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        高效液相色譜法測(cè)定武力拔寒散中橙皮苷的含量*

        2017-06-05 14:14:37趙磊孫艷濤張晗馬琳琳于浪天
        化學(xué)分析計(jì)量 2017年3期
        關(guān)鍵詞:武力橙皮本發(fā)明

        趙磊,孫艷濤,張晗,馬琳琳,于浪天

        (1.四平市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林四平 136000; 2.吉林師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院,吉林四平 136000;3.吉林師范大學(xué)環(huán)境友好材料制備與應(yīng)用省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,吉林四平 136000;4.中國醫(yī)科大學(xué),南京 211198)

        高效液相色譜法測(cè)定武力拔寒散中橙皮苷的含量*

        趙磊1,孫艷濤2,3,張晗2,3,馬琳琳2,3,于浪天4

        (1.四平市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林四平 136000; 2.吉林師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院,吉林四平 136000;3.吉林師范大學(xué)環(huán)境友好材料制備與應(yīng)用省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,吉林四平 136000;4.中國醫(yī)科大學(xué),南京 211198)

        建立液相色譜測(cè)定武力拔寒散中橙皮苷含量的方法。以甲醇為流動(dòng)相A,以冰乙酸–水(1∶300)為流動(dòng)相B,進(jìn)行梯度洗脫,檢測(cè)波長為284 nm,流量為1.0 mL/min,柱溫為30℃。橙皮苷的質(zhì)量濃度在1.190 3~119.03 μg/mL范圍與色譜峰面積線性關(guān)系良好(r=0.999 9),檢出限為300 ng/g。樣品加標(biāo)回收率為95.00%~98.50%,測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%(n=6)。該方法簡單、快速、準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,可為全面評(píng)價(jià)和控制武力拔寒散制劑的質(zhì)量提供依據(jù)。

        武力拔寒散;花椒;橙皮苷;高效液相色譜法

        武力拔寒散是一種中藥制劑,它具有祛風(fēng)散寒,活血通絡(luò)的功效,主要用于治療感受風(fēng)寒,筋骨麻木,肩背酸痛,腰痛寒腿,飲食失調(diào),胃寒作痛,腎寒精冷,子宮寒冷,行經(jīng)腹痛,寒濕帶下等癥[1–3]。武力拔寒散制劑收錄于中國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中(WS3–B–1751–94)[4],現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有性狀鑒別與顯微鑒別。為了更好地控制與評(píng)價(jià)該制劑,需要對(duì)該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行進(jìn)一步的研究,建立一種快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。

        武力拔寒散是由白花菜子、花椒(青椒去目)二味藥經(jīng)提取加工制成的制劑,花椒是《中華人民共和國藥典》收載的常用中藥材[5–7]。青花椒中主要含有揮發(fā)油、酰胺類物質(zhì)和生物堿等成分[8–11],具有多種藥理活性[12–14]。研究表明,橙皮苷具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗菌、抗病毒等功效,目前尚未見有關(guān)花椒中橙皮苷檢測(cè)方法的報(bào)道。花椒中揮發(fā)油成分容易受外界條件影響,因此測(cè)定橙皮苷的含量可以更好地控制花椒的質(zhì)量,進(jìn)而能夠更好地對(duì)武力拔寒散藥品進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,提高用藥安全。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 主要儀器與試劑

        高效液相色譜儀:1260型,美國安捷倫科技有限公司;

        超純水器:2001B型,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;

        電子天平:BT125D型,感量為0.1/0.01 mg,上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠;

        超聲波清洗器:SK5200H型,功率為300 W,頻率為60 Hz,上海科導(dǎo)儀器有限公司;

        橙皮苷對(duì)照品:批號(hào)為110712–201316,含量為95.38%,中國食品藥品檢定研究院;

        橙皮苷對(duì)照品溶液:0.119 0 mg/mL,精密稱取橙皮苷對(duì)照品5.95 mg,置于50 mL容量瓶中,用甲醇稀釋至標(biāo)線,混勻;

        甲醇:HPLC級(jí),賽默飛世爾(中國)有限公司;

        武力拔寒散:(1)批號(hào)為3101029,北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠,(2)按處方工藝[白花菜子600 g、花椒(青椒去目)500 g,將以上二味藥材粉碎成粗粉,過篩,混勻]自制兩批,批號(hào)分別為20151107,20151209;

        實(shí)驗(yàn)用水為超純水,符合GB/T 6682–2008 《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》要求。

        1.2 色譜條件

        色譜柱:ZORBAX SB–C18柱[250 mm×4.6 mm,5 μm,安捷倫科技(中國)有限公司];檢測(cè)波長:284 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣體積:5 μL;流動(dòng)相流量:1.0 mL/min;流動(dòng)相:A組分為甲醇,B組分為冰乙酸–水(1∶300),梯度洗脫,洗脫程序見表1。

        表1 梯度洗脫程序

        1.3 樣品處理

        取武力拔寒散樣品,混勻,精密稱量1.122 g,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇100 mL,超聲處理30 min,放冷,過濾,用30 mL甲醇分別洗滌殘?jiān)叭萜?,合并濾液,蒸干,殘?jiān)眉状既芙夂?,定容?0 mL,搖勻,濾過,取續(xù)濾液分析。

        1.4 陰性樣品處理

        按照武力拔寒散處方工藝,去除花椒(去目)藥材,白花菜子粉碎成粗粉,過篩,混勻,精密稱量0.605 g,置于具塞錐形瓶中,加入甲醇100 mL,超聲處理30 min,放冷,過濾,用30 mL甲醇分別洗滌殘?jiān)叭萜鳎喜V液,蒸干,殘?jiān)眉状既芙夂?,定容?0 mL,搖勻,濾過,取續(xù)濾液分析。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 提取條件選擇

        分別以甲醇、20%甲醇、水作為提取溶劑進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果表明甲醇的提取率最高,回收率達(dá)到96.91%。以甲醇為提取溶劑,提取時(shí)間分別選擇5,10,20,30和40 min進(jìn)行提取試驗(yàn),結(jié)果表明,隨著提取時(shí)間的增加提取率隨之增高,提取30 min以后提取率趨于穩(wěn)定,因此提取時(shí)間定為30 min。

        2.2 色譜條件優(yōu)化

        參照文獻(xiàn)[12–15],選擇ODS色譜柱作為分析色譜柱,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)規(guī)格為(250 mm×4.6 mm,5 μm)的色譜柱優(yōu)于(150 mm×4.6 mm,5 μm)的色譜柱。分別以甲醇–冰乙酸水溶液(1∶300)、甲醇–水、甲醇–0.1%磷酸作為流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)色譜峰形差別較大,采用甲醇為流動(dòng)相(A),以冰乙酸–水(1∶300)為流動(dòng)相(B)效果最佳。由于樣品中雜質(zhì)峰多,為了縮短分析時(shí)間,采用梯度洗脫方式,對(duì)強(qiáng)保留物質(zhì)進(jìn)行洗脫。洗脫初始甲醇為38%,運(yùn)行35 min,保證橙皮苷色譜峰完全分離。36~40 min甲醇占比為100%,目的是沖洗色譜柱,洗脫強(qiáng)保留物質(zhì),減少分析時(shí)間。41~70 min甲醇占比38%,該階段為平衡色譜柱時(shí)間。在優(yōu)化的色譜條件下,橙皮苷對(duì)照品溶液、武力拔寒散樣品溶液、陰性樣品溶液的色譜圖分別見圖1~圖3。由圖1~圖3可見,橙皮苷與樣品中其它成分色譜峰分離良好,色譜峰形比較理想,可以進(jìn)行定量分析。

        圖1 橙皮苷對(duì)照品溶液、寒散樣品溶液、陰性樣品溶液高效液相色譜圖

        2.3 線性關(guān)系和檢出限

        精密吸取橙皮苷對(duì)照品溶液0.1,3,5,7,10 mL,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至標(biāo)線,混勻,配制成質(zhì)量濃度分別為1.190,35.70,59.50,83.3,119.0 μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,依次取溶液注入液相色譜儀,按照1.2色譜條件對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定,以色譜峰面積(y)為縱坐標(biāo),溶液的質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,以橙皮苷色譜峰的信噪比(S/N)為3時(shí)計(jì)算橙皮苷的檢出限,線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限結(jié)果見表2。

        表2 線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

        2.4 精密度試驗(yàn)

        取批號(hào)為3101029的武力拔寒散樣品6份,按照1.3方法制備樣品溶液,并依照1.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算樣品中橙皮苷的含量及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,結(jié)果見表3。由表3可知,本法測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%,表明本法測(cè)量精密度良好。

        表3 樣品中橙皮苷含量測(cè)定結(jié)果

        2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

        取批號(hào)為3101029的武力拔寒散樣品1.0758 g,按照1.3方法制備樣品溶液,分別放置3,6,9,12,15 h,按照1.2色譜條件測(cè)定色譜峰面積,考察方法的穩(wěn)定性,測(cè)定結(jié)果見表4。

        表4 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

        由表4可知,橙皮苷色譜峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.76%(n=5),表明樣品溶液在15 h內(nèi)基本穩(wěn)定,說明該分析方法穩(wěn)定性良好。

        2.6 加標(biāo)回收試驗(yàn)

        精密稱取已知含量的武力拔寒散樣品6份(批號(hào)為3101029,取樣量按約含橙皮苷0.4 mg),分別依次精密加入以甲醇配制的質(zhì)量濃度為0.119 0 mg/mL的橙皮苷對(duì)照品溶液3,5,5,10,10 mL,按1.3方法制備加標(biāo)樣品溶液,并依次進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算橙皮苷的標(biāo)回收率,結(jié)果見表5。由表5可知,橙皮苷的加標(biāo)回收率為95.00%~98.50%,表明本方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度較高。

        表5 加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果

        3 結(jié)語

        參照液相色譜法測(cè)定橙皮苷的色譜條件,利用高效液相色譜法定量分析制劑中含量較高的橙皮苷。采用甲醇–冰乙酸水溶液(1∶300)作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,所得色譜峰峰形對(duì)稱,可以有效地縮短分析時(shí)間,滿足分析要求。該方法具有專屬性強(qiáng)、精密度高、重復(fù)性好的特點(diǎn),為控制武力拔寒散制劑的質(zhì)量提供理論依據(jù)。

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        一種基于光學(xué)傳感器的紙張?zhí)妓徕}含量測(cè)定的新方法與裝置

        公開(公告)號(hào):CN106525743A 公開(公告)日:2017.03.22

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:福建農(nóng)林大學(xué)

        摘要本發(fā)明涉及碳酸鈣含量測(cè)定的技術(shù)領(lǐng)域,公開一種基于光學(xué)傳感器的紙張?zhí)妓徕}含量測(cè)定的新方法與裝置。該裝置包括用于分散紙張和加酸酸化的酸化反應(yīng)槽、沉淀劑儲(chǔ)存槽、計(jì)量泵、溶液混合器、設(shè)有比色皿的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)和計(jì)算機(jī),所述酸化反應(yīng)槽和沉淀劑儲(chǔ)存槽分別通過設(shè)有閥門和計(jì)量泵的管道連通溶液混合器,溶液混合器連通比色皿,所述比色皿設(shè)有出液口。該方法通過對(duì)紙張進(jìn)行酸化處理后,對(duì)酸化溶液進(jìn)行光譜檢測(cè)得到所述紙張中碳酸鈣含量。本發(fā)明裝置結(jié)構(gòu)簡單,操作簡便,極大的改善了檢測(cè)的工作強(qiáng)度,減小人工操作的誤差。能夠快速實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確測(cè)定紙張中的碳酸鈣含量,檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度高。

        一種基于膜富集比色快速檢測(cè)紙質(zhì)包裝材料中甲醛含量的方法

        公開(公告)號(hào):CN106525839A 公開(公告)日:2017.03.22

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:上海煙草集團(tuán)有限責(zé)任公司;上海煙草包裝印刷有限公司

        摘要本發(fā)明提供一種基于膜富集比色快速檢測(cè)紙質(zhì)包裝材料中甲醛含量的方法,包括以下步驟:(1)取甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,加入顯色試劑,獲得標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液;(2)將標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液中顯色產(chǎn)物富集至過濾膜上,與色卡比較,制作比色卡;(3)將紙質(zhì)包裝材料試樣加水混合,浸泡提取后移取上層清液,加入顯色試劑,獲得顯色溶液;(4)將顯色溶液中的顯色產(chǎn)物富集至過濾膜上,獲得顯色過濾膜;(5)將顯色過濾膜與比色卡進(jìn)行比色,從而獲得試樣中甲醛含量。本發(fā)明提供的上述方法,首次將膜富集與比色法進(jìn)行結(jié)合用于甲醛的檢測(cè)中,能夠快速測(cè)定紙質(zhì)包裝材料及其油墨中甲醛含量,提高測(cè)定準(zhǔn)確性和靈敏度。

        一種測(cè)定合金鋼中痕量氧、氮元素的方法

        公開(公告)號(hào):CN106525757A 公開(公告)日:2017.03.22

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:陜西宏遠(yuǎn)航空鍛造有限責(zé)任公司

        摘要本發(fā)明涉及一種測(cè)定合金鋼中痕量氧、氮含量的方法,包括步驟1:試驗(yàn)條件準(zhǔn)備;步驟2:制備試樣;步驟3:空白試驗(yàn);步驟4:氧氮分析儀校準(zhǔn)(4.1:使用鋼中氧氮含量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn),4.2:測(cè)定鋼中氧氮含量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確定校準(zhǔn));步驟5:測(cè)定試樣中痕量氧氮含量。本發(fā)明提高了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,解決了合金鋼中痕量氧、氮含量的測(cè)定難題。

        一種采用B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測(cè)定重酒石酸去甲腎上腺素含量的方法

        公開(公告)號(hào):CN106525926A 公開(公告)日:2017.03.22

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:遼寧石油化工大學(xué)

        摘要本發(fā)明涉及一種采用B-Z化學(xué)振蕩法測(cè)定重酒石酸去甲腎上腺素含量的方法,通過對(duì)影響振蕩反應(yīng)的4種主要因素,(NH4)2Ce(SO4)3,KBrO3,HOOCCH2COOH,H2SO4濃度進(jìn)行探討,確定了B-Z反應(yīng)中重酒石酸去甲腎上腺素檢測(cè)的最佳濃度條件;進(jìn)而考察了最佳的振蕩反應(yīng)溫度。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,通過重酒石酸去甲腎上腺素對(duì)B-Z化學(xué)振蕩體系擾動(dòng)的大小與其濃度成線性關(guān)系來測(cè)定其含量,可用于重酒石酸去甲腎上腺素的日常例行分析檢測(cè)。

        一種赭曲霉毒素A含量檢測(cè)方法

        公開(公告)號(hào):CN106556585A 公開(公告)日:2017.04.05

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:百奧森(江蘇)食品安全科技有限公司

        摘要本發(fā)明公開了一種赭曲霉毒素A含量檢測(cè)方法,包括以下步驟:樣品前處理:取蔬果樣品碾碎,加入萃取劑,混勻,采用超聲波快速萃取30~60 min,萃取溫度為30~40℃,離心,取上清,將上清過赭曲霉毒素A免疫親和柱純化,依次用真菌毒素清洗緩沖液、水淋洗免疫親和柱,然后用甲醇洗脫,收集洗脫液,將洗脫液過濾,取濾液得到待測(cè)樣品溶液;所述萃取劑為乙腈和四氫呋喃的混合液。本發(fā)明可用于復(fù)雜基體中痕量組的赭曲霉毒素A定量快速測(cè)定,結(jié)果更加準(zhǔn)確,更有利于目前市場(chǎng)的發(fā)展與推廣。

        一種檢測(cè)食品中果糖的方法

        公開(公告)號(hào):CN106525801A 公開(公告)日:2017.03.22

        申請(qǐng)(專利權(quán))人:蘭州大學(xué);蘭州大學(xué)中衛(wèi)高新技術(shù)研究院

        摘要本發(fā)明提供了一種檢測(cè)食品中果糖的方法,其步驟為a.配制儲(chǔ)備液;b.制備標(biāo)準(zhǔn)溶液;c.測(cè)定熒光光譜;d.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。熒光譜圖中存在572 nm和500 nm兩個(gè)峰,基于兩個(gè)波長的熒光強(qiáng)度比值對(duì)果糖進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,分析時(shí)間短,操作條件溫和,重現(xiàn)性好,且對(duì)果糖的檢出限低,具有快速、簡便、穩(wěn)定和高靈敏的優(yōu)點(diǎn)。

        Determination of Hesperidin in Wuli Bahan Powders by High Performance Liquid Chromatography

        Zhao Lei1, Sun Yantao2, 3, Zhang Han2, 3, Ma Linlin2,3, Yu Langtian4
        (1. Siping Institute for Food and Drug Control, Siping 136000, China; 2. College of Chemistry, Jilin Normal University, Siping 136000, China; 3. Key Laboratory of Preparation and Applications of Environmmental Frendly Materials, Jilin Normal University, Siping 136000, China; 4. Chinese Pharmaceutical University, Nanjing 211198, China)

        A method was established to determine hesperidin in Wuli Bahan powders by high performance liquid chromatography. The mobile phase was methanol (A) and acetic acid–water (1∶300)(B) with gradient elution program. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was 284 nm. The column temperature was 30℃. The content of hesperidin had good linear relationship with the chromatographic peak area in the range of 1.190 3–119.03 μg/mL with the correlation coefficient of 0.999 9, the detection limit was 300 ng/g. The sample recovery rates were 95.00%–98.50%, and the RSD was 1.0%(n=6). The method is simple, rapid, accurate and reproducible, which provides a reference for quality control of Wuli Bahan powders.

        Wuli Bahan powders; chinese prickly ash; hesperidin; HPLC

        O657.7

        A

        1008–6145(2017)03–0050–04

        *2016國家級(jí)大學(xué)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201610203010);四平市科技局項(xiàng)目(2014042)

        聯(lián)系人:趙磊;E-mail: zhaolei0433@sina.com

        2017–03–13

        10.3969/j.issn.1008–6145.2017.03.011

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