葉倩 黃健祥 鄧義才 高毓文 梁應(yīng)坤 孫玲

摘 要 為探明廣州地區(qū)丙環(huán)唑和矮壯素在葉菜的殘留以及膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)情況，對(duì)2016年第2季度廣州市9個(gè)區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市的芥藍(lán)、菜心和普通白菜樣品中丙環(huán)唑和矮壯素殘留水平進(jìn)行了分析。應(yīng)用點(diǎn)評(píng)估和基于@Risk評(píng)估軟件的概率評(píng)估方法，對(duì)這3種蔬菜中丙環(huán)唑和矮壯素殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，芥藍(lán)、菜心、普通白菜中丙環(huán)唑殘留均值為0.162 8～0.002 8 mg/kg，最高為芥藍(lán)，與菜心和普通白菜差異顯著，平均檢出率為100%～70.25%，最高為芥藍(lán)，與普通白菜差異顯著。矮壯素殘留平均值為0.010 9～0.001 0 mg/kg，最高為菜心，三者間差異不顯著，平均檢出率為14.99%～8.46%，最高為芥藍(lán)，三者間差異不顯著。通過(guò)膳食攝入3種蔬菜，丙環(huán)唑殘留暴露急性風(fēng)險(xiǎn)熵為1.81～7.93，99%人群暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)熵為1.02～25.03，0.1%人群存在芥藍(lán)丙環(huán)唑膳食暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)；矮壯素殘留暴露急性風(fēng)險(xiǎn)熵為55.14～62.26，100%人群暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)熵為3.26～8.11。3種蔬菜中丙環(huán)唑和矮壯素殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍。

關(guān)鍵詞 丙環(huán)唑；矮壯素；殘留；膳食暴露；風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

中圖分類(lèi)號(hào) TS201.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract In order to evaluate the residue distribution and dietary exposure risk of propiconazole and chlormequat in leaf vegetables of Guangzhou， Chinese kales， flowering Chinese cabbages and pak-chois samples from markets of 9 districts in the second quarter of 2016 were collected and studied. Dietary exposure risks of propiconazole and chlormequat residue were assessed with point evaluation and @Risk. Results showed that the average value of propiconazole residue was between 0.002 8 and 0.162 8 mg/kg， in which Chinese kale was the highest and significantly different from flowering Chinese cabbage and pak-choi. The average detection rate of propiconazole was between 70.25% and 100%， in which Chinese kale was the highest and significantly different from pak-choi. The average value of chlormequat residue was between 0.001 0 and 0.010 9 mg/kg， in which flowering Chinese cabbage was the highest and there was no significant difference among the three studied vegetables. The detection rate of chlormequat was between 8.46% and 14.99%， in which Chinese kale was the highest and there was no significant difference among the three studied vegetables. The acute dietary exposure risk quotient of propiconazole was 1.81-7.93， while the chronic dietary exposure risk quotient was 1.02-25.03 for 99% eater consumers. Propiconazole residue in Chinese kale showed chronic dietary exposure risk to 0.1% eater. The acute dietary exposure risk quotient of chlormequat was 55.14-62.26， while the chronic dietary exposure risk quotient was 3.26-8.11 for 100% eater. The results suggest that dietary exposure risks of propiconazole and chlormequat residue in three vegetables are acceptable.

Key words propiconazole； chlormequat； residue； dietary exposure； risk assessment

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.04.026

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有增強(qiáng)作物抗逆性，改善品質(zhì)，增加產(chǎn)量等作用[1]。丙環(huán)唑和矮壯素近年來(lái)被用于控制菜心、芥藍(lán)、普通白菜等蕓苔類(lèi)和葉類(lèi)蔬菜的外形，促進(jìn)莖葉粗壯和葉色深綠，增加產(chǎn)量，提高品質(zhì)[2-5]。日本肯定列表規(guī)定丙環(huán)唑和矮壯素在這類(lèi)蔬菜的殘留限量為0.05 mg/kg[6]。目前我國(guó)制定了丙環(huán)唑在部分谷物、油料、水果、堅(jiān)果等作物以及蔬菜中玉米筍中殘留限量標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)于矮壯素，制定了部分谷物和油料類(lèi)作物中的殘留限量[7]。但尚未對(duì)丙環(huán)唑和矮壯素在蕓苔類(lèi)和葉類(lèi)蔬菜中的殘留限量及使用規(guī)程做出規(guī)定，也未見(jiàn)丙環(huán)唑和矮壯素蔬菜中殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估研究報(bào)道。

廣東為蕓苔類(lèi)和葉類(lèi)蔬菜生產(chǎn)和消費(fèi)大省，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留成為蔬菜質(zhì)量安全監(jiān)管的重要內(nèi)容。本研究以廣州地區(qū)生產(chǎn)和消費(fèi)量較大的芥藍(lán)、菜心、普通白菜為材料，監(jiān)測(cè)分析市場(chǎng)中這3種蔬菜丙環(huán)唑和矮壯素殘留水平，同時(shí)基于丙環(huán)唑和矮壯素毒理學(xué)數(shù)據(jù)及華南地區(qū)人群蔬菜膳食攝入量，分別應(yīng)用點(diǎn)評(píng)估方法和基于@Risk風(fēng)險(xiǎn)分析軟件的概率評(píng)估方法[8-12]，對(duì)丙環(huán)唑和矮壯素殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估研究，為廣州蔬菜質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)管理提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)材料 采樣2016年第2季度廣州所屬9個(gè)區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市的芥藍(lán)樣品66個(gè)、菜心樣品84個(gè)、普通白菜樣品66個(gè)。

1.1.2 儀器設(shè)備與試劑 組織勻漿機(jī)（飛利浦公司），Multi Reax德國(guó)Heidolph漩渦振蕩器（Multi Reax德國(guó)公司，德國(guó)），離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司），超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（日本島津公司，日本）。乙腈（色譜純，德國(guó)Merck公司），PSA（美國(guó)Agilent公司），C18（天津博納艾杰爾公司），乙酸、無(wú)水硫酸鎂、無(wú)水乙酸鈉均為分析純（廣州化學(xué)試劑廠）。

1.2 方法

1.2.1 樣品前處理 樣品去除枯黃葉片，組織勻漿機(jī)勻漿，低溫保存?zhèn)溆?。稱(chēng)取10.00 g樣品于50 mL離心管中，加入20 mL含1%（V%）乙酸的乙腈溶液，加入4.00 g無(wú)水硫酸鎂和1.00 g無(wú)水醋酸鈉，渦旋振蕩3 min；以4 500 r/min離心5 min；取5 mL上清液于10 mL離心管中（內(nèi)含75 mg PSA、425 mg無(wú)水硫酸鎂、50 mg C18），渦旋混勻1 min后4 500 r/min離心5 min，取上清液以0.22 μm尼龍66濾膜過(guò)濾，待測(cè)定。

1.2.2 丙環(huán)唑和矮壯素殘留檢測(cè) 色譜柱：島津Shim-pack XR-ODSIII（2.0 mm×75 mm，1.6 μm）。流動(dòng)相A：0.1%（V%）甲酸水；流動(dòng)相B：乙腈；梯度洗脫程序：0.5～2 min，10%B；2～5 min，10%～95%B；5～7 min，95%B；7.1 min，10%B。流速：0.3 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：1 μL。采用ESI離子源，正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）檢測(cè)。霧化氣流速：3 L/min；加熱氣流速：10 L/min；干燥氣流速：10 L/min；離子源接口溫度：300 ℃；脫溶劑溫度：250 ℃；加熱塊溫度：400 ℃。矮壯素、丙環(huán)唑的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)見(jiàn)表1。

1.2.3 丙環(huán)唑和矮壯素殘留分布擬合 應(yīng)用@Risk風(fēng)險(xiǎn)分析軟件分別對(duì)丙環(huán)唑和矮壯素在3種蔬菜中殘留進(jìn)行分布擬合，卡方檢驗(yàn)，得出擬合分布。

1.2.4 評(píng)估模型建立 急性暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估采用點(diǎn)評(píng)估方法，參考農(nóng)藥殘留聯(lián)席會(huì)議（JMPR）目前采用的國(guó)家估計(jì)短期攝入量方法[13-14]，按照公式（1）計(jì)算急性風(fēng)險(xiǎn)熵RQ（risk quotient）；慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估采用概率評(píng)估方法，參考FAO的國(guó)家估計(jì)每日攝入量方法[15]，按照公式（2）計(jì)算慢性風(fēng)險(xiǎn)熵RQ。RQ<100時(shí)，表示風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍；RQ≥100時(shí)，表示存在危害風(fēng)險(xiǎn)。

公式（1）：RQ（ARfD）/%=（HR×LP+MRL谷物×谷物平均攝入量+MRL水果×水果平均攝入量+ MRL畜肉×畜肉類(lèi)平均攝入量+MRL禽肉×禽肉平均攝入量+ MRL蛋類(lèi)×蛋平均攝入量+MRL奶類(lèi)×奶類(lèi)平均攝入量）×100/（BW×ARfD）

公式（2）：RQ（ADI）/%=（C×蔬菜平均攝入量+ MRL谷物×谷物平均攝入量+MRL水果×水果平均攝入量+MRL畜肉×畜肉類(lèi)平均攝入量+MRL禽肉×禽肉平均攝入量+MRL蛋類(lèi)×蛋平均攝入量+MRL奶類(lèi)×奶類(lèi)平均攝入量）×100/（BW×ADI）

式中：HR（highest residue from a supervised trial）取值殘留監(jiān)測(cè)99百分位點(diǎn)值和擬合99百分位點(diǎn)值中的高值。LP（large portion）參考WHO統(tǒng)計(jì)[16]，取值大部分中國(guó)膳食者（涵蓋97.5%消費(fèi)者）芥藍(lán)、菜心、普通白菜消耗量，分別為0.385 1、0.556 6、0.601 6 kg。

蔬菜、谷物、水果、畜禽肉、蛋類(lèi)、奶類(lèi)平均攝入量取值見(jiàn)表2。丙環(huán)唑和矮壯素在各類(lèi)食物中殘留限量MRL（maximum residue limit）首先取值中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，尚未制定國(guó)標(biāo)的，取值國(guó)際食品法典（CAC）、歐盟委員會(huì)、日本肯定列表標(biāo)準(zhǔn)，按照風(fēng)險(xiǎn)最大化原則，就高取值，具體見(jiàn)表2。丙環(huán)唑殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵計(jì)算時(shí)，水果取值香蕉MRL；矮壯素殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵計(jì)算時(shí)，谷物取值小麥MRL。

C（殘留分布值）為擬合分布隨機(jī)取值（mg/kg），迭代10 000次；ARfD為農(nóng)藥急性參考劑量[mg/（kg.d bw）]，取值見(jiàn)表2；ADI為農(nóng)藥每日允許攝入量[mg/（kg.d bw）]，取值見(jiàn)表2；BW為人群平均體重，取值63 kg[17]。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

1.3.1 數(shù)據(jù)處理 原始數(shù)據(jù)采集按照國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估專(zhuān)家委員會(huì)《食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估數(shù)據(jù)需求及采集要求》進(jìn)行[22]，當(dāng)某個(gè)區(qū)樣品殘留檢出率大于60%時(shí)，未檢出值以 1/2檢出限LOD（limit of detection）代入；檢出率小于60%時(shí)，未檢出值以LOD代入，LOD值見(jiàn)表2。

1.3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 丙環(huán)唑和矮壯素在芥藍(lán)、菜心、普通白菜中殘留水平

丙環(huán)唑和矮壯素在芥藍(lán)、菜心、普通白菜中殘留平均值和檢出率見(jiàn)圖1、2。丙環(huán)唑總平均殘留水平和總平均檢出率顯著高于矮壯素，分別為矮壯素的10.9倍和6.8倍。提示，3種蔬菜中丙環(huán)唑降解速度較慢或使用較普遍。

3種蔬菜中，芥藍(lán)丙環(huán)唑殘留值和檢出率均最高，殘留均值為菜心和普通白菜的2.6倍和58.1倍，達(dá)顯著和極顯著水平，檢出率為菜心和普通白菜的1.1倍和1.4倍，與普通白菜中丙環(huán)唑檢出率差異達(dá)極顯著水平；菜心和普通白菜中殘留及檢出率差異不顯著。提示，丙環(huán)唑在芥藍(lán)中使用相對(duì)普遍。

3種蔬菜中，菜心矮壯素殘留相對(duì)高，分別為芥藍(lán)和普通白菜的1.2倍和10.9倍，但殘留均值及檢出率差異不顯著。

2.2 丙環(huán)唑和矮壯素在芥藍(lán)、菜心、普通白菜中殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)

2.2.1 殘留分布擬合 丙環(huán)唑和矮壯素在芥藍(lán)、菜心、普通白菜中殘留分布擬合函數(shù)、監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)與擬合數(shù)據(jù)比較見(jiàn)表3。丙環(huán)唑殘留擬合分布平均值與99百分位點(diǎn)值由高至低為芥藍(lán)、菜心、普通白菜；矮壯素殘留擬合分布平均值與99百分位點(diǎn)值由高至低為菜心、芥藍(lán)、普通白菜，與3種蔬菜實(shí)際監(jiān)測(cè)平均值趨勢(shì)一致。由于實(shí)際監(jiān)測(cè)值中存在部分極端樣品，引起一些監(jiān)測(cè)值99百分位點(diǎn)值偏高，通過(guò)擬合有效降低了極端殘留帶來(lái)的不確定性。

2.2.2 膳食暴露急性風(fēng)險(xiǎn) 丙環(huán)唑與矮壯素殘留膳食暴露急性風(fēng)險(xiǎn)熵見(jiàn)表4。丙環(huán)唑和矮壯素急性風(fēng)險(xiǎn)熵小于100，均在可接受風(fēng)險(xiǎn)范圍。但矮壯素殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵較高，達(dá)到了60左右。本研究谷物類(lèi)矮壯素殘留限量取值最高的小麥限量值，當(dāng)人群一次性攝入谷物全部為小麥類(lèi)時(shí)，矮壯素膳食暴露才達(dá)到急性參考計(jì)量的55.14%～62.26%，而廣州地區(qū)人群谷物攝入以稻米為主，因此矮壯素急性風(fēng)險(xiǎn)熵具有較大的保守性。

3種蔬菜比較，丙環(huán)唑和矮壯素殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵最高的均為菜心，分別為急性參考劑量的7.93%和62.26%。

2.2.3 膳食暴露慢性風(fēng)險(xiǎn) 丙環(huán)唑與矮壯素殘留膳食暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)熵及概率范圍見(jiàn)表5。

3種蔬菜矮壯素殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)熵均小于100，通過(guò)膳食攝入這3種蔬菜，100%人群矮壯素暴露水平為每日允許攝入量的3.26%～8.11%，在可接受風(fēng)險(xiǎn)范圍。

菜心和普通白菜丙環(huán)唑殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)熵小于100，通過(guò)膳食攝入菜心和普通白菜，100%人群丙環(huán)唑暴露水平分別為每日允許攝入量的16.9%和1.2%，在可接受風(fēng)險(xiǎn)范圍；芥藍(lán)丙環(huán)唑殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)熵99位點(diǎn)值為25.03，通過(guò)膳食攝入芥藍(lán)，99%人群丙環(huán)唑暴露水平達(dá)到每日允許攝入量的25%，處于安全范圍。值得注意的是，芥藍(lán)丙環(huán)唑殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)熵99.9位點(diǎn)值達(dá)到了100，提示通過(guò)膳食攝入芥藍(lán)，有0.1%人群存在丙環(huán)唑暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)。

3 討論

3.1 丙環(huán)唑和矮壯素殘留水平與膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)

由于氣候原因，芥藍(lán)和菜心第2季度在廣州地區(qū)極少生產(chǎn)，本項(xiàng)目的市場(chǎng)抽樣調(diào)查也顯示，該季度芥藍(lán)和菜心大多由寧夏、云南等地調(diào)入，普通白菜則大多數(shù)來(lái)自本地。因此，本項(xiàng)目結(jié)果在一定程度上可反應(yīng)廣州地區(qū)生產(chǎn)的普通白菜中丙環(huán)唑和矮壯素殘留水平，但不能代表廣州地區(qū)生產(chǎn)的芥藍(lán)和菜心中丙環(huán)唑和矮壯素殘留水平。

殘留暴露風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算結(jié)果除了取決于所涉及食物中農(nóng)藥的殘留水平外，很大程度上受所建立的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型影響，包括模型中列入膳食攝入的食物種類(lèi)及攝入量取值、農(nóng)藥在各類(lèi)食物殘留限量取值等。在本研究中，受膳食攝入量取值的影響，盡管芥藍(lán)丙環(huán)唑殘留水平和檢出率顯著高于菜心和普通白菜，但急性暴露風(fēng)險(xiǎn)水平最高的則為菜心；受谷物類(lèi)矮壯素殘留限量最高取值的影響，盡管丙環(huán)唑在3種蔬菜中殘留水平和檢出率均顯著高于矮壯素，但矮壯素殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵水平卻顯著高于丙環(huán)唑。

3.2 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型及評(píng)估結(jié)果不確定性

膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型具有變異性和不確定性[23]。在建立評(píng)估模型時(shí)，考慮到丙環(huán)唑和矮壯素為常用農(nóng)藥，在農(nóng)產(chǎn)品中殘留范圍較廣，為提高評(píng)估結(jié)果的可靠性，在模型中增加了谷物、水果、畜禽肉、蛋奶類(lèi)等攝入量較高食物的殘留暴露量，但未包括食用油、果蔬深加工食品、堅(jiān)果等食物。此外，評(píng)估所用的主要膳食攝入?yún)?shù)采用成人攝入平均值，沒(méi)有包含兒童、少年、孕婦等特殊人群；評(píng)估材料限于廣州市2016年第2季度市場(chǎng)銷(xiāo)售蔬菜。因此，評(píng)估結(jié)果具有一定不確定性。

評(píng)估模型中參數(shù)的采用基于風(fēng)險(xiǎn)最大原則，評(píng)估結(jié)果具有一定的保守性。急性暴露評(píng)估時(shí)，有研究采用農(nóng)藥殘留值95百分位點(diǎn)值、97.5百分位點(diǎn)值、99.9百分位點(diǎn)值[24-26]，本研究殘留值取監(jiān)測(cè)值99百分位點(diǎn)和擬合值99百分位點(diǎn)中的高值；芥藍(lán)、菜心、普通白菜膳食攝入采用世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)的涵蓋97.5% 中國(guó)消費(fèi)者的消耗量；谷物、水果、畜禽肉、蛋奶類(lèi)殘留限量取值大多數(shù)產(chǎn)品的限量值或同類(lèi)產(chǎn)品的最高值，例如丙環(huán)唑殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵計(jì)算時(shí)，水果取值香蕉MRL，矮壯素殘留急性風(fēng)險(xiǎn)熵計(jì)算時(shí)，谷物取值小麥MRL。慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)，為能更好反映出在非極端情況下膳食暴露水平和概率，殘留值為擬合分布函數(shù)隨機(jī)取值，谷物、水果、畜禽肉、蛋奶類(lèi)攝入量采用廣州市區(qū)人群平均攝入量，同時(shí)以廣州市區(qū)人群所有蔬菜平均攝入量代替芥藍(lán)、菜心、普通白菜攝入量。

4 結(jié)論

2016年第2季度廣州市所屬9個(gè)區(qū)的農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市的芥藍(lán)、菜心、普通白菜中丙環(huán)唑殘留均值為0.162 8～0.002 8 mg/kg，最高為芥藍(lán)，與菜心和普通白菜差異顯著，平均檢出率為100%～70.25%，最高為芥藍(lán)，與普通白菜差異顯著。矮壯素殘留平均值為0.010 9～0.001 0 mg/kg，最高為菜心，三者間差異不顯著，平均檢出率為14.99%～8.46%，最高為芥藍(lán)，三者間差異不顯著。

通過(guò)膳食攝入這3種蔬菜，丙環(huán)唑殘留暴露急性風(fēng)險(xiǎn)熵為1.81～7.93，99%人群暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)熵為1.02～25.03，0.1%人群存在芥藍(lán)丙環(huán)唑膳食暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)；矮壯素殘留暴露急性風(fēng)險(xiǎn)熵為55.14～62.26，100%人群暴露慢性風(fēng)險(xiǎn)熵為3.26～8.11。提示，這3種蔬菜中丙環(huán)唑和矮壯素殘留膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍。

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