nihon Rinsho, 2001, 59（10）：1894-1899.

［7］ 劉順, 李赫宇, 趙玲. 白藜蘆醇降血尿酸、抗炎作用研究進(jìn)展［J］. 藥物評(píng)價(jià)研究, 2016, 39（2）：304-307.

［8］ Huang H, Peng Y, Long XD, et al. Tonsillar CD4+CD25+regulatory T cells from IgA nephropathy patients have decreased immunosuppressive activity in experimental IgA nephropathy rats［J］. Am J Nephrol, 2013, 37（5）：472-480.

［9］ Ricciardolo FLM, Sorbello V, Silvestri M, et al. TNF-α, IL-4Rα and IL-4 polymorphisms in mild to severe asthma from Italian Caucasians［J］. Int J Immunopathol Pharmacol, 2013, 26（1）：75-84.

［10］ Pozzi C, Andrulli S, Pain A, et al. Addition of azathioprine to corticosteroids does not benefit patients with IgA nephropathy［J］. J Am Soc Nephrol, 2010, 21（10）：1783-1790.

［11］ 薛楊, 林珊, 賈俊亞, 等. IgA腎病患者腎組織TNF-α表達(dá)與疾病活動(dòng)性的關(guān)系［J］. 廣東醫(yī)學(xué), 2010, 31（19）：2555-2557.

［12］ 葉海亮, 江燕, 孫偉. 益氣養(yǎng)陰法聯(lián)合雷公藤多苷片治療氣陰兩虛型IgA腎病23例［J］. 河南中醫(yī), 2016, 36（6）：1056-1058.

［13］ 陳薪薪, 仝歡, 陳宇, 等. 白藜蘆醇對(duì)小鼠腎纖維化TGF-β1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的干預(yù)研究［J］. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2016, 34（5）：1224-1227.

［14］ W?growska-Danilewicz M, Danilewicz M. Expression of α5β1 and α6β1 integrins in IgA nephropathy（IgAN）with mild and severe proteinuria. An immunohistochemical study［J］. International Urology and Nephrology, 2003, 36（1）：81-87.

［15］ Aversa G, Punnonen J, Cocks BG, et al. An interleukin 4（IL-4）mutant protein inhibits both IL-4 or IL-13-induced human immunoglobulin G4（IgG4）and IgE synthesis and B cell proliferation：support for a common component shared by IL-4 and IL-13 receptors［J］. The Journal of Experimental Medicine, 1993, 178（6）：2213-2218.

［16］ 曹廷容, 楊宏, 雷琴. 肺炎支原體感染合并支氣管哮喘患兒血清總IgE及IL-5的檢測(cè)及意義［J］. 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2013, 19（2）：241-243.

［17］ 陳小紅, 何芳, 柳青, 等. 腎型過敏性紫癱患者血清IL-5, IL-10, CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞測(cè)定及意義［J］. 疑難病雜志, 2013, 12（2）：140-141.

［18］ 張瑞. 免疫復(fù)合物與免疫性腎臟損傷［J］. 國(guó)際泌尿系統(tǒng)雜志, 2006, 26（4）：519-523.

［19］ Martinsson K, Skogh T, Mousavi S, et al. Deficiency of activating Fcγ-receptors reduces hepatic clearance and deposition of IC and increases CIC levels in mercury-induced autoimmunity［J］. PLoS One, 2010, 5（10）：e13413.

［20］ 趙杰, 陳瑩, 陳江華. 人參對(duì)家兔系膜增生性腎小球腎炎模型循環(huán)免疫復(fù)合物的影響［J］. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志, 2010, 11（2）：112-115.

（責(zé)任編輯 馬鑫）

Effects of Resveratrol on Renal Tissue of TH2 Inflammatory Factors and CIC from Serum of Rats with IgA Nephropathy

ZHOU Min
（Jiangsu Food & Pharmaceutical Science College，Huai’an 223003）

This work aims to investigate the effects of resveratrol on renal tissues of IL-4，IL-5 and IL-13 TH2 inflammatory factors and circulating immunocomplex（CIC）from serum of rats with IgA nephropathy. Ten normal rats were used as the normal group，and the other 40 rats were treated with fetal bovine gamma globulin（BGG）for 9 weeks to become 4 groups of IgA nephropathy（IgAN）rats. Resveratrol was administered to them at the end of the 9th week. According to the different dose of the drug，they were defined as model group（no drug），low dose group（15 g crude drug/kg），middle dose group（30 g crude drug/kg），and high dose group（45 g crude drug/kg）. Then they were killed at the end of the 12th week，and the validity of the model was tested by immunofluorescence staining. The expression levels of IL-13，IL-5 and IL-4 renal tissues were detected by RT-PCR，and the CIC concentration of serum was measured by ELISA. Results showed that the experimental model was successful. In contrast to the normal group，the relative expression levels of IL-4，IL-5 and IL-13 in the model group were significantly higher（P ＜ 0.001）. Compared with the model group，the relative expression levels of IL-4，IL-5，and IL-13 in the low，middle and high dose groups decreased gradually，and the comparison of the cytokine indexes between every two groups had statistical significance（P ＜ 0.01）. Compared with the normal group，the CIC concentration from serum in the model group was significantly higher（P ＜ 0.01），and those in the low，medium and high dose groups were higher than the normal group，but there was no significant statistical significance when compared with the normal group（P ＞ 0.05）；moreover，they showed a gradually decreasing trend in comparison with the model group and they were significantly lower（P ＜ 0.05）. In summary，resveratrol significantly down-regulates the expressions of totalpro-inflammatory factor IL-5 in the renal tissues of IgA rats，and the anti-inflammatory factors IL-4 and IL-13 decrease their values after the inflammatory reaction decreased. Besides，resveratrol also significantly reduce the CIC concentration of serum in IgA rats.

resveratrol；IgA nephropathy；TH2 inflammatory factor；circulating immunocomplex

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016-1065

2016-11-26

周敏，女，碩士研究生，講師，研究方向：炎癥機(jī)制及藥物治療；E-mail：minzhou2016@163.com