河南省農(nóng)藥檢定站 馬麗娜 郝小磊 王青霞

15% 雙氟·氯氟吡氧乙酸異辛酯懸浮劑高效液相色譜分析

河南省農(nóng)藥檢定站 馬麗娜 郝小磊 王青霞

雙氟磺草胺是由美國陶氏農(nóng)業(yè)科學(xué)公司開發(fā)的三唑并嘧啶磺酰胺類除草劑。雙氟磺草胺是三唑并嘧啶磺酰胺類超高效除草劑，雙氟磺草胺是內(nèi)吸傳導(dǎo)型除草劑，可以傳導(dǎo)至雜草全株。在低溫下藥效穩(wěn)定，即使是在2 ℃時(shí)仍能保證穩(wěn)定藥效，這一點(diǎn)是其他除草劑無法比擬的。雙氟磺草胺殺草譜廣，可防除麥田大多數(shù)闊葉雜草，包括豬殃殃（茜草科）﹑麥家公（紫草科）等難防雜草，并對(duì)麥田中最難防除的澤漆（大戟科）有非常好的抑制作用。氯氟吡氧乙酸異辛酯，屬內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗后莖葉處理除草劑，施藥后很快被雜草吸收，使敏感植物出現(xiàn)典型激素類除草劑的反應(yīng)并傳導(dǎo)到全株各部位。適用于小麥﹑大麥﹑玉米﹑葡萄﹑果園﹑牧場﹑林地﹑草坪等地防除闊葉雜草；如豬殃殃﹑卷莖蓼﹑馬齒莧﹑龍葵﹑田旋花﹑蓼﹑莧等，對(duì)禾本科雜草無效。本文研究了雙氟磺草胺﹑氯氟吡氧乙酸異辛酯的分析方法，該方法快速﹑準(zhǔn)確﹑分離效果佳，能滿足產(chǎn)品的分析要求。

一、試驗(yàn)部分

（一）試劑和溶液

乙腈：色譜純；水：二次蒸餾水；雙氟磺草胺標(biāo)樣：已知含量為95%；氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣：已知含量為96%；15%雙氟·氯氟吡懸浮劑試樣。

（二）儀器

高效液相色譜儀：美國Agilent1260型， 帶 有 紫 外 光檢測(cè)器（VWD）和自動(dòng)進(jìn)樣器；Agilent色譜工作站；色譜柱：150 mm×4.6 mm（i.d）不繡鋼柱，內(nèi)裝XDB-C18，5μm填料。

（三）液相色譜操作條件

流動(dòng)相：乙腈+水=80+20（V+ V）；流量：1.0 mL/min；柱溫：室溫；檢測(cè)波長：265 nm；進(jìn)樣體積：5μl。上述色譜條件下雙氟磺草胺的保留時(shí)間約為1.523 min，氯氟吡氧乙酸異辛酯保留時(shí)間約為6.160 min。

上述液相色譜操作條件，系典型操作參數(shù)，可根據(jù)不同儀器特點(diǎn)，對(duì)給定的操作參數(shù)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以期獲得最佳效果。標(biāo)樣和樣品典型色譜圖（見圖1﹑圖2﹑圖3）。

圖1 雙氟磺草胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 氯氟吡氧乙酸異辛酯高效液相色譜圖

圖3 15%雙氟?氯氟吡懸浮劑高效液相色譜圖

（四）測(cè)定步驟

1.標(biāo)樣溶液的配制。稱取雙氟磺草胺標(biāo)準(zhǔn)品0.03 g（精確至0.0002 g）氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)準(zhǔn)品0.03 g（精確至0.0002 g），各置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋至刻度，超聲波震蕩10 min，取出冷卻至室溫，搖勻。用0.45 μm濾膜過濾，搖勻備用。

環(huán)腐棒桿菌在種薯中越冬，成為翌年初侵染源。病薯播下后，一部分芽眼腐爛不發(fā)芽，一部分是出土的病芽，病菌沿維管束上升至莖中部或沿莖進(jìn)入新結(jié)薯塊而致病。適合環(huán)腐棒桿菌生長溫度20～23℃，最高31～33℃，最低1～2℃。致死溫度為干燥情況下50℃。

2.試樣溶液配制。稱取1.0 g（精確至0.0002 g）置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀釋至刻度，超聲波震蕩10 min，取出冷卻至室溫，搖勻。用0.45 μm濾膜過濾，搖勻備用。

3.測(cè)定。在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，待相鄰2針響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液﹑試樣溶液﹑試樣溶液﹑標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

4.計(jì)算。將測(cè)得的2針試樣溶液和2針標(biāo)樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X按式（1）計(jì)算：

式中：

——雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

——試樣的質(zhì)量， g；

——標(biāo)樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；

——試樣溶液色譜圖上雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯峰面積的平均值；

二、結(jié)果與分析

（一）流動(dòng)相的優(yōu)化

根據(jù)該化合物特點(diǎn)，使用不同比例的甲醇和水，乙腈和水作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行檢測(cè)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用乙腈+水=80+20（V+V），作為流動(dòng)相，分離效果好，峰形對(duì)稱，因此選擇該流動(dòng)相。

（二）檢測(cè)波長的選擇

通過Agilent1260高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得雙氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸異辛酯紫外波掃描圖。從圖中看到雙氟磺草胺的最大吸收在260 nm附近，氯氟吡氧乙酸異辛酯的最大吸收波長在254 nm附近，為減少雜質(zhì)的干擾﹑達(dá)到分離的效果，將檢測(cè)波長定為265 nm。

（三）色譜柱的優(yōu)化

色譜柱經(jīng)C18和C8對(duì)比，選用反相填料C18柱，在保證雜質(zhì)分離徹底的情況下，大幅縮短分析時(shí)間。

（四）分析方法的線性測(cè)定

將標(biāo)樣溶液在上述色譜條件下分別進(jìn)行分析，進(jìn)樣量依次為1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以雙氟磺草胺的峰面積為縱坐標(biāo)，以它們不同進(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)作圖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得雙氟磺草胺線性方程：Y=7482.3X+53.1，線性相關(guān)系數(shù)0.9 998（見表1，圖4）。

將試樣溶液在上述色譜條件下分別進(jìn)行分析，進(jìn)樣量依次為1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以氯氟吡氧乙酸異辛酯的峰面積為縱坐標(biāo)，以它們不同進(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo)作圖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得氯氟吡氧乙酸異辛酯線性方程：Y=1011.7X+11，線性相關(guān)系數(shù)0.9 998（見表2，圖5）。

（五）方法的精密度試驗(yàn)

按照測(cè)定步驟對(duì)同一試樣5次平行測(cè)定，結(jié)果見表3。

（六）方法準(zhǔn)確測(cè)定

稱取5份一定量的試樣，分別準(zhǔn)確加入適量標(biāo)樣溶液，在上述色譜條件下測(cè)定，測(cè)得雙氟磺草胺的平均回收率為 98.84% ，氯氟吡氧乙酸異辛酯的平均回收率為 99.78 %，結(jié)果見表4。

表1 分析方法的線性相關(guān)測(cè)定數(shù)據(jù)

表 2 分析方法的線性相關(guān)測(cè)定數(shù)據(jù)

表3 精密度試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

三、結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，使用本方法測(cè)定雙氟磺草胺﹑氯氟吡氧乙酸異辛酯的有效成分的高效色譜分析，不但雜質(zhì)分離效果好，準(zhǔn)確度﹑精密度高，線性關(guān)系好，分析時(shí)間短，操作簡便，而且符合定量要求，能滿足產(chǎn)品的分析要求。

圖4 雙氟磺草胺線性關(guān)系圖

圖5 氯氟吡氧乙酸異辛酯線性關(guān)系圖

表4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)