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        不同頻率電針刺激緩解大鼠痛情緒的行為觀察

        2017-06-08 16:11:04秦國(guó)華馬洋趙欣王志華賈欣代潔瓊
        關(guān)鍵詞:電針

        秦國(guó)華 馬洋 趙欣 王志華 賈欣 代潔瓊 陳建鳴 張策 張宇

        【摘要】 目的:觀察不同頻率電針刺激對(duì)大鼠痛情緒的作用。方法:本研究以不同頻率電針刺激對(duì)痛情緒的作用為研究對(duì)象。給大鼠左側(cè)后腳掌注射完全弗氏佐劑(CFA),誘導(dǎo)其產(chǎn)生炎性痛并與環(huán)境相匹配,建立條件性位置回避(conditioned place avoidance,CPA)模型,給予大鼠環(huán)跳穴(GB30)電針刺激(電流3 mA,波寬0.1 ms,刺激頻率2、10、100 Hz),通過(guò)條件位置回避裝置觀察在電針刺激前后痛情緒行為變化。結(jié)果:2、10、100 Hz電針刺激均明顯反轉(zhuǎn)了大鼠的C-CPA反應(yīng),但各刺激頻率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:不同頻率的電針刺激均可緩解痛情緒,且無(wú)頻率依賴性。

        【關(guān)鍵詞】 電針; 刺激頻率; 條件位置逃避; 痛情緒

        Behavioral Observation of Different Frequencies Electroacupuncture Stimulation to Relieve Pain Emotion in Rats/QIN Guo-hua,MA Yang,ZHAO Xin,et al.//Medical Innovation of China,2017,14(14):001-004

        【Abstract】 Objctive:To observe the relieve effect of different frequencies electroacupuncture stimulation to pain emotion in rats.Method:In this study,we exploreded the effects of electroacupuncture(EA) at various frequencies on the pain emotion.Complete Freunds adjuvant (CFA) was subcutaneously injected into the left hind-paw to induce the inflammatory pain and match the environment to establish conditioned place avoidance (C-CPA) behavioral model,then Huantiao acupoints (GB30) in rats were treated by EA(current intensity 3 mA,width 0.1 ms,stimulus frequency 2,10,100 Hz),C-CPA behavioral responses were observed.Result:EA at 2,10,100 Hz stimulus frequency were all reversed the C-CPA behavioral responses,but there were no significant differences among them(P>0.05).Conclusion:EA at various stimulation frequencies all can eviate the pain emotion of rats,and there is no frequency dependence.

        【Key words】 Electroacupuncture; Stimulus frequency; Conditioned place avoidance; Pain emotion

        First-authors address:Physiology Department of the Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China

        doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2017.14.001

        世界衛(wèi)生組織(WHO)和國(guó)際疼痛研究協(xié)會(huì)(IASP)定義疼痛是組織損傷或潛在組織損傷所引起的不愉快感覺和情感體驗(yàn),包括痛感受和痛情緒兩個(gè)成分[1],已知前扣帶皮層(anterior cingulate cortex,ACC)是內(nèi)側(cè)痛覺系統(tǒng)的重要組成部分,它接受丘腦內(nèi)側(cè)核群的纖維投射,主要參與痛覺情緒信息的編碼[2],也有實(shí)驗(yàn)證明,痛情緒引起的條件位置逃避(conditioned place avoidance,CPA)反應(yīng)可通過(guò)切除大鼠雙側(cè)rACC得到緩解[3],這都說(shuō)明ACC在情感情緒調(diào)節(jié)過(guò)程中居于重要地位。

        以往的研究表明電針可以鎮(zhèn)痛,并且不同頻率電針刺激對(duì)大鼠痛感覺的作用機(jī)制有一定差異,低頻電針通過(guò)促進(jìn)脊髓上中樞的內(nèi)源性阿片肽釋放,作用于相應(yīng)的阿片受體;在脊髓內(nèi),低頻電針(2 Hz)和高頻電針(100 Hz)釋放內(nèi)啡肽和強(qiáng)啡肽,作用于δ受體和κ受體發(fā)揮其鎮(zhèn)痛作用,低頻電針在腦內(nèi)釋放腦啡肽,作用于μ受體發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用[4-11]。還有研究證實(shí)電針可以通過(guò)激活阿片受體緩解痛情緒反應(yīng)[5],10 Hz的電針刺激可通過(guò)激活μ阿片受體反轉(zhuǎn)大鼠CFA誘導(dǎo)的CPA反應(yīng)[6-7,12],但低頻電針(2 Hz)和高頻電針(100 Hz)是否也可以和10 Hz的電針刺激一樣有類似的緩解痛情緒的作用尚并不清楚。

        因此本實(shí)驗(yàn)利用CPA行為模型,給予大鼠環(huán)跳穴(GB30)電針刺激(電流3 mA,波寬0.1 ms,刺激頻率2、10、100 Hz),通過(guò)條件位置回避裝置觀察不同頻率電針刺激對(duì)痛情緒的影響。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組 選取購(gòu)于中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(中國(guó),北京,經(jīng)營(yíng)許可證編號(hào):SCXK-(軍)2012-0004)的健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,體重240~260 g,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為:生理鹽水(NS)假電針組、完全弗氏佐劑(CFA)+假電針組、CFA+2 Hz電針組、CFA+10 Hz電針組、CFA+100 Hz電針組5組,每組6~8只。

        1.2 儀器 腦立體定位儀(Narishige,日本);NeuroMotive軟件(Stoelting公司,美國(guó));ANY-Maze軟件(Stoelting公司,美國(guó));

        1.3 CPA反應(yīng)觀察 取術(shù)后5~7 d,體重增加的大鼠,在實(shí)驗(yàn)籠具中進(jìn)行CPA反應(yīng)測(cè)試[13-17],第1天去掉中間擋板,測(cè)大鼠在活動(dòng)裝置中的基線10 min;第2天隔開活動(dòng)裝置的中間擋板,將大鼠放入一側(cè)(非痛環(huán)境)適應(yīng)30 min,然后在大鼠左側(cè)腳掌皮下注射弗氏完全佐劑CFA(0.08 mL,40 μg)后在活動(dòng)裝置的另一側(cè)(痛環(huán)境)條件性適應(yīng)30 min;第3天測(cè)量方法同第1天,見圖1。

        1.4 電針刺激 電針穴位環(huán)跳穴靠近髖關(guān)節(jié),位于股骨頭大轉(zhuǎn)子最凸點(diǎn)與骶管裂孔連線的外1/3與中1/3交點(diǎn)處。刺激頻率為2、10、100 Hz,電流3 mA,波寬0.1 ms[6]。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Graph Pad Prism 6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用(x±s)表示,比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,比較采用 字2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 條件位置回避模型的建立 大鼠左側(cè)后腳掌分別注射0.9%氯化鈉注射液(NS)和CFA, NS組條件匹配前后在痛環(huán)境停留時(shí)間基本保持不變,CFA組條件匹配后痛側(cè)停留時(shí)間較匹配前縮短,對(duì)痛環(huán)境產(chǎn)生回避,前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1、圖2。

        2.2 不同頻率電針刺激對(duì)痛情緒的作用 于大鼠左側(cè)后腳掌注射CFA,同時(shí)環(huán)跳穴分別給予2、10、100 Hz的電針刺激,不同頻率電針組條件匹配前后痛環(huán)境停留時(shí)間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),痛環(huán)境均未產(chǎn)生明顯的回避反應(yīng),見表2、圖3。

        3 討論

        各種原因所致的慢性持續(xù)性疼痛給許多患者帶來(lái)巨大的痛苦,因疼痛而生的惡性情緒帶來(lái)的危害甚至大于疼痛本身。電針可以鎮(zhèn)痛,并且不同頻率電針刺激對(duì)大鼠痛感覺的作用機(jī)制有一定差異。前扣帶皮層(anterior cingulate cortex,ACC)與痛情緒有關(guān),ACC神經(jīng)元對(duì)傷害性刺激能產(chǎn)生反應(yīng)[18-19],電生理研究表明痛情緒時(shí)ACC腦區(qū)神經(jīng)元放電有明顯變化[13,15]。切除慢性痛患者的ACC和周圍皮層組織,能夠明顯緩解患者焦慮、抑郁等痛情緒反應(yīng),而對(duì)痛感覺沒有影響[16,20-21]。電針對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的影響不僅局限于內(nèi)源性阿片系統(tǒng),還可同時(shí)激活其他非肽類遞質(zhì),如多巴胺(DA)、5-羥色胺(5-HT)、縮膽囊素(CCK)、谷氨酸(Glu)等[22-24]。電針也可以緩解痛情緒,10 Hz電針刺激可以減弱完全弗氏佐劑(CFA)誘導(dǎo)產(chǎn)生條件性位置逃避(CPA)反應(yīng),激活A(yù)CC腦區(qū)μ-阿片受體緩解痛情緒[25]。

        本研究使用CFA誘導(dǎo)產(chǎn)生條件性位置逃避(CPA)裝置,分別2、10、100 Hz電針刺激,結(jié)果表明不同頻率電針刺激匹配前后痛環(huán)境停留時(shí)間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),無(wú)明顯的回避反應(yīng)。這與之前所研究的10 Hz電針刺激緩解痛情緒結(jié)果相同。且2、10、100 Hz組之間的回避分?jǐn)?shù)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說(shuō)明電針刺激緩解痛情緒無(wú)明顯的頻率依賴性。

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        (收稿日期:2017-04-10) (本文編輯:程旭然)

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