程曉彤

（遼寧省遼陽(yáng)市傳染病醫(yī)院，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物兩種方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比觀察

程曉彤

（遼寧省遼陽(yáng)市傳染病醫(yī)院，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

目的 對(duì)比分析酶聯(lián)免疫法（Elisa）與化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法（CMIA）對(duì)乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物檢測(cè)效果。方法隨機(jī)選取確診為HBV感染的患者200例和同期在本院進(jìn)行體檢的正常健康人群30例。所有納入本次研究的研究對(duì)象均通過(guò)半自動(dòng)高通量Elisa方法和CMIA法對(duì)其HBV血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比兩種檢測(cè)方法的CV值差異。結(jié)果CMIA檢測(cè)各項(xiàng)HBV血清標(biāo)志物的CV值（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為3.62%、5.52%、3.61%、8.20%和18.12%）均顯著小于Elisa（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為7.11%、12.31%、7.98%、11.82%和22.23%）（P＜0.05），檢測(cè)符合率（96.64%）顯著大于Elisa法（87.52%）（P＜0.05）；CMIA與Elisa檢測(cè)HBsAg最低濃度均可達(dá)到0.10 IU/mL，兩組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論相對(duì)于半自動(dòng)高通量Elisa檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物，全自動(dòng)高通量CMIA檢測(cè)質(zhì)量更高、重復(fù)性更好、檢測(cè)準(zhǔn)確度和精確度更優(yōu)。

酶聯(lián)免疫法；化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法；血清標(biāo)志物；乙肝

目前，我國(guó)各種乙肝病患的人數(shù)已經(jīng)超過(guò)一億，并且流行病學(xué)研究表明[1-2]，家族間的垂直傳播是造成乙肝傳染患病的主要因素之一，所謂的家族間垂直傳播也就是指母親或者父親將乙肝病毒傳染給下一代。雖然目前對(duì)還為研究乙肝徹底治療的方法，但是對(duì)乙肝的預(yù)防幾乎可以達(dá)到100%的成功的效果。所以，對(duì)于感染乙肝病毒的成人夫妻，只要其按照嚴(yán)格的計(jì)劃免疫預(yù)防程序進(jìn)行乙肝病毒的預(yù)防接種，就可以保證新生兒完全不會(huì)受到乙肝病毒的感染。因此，對(duì)疑似乙肝患者進(jìn)行乙肝血清檢測(cè)可以有效的防治乙肝的傳播與傳染。本文即對(duì)比目前乙肝五項(xiàng)檢測(cè)中最為常用的Elisa法和CMIA法對(duì)乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果的差異，為選擇最好的乙肝五項(xiàng)檢測(cè)方法提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本次研究所納入的血清均為本院2014年1月～2016年1月確診為HBV感染的患者200例和同期在本院進(jìn)行體檢的正常健康人群。200例確診為HBV感染的患者中男126例和女74例，年齡26～62周歲，平均年齡（40.31+6.75）周歲。30例健康人群中男15例和女15例，年齡25～65周歲，平均年齡（40.05+6.81）周歲。所有納入本次研究的血清來(lái)源對(duì)象均由本次研究的研究人員向其詳細(xì)介紹本次研究目的、意義以及主要研究?jī)?nèi)容的前體下，自愿加入本次研究，簽訂知情確認(rèn)書(shū)后方進(jìn)行本次研究。

1.2 儀器與試劑 半自動(dòng)高通量Elisa檢測(cè)儀器：型號(hào)，安圖斯PHOMO全自動(dòng)酶標(biāo)儀[安圖實(shí)驗(yàn)儀器(鄭州)有限公司]。所有ELisa法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)血清標(biāo)志物的試劑和試劑盒均購(gòu)買(mǎi)于英科新創(chuàng)(廈門(mén))科技有限公司。

全自動(dòng)板式發(fā)光免疫分析法檢測(cè)儀器：ADC CLIA 400全自動(dòng)板式發(fā)光免疫分析儀（生產(chǎn)商：煙臺(tái)艾德康生物科技有限公司）。所有CMIA法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)血清標(biāo)志物的試劑和試劑盒均購(gòu)買(mǎi)于鄭州安圖生物工程股份公司。

1.3 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) Elisa法陽(yáng)性判斷以所購(gòu)買(mǎi)安圖實(shí)驗(yàn)儀器有限公司，型號(hào)是phomo全自動(dòng)酶標(biāo)儀，以英科新創(chuàng)(廈門(mén))科技有限公司的試劑所配備的陽(yáng)性判斷說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，即當(dāng)S/CO＞1.0為陽(yáng)性（其中S代表檢測(cè)病患血液樣本的OD值，CO為檢測(cè)臨界OD值）。而HBeAb與HBcAb則是以S/CO不超過(guò)1.0為陽(yáng)性。

CMIA檢測(cè)法陽(yáng)性的判定則是直接以測(cè)定乙肝血清標(biāo)志物的濃度為準(zhǔn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次所有需要進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的數(shù)據(jù)均選用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPAA19.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)和例數(shù)表示，組間的比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用“x±s”表示，組間的比較采用t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法CV值對(duì)比分析 CMIA檢測(cè)各項(xiàng)HBV組血清標(biāo)志物的CV值均顯著小于Elisa組（P＜0.05），檢測(cè)符合率為96.64%，顯著大于Elisa法的87.52%（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩種高通量Elisa檢測(cè)方法對(duì)HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)符合率和CV值對(duì)比分析（%）

2.2 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)HBsAg最低濃度對(duì)比分析 CMIA與Elisa檢測(cè)HBsAg最低濃度均可達(dá)到0.10 IU/mL，兩組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)HBsAg最低濃度對(duì)比分析

3 討論

慢性乙型肝炎（簡(jiǎn)稱(chēng)乙肝）是指乙肝病毒檢測(cè)為陽(yáng)性，病程超過(guò)半年或發(fā)病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現(xiàn)者。臨床表現(xiàn)為乏力、畏食、惡心、腹脹、肝區(qū)疼痛等癥狀。肝大，質(zhì)地為中等硬度，有輕壓痛。病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大，肝功能可異?；虺掷m(xù)異常。根據(jù)臨床表現(xiàn)分為輕度、中度和重度。而慢性乙肝攜帶是指乙肝病毒檢測(cè)為陽(yáng)性，無(wú)慢性肝炎癥狀，1年內(nèi)連續(xù)隨訪3次以上血清ALT和AST均無(wú)異常，且肝組織學(xué)檢查正常者[3]。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專(zhuān)一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。目前，酶聯(lián)免疫法是臨床上檢測(cè)乙肝五項(xiàng)最為普遍的方法之一，但是由于酶聯(lián)免疫法實(shí)驗(yàn)步驟較多，存在多種影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素，所以極易造成Elisa檢測(cè)結(jié)果誤差較大[4]。因此，對(duì)Elisa實(shí)驗(yàn)的各個(gè)步驟進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化系統(tǒng)化的建立十分重要[5-6]。但是，目前我國(guó)各級(jí)醫(yī)院Elisa檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的自動(dòng)化水平具有明顯的差異，這也造成目前我國(guó)醫(yī)院Elisa檢測(cè)各個(gè)步驟的標(biāo)準(zhǔn)化工作十分不完善[7]。

化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法是在放射免疫分析法和Elisa檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行有效的改進(jìn)而新形成的一種檢測(cè)方法，這種新型的檢測(cè)方法不僅具備放射免疫分析法敏、特異、簡(jiǎn)便易行、用樣量少等優(yōu)點(diǎn)，而且兼具酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高等優(yōu)勢(shì)[8]。而本文所使用的ADC CLIA 400全自動(dòng)板式發(fā)光免疫分析儀是采用微粒子化學(xué)發(fā)光的技術(shù)對(duì)人體內(nèi)的微量成份以及藥物濃度進(jìn)行定量測(cè)定，該系統(tǒng)具有高度的特異性、高度的敏感性、高度的穩(wěn)定性等[9]。

本文對(duì)比目前最為常見(jiàn)的Elisa和CMIA法檢測(cè)方法對(duì)HBV血清標(biāo)志物的進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，CMIA檢測(cè)各項(xiàng)HBV血清標(biāo)志物的CV值（BsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為3.62%、5.52%、3.61%、8.20%和18.12%）均顯著小于Elisa（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb的CV值分別為7.11%、12.31%、7.98%、11.82%和22.23%）（P＜0.05），檢測(cè)符合率（96.64%）顯著大于Elisa法（87.52%）（P＜0.05）；CMIA與Elisa檢測(cè)HBsAg最低濃度均可達(dá)到0.10 IU/mL，兩組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。造成Elisa法檢測(cè)CV值過(guò)高和檢測(cè)符合率較低主要原因可能是Elisa檢測(cè)方法靈敏度過(guò)高，且每?jī)蓚€(gè)樣本之間檢測(cè)間隔過(guò)低導(dǎo)致容易出現(xiàn)樣本間的污染或者其他相互影響，進(jìn)而導(dǎo)致較高的CV值以及顯著低于CMIA法的檢測(cè)符合率（P＜0.05）[10]。

綜上所述，相對(duì)于全自動(dòng)高通量Elisa檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物，全自動(dòng)MIA檢測(cè)質(zhì)量更高、重復(fù)性更好、檢測(cè)準(zhǔn)確度和精確度更優(yōu)。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2017.07.031