韓明子
(延邊州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心)
摘 要:本實(shí)驗(yàn)分4組,分別為白酒灌胃建立兔酒精性肝損傷模型組,對(duì)照組0.9%生理鹽水,?;撬釋?shí)驗(yàn)組分高低兩組。飼養(yǎng)2周后,提前1日斷飼,第2天用生物機(jī)能分析系統(tǒng)做動(dòng)脈導(dǎo)管測(cè)平均動(dòng)脈壓。測(cè)完血壓后,采血3m1,立即以3000r/min離心15min,取上層血清,按照試劑盒方法測(cè)定TG。結(jié)果表明與模型組相比,高低兩種濃度的(5%和2%)?;撬峋梢燥@著降低酒精性肝損傷兔的血清甘油三酯(P<0.05);高劑量組?;撬徇€能降低酒精性肝損傷兔血壓(P<0.05);肝臟病理切片量化分析顯示,高低兩種劑量?;撬峋娠@著降低酒精對(duì)肝臟的損傷(P<0.05),且高低劑量組的保護(hù)效果無顯著性差異(P>0.05)。
關(guān)鍵詞:?;撬幔痪凭愿尾。桓视腿?;量化分析
牛磺酸(taurine)是廣泛存在于人和動(dòng)物體內(nèi)的一種游離的氨基酸,它的生物學(xué)作用日益引起人們的重視[1]。肝臟是合成牛磺酸的主要場(chǎng)所,大量臨床和基礎(chǔ)研究表明,?;撬釋?duì)多種肝損傷具有保護(hù)作用[2、3],而它對(duì)酒精性肝損傷保護(hù)效果的研究并不多見,本次實(shí)驗(yàn)主要探討?;撬釋?duì)兔酒精性肝損傷的保護(hù)效果,從而為預(yù)防及治療酒精性肝損傷提供一些有益的參考。
酒精對(duì)人體的損害,尤其是對(duì)肝臟的毒性作用日益引起人們的重視。在西方國(guó)家,8O%肝硬變的原因是酒精中毒。酒精對(duì)病毒性肝炎、肝癌等的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后都有著重要的影響。我國(guó)現(xiàn)有酒民3億多,酒精性肝病的發(fā)病率在20%左右[1]。目前對(duì)酒精性肝損傷的研究工作偏重于篩選臨床治療藥物。如何通過飲食代替藥物來有效預(yù)防和治療酒精性肝病成為科研工作者研究的熱點(diǎn)。
?;撬嵊址Qα-氨基乙磺酸,最早由牛黃中分離出來,故得名,是一種特殊的氨基酸,是人體必不可少的一種營(yíng)養(yǎng)元素,有著平衡健康的奇妙功效。除了眼睛之外,?;撬徇€對(duì)其它器官有重要功效。例如,經(jīng)過研究證實(shí),人體心臟中?;撬岷孔罡?。?;撬崾峭ㄟ^保護(hù)心肌而增強(qiáng)心臟功能的。當(dāng)心肌細(xì)胞中鈣離子流入量過高時(shí),就會(huì)引發(fā)冠心病。?;撬峥梢哉{(diào)整心肌細(xì)胞中鈣離子的量,維持其平衡,實(shí)現(xiàn)強(qiáng)心。牛磺酸與心臟的關(guān)系已成為全世界重點(diǎn)研究的課題之一。此外,?;撬釋?duì)肺、肝臟、胃腸等都有保護(hù)作用。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與藥品
選取雄性白兔8只,隨機(jī)分為4組:對(duì)照組2只,模型組2只,?;撬岣邉┝拷M(5%)2只,?;撬岬蛣┝拷M(2%)2只。牛磺酸(食品級(jí))由北京健力藥業(yè)提供,50度簡(jiǎn)裝白酒(本地產(chǎn)散裝白酒)
1.2 造模及給藥途徑
正常對(duì)照組:每天早晨7時(shí)以0.9%生理鹽水灌胃。模型組:每天早晨7時(shí)以50度簡(jiǎn)裝白酒灌胃。5%?;撬幔ǜ邉┝浚┙M:早晨按模型組白酒計(jì)量灌胃,并于下7時(shí),以5%?;撬峁辔浮?%?;撬幔ǖ蛣┝浚┙M:早晨7時(shí)按模型組白酒計(jì)量灌胃,并于下午7時(shí),以2%?;撬峁辔?。各組兔均自由攝食、飲水,灌胃量各組均為10ml/kg bw,實(shí)驗(yàn)周期為2周。
1.3 測(cè)定指標(biāo)和方法
1.3.1 平均動(dòng)脈壓(MAP):實(shí)驗(yàn)2周末,前1日斷飼,第2天用生物機(jī)能分析系統(tǒng)做動(dòng)脈導(dǎo)管測(cè)平均動(dòng)脈壓。
1.3.2甘油三酯的測(cè)定:測(cè)完血壓后,采血3m1,立即以3000r/min離心15min,取上層血清,按照試劑盒方法測(cè)定TG。
1.3.3 肝臟冰凍切片量化分析:處死兔后,迅速剖取肝左葉,取部分肝臟組織快速冰凍切片,用蘇丹Ⅲ染色后,用北航病理圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行免疫組化定量分析。其中,在隨機(jī)選取的三個(gè)視野里,將發(fā)生病理改變的(脂肪變性)肝臟細(xì)胞作為陽性目標(biāo),在鏡下均為紅染。將陽性目標(biāo)在所選視野(即統(tǒng)計(jì)場(chǎng))中面積所占的比例定義為面密度(density of visualfield),將三個(gè)面密度取均值最后用于統(tǒng)計(jì)分析。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所有數(shù)據(jù)均以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SAS軟件包對(duì)各組變量值做方差分析的q檢驗(yàn)。
2 結(jié)果與討論
2.1 ?;撬釋?duì)兔血清TG和MAP的影響結(jié)果 (見表1)
由表1可見,在實(shí)驗(yàn)?zāi)?,模型組和其余三組的TG存在顯著性差異(P<0.0 5)。對(duì)照組、模型組以及高劑量5%?;撬峤M的MAP也存在顯著性差異。這說明?;撬岣叩蛣┝拷M均可顯著降低TG,尤其是?;撬岣邉┝拷M(5%)效果最佳。
2.2 冰凍切片量化分析結(jié)果(見表2)
由表2可見,模型組和其余三組面密度(陽性目標(biāo)總面積/統(tǒng)計(jì)場(chǎng)總面積)具有顯著性差異(P<0.05)。而高低劑量組之間不存在顯著性差異 (P<0.05)。與模型組兔相比,治療組兔肝臟的損傷程度顯著降低,高低劑量治療組之間沒有發(fā)現(xiàn)顯著性差異。
2.3 國(guó)內(nèi)外大量研究表明,酒精能對(duì)機(jī)體多種器官和系統(tǒng)產(chǎn)生不利的影響。其中肝臟是主要的受累器官。為此,本研究在參照相關(guān)方法的基礎(chǔ)上加以改良,通過白酒灌胃成功地復(fù)制出酒精性脂肪肝動(dòng)物模型[4]。該造模過程與人類飲酒極其相似,故尤其適用于酒精性脂肪肝的預(yù)防與治療的基礎(chǔ)研究。
2.4 本實(shí)驗(yàn)研究表明,模型組兔血壓高于正常組,且存在顯著性差異(P<0.05)。這說明酒精能引起兔血壓升高,而?;撬岣邉┝拷M兔血壓明顯下降,且與模型組存在顯著性差異(P<0.05)。此結(jié)果表明牛磺酸高劑量組能起到降壓作用。牛磺酸抗高血壓作用的機(jī)制目前尚未完全闡明,有作者發(fā)現(xiàn)在牛磺酸降壓作用的同時(shí),血中腎上腺素、去甲腎上腺素水平下降,并與血中?;撬釢舛壬仙酗@著的相關(guān)關(guān)系。
2.5 長(zhǎng)期大量飲酒對(duì)肝臟功能有損害,除可引起酒精性肝炎和肝硬化外,還容易發(fā)生酒精性脂肪肝。此種脂肪肝主要是屬于甘油三酯堆積的類型,此外,還可引起血清中甘油三酯升高。血清甘油三酯(TG)升高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素,在臨床上常作為冠心病的信息指標(biāo),模型組兔血清甘油三酯(TG)高于正常組和?;撬岣?、低劑量組,且存在顯著性差異(P<0.05),而正常組和?;撬岣摺⒌蛣┝拷M之間差異無顯著性,這說明?;撬岣?、低劑量組均可顯著降低TG,尤其是?;撬岣邉┝拷M(5%牛磺酸)效果最佳 。
2.6 牛磺酸廣泛分布在動(dòng)物組織內(nèi),海洋動(dòng)物中含量尤為豐富,而且具有特異性低、范圍廣、無毒性等特點(diǎn),對(duì)于它對(duì)脂肪肝的保護(hù)效果的研究,將為通過飲食來預(yù)防和治療酒精性肝損傷提供更廣泛的應(yīng)用前景。
參考文獻(xiàn)
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