程偉青　吳水華　鄧笑治

摘要[目的]建立微波消解-ICP-MS法測定金線蓮中微量元素，為企業(yè)種植金線蓮及質量標準的制定提供依據(jù)。[方法]樣品微波消解后，采用ICP-MS法測定各元素含量，比較不同品種、不同栽培方式及月齡對金線蓮中各微量元素的影響。[結果]各微量元素標液工作曲線的線性良好，相關系數(shù)≥0.999，精密度RSD≤4.4%，重復性RSD≤5.8%，回收率89.4%～114.2%，回收率RSD ≤4.8%。金線蓮不同品種間微量元素含量有較大差異，其中以Ca、Mg、Fe、Mn、Zn的含量較高。[結論]金線蓮中的微量元素含量隨種植周期的延長而增長。該方法快捷準確、靈敏穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，可用于同時測定金線蓮中各微量元素的含量。

關鍵詞金線蓮；微量元素；ICP-MS；微波消解；栽培方式

中圖分類號S567.23+9文獻標識碼A文章編號0517-6611（2017）20-0123-03

Abstract[Objective]The research aimed to establish the microwave digestion inductively coupled plasma mass spectrometry （ICPMS） method for content determination of trace elements in A. roxburghii，which provided the basis for the development of A. roxburghii and the quality standard. [Method]After the treatment of microwave digestion， ICPMS method was used in the determination. The effects of different cultivars， different cultivation methods and age on the trace elements of A. roxburghii were studied.[Result]The standard liquid working curves of trace elements had good linearity， with the correlation coefficients of more than 0.999. The relative standard deviation（ RSD） of precision was less than 4.4% and RSD of repeatability was less than 5.8%.The average recovery was 89.4%-114.2%，with RSD of less than 4.8%. Different varieties of A. roxburghii presented great differences in contents of inorganic elements， with high content of Ca， Mg， Fe， Mn， Zn. [Conclusion ]The content of trace elements increase along with the prolonged cultivation cycle.The method is fast and accurate， sensitive and stable， good reproducibility. It can be used for the simultaneous determination of trace elements in A. roxburghii.

Key wordsAnoectochilus roxburghii （Wall.） Lindl；Trace elements；Inductively coupled plasma mass spectrometry（ ICPMS）；Microwave digestion；Cultivation methods

金線蓮是蘭科開唇蘭屬多年生草本植物，全草入藥，性平味甘，清熱涼血、解毒除濕，在我國有20種[1]，俗稱“藥王”“金草”，含有多糖、黃酮、氨基酸等有效成分[2]，在民間食用廣泛?，F(xiàn)今，民眾對食品重金屬污染問題日趨關注，野生及人工培育后林下種植的金線蓮都有可能受污染。微量元素的檢測多為原子吸收分光光度法（AAS法）[3-4]，該分析方法耗時費力，一次只能完成一個樣品的一種元素分析。電感耦合等離子質譜法（ICP-MS）檢測微量元素具有靈敏度高、抗干擾能力強、快速準確等優(yōu)點，在食品藥品微量元素檢測領域有廣泛應用[5-6]。目前，對市場流通的金線蓮品質并無質量標準，該試驗建立了準確、快速的微波消解-ICP-MS法測定不同品種不同月齡金線蓮的微量元素，以期為金線蓮產品的微量化學成分闡明、質量標準的建立和安全評價提供試驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1

儀器。微波消解儀（Anton Paar-Multiwave PRO）；電感耦合等離子體質譜儀（Agilent-7700 Series ICP-MS）；Milli-Q 超純水系統(tǒng)；電子天平（Mettler Toledo）；玻璃儀器和聚四氟乙烯罐以10%硝酸浸泡過夜，超純水洗凈備用。

1.1.2試藥。安捷倫混合標準溶液（8500-6940），內標液（Sc、Ge、In、Bi），協(xié)調液（59Co、89Y、205Tl、156CeO、140Ce）；硝酸（優(yōu)級純）；試驗用水均為新制的超純水。

1.1.3

試材。金線蓮由福建某金線蓮生物科技有限公司提供，經福建農林大學張大鵬教授鑒定為蘭科開唇蘭屬多年生草本植物金線蓮[Anoectochilus roxburghii（Wall.）Lindl]。樣品共8種，分別為福建野生金線蓮（Y1）；移植林下4個月（Y2），12個月（Y3），18個月（Y4）；尖葉福建種組培5個月（Y5），移植林下4個月（Y6）；臺灣種組培5個月（Y7），移植野外4個月（Y8）。藥材粉碎成細粉備用。

1.2方法

1.2.1

標準品溶液的制備。取混合標準溶液適量，以2%HNO3溶液為溶劑，臨用現(xiàn)配0、2、4、6、10、20、50、100 ng/mL的標準系列溶液。

1.2.2

樣品溶液的制備。取樣品粉末約0.5 g，精密稱定，置消解管內，加入硝酸8 mL，消化爐預消解（120 ℃，30 min），放冷。移至微波消解爐，按功率從0→700運行10 min，保持5 min，功率從700→15 000運行10 min，保持20 min的微波消解程序進行消解后，少量水沖洗消解管內壁，以130 ℃在消化爐上趕酸至剩余液體約2 mL，放冷。轉移置25 mL量瓶中，以2%HNO3溶液定容至刻度，即得樣品貯備液。取各樣品儲備液分別稀釋10、100、1 000倍，以滿足不同元素的線性范圍。

1.2.3

ICP-MS工作條件。載氣流量1.0 L/min，補償氣流量1.0 L/min，冷卻氣流量15.0 L/min，射頻功率1 490 W；內標元素：Sc、Ge、In、Bi；八極桿反應池模式：氦氣。

1.2.4

方法學考察。

1.2.4.1

線性范圍及檢測限。取標準品系列溶液在ICP-MS的工作條件下進行測試，以濃度為橫坐標、各待測元素與內標相應值的比值為縱坐標，繪制標準工作曲線。以空白溶液平行測定10次，儀器顯示各元素檢出限。

1.2.4.2

精密度試驗。取各元素10 ng/mL的混合標準溶液、Hg元素2 ng/mL，平行進樣6次，測定各元素的濃度，并計算RSD。

1.2.4.3

重復性試驗。取Y2樣品，按“1.2.2”方法平行制備供試品溶液6份，測定各元素的濃度，并計算RSD。

1.2.4.4

加標回收率。取Y2樣品溶液6份，各添加10 ng/mL的混合標準溶液，進行加樣回收試驗，測定各元素的加樣回收率及其RSD。

1.2.5

樣品的含量測定。按“1.2.2”方法對不同產地、月齡的金線蓮制備供試品溶液，進行測定。平行讀數(shù)3次，扣除空白后代入線性方程計算各品種中各種元素的含量。

2結果與分析

2.1方法學考察

2.1.1線性關系與檢測限考察。按“1.2.4.1”方法操作，各元素的線性范圍和檢測限結果見表1。由表1可知，各種元素的工作曲線在對應范圍內相關系數(shù)r>0.999，呈良好的線性關系。

2.1.2精密度、重復性和回收率試驗。按照“1.2.4.2”“1.2.4.3”“1.2.4.4”方法操作，結果見表2。由表2可知，該方法的精密度RSD在0.7%～4.4%，重復性RSD在0.3%～5.8%，回收率在89.4%～114.2%，回收率的RSD在0.32%～4.80%。表明該方法在該條件下精密度、重復性良好，方法準確、可靠，可用于金線蓮中微量元素的含量測定。

2.2含量測定

由表3可知，金線蓮中微量元素以Ca、Mg含量為最高，其次是Fe、Mn、Zn含量。野生金線蓮（Y1）中含有的微量元素總量比較高，超過4 g/kg，其中有害元素Pb、As和Hg均高于組織培養(yǎng)和林下種植的樣品，這或許與其野外生長環(huán)境中土壤母質有關；同一產地，不同月齡金線蓮樣品（Y2、Y3、Y4和Y5、Y6、Y7、Y8）中的微量元素含量隨月齡的增長而增長，總體呈隨種植周期的延長而增長的趨勢，即微量元素在藥材的生長過程中進行累積。

3小結與討論

許多微量元素是藥材中酶或輔酶的一部分，對藥材的生長起關鍵作用，甚至影響藥材有效成分的含量[7]。通過對不同產地和月齡金線蓮樣品中的微量元素含量進行比較發(fā)現(xiàn)，各品種的各微量元素含量隨土壤母質的不同而有所區(qū)別，微量元素在藥材的生長過程中進行累積。金線蓮中含有的人體必需微量元素，以Ca、Mg含量最高，其次是Fe、Mn、Zn含量，這些元素影響著人體的生長發(fā)育、造血功能和免疫功能[8]，這或許是金線蓮發(fā)揮其藥理作用的重要因素。

Pb、As和Hg均是對人體有毒的重金屬，在體內蓄積會造成慢性中毒。對比2012年國家藥典委員會公布“除礦物、動物、海洋類以外的中藥材中，Pb≤10 mg/kg、As≤5 mg/kg、Hg≤1 mg/kg”的標準，野生金線蓮樣品Pb超標，這可能與金線蓮為多年生草本植物，且野生金線蓮生長的土壤母質重金屬元素不受控相關。被檢樣本的Hg均超標，說明所測金線蓮或許對Hg有富集作用，在Hg含量上存在使用風險，需要對金線蓮的規(guī)范化種植條件進行進一步優(yōu)化。

該試驗建立測定金線蓮中微量元素含量的方法簡便、靈敏、重現(xiàn)性好，可推廣使用，檢測結果也為金線蓮質量標準的建立提供參考依據(jù)。

參考文獻

[1] 中國科學院植物研究所.中國高等植物：第十三卷[M].青島：青島出版社，2002.

[2] 吳水華，程偉青.不同栽培方式對金線蓮中多糖含量的影響[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2016，30（6）：8-11.

[3] 許蘭淑，周金池.原子吸收光譜法測定環(huán)境及食品樣品中痕量元素的樣品前處理方法的研究進展[J].理化檢驗-化學分冊，2016，52（2）：244-248.

[4] 薛福玲，藺志鐸，韓明，等.三種中藥材微量元素測定及其多糖抗氧化性研究[J].中藥材，2010，33（2）：293-296.

[5] 吳水華，程偉青，柯伙釗，等.不同來源金線蓮中水分灰分及微量元素的測定[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21（12）：3185-3186.

[6] 錢保勇，蔡鵬，袁華峰.ICP-MS法測定薄荷腦中的5種重金屬元素[J].華西藥學雜志，2015，30（4）：521-522.

[7] 楊雁芳，張友波，楊秀偉.基于微波消解的ICP-OES 和ICP-MS 法測定中藥獨活中的24 種微量元素[J].藥物分析雜志，2016，6（11）：2004-2008.

[8] 袁珂，薛月芹，桂仁意，等.微波消解-原子吸收光譜法測定不同產地淡竹葉中微量元素的含量[J].光譜學與光譜分析，2010，30（3）：804-808.