俞士勇

江蘇省鹽城市鹽都區(qū)疾病預(yù)防控制中心，江蘇鹽城224002

2012—2015年鹽都區(qū)腹瀉病例霍亂弧菌、志賀氏菌檢測(cè)分析

俞士勇

江蘇省鹽城市鹽都區(qū)疾病預(yù)防控制中心，江蘇鹽城224002

目的分析鹽都區(qū)2012—2015年5 394份腹瀉病例霍亂弧菌、痢疾志賀菌的檢測(cè)結(jié)果，制定策略，為今后的腹瀉病預(yù)防控制工作服務(wù)。方法參照霍亂防治手冊(cè)、預(yù)防醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù)、臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)、全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程相關(guān)章節(jié)微生物部分進(jìn)行霍亂弧菌、痢疾志賀菌的檢測(cè)。結(jié)果5 513份糞便標(biāo)本未檢出O1和O139霍亂弧菌；119份糞便標(biāo)本檢出志賀氏菌12株，志賀氏菌檢出率10.08%。結(jié)論鹽都區(qū)腹瀉病例有很大一部分為志賀氏菌引起的，應(yīng)加大腹瀉病例志賀氏菌檢測(cè)力度，同時(shí)腹瀉病例糞便樣本的送檢質(zhì)量有待提高。

腹瀉；霍亂弧菌；志賀氏菌；檢測(cè)分析

腹瀉病例腸道菌檢測(cè)是掌握腸道菌疫情動(dòng)向，制定預(yù)防措施的依據(jù)，近年來該中心就將腹瀉病例霍亂弧菌、痢疾志賀菌的檢測(cè)列入常規(guī)檢驗(yàn)范疇，要求轄區(qū)內(nèi)各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)每年4～11月采集腸道門診腹瀉病例糞便樣送區(qū)疾控中心微生物實(shí)驗(yàn)室檢索霍亂弧菌和痢疾志賀菌，現(xiàn)就鹽都區(qū)2012年4月—2015年11月腹瀉病例腸道菌檢測(cè)情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

轄區(qū)內(nèi)各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢的腹瀉病例糞便樣本，O1和O139霍亂弧菌送檢糞便以文臘氏液（實(shí)驗(yàn)室自配）保存送檢，痢疾志賀氏菌送檢糞便以甘油鹽水（實(shí)驗(yàn)室自配）保存送檢。堿性胨水、GN增菌液、TCBS、SS、EMB、麥康凱瓊脂、三糖鐵瓊脂、半固體瓊脂、氧化酶紙片，科瑪嘉弧菌顯色培養(yǎng)基；革蘭氏染液，API20E；O1、O139和志賀氏菌診斷血清；以上實(shí)驗(yàn)材料均在有效期內(nèi)使用。ZSD-1300生化培養(yǎng)箱，GRP-9270隔水式恒溫培養(yǎng)箱，Thermo生物安全柜，Leica生物顯微鏡。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

參照霍亂防治手冊(cè)[1]、預(yù)防醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù)[2]、臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)[3]、全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[4]相關(guān)章節(jié)微生物部分，糞便標(biāo)本增菌→相關(guān)平板分離培養(yǎng)→革蘭氏染色鏡檢、氧化酶試驗(yàn)、三糖鐵、血清學(xué)預(yù)試驗(yàn)、API生化反應(yīng)，綜合各種特征作出菌種鑒定結(jié)論。

2 結(jié)果

四年共檢糞便標(biāo)本5 513份，其中用于O1和O139霍亂弧菌檢索的標(biāo)本5 394份，未檢出O1和O139霍亂弧菌；用于痢疾志賀氏菌檢索的標(biāo)本119份，檢出志賀氏菌12株，檢測(cè)情況見表1。

3 討論

3.1 霍亂弧菌在該區(qū)的動(dòng)態(tài)

上世紀(jì)70～90年代，該區(qū)所檢出的霍亂弧菌均為O1群，2003、2004、2005年該區(qū)檢出的7株霍亂弧菌的菌株血清型均為O139群，2006—2015年O1、O139霍亂弧菌均未檢出，無病例發(fā)生，與急性傳染病控制專家們預(yù)測(cè)的近幾年該區(qū)可能會(huì)發(fā)生O139霍亂弧菌流行不相吻合，原因之一為該區(qū)農(nóng)村飲用水近十幾年得到很好的改善，農(nóng)村普及了自來水，且實(shí)行飲用水消毒，河水、淺井水已不再為人們所飲用。其二為衛(wèi)生防病知識(shí)的宣傳普及，群眾自我的衛(wèi)生意識(shí)顯著增強(qiáng)。

表1 2012—2015鹽都區(qū)腹瀉病例腸道菌檢測(cè)結(jié)果

3.2 志賀氏菌檢出效果明顯

2012年始區(qū)疾控中心實(shí)驗(yàn)室開展腹瀉病例疑似菌痢列入常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，雖然沒有如霍亂弧菌檢測(cè)一樣下達(dá)送檢任務(wù)數(shù)，但從送檢的119份糞便標(biāo)本中檢出12株志賀氏菌，說明該區(qū)腹瀉病例有很大一部分為志賀氏菌引起的，應(yīng)引起衛(wèi)生防病工作者的重視，制定相關(guān)監(jiān)測(cè)計(jì)劃，加大腹瀉病例志賀氏菌檢測(cè)力度應(yīng)該列為今后衛(wèi)生防病的重要工作之一。2012年4月—2015年11月腹瀉病例糞便標(biāo)本志賀氏菌檢測(cè)結(jié)果顯示：該區(qū)志賀菌氏流行株以福氏Ⅱa為主要流行株（福氏＞宋內(nèi)氏＞鮑氏，未檢到痢疾志賀氏菌）,與北京地區(qū)2006年前以福氏志賀氏菌為流行的優(yōu)勢(shì)菌型相似[5]，但有別與北京地區(qū)2007年后以宋內(nèi)志賀氏菌為流行的優(yōu)勢(shì)菌型[5]，因?yàn)樗蝺?nèi)志賀菌是發(fā)達(dá)國(guó)家菌痢的病原體，且宋內(nèi)志賀菌感染引發(fā)的臨床癥狀較輕，這一特點(diǎn)更易在人群中傳播，而我國(guó)其他大部分地區(qū)仍然是以福氏志賀氏菌為主。

3.3 志賀氏菌檢出病例以兒童為主

該次報(bào)道檢出的12株志賀氏菌，8例來自11歲以下的兒童，4例來自60歲以上的老人，男、女均等，各6例。其余年齡段未檢出病例，可能是兒童手-口接觸太頻以及兒童手衛(wèi)生狀態(tài)不佳的原因，老年人應(yīng)該是個(gè)體抵抗力下降導(dǎo)致感染發(fā)病率增高。

3.4 樣本的送檢質(zhì)量有待提高

檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，大部分基層防病人員質(zhì)量意識(shí)淡薄，把采樣送檢看成是完成任務(wù)，標(biāo)本質(zhì)量較差，無糞便標(biāo)本、正常糞便標(biāo)本充數(shù)送檢占很大比例，且也不及時(shí)送檢，經(jīng)常是收集一批再送檢，大大降低了病原菌的檢出率，2012—2015年5 394份標(biāo)本霍亂弧菌檢出為零，且2003、2004、 2005年正常腸道門診送檢的2 467份標(biāo)本霍亂弧菌檢出也為零，7株霍亂弧菌O139都是實(shí)驗(yàn)室人員去現(xiàn)場(chǎng)采集的疑似病人腹瀉標(biāo)本中檢出的，這應(yīng)引起衛(wèi)生防病控制管理工作者們的注意，不能讓這項(xiàng)花費(fèi)大量人力、物力的腹瀉病例霍亂弧菌檢測(cè)工作流于形式，要確保樣本真實(shí)、可信、陽性指征明顯，使腹瀉病例糞便檢測(cè)工作能反映本區(qū)的真實(shí)結(jié)果，真正起到監(jiān)測(cè)預(yù)警作用。

3.5 外環(huán)境標(biāo)本O 1、O139群霍亂弧菌檢測(cè)亟待加強(qiáng)

2003、2004、2005年該區(qū)檢出的7株血清型為O139群霍亂弧菌均為聚餐病例，近幾年省內(nèi)外同行在水產(chǎn)品中檢測(cè)O1、O139霍亂弧菌也有很多報(bào)道，該區(qū)2008年始開展了部分水產(chǎn)品霍亂弧菌的檢測(cè)，至今未檢出1例陽性標(biāo)本，是該區(qū)水產(chǎn)品的情況就是這個(gè)結(jié)果，還是采樣或檢測(cè)方法的原因有待在以后的檢測(cè)工作中進(jìn)一步驗(yàn)證。

3.6 微生物檢驗(yàn)人員的檢測(cè)技能急需提高

2000年以前從事微生物檢驗(yàn)的人員都經(jīng)歷過大量霍亂弧菌檢測(cè)的實(shí)踐操作，近幾年病例基本上已沒有了，現(xiàn)從事微生物檢驗(yàn)的年青同志大部分都沒有實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)，只有組織學(xué)習(xí)、培訓(xùn)，強(qiáng)化實(shí)際操作技能的訓(xùn)練，才能適應(yīng)新形勢(shì)下突發(fā)疫情應(yīng)急工作的需要。

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部疾病控制司.霍亂防治手冊(cè)[M].第5版.北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部疾病控制司，1999.

[2]王秀茹.預(yù)防醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2002：302-348.

[3]倪語星,尚紅.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2007：101-145.

[4]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社,2008：798-831.

[5]曲梅，劉桂榮，張新，等.北京市2004—2010年志賀菌分型分布及毒力基因分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2011,21(8)：1850-1853.

Analysis of Detection of Vibrio Cholera and Shigella in Diarrhea Cases in Yandu District from 2012 to 2015

YU Shi-yong
Center for Disease Control and Prevention of Yandu District,Yancheng,Jiangsu Province,224002 China

Objective To analyze the detection results of vibrio cholera and shigella in 5 394 pieces of diarrhea cases in Yandu District from 2012 to 2015 and make the strategies and provide service for the further control and prevention work of diarrhea cases.M ethods The vibrio cholera and shigella detection was conducted according to the cholera control handbook,prevention ofmedicalmicrobiology and inspection techniques,clinicalmicrobiology and inspection,national clinical test regulation of operation selected chapters ofmicroorganism.Results O1 and O139 vibrio cholera were not detected of 5 513 pieces of fecal samples and 12 strains of shigella were detected of 119 pieces of fecal samples,and the detection rate of shigella was 10.08%.Conclusion A large proportion of the diarrhea cases in Yandu District are caused by shigella,and we should increase the detection of shigella in diarrhea cases,at the same time,the submission and inspection quality of fecal samples of diarrhea cases should be improved.

Diarrhea;Vibrio cholera;Shigella;Analysis of detection

R7

A

1672-5654（2017）04（a）-0050-02

2017-01-07）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.10.050

俞士勇（1970-），男，江蘇鹽城人，本科，副主任技師，主要從事衛(wèi)生防病檢測(cè)工作。