樊國全，趙曉梅，*，俄熱肯·庫萬別克，吳玉鵬

（1.新疆農業(yè)科學院，新疆烏魯木齊830091；2.新疆農業(yè)大學科學技術學院，新疆烏魯木齊830052；3.新疆農業(yè)職業(yè)技術學院，新疆昌吉831100）

反接萼端黑斑病致病菌果實品質的變化

樊國全1，趙曉梅1，*，俄熱肯·庫萬別克2，吳玉鵬3

（1.新疆農業(yè)科學院，新疆烏魯木齊830091；2.新疆農業(yè)大學科學技術學院，新疆烏魯木齊830052；3.新疆農業(yè)職業(yè)技術學院，新疆昌吉831100）

從庫爾勒香梨萼端黑斑病感病果中提取致病菌，反接至健康果中，通過對貯藏的健康果和感病果進行色差、可溶性固形物、果實硬度的測定，研究萼端黑斑病對庫爾勒香梨品質的影響。結果表明，健康果中L值較感病果高，而感病果中a值和b值的較高。隨著貯藏期的延長，健康果和感病果中a值和b值均呈上升趨勢，感病果a值和b值始終大于健康果；L值的變化趨勢與a值和b值相反，感病果L值始終小于健康果。貯藏過程中，庫爾勒香梨健康果和感病果中可溶性固形物含量和果實硬度均呈下降趨勢，但感病果下降幅度較健康果大。

庫爾勒香梨；萼端黑斑??；果實品質

新疆無污染的生態(tài)環(huán)境和獨特的氣候條件，造就了新疆林果外觀絢麗、個頭飽滿、果香濃郁、營養(yǎng)豐富的品質優(yōu)勢。據報道，2015年新疆特色林果種植面積突破2 200萬畝，總產量650萬噸[1]。隨著果樹盛果期的到來，林果產量成幾何倍數增加，果品質量問題凸現。庫爾勒香梨是新疆最具特色的林果之一，由于其皮薄，肉質細膩、多汁，芳香濃郁，品質優(yōu)良，深受消費者的喜愛。目前，庫爾勒香梨也是新疆貯藏量最大的水果之一[2]。據統計[3]，2013年巴州庫爾勒香梨面積73.26萬畝，總產量達36.18萬噸，占新疆香梨產量的42%。但近年來，由于庫爾勒香梨萼端黑斑病的出現，嚴重影響果實的品質和外觀，同時造成大量腐爛，嚴重時病果率高達30%[4]，給果農和果品經營者造成了巨大損失。因此，本課題從庫爾勒香梨萼端黑斑病病果中提取、分離、純化該致病菌，再將其反接至健康香梨果實中，對貯藏后的健康果和感病果進行果皮色差、果實可溶性固形物和硬度的測定，旨在為庫爾勒香梨萼端黑斑病的控制提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間、地點

室內試驗于2015、2016年在新疆農業(yè)科學院生物質能源研究所進行。

1.2 試驗材料

1.2.1 原料與試劑

試驗原料庫爾勒香梨來源于巴州沙依東園藝場；試驗試劑馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（簡稱PDA培養(yǎng)基）；0.85%生理鹽水。

1.2.2 儀器設備

FHM－5型果實硬度計：日本竹村電械制作所制造；PAL－1型0－53%手持糖量計：日本ATAGO公司制造；CR－10型果實色差計：日本美能達公司。

1.3 試驗處理

從萼端黑斑病庫爾勒香梨（感病果）提取、分離、純化致病菌→將致病菌反接至正常的庫爾勒香梨（健康果）→對貯藏的健康果和感病果進行果皮色差、果實可溶性固形物和硬度的測定

1.4 試驗方法

1.4.1 庫爾勒香梨黑斑病病原菌的分離及純化

參照許玲等[5－7]并略作改動，將感病梨用75%的酒精擦拭1遍，用無菌水淋洗3遍，待其干燥后在病健交界處切下病組織5 mm，移至PDA平板培養(yǎng)基上，于25℃下培養(yǎng)28 h～36 h觀察。再將初分離的菌落接回于健康梨進行致病性的確定，重復上述步驟再次得到初分離菌落，將其在PDA平板上進行稀釋純化培養(yǎng)，直到分離出菌落大小、形狀、顏色、表面光滑濕潤程度、菌絲生長快慢、菌絲形狀、產孢情況、孢子顏色、形狀等一致的若干菌株。分離的過程：懸浮液→適當稀釋→涂布平板→單菌落。

1.4.2 庫爾勒香梨黑斑病病原菌的反接

2016年3月28日，選擇大小適中、無病蟲、無機械損傷的果實，將其裝入聚乙烯保鮮袋，每箱裝30個果實，共16箱，分為兩組，一組接分離純化后的病原菌，一組不接菌，均貯藏于常溫（25℃）條件下，于2016年3月28日～4月3日每天分別取樣（健康梨、感病梨）10個進行生理生化指標的測定，重復3次。

1.5 測定內容

果實硬度采用果實硬度計（高10 mm，探頭徑12 mm的半球體）進行測定；可溶性固形物含量采用0%～53%手持糖量計進行測定；果實萼端的色澤L、a、 b值用果實色差計進行測定。

1.6 數據處理

采用SigmaPlot 10.0軟件制作曲線圖，采用LSD法進行差異性顯著分析。

2 結果與分析

2.1 庫爾勒香梨萼端黑斑病的發(fā)病癥狀

庫爾勒香梨黑斑病在病原菌可冬天潛伏在樹體，主要危害果實，第二年發(fā)病，果實在生長后期未達成熟時便可發(fā)病，在采后貯藏期發(fā)病更為嚴重。圖1為庫爾勒香梨萼端黑斑病發(fā)病果照片，圖2和圖3分別為健康的庫爾勒香梨果實在反接萼端黑斑病致病菌之前和之后的照片。

圖1 萼端黑斑病香梨Fig.1 Korla fragrant pear of calyx end black spot

圖2 果實接菌前Fig.2 The fruit before the inoculation

圖3 果實接菌后Fig.3 Fruit after inoculation

2.2 庫爾勒香梨健康果接種致病菌對果實色差的影響

在果實成熟和貯藏過程中，果皮顏色會發(fā)生變化，通過對色差值的量化，從理論上判定果實衰老的程度。L值的大小反映果皮色澤的明度，a值表示果實表皮色澤由紅色向綠色的轉變，b值表示果實表皮色澤由黃色到藍色的轉變。庫爾勒香梨萼端黑斑病對果皮色差值L、a和b的影響見圖4。

圖4 萼端黑斑病對庫爾勒香梨果皮L、a和b值的影響Fig.4 Calyx end black spot impact on the L，a and b value in skin of Korla fragrant pear

貯藏7 d內，隨著貯藏時間延長，a值和b值均呈上升趨勢，3月30日后上升幅度平緩。貯藏期內，不同處理間a值和b值差異多表現為不顯著（P＞0.05），隨著貯藏時間的延長，處理間差異顯著（P＜0.05）。貯藏7 d，感病梨a值和b值始終大于健康梨，感病梨a值和b值分別比健康梨高4%～12%和6%～10%。L值的變化趨勢與a值和b值相反，隨著貯藏時間延長，L值均呈下降趨勢，貯藏第5天后，處理間差異顯著，感病梨L值始終小于健康梨，變幅在2%～8%之間。這說明貯藏過程中果實果皮色澤a值和b值會逐漸增大，L值會逐漸變小，色澤由綠逐漸變黃、變淡和變暗，感病梨比健康梨變黃、變淡和變暗速度更為迅速。

2.3 庫爾勒香梨健康果接種致病菌對果實可溶性固形物含量的影響

可溶性固形物是檢測果蔬品質和貯藏效果的重要指標。庫爾勒香梨萼端黑斑病對果實可溶性固形物含量的影響見圖5。

隨著貯藏時間延長，果實中的可溶性固形物含量均呈下降趨勢，但感病梨下降幅度較健康梨大。貯藏7 d內，庫爾勒香梨不同處理間可溶性固形物差異達顯著水平（P＜0.05），健康梨可溶性固形物含量大于感病梨，健康梨可溶性固形物含量比感病梨高10%～24%。這可能是由于感病梨中致病菌的感染，引起呼吸作用的增強，可溶性固形物含量的消耗增加，因此感病梨中可溶性固形物含量比健康梨中下降速度更快。

2.4 庫爾勒香梨健康果接種致病菌對果實硬度的影響

果實硬度是衡量果實成熟度和貯藏品質的重要指標。庫爾勒香梨萼端黑斑病對果實硬度的影響見圖6。

圖5 萼端黑斑病對庫爾勒香梨可溶性固形物含量的影響Fig.5 Calyx end black spot impact on the soluble solids content of Korla fragrant pear

圖6 萼端黑斑病對庫爾勒香梨果實硬度的影響Fig.6 Calyx end black spot impact on the fruit hardness of Korla fragrant pear

隨著貯藏時間的延長，果實硬度均呈下降趨勢。貯藏第4天后，果實硬度下降幅度增加。貯藏3 d內，不同處理間果實硬度差異不顯著（P＞0.05），貯藏第4天至第7天，各處理間差異達顯著水平（P＜0.05）；貯藏期內，健康梨果實硬度始終大于感病梨，健康梨果實硬度比感病梨高5%～22%。表明隨著貯藏時間的延長，果實硬度逐漸下降，由于致病菌的侵染，造成感病梨果肉硬度的軟化，所以硬度下降速度較快。

3 討論

1）庫爾勒香梨因其自身多汁、皮薄、衰變、易受損傷的特點，極易受病原菌的侵染，造成果實品質下降，腐爛率極高，貯藏期間生理病害造成的損失高達30%左右。高腐爛率會引起果實硬度下降、果皮表面黃化等品質下降的現象，產后必須進行商品化貯藏、保鮮等，從而提高果實的商品價值。黑斑病是梨、蘋果[8]等薔薇科水果的三大病害之一，由真菌的鏈格孢侵染引起[9]。鏈格孢屬引起貯藏果實腐爛病原物，可在花期和果實生長發(fā)育時期通過各種途徑潛伏侵染，直到果實貯藏期發(fā)病[10]。

2）大量研究表明，庫爾勒香梨在貯藏期間果實發(fā)生后熟作用，色澤從綠色逐漸向黃色轉變[11]。溫度是影響庫爾勒香梨品質的主要因素之一，溫度高低影響果皮葉綠素的降解和果蔬體內各種酶的活性，低溫可以抑制香梨果實葉綠素降解酶的活性，保持果實良好的色澤[12]。貯藏7 d內，庫爾勒香梨隨著貯藏時間延長a值和b值均呈上升趨勢。貯藏期內不同處理間a值和b值差異多表現為不顯著（P＞0.05），后隨著貯藏時間的延長處理間差異顯著（P＜0.05）。感病梨a值和b值始終大于健康梨，感病梨a值和b值分別比健康梨高4%～12%和6%～10%。L值的變化趨勢與a值和b值相反，貯藏第5天后，處理間差異顯著，感病梨L值始終小于健康梨，變幅在2%～8%之間。這可能是由于庫爾勒香梨在貯藏過程中果實表面色澤a值和b值會逐漸增大，色澤由綠逐漸變黃、變淡和變暗，而感病梨比健康梨變黃、變淡和變暗速度更為迅速的緣故。

3）果實采后可溶性固形物含量呈下降趨勢，與其呼吸代謝有關，果實中可溶性糖和有機酸可作為呼吸底物而被逐漸消耗[13]。低溫貯藏可抑制果實采后呼吸作用，從而維持果實較高的可溶性固形物含量，保持果實的食用品質[14]。果實采后可溶性固形物含量呈下降趨勢。硬度決定了果實的口感與質地，香梨果實采收后硬度呈下降趨勢。本試驗中隨著貯藏時間延長果實中可溶性固形物和果實硬度均呈下降趨勢，但感病梨下降幅度較為健康梨大。這是因為感病梨受到致病菌的侵染，引起果實呼吸作用突然增強[15]，造成呼吸底物主要是可溶性固形物的含量消耗增加，促使感病果中可溶性固形物含量迅速下降；致病菌的侵染也同時造成酶系統等生理活性的增加，造成果實硬度下降劇烈。

4 結論

健康果中L值較感病果高，而感病果中a值和b值的較高。隨著貯藏期的延長，健康果和感病果中a值和b值均呈上升趨勢，感病果a值和b值始終大于健康果；L值的變化趨勢與a值和b值相反，感病果L值始終小于健康果。貯藏過程中，庫爾勒香梨健康果和感病果中可溶性固形物含量和果實硬度均呈下降趨勢，但感病果下降幅度較健康果大。

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The Change of Fruit Quality after Calyx End Black Spot Pathogenic Bacteria Reversed the Fruit

FAN Guo-Quan1，ZHAO Xiao-mei1，*，E Reken·Kuwanbieke2，WU Yu-peng3
（1.Xinjiang Academy of Agricultural Sciences，Urumqi 830091，Xinjiang，China；2.College of Science and Technology，Xinjiang Agricultural University，Urumqi 830052，Xinjiang，China；3.Xinjiang Vocational College of Agriculture，Changji 831100，Xinjiang，China）

It studied the calyx end black spot affected on fruit quality through the determination of color difference，soluble solids content and fruit hardness in health and disease pear in the process of storage，when the calyx end black rot pathogenic bacteria extracted from Korla fragrant pear disease fruit and reversed connect to healthy fruit.The results showed that the healthy fruit had higher L value than infected fruit，and infected fruit had higher a and b value.With the extension of storage period，a and b value in the healthy fruit and infected fruit was rising，while a and b value in infected fruit was always greater than healthy fruit；L value changed trendly in contrast to a and b values，and L value in infected fruit was always less than healthy fruit.Soluble solids content and fruit hardness were declining in Korla fragrant pear health fruit and infected fruit in storage process，but there was a big drop in infected fruit.

Korla fragrant pear；calyx end black spot；fruit quality

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.10.042

2016－08－31

自治區(qū)財政林業(yè)科技專項“新疆特色林果質量控制發(fā)展戰(zhàn)略研究”

樊國全（1980—），男（漢），助理研究員，碩士，研究方向：園藝學。

*通信作者：趙曉梅（1980—），女（漢），副研究員，博士，研究方向：果樹學。