李丹丹,張 斌,張赫恂，李長鋒,王學(xué)菊,韓志峰

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 a.內(nèi)鏡中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 長春130033;2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院)

整合素αvβ3在食管腫瘤中的表達(dá)及意義

李丹丹1a,張 斌1a,張赫恂2，李長鋒1a,王學(xué)菊1b,韓志峰1c*

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 a.內(nèi)鏡中心；b.病理科；c.胸外科，吉林 長春130033;2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院)

目的 探討整合素αvβ3在不同食管腫瘤中的表達(dá)及其意義。方法 分別收集10例正常食管組織標(biāo)本、10例食管平滑肌瘤標(biāo)本及30例食管癌標(biāo)本，分為3組，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對標(biāo)本中整合素αvβ3的表達(dá)進(jìn)行分析。結(jié)果 食管癌組織中可見整合素αvβ3呈明顯陽性表達(dá)；正常食管組織及食管平滑肌瘤組織則不表達(dá)或弱表達(dá)。食管癌組整合素αvβ3的表達(dá)與正常食管組和食管平滑肌瘤組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而正常食管組與平滑肌瘤組之間則無明顯差異(P>0.05)。食管癌組整合素αvβ3的表達(dá)與腫瘤的浸潤深度無關(guān)(P>0.05)，而與腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 整合素αvβ3的表達(dá)可作為判斷食管癌惡性程度及預(yù)后的重要生物學(xué)指標(biāo)。

整合素αvβ3；食管癌；預(yù)后

(ChinJLabDiagn,2017,21:0571)

惡性腫瘤的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移受多種因素的影響，其中整合素作為細(xì)胞粘附分子在其中起著重要的調(diào)節(jié)作用，它參與細(xì)胞-細(xì)胞之間、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用[1]。多項(xiàng)研究證實(shí)整合素αvβ3在多種惡性腫瘤中高表達(dá)，且與其惡性行為密切相關(guān)。為進(jìn)一步研究整合素αvβ3與食管癌生物學(xué)行為的關(guān)系，我們采用免疫組化方法對食管良性及惡性腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行檢測，探討整合素αvβ3與食管癌的侵襲、轉(zhuǎn)移及其對預(yù)后評價的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集我院外科食管癌手術(shù)標(biāo)本共30例，其中男23例，女7例，年齡范圍40-79歲，平均年齡60.6歲，體重45-73 kg，平均體重65 kg。并于距腫物大于5.0 cm的陰性切緣部位取材食管正常組織10例，外科及內(nèi)鏡食管平滑肌瘤手術(shù)標(biāo)本10例作為對照組。

1.2 試劑與方法

50例標(biāo)本均經(jīng)4%甲醛固定、石蠟包埋、4 μm連續(xù)切片，行常規(guī)HE染色確定取材的食管組織性質(zhì)。采用免疫組化SP法，一抗選用抗整合素αvβ3多克隆抗體(美國Abbiotec公司)，具體操作按說明書步驟進(jìn)行。根據(jù)免疫組化染色結(jié)果判定整合素αvβ3在食管正常組織和腫瘤組織中的表達(dá)。

1.3 結(jié)果判定

整合素αvβ3表達(dá)陽性時，鏡下可見細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)黃色顆粒，且染色強(qiáng)度高于背景。其陽性結(jié)果的判定需將染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞總數(shù)的百分比綜合計分。染色強(qiáng)度的評分：無色(-)為0分，淡黃色(+)為1分，棕黃色(++)為2分，深棕色(+++)為3分。陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)評分：在高倍鏡(400倍)下對每張切片隨機(jī)選取5個視野，每個視野計數(shù)200個細(xì)胞，共記錄每1000個細(xì)胞中所含的陽性細(xì)胞數(shù)，然后計算百分比。0為0分，≤25%為1分，26%-50%為2分，51%-75%為3分，76%-100%為4分。當(dāng)染色強(qiáng)度的評分與陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評分之和≥3，即為免疫組化陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

經(jīng)HE染色病理組織學(xué)檢查確定30例食管癌標(biāo)本均為食管鱗癌。于腫瘤陰性切緣留取的10例正常食管組織HE染色未見異型腫瘤細(xì)胞，且整合素αvβ3免疫組化染色結(jié)果顯示無色或淡黃色。食管平滑肌瘤染色呈淡黃色。食管癌組織中可見腫瘤細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)著色程度不一的黃色、棕黃色或棕褐色顆粒，細(xì)胞核不著色，間質(zhì)淡染(見圖1，2)。經(jīng)兩兩比較發(fā)現(xiàn)，食管癌組織中的整合素αvβ3陽性表達(dá)率顯著高于正常食管組織和食管平滑肌瘤(P<0.001)，見表1。

a：正常食管；b：食管平滑肌瘤；c：食管癌

圖1 不同食管組織整合素αvβ3免疫組化染色結(jié)果

a：HE染色圖片(×400)示食管中分化鱗癌；b：免疫組化染色示腫瘤細(xì)胞及新生血管內(nèi)皮細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)見整合素αvβ3表達(dá)(×400)。

圖2 食管癌組織HE染色及整合素αvβ3免疫組化染色

表1 整合素αvβ3在食管組織中的表達(dá)及相關(guān)性

注釋：* FISHER精確概率法；a：與正常食管組織相比，P<0.05；b：與食管平滑肌瘤相比，P<0.05。

對30例食管癌標(biāo)本整合素αvβ3表達(dá)與臨床病理分期的關(guān)系進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)整合素αvβ3的表達(dá)與腫瘤組織的浸潤程度無關(guān)，而與其分化程度相關(guān)(P<0.05)。在有或者無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者中整合素αvβ3的表達(dá)差異顯著(P<0.05)，見表2。

3 討論

多項(xiàng)研究證實(shí)，不同組織來源的惡性腫瘤細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面都存在整合素αvβ3的高表達(dá)[2-8]，這與多種腫瘤的不良預(yù)后以及早期轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。除此之外，多種基于上述結(jié)論的惡性腫瘤整合素αvβ3受體顯像特異性靶向示蹤劑的研究也如火如荼的開展起來[9-12]，從而進(jìn)一步證實(shí)了整合素αvβ3在腫瘤新生血管形成及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。

在本研究中，食管癌組織中整合素αvβ3在癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)過量表達(dá)，而在正常食管組織和平滑肌瘤中幾乎不表達(dá)或微量表達(dá)，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。有研究報道整合素αvβ3的表達(dá)在惡性程度不同的同一種腫瘤細(xì)胞中也不一致，隨著癌組織分化程度的降低，整合素αvβ3的表達(dá)率呈現(xiàn)上升趨勢[8,13-15]。在本研究中同樣發(fā)現(xiàn)食管癌組織分化越差整合素αvβ3的表達(dá)越高，而分化程度越高，表達(dá)則越低，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示癌細(xì)胞分化程度越差，對血液供應(yīng)的要求越高，其浸潤程度可能越明顯，預(yù)后可能就越差。

表2 整合素αvβ3表達(dá)與食管癌患者病理參數(shù)的比較

*陽性細(xì)胞百分率

有研究證實(shí)肺癌腦轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移組織中整合素αvβ3的陽性表達(dá)強(qiáng)度均高于原發(fā)肺癌組織[8,16]，均提示整合素αvβ3參與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。本研究發(fā)現(xiàn)發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中整合素αvβ3的表達(dá)明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，與上述研究結(jié)果相符，對于腫瘤的預(yù)后評估有一定的指導(dǎo)意義。

綜上所述，整合素αvβ3的表達(dá)與食管癌的惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為臨床上判斷預(yù)后的一項(xiàng)重要生物學(xué)指標(biāo)。另外，食管癌組織中整合素αvβ3的高表達(dá)可為臨床上食管癌的治療提供新的思路。

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Expression and significant of integrin αvβ3 in esophageal tumor

LIDan-dan,ZHANGBin,ZHANGHe-xun,etal.

(EndoscopyCenter,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To investigate the expression and significant of integrin αvβ3 in different esophageal tumors.Methods 10 normal esophageal tissues,10 leimyoma tissues and 30 esophageal carcinoma tissues were collected.Pathological and immunohistochemical methods were used to study the expression of integrin αvβ3.Results The immunohistochemical staining results showed that integrin αvβ3 expressed in the tissues of esophageal carcinoma.None or only faint yellow grain could be seen in the normal esophageal tissues and leimyoma esophageal tissues,with statistical significance to carcinomas (P<0.05).The expression of integrin αvβ3 had relevance to the differentiated degree and lymphatic metastasis of the tumor (P<0.05),but no relevance to the invasive depth(P>0.05).Conclusion Integrin αvβ3 can be used as an important biological indicator to estimate the severity and prognosis of the esophageal carcinomas.

integrin αvβ3；esophageal carcinoma；prognosis

吉林省科技發(fā)展計劃項(xiàng)目(白求恩專項(xiàng)20160101064JC);吉林大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院優(yōu)青培養(yǎng)計劃支持經(jīng)費(fèi)(419080500365)

1007-4287(2017)04-0571-03

R735.1

A

2016-07-18)

*通訊作者