顧 濤，張彥秋，劉立杰，張 雙，張 瑜，付占昭，付寶紅

(秦皇島市第一醫(yī)院 腫瘤科，河北 秦皇島066000)

*通訊作者

非小細(xì)胞肺癌患者化療前后血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1檢測(cè)的臨床意義

顧 濤，張彥秋，劉立杰，張 雙，張 瑜，付占昭，付寶紅*

(秦皇島市第一醫(yī)院 腫瘤科，河北 秦皇島066000)

目的 探討非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者化療前后血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度的變化，探討兩者在病情監(jiān)測(cè)中的臨床價(jià)值。方法 72例NSCLC患者化療前采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度，化療采用GP方案，連用2周期，治療結(jié)束后1周再次測(cè)定血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度，并行胸部CT檢查，根據(jù)CT結(jié)果分為化療有效組(完全緩解+部分緩解)和無(wú)效組(病情穩(wěn)定+疾病進(jìn)展)，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 NSCLC患者化療前血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1濃度分別為(0.803±0.078)10-6pg、45.56±4.54 ng/ml，均高于對(duì)照組的(0.539±0.027)10-6pg、16.02±2.32 ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=19.57、39.56，P<0.05)。不同性別、年齡、病理類型和分化程度NSCLC患者之間血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1濃度接近，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。化療有效組化療前血清VEGF/血小板數(shù)為(0.810±0.121)10-6pg，化療后下降至(0.415±0.098)10-6pg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=16.84，P<0.05)；化療無(wú)效組化療前血清VEGF/血小板數(shù)為(0.815±0.104)10-6pg，化療后濃度明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=24.42，P<0.05)?；熡行ЫM化療前血清TGF-β1濃度為42.57±4.47 ng/ml，化療后濃度下降至20.75±3.43 ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=26.72，P<0.05)；化療無(wú)效組化療前血清TGF-β1濃度為41.90±5.26 ng/ml，化療后濃度為45.51±4.48 ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.38，P=0.030)。結(jié)論 血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度與腫瘤活動(dòng)度密切相關(guān)，可用于判定NSCLC化療近期療效。

非小細(xì)胞肺癌；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1

(ChinJLabDiagn,2017,21:0585)

肺癌的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程，腫瘤新生血管的生成對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移起了決定性作用。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)屬于血小板衍生生長(zhǎng)因子家族，促進(jìn)血管生成[1]。大量的VEGF存儲(chǔ)在血小板內(nèi)膜，血小板可能是血清VEGF的一個(gè)主要來(lái)源[2]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)屬于TGF-β超家族細(xì)胞因子，是一種具有多種細(xì)胞功能的分泌蛋白。VEGF和TGF-β1在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中高度相關(guān)，在腫瘤血管生成中發(fā)揮重要的監(jiān)管作用。VEGF促進(jìn)腫瘤血管生成，增加腫瘤細(xì)胞通過(guò)脈管系統(tǒng)進(jìn)入循環(huán)，最終促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。另一方面，高水平的TGF-β1也激活多種細(xì)胞通路促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移[3]。本研究探討血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者化療前后的變化，探討二者預(yù)測(cè)療效的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 NSCLC組 選取2013年2月-2015年1月NSCLC患者72例，有完整的臨床病理資料。男性49例，女性23例；年齡35-68歲，中位年齡56歲；均符合下列條件：KPS評(píng)分≥70分，均經(jīng)細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)證實(shí)；血常規(guī)、肝腎功能及心電圖基本正常。除外合并其他的內(nèi)科疾病不能接受治療者、臨床資料不全者、妊娠或哺乳期婦女。

1.1.2 正常對(duì)照組 50例體檢正常健康者來(lái)自秦皇島市第一醫(yī)院體檢中心，其中男28例，女22例，年齡30-66歲，中位年齡49歲，均排除肺部疾病。

1.2 化療方案

所有患者均應(yīng)用GP方案化療：鹽酸吉西他濱1 250 mg/m2，第1、8天；順鉑 75 mg/m2，第1-3天；每21天為1個(gè)周期，共2個(gè)周期。

1.3 血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1檢測(cè)方法

化療前1天及2周期化療結(jié)束后1周行血清中VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1的檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定，試劑盒由北京榮志海達(dá)生物科技有限公司提供。嚴(yán)格按說(shuō)明書操作。

1.4 療效評(píng)價(jià)

2周期化療結(jié)束后1周復(fù)查胸部CT，按照實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行療效評(píng)估。完全緩解(CR)：所有目標(biāo)病灶消失。部分緩解(PR)：基線病灶長(zhǎng)徑總和縮小≥30%；病變進(jìn)展(PD)：基線病灶長(zhǎng)徑總和增加≥20%或出現(xiàn)新病灶。病情穩(wěn)定(SD)：基線病灶長(zhǎng)徑總和有縮小但未達(dá)PR或有增加但未達(dá)PD。CR+PR為有效病例，SD+PD為無(wú)效病例。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 NSCLC組及正常對(duì)照組血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度

NSCLC患者化療前血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1濃度分別為(0.803±0.078)10-6pg、45.56±4.54 ng/ml，均高于正常對(duì)照組的(0.539±0.027)10-6pg、16.02±2.32 ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=19.57、39.56，P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 NSCLC組和正常對(duì)照組血清VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度

2.2 NSCLC患者血清VEGF/血小板數(shù)與臨床病理因素的關(guān)系

VEGF/血小板數(shù)與NSCLC患者性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、病理類型和分化程度無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 NSCLC患者血清TGF-β1濃度與臨床病理因素關(guān)系

血清TGF-β1濃度與NSCLC患者性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位、病理類型和分化程度無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表2 NSCLC患者血清VEGF/血小板數(shù)與臨床病理因素的關(guān)系

表3 NSCLC患者血清TGF-β1濃度與臨床病理因素的關(guān)系

2.4 化療前后血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1濃度變化與近期療效的關(guān)系

化療前血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1在有效組(CR+PR)的濃度分別為(0.810±0.121)10-6pg、42.57±4.47 ng/ml，化療后兩者濃度明顯下降，分別為(0.415±0.098)10-6pg、20.75±3.43 ng/ml，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=16.84、26.72，P<0.05)，而進(jìn)展組(SD+PD)血清VEGF/血小板數(shù)、TGF-β1濃度并未下降，反而明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表4、5。

表4 血清VEGF/血小板數(shù)在化療前后的變化

表5 血清TGF-β1在化療前后的變化

3 討論

腫瘤血管顯著地影響了NSCLC的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移[4]，而VEGF、TGF-β1在腫瘤血管生成中起著重要的作用[5]。目前研究顯示動(dòng)態(tài)檢測(cè)NSCLC患者血清VEGF/血小板數(shù)變化可能有助于化療療效的評(píng)價(jià)。

腫瘤組織確實(shí)含有高濃度的VEGF，但由于VEGF儲(chǔ)存于血小板膜的a-質(zhì)粒中，因此血小板數(shù)量對(duì)循環(huán)VEGF水平增高有一定貢獻(xiàn)[6]。血小板是血清中VEGF的主要來(lái)源，腫瘤患者血小板計(jì)數(shù)與血清中VEGF水平呈正相關(guān)[7，8]。因此本研究采用VEGF/血小板數(shù)來(lái)排除血小板數(shù)本身對(duì)本實(shí)驗(yàn)的影響。研究結(jié)果表明，VEGF/血小板數(shù)在NSCLC組明顯高于正常組。VEGF通過(guò)其對(duì)腫瘤血管生成的影響和轉(zhuǎn)移參與腫瘤的生長(zhǎng)[9]。VEGF增加了各種蛋白酶的分泌和基質(zhì)降解酶在腫瘤中的作用，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[10]。

TGF-β1是一種多功能的細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)各生理過(guò)程，如細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、免疫抑制、細(xì)胞外基質(zhì)沉積和腫瘤發(fā)生[11，12]。幾項(xiàng)研究表明TGF-β1促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移、血管生成和逃避免疫監(jiān)視[13]。在肺癌方面，TGF-β1表現(xiàn)為相反的作用方式：在腫瘤生長(zhǎng)的早期階段，它可作為腫瘤抑制劑；在腫瘤晚期階段，通過(guò)刺激腫瘤內(nèi)血管生成，分泌VEGF為腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供適宜的條件[14,15]。

動(dòng)態(tài)檢測(cè)NSCLC患者血清VEGF、TGF-β1濃度可能有助于放療或化療效果的評(píng)價(jià)[12]。Brattstr?m D等[16]對(duì)血小板處于正常范圍內(nèi)的73例局部晚期NSCLC患者檢測(cè)同步放化療前后血清VEGF的濃度變化，結(jié)果顯示：NSCLC患者外周血清VEGF濃度明顯高于正常對(duì)照組，且隨疾病的進(jìn)展其水平亦逐步升高；治療有效者其外周血清濃度較治療前明顯降低(P<0.05)。Zhao L等[17]對(duì)65例不可手術(shù)的中晚期NSCLC患者治療前后血清TGF-β1濃度與同步放化療療效的關(guān)系進(jìn)行研究，結(jié)果顯示：治療有效組的血清TGF-β1的濃度較治療前明顯下降，治療后低濃度的TGF-β1明顯提高了總有效率、延長(zhǎng)了OS及PFS。本研究中，化療2周期后血清TGF-β1濃度均明顯下降，與化療前比較，提示化療后腫瘤體積減少。因此，TGF-β1濃度可以作為NSCLC患者生存的一個(gè)獨(dú)立預(yù)后因素。本研究顯示VEGF/血小板數(shù)和TGF-β1濃度在化療有效組化療后明顯下降，但化療進(jìn)展組的結(jié)果正好相反，這可能是腫瘤體積變化，相關(guān)的腫瘤負(fù)荷變化，改變了腫瘤血液中釋放的標(biāo)志物。

本研究結(jié)果有一定的局限性。首先，如吸煙狀況，BMI和其他呼吸系統(tǒng)疾病可能會(huì)改變VEGF/血小板數(shù)和血清TGF-β1濃度，進(jìn)而影響結(jié)果的可靠性。其次，研究結(jié)果應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大到其他種族的NSCLC患者。因此，為了得到準(zhǔn)確和系統(tǒng)的結(jié)果，大樣本研究是必要的。

總之，研究結(jié)果表明，VEGF和TGF-β1在NSCLC行為中發(fā)揮重要作用。二者與NSCLC患者化療療效相關(guān)，可能成為診斷和預(yù)后的臨床標(biāo)志物。

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Clinical significance of serum VEGF/platelet count and TGF- beta 1 in patients with non-small cell lung cancer before and after chemotherapy

GUTao,ZHANGYan-qiu,LIULi-jie,etal.

(DepartmentofOncology,theFirstHospitalofQinhuangdao,Qinhuangdao066000,China)

Objective To investigate the changes of serum VEGF/platelet count and TGF- beta 1 in patients with NSCLC before and after chemotherapy and to explore their clinical value as biomarkers.Methods A total of 122 subjects were recruited at the First Hospital of Qinhuangdao between February 2013 and January 2015,including 72 NSCLC patients receiving chemotherapy (NSCLC group) and 50 healthy controls (control group).All NSCLC patients received gemcitabine plus cisplatin (GP regimen) for a total of two courses.Serum VEGF/platelet count and TGF- beta 1 were measured before and after chemotherapy using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).NSCLC group was categorized into complete response (CR) plus partial response(PR) group and stable disease(SD) plus progressive disease(PD) group based on the results of CT scans obtained 1 week after chemotherapy.Results Serum VEGF/platelet count and TGF-beta 1 were significantly higher in NSCLC group before chemotherapy compared to the control group (VEGF/ platelet count,0.803±0.078 vs 0.539±0.027;t=19.57;P<0.05 and TGF-β1,45.56±4.54 vs 16.02±2.32;t=39.56;P<0.05).There were no significant differences in serum VEGF/platelet count and TGF- beta 1 in patients with different gender,age,pathological type and differentiation degree(P>0.05).Importantly,serum VEGF/platelet count and TGF-beta 1 decreased significantly after chemotherapy in CR+PR group in comparison with before chemotherapy (VEGF/platelet count,0.415±0.098 vs 0.810±0.121;t=16.84;P<0.05 and TGF-β1,20.75±3.43 vs 42.57±4.47;t=26.72;P<0.05).By contrast,serum VEGF/platelet count and TGF- beta 1 were markedly higher after chemotherapy in the SD+PD group in comparison with before chemotherapy (VEGF/platelet count,0.815±0.104 vs 1.178±0.106;t=24.42;P<0.05 and TGF-β1,41.90±5.26 vs 45.51±4.48;t=2.38;P=0.030).Conclusion Serum VEGF/ platelet count and TGF- beta 1 are closely related to tumor activity,which can be used to determine the short-term efficacy of NSCLC chemotherapy.

NSCLC;VEGF;TGF-β1

1007-4287(2017)04-0585-04

R734.2

A

2016-10-05)