海林格:致力成為動物疫苗黏膜免疫領(lǐng)導(dǎo)者
——記2017海大論道暨第一屆動物黏膜免疫與疫苗設(shè)計論壇

本刊編輯/薛惠莉

為推動動物黏膜免疫系統(tǒng)理論體系的行業(yè)認(rèn)知與了解，推廣黏膜免疫疫苗設(shè)計的研發(fā)和臨床應(yīng)用，3月20-22日，四川海林格生物制藥有限公司（以下簡稱“海林格”）在廣州召開了“2017海大論道——第1屆動物黏膜免疫與疫苗設(shè)計技術(shù)論壇”。海林格公司特別邀請了國內(nèi)黏膜免疫頂級專家、國內(nèi)首個黏膜免疫疫苗申報團(tuán)隊、各省生豬現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系疾病控制研究室崗位科學(xué)家以及國內(nèi)著名養(yǎng)殖企業(yè)的總經(jīng)理/技術(shù)總監(jiān)組成了超重量級的實(shí)踐型專家團(tuán)隊主講本次論壇各類技術(shù)專題報告；以“匯聚全球黏膜免疫前沿智慧，引領(lǐng)中國動物疫病防控創(chuàng)新”為主題，與會嘉賓圍繞當(dāng)前主要疫病防控和動物黏膜免疫疫苗的研究進(jìn)展情況進(jìn)行了闡述分析，并就動物疫苗的研究與生產(chǎn)提出了精彩見解與對策。

什么是黏膜免疫？

傳統(tǒng)的肌肉注射免疫大家都知道，那到底什么是黏膜免疫？黏膜免疫基礎(chǔ)理論研究證明，動物黏膜免疫系統(tǒng)是指機(jī)體與外界相接觸的腔道黏膜表面的免疫系統(tǒng)，主要由呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜及某些外分泌腺（如唾液腺、淚腺及乳腺等）黏膜相關(guān)的淋巴組織所組成的免疫系統(tǒng)，是機(jī)體抵抗病原微生物入侵的第一道屏障。已知的黏膜部位免疫細(xì)胞（如M細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）和免疫分子（如SIgA)的數(shù)量均超過全身免疫系統(tǒng)，黏膜免疫系統(tǒng)在防御動物傳染病的發(fā)生中發(fā)揮著不可替代的重要作用，且又具有相對獨(dú)立性。

圖1 會議現(xiàn)場

目前，動物黏膜免疫系統(tǒng)理論體系的認(rèn)知和黏膜免疫（疫苗設(shè)計和黏膜免疫佐劑研制）的實(shí)踐還沒有受到行業(yè)的研究開發(fā)和臨床應(yīng)用的重視。海林格公司近年來致力于共同黏膜免疫系統(tǒng)疫苗設(shè)計研究和臨床應(yīng)用實(shí)踐，取得了超出預(yù)期的臨床效果。

滴鼻免疫流感活疫苗已得到認(rèn)可

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士生導(dǎo)師楊倩教授深入淺出地為與會者做 “動物共同黏膜免疫理論體系與疫苗設(shè)計技術(shù)”的報告。關(guān)于鼻腔免疫及其疫苗設(shè)計，楊教授提到由于鼻腔后部黏膜下分布有豐富的毛細(xì)血管和大量黏膜相關(guān)的淋巴組織，鼻腔免疫具有抗原誘導(dǎo)免疫反應(yīng)閾值低、抗原用量少，不受消化酶的影響、不引起免疫耐受等優(yōu)點(diǎn)，鼻腔免疫誘導(dǎo)免疫反應(yīng)能力保持較長時間。2010年美國啟動流感疫苗工程，通過滴鼻免疫活的流感疫苗已得到認(rèn)可，鼻腔免疫預(yù)防豬的豬繁殖與呼吸綜合征、豬支原體肺炎和豬流感等病已有研究。同樣，鼻腔免疫存在著挑戰(zhàn)，鼻腔上皮纖毛的擺動和上皮黏液可分別影響抗原的滯留和吸收；抗原進(jìn)入鼻腔后只能在黏膜表面做短暫的停留；假復(fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞間的緊密連接產(chǎn)生的物理屏障；多數(shù)抗原單獨(dú)進(jìn)行鼻腔免疫時免疫原性較弱等特點(diǎn)，所以要有相應(yīng)的設(shè)計原則。首先要解決疫苗抗原在鼻腔黏膜表面黏附和滯留問題，黏膜疫苗需要黏附在黏膜上，黏附的時間越長發(fā)揮的效果就越好，然后增強(qiáng)抗原的免疫原性，促進(jìn)M細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞有效攝取抗原，解決抗原跨上皮吸收的困難。

因黏膜免疫較難計算抗原量和確定免疫反應(yīng)，缺乏標(biāo)準(zhǔn)化試驗(yàn)和臨床評價標(biāo)準(zhǔn)。盡快建立黏膜免疫評價標(biāo)準(zhǔn)，靶向M細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞（針對黏膜組織）針對感染選擇接種的途徑，黏膜疫苗設(shè)計上需要考慮動物和各種病原的不同安全性、穩(wěn)定性（在胃腸道），成本是制約免疫增強(qiáng)劑在畜牧生產(chǎn)中應(yīng)用的關(guān)鍵，尋找低成本、易制備、高效且安全的獸用疫苗免疫增強(qiáng)劑。

楊教授表示根據(jù)黏膜免疫特點(diǎn)，如何增加抗原的遞呈是核心問題，但可通過免疫增強(qiáng)佐劑等方式解決；而口服免疫疫苗則需要克服消化酶的降解，而且需要二次免疫才能達(dá)到預(yù)期效果。鼻腔免疫則需要克服纖毛的擺動，想辦法延長疫苗抗原在其的停留時間。

4款豬用疫苗產(chǎn)品組合已上市

海林格公司總經(jīng)理趙金旺分享了海林格公司對動物黏膜免疫的理解、疫苗產(chǎn)品方案和研發(fā)方向，展現(xiàn)了海林格公司在動物黏膜免疫領(lǐng)域特色發(fā)展道路上的藍(lán)圖。

海林格公司針對當(dāng)前養(yǎng)豬業(yè)最常見的7大疫?。贺i瘟、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病、豬流行性腹瀉病毒病、豬藍(lán)耳病、豬支原體肺炎和口蹄疫，海林格公司目前推出4款豬用疫苗產(chǎn)品組合。

“海聯(lián)安”，即豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗組合產(chǎn)品。為解決豬瘟超前免疫臨床上實(shí)際操作不易落實(shí)，以及避免仔豬肌注豬瘟活疫苗病毒、豬偽狂犬病活疫苗病毒（早期免疫接種）等受到母源抗體干擾的情況，海大集團(tuán)畜牧獸醫(yī)研究院在成功研制出豬流行性腹瀉病毒滅活疫苗黏膜免疫佐劑的基礎(chǔ)上，又成功研制出針對豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗專用黏膜免疫佐劑。依據(jù)專有的黏膜免疫（佐劑）技術(shù)，在仔豬出生1～3日齡，鼻腔噴鼻黏膜免疫豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗組合產(chǎn)品，因不受母源抗體的干擾或影響，取得了理想的豬瘟、豬偽狂犬病活疫苗的臨床免疫效果。

針對豬圓環(huán)病毒病防控存在的注射與應(yīng)激問題、保護(hù)時間短（免疫100日齡左右仍有發(fā)?。┑葐栴}，海林格推出“海圓安”產(chǎn)品，即豬圓環(huán)病毒2型疫苗，采用原創(chuàng)佐劑生物油活性物質(zhì)聚合緩釋技術(shù)，使疫苗具有不怕冷、不怕熱，好抽易打，無應(yīng)激，除僵豬等顯著效果。

即將上市的黏膜免疫“海瀉安”，即豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉病毒二聯(lián)滅活疫苗，據(jù)了解，該產(chǎn)品擁有2項(xiàng)豬流行性腹瀉核心國家發(fā)明專利技術(shù)。另外，海林格預(yù)計2017-2019年上市銷售的疫苗產(chǎn)品還有，副豬嗜血桿菌三價滅活疫苗和豬支原體肺炎滅活疫苗。

此次會議還邀請到中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心家畜病監(jiān)測室負(fù)責(zé)人李曉成研究員，海大集團(tuán)畜牧獸醫(yī)研究院院長王貴平博士，河南省生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系首席科學(xué)家郭成留研究員，中國獸醫(yī)協(xié)會動物診療分會副會長、豬病組組長白挨泉教授，廣東溫氏食品集團(tuán)股份有限公司養(yǎng)豬事業(yè)部生產(chǎn)技術(shù)部副總經(jīng)理王連想博士，云南智康源農(nóng)牧科技有限公司董事長彭克高研究員，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授、碩士生導(dǎo)師、中國病理生理學(xué)會動物病理生理學(xué)專業(yè)委員會秘書長嚴(yán)玉霖博士，江西省畜禽育種中心主任、江西農(nóng)大動科院王亞鳴副教授，海大集團(tuán)益豚豬業(yè)事業(yè)部獸醫(yī)總監(jiān)、海大集團(tuán)湖南益豚豬業(yè)公司副總經(jīng)理陳果亮博士等知名專家，其中，李曉成研究員作了《2017年我國豬病流行態(tài)勢分析》的報告，王貴平院長作《豬流行性腹瀉病原分離鑒定及黏膜免疫疫苗的研究》的報告。

王院長的報告分析了當(dāng)前豬流行性腹瀉病毒（PEDV）流行趨勢：由北向南逐漸加強(qiáng)。目前流行的特點(diǎn)：產(chǎn)房出現(xiàn)跳躍式爆發(fā)，沒有明顯季節(jié)性。據(jù)統(tǒng)計，消化道感染的發(fā)病率在感染性疾病中居第二位，在感染過程中，腸道黏膜的免疫屏障被破壞，造成臨床各種癥狀，因此，研究腸道黏膜的免疫屏障至關(guān)重要，在腸道黏膜免疫中起重要作用的是分泌型SIgA。

圖2 會議合影

據(jù)王院長介紹，海大研究院從2010年-2016年間在廣東豬場臨床分離到52株P(guān)EDV毒株，經(jīng)過篩選培育出毒力較強(qiáng)、免疫原性最好的流行株，通過不斷改進(jìn)培養(yǎng)方法，病毒滴度及生長速度都得到很大提高，并突破了病毒培養(yǎng)從平面到懸浮培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)研究，為規(guī)?；a(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

克服PEDV的培養(yǎng)難題后，海大研究院對免疫劑型、佐劑和免疫途徑也進(jìn)行了深入研究。目前腹瀉疫苗主要以肌肉注射、后海穴注射為主，效果并不很理想，因此海大研究院在黏膜免疫途徑方面做了大膽嘗試，通過口服免疫的膠囊、混懸液、包裹顆粒等，最終選定噴鼻免疫方式。據(jù)他介紹，PEDV的靶細(xì)胞是腸上皮細(xì)胞，而形成有效的免疫反應(yīng)應(yīng)該是阻斷病毒進(jìn)入腸道上皮細(xì)胞，取決于在消化道表面的SIgA。而仔豬SIgA來源則依賴母乳中SIgA含量的高低。根據(jù)胃腸道——乳房免疫軸理論，通過胃腸道或呼吸道免疫，可誘導(dǎo)相關(guān)免疫細(xì)胞分化并遷移到乳腺中定居，合成大量SIgA 釋放到乳汁中。

由于噴鼻免疫的腹瀉疫苗還沒有先例，海大研究院還同步研發(fā)了具有強(qiáng)烈細(xì)胞膜親和作用，抵御鼻黏膜分泌物破壞、能協(xié)助突破黏膜屏障，提高抗原遞呈細(xì)胞識別病毒和亞單位抗原的新型黏膜免疫佐劑。

論壇活動期間，海林格公司組織與會專家學(xué)者、大型養(yǎng)殖客戶蒞臨海林格公司的研發(fā)承接機(jī)構(gòu)——海大集團(tuán)研究院進(jìn)行了參觀考察，嘉賓再次見證了海大集團(tuán)雄厚的科研實(shí)力。

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四川海林格生物制藥有限公司是廣東海大集團(tuán)股份有限公司的控股子公司，前身是國營企業(yè)四川省獸醫(yī)生物藥品廠，是一家具有50多年歷史，專業(yè)從事獸醫(yī)生物制品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和服務(wù)于一體的高科技企業(yè)，2015年5月由廣東海大集團(tuán)股份有限公司控股重組后更名為“四川海林格生物制藥有限公司”。