蘇玲萍　張勇　朱曉北　謝珊珊

摘要：建立復(fù)方感冒膠囊中撲爾敏的含量測(cè)定方法。方法：色譜柱為Red Classical C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相A為磷酸緩沖液（取磷酸二氫銨11.5g，加水適量使溶解，加磷酸4ml，用水稀釋至1000ml），流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm，流速為1.0ml·min-1，進(jìn)樣量為10μl。結(jié)果：撲爾敏濃度在12μg·ml-1-55μg·ml-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9985），平均回收率為100.86%，RSD為1.7%（n=6）。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于復(fù)方感冒膠囊中撲爾敏的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；復(fù)方感冒膠囊；撲爾敏；含量測(cè)定

復(fù)方感冒膠囊為我公司獨(dú)家產(chǎn)品，主要生產(chǎn)工藝是羌活、防風(fēng)、荊芥、黃芩、細(xì)辛等中藥材經(jīng)過提取濃縮制成干膏，加撲熱息痛和撲爾敏制成的中西結(jié)合的復(fù)方制劑。有解表散寒的功效，用于感冒風(fēng)寒、頭痛、身疼、惡寒發(fā)熱?，F(xiàn)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS-10980（ZD-0980）-2002-2011Z采用HPLC法測(cè)定馬來酸氯苯那敏的含量。由于成分較多，存在較多干擾峰，該方法無法準(zhǔn)確測(cè)定撲爾敏的含量。在參閱有關(guān)文獻(xiàn)[1，2，3]的基礎(chǔ)上，本文建立準(zhǔn)確有效的高效液相色譜法，對(duì)復(fù)方感冒膠囊中撲爾敏的含量進(jìn)行測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電子分析天平（Sartorius BP211D），高效液相色譜儀（LC-10AT VP泵、SPD-10AVP紫外檢測(cè)器、SIL-10A自動(dòng)進(jìn)樣器），Class-vp工作站（日本島津）。

1.2 試藥

復(fù)方感冒膠囊（規(guī)格：每粒裝0.33g，批號(hào)20151201，20151202，溫州海鶴藥業(yè)有限公司）；撲爾敏原料藥（批號(hào)：150112，河南九勢(shì)制藥股份有限公司）撲爾敏對(duì)照品（批號(hào)：100047-200606；純度：99.7%，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；乙腈為色譜純，水為公司自制的純水，磷酸二氫銨等分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱為 C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相A為磷酸緩沖液（取磷酸二氫銨11.5g，加水適量使溶解，加磷酸4ml，用水稀釋至1000ml），流動(dòng)相B為乙腈，按表1進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm，流速為1.0ml·min-1，進(jìn)樣體積：10μl。

2.2溶液的制備

2.2.1對(duì)照品貯備液：取撲爾敏對(duì)照品10.1mg置100ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度。

2.2.2對(duì)照品溶液：吸取貯備液2ml置5ml容量瓶中，用流動(dòng)相A：流動(dòng)相B（82：18）稀釋至刻度。

2.2.3供試品溶液：取復(fù)方感冒膠囊內(nèi)容物，研細(xì)，取0.33g，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲處理（功率300W，頻率50kHz）15分鐘，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，靜置半小時(shí)，濾過，濾液作為供試液

2.2.4陰性對(duì)照 取按工藝制備的干膏，加其他原輔料除撲爾敏外的樣品，按2.2.3制備，作為陰性對(duì)照。

2.3最低檢出限和定量限

吸取對(duì)照品溶液分別稀釋成12ug.ml，1.2ugml；0.12ug.ml；0.36ug.ml，分別吸取10μl，注入液相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣。檢測(cè)限濃度為0.36μg·ml-1，信噪比為6，峰面積RSD為2.5%；定量限濃度為1.2μg·ml-1，信噪比為18，峰面積RSD為4.3%。

2.4線性關(guān)系考察

分別吸取上述對(duì)照品貯備液3，5，10，12，14ml置25ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，制成12，20，40，48，56μg·ml-1的系列溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣，采集峰面積。制線性關(guān)系圖，結(jié)果表明撲爾敏含量在12μg·ml-1-56μg·ml-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9985）。

2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)

取上述同一份供試品溶液，分別于0，4，8，12，24，36，48h測(cè)定，結(jié)果撲爾敏峰面積RSD為3.3%（n=6）。表明供試品溶液在48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6加樣回收率

精密稱取批號(hào)20160402的復(fù)方感冒膠囊0.165g，共6份，置25ml容量瓶中，精密加入對(duì)照品0.45mg，照“2.2.3”項(xiàng)下方法處理。進(jìn)樣，分別測(cè)定含量，結(jié)果平均回收率為93.6%，RSD為0.4%（n=6）。

2.7精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6針，結(jié)果撲爾敏峰面積RSD為1.0%（n=6）。

2.8樣品含量測(cè)定

取復(fù)方感冒膠囊（批號(hào)20151201，20151202，溫州海鶴藥業(yè)有限公司）兩批產(chǎn)品，分別稱取裝量差異項(xiàng)下的復(fù)方感冒顆粒，研碎，稱取0.33g，按上述的色譜條件，測(cè)定含量。兩批的平均含量分別為0.93mg/粒、0.90mg/粒

3討論

3.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇：對(duì)撲爾敏對(duì)照品溶液作在200—400nm進(jìn)行掃描，其最大吸收峰波長(zhǎng)分別為211nm和265nm。在上述實(shí)驗(yàn)條件下，分別于215nm和265nm波長(zhǎng)處對(duì)上述樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析，結(jié)果215nm處所得的色譜圖譜簡(jiǎn)單，分離效果較好。故選擇215nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2流動(dòng)相的選擇：參照文獻(xiàn)[1，2，3]，選擇三種不同的流動(dòng)相進(jìn)行分析乙腈-50%甲醇溶液（含0.5%十二烷基硫酸鈉和0.1%磷酸）（42：58）；0.005mol/L辛烷磺酸鈉（用醋酸調(diào)節(jié)pH3.0）：乙腈3：1；磷酸緩沖液（取磷酸二氫銨11.5g，加水適量使溶解，加磷酸1ml，用水稀釋至1000ml）-乙腈（80：20），結(jié)果第三種流動(dòng)相所得的HPLC圖譜分離度較好，但是黃芩苷峰60分鐘都未出，所以調(diào)整為梯度洗脫方式。

3.3流動(dòng)相pH的選擇 pH值對(duì)撲爾敏的出峰時(shí)間及峰形影響較大。用文獻(xiàn)[3]方法加1ml磷酸，撲爾敏峰拖尾嚴(yán)重且分離度不好，后改為加4ml磷酸（pH2.27）峰形尖銳漂亮，分離度較好。加3.5ml（pH2.42）-6ml（pH2.1）磷酸，分離度及峰形均符合要求。最后，選定加磷酸4ml。

3.4 耐用性分別用不同流速、不同品牌的同類型柱子、不同pH條件進(jìn)行進(jìn)樣分析，方法均穩(wěn)定可靠。

參考文獻(xiàn)：

[1]李桃，林煥澤，吳秀榮.RP-HPLC法測(cè)定馬來酸氯苯那敏片中馬來酸氯苯那敏的含量[J].臨床合理用藥雜志，2010（5）：56-57

[2]何永虎，周小露，陳洪駿.HPLC法測(cè)定治感佳膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量[J].今日藥學(xué)，2008（4）：31-32，42

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典二部[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.63

作者簡(jiǎn)介：蘇玲萍（1970-），女，浙江瑞安人，本科學(xué)歷，工程師，研究方向：藥品生產(chǎn)研發(fā)、藥品質(zhì)量管理。