秦昌鮮，唐利球，馬文清，韋海球，郭強(qiáng)

甘蔗新品系桂南亞08-212的組培快繁技術(shù)

秦昌鮮，唐利球，馬文清，韋海球，郭強(qiáng)

（廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，廣西龍州532415）

以廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所自育甘蔗新品系桂南亞08-212的幼嫩葉片作為外植體，采用不同2，4-D濃度對(duì)幼嫩葉片的切片進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)，以不同6-BA濃度對(duì)甘蔗愈傷進(jìn)行分化誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，以不同NAA濃度誘導(dǎo)甘蔗組培苗生根。結(jié)果表明：適宜甘蔗幼嫩葉片愈傷誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為改良MS+2，4-D 2.0 mg/L，誘導(dǎo)分化培養(yǎng)以改良MS+6-BA 2.0 mg/L為宜，增殖培養(yǎng)以改良MS+6-BA 2.0 mg/L為宜，適宜的生根培養(yǎng)基為改良MS+NAA 5.0 mg/L。

甘蔗；桂南亞08-212；組培快繁

選育和推廣甘蔗新品種是提高我國(guó)甘蔗產(chǎn)量、降低蔗糖生產(chǎn)成本的重要手段[1-2]。目前，我國(guó)甘蔗旱坡地栽種面積已占植蔗面積的80%以上，迫切需要推廣種植強(qiáng)宿根抗旱甘蔗新品種，以提高我國(guó)甘蔗單產(chǎn)，保證蔗糖產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定可持續(xù)發(fā)展。甘蔗新品系桂南亞08-212由廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所選育，該品系具有強(qiáng)生長(zhǎng)勢(shì)、早熟、高產(chǎn)、高糖、宿根好、分蘗強(qiáng)的優(yōu)良農(nóng)藝性狀。本研究對(duì)桂南亞08-212新品系進(jìn)行組培快繁研究，旨在加快該甘蔗新品系的繁殖速率。

1 材料和方法

1.1材料

以廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所內(nèi)種植的甘蔗新品系桂南亞08-212為試驗(yàn)材料，取甘蔗莖頂部約60cm長(zhǎng)，帶回實(shí)驗(yàn)室后剝?nèi)ゲ糠掷先~梢，即獲得外植體。

1.2方法

1.2.1 外植體的處理和愈傷誘導(dǎo)取甘蔗外植體，用75%酒精輕輕擦拭表面，放入超凈工作臺(tái)中。剝?nèi)ネ馊~梢至見(jiàn)到甘蔗幼嫩葉片，置于已滅菌消毒的盤(pán)子內(nèi)切成lmm薄片，接種于瓶?jī)?nèi)，每瓶接種10片，放置于溫度28℃的培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行暗培養(yǎng)。培養(yǎng)基配方為改良MS+2，4-D 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L+糖30g/L+卡拉膠8g/L。觀察記錄愈傷組織的情況。

1.2.2 分化誘導(dǎo)與增殖培養(yǎng)將生長(zhǎng)良好的愈傷組織隨機(jī)接種于分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，分化培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即改良MS+6-BA 0.25、0.5、1.0、2.0、3.0mg/L+糖30g/L+卡拉膠8g/L，每個(gè)處理接種15瓶，每瓶接種10個(gè)。光照培養(yǎng)20～25d，光照14h，光照度為1500～20001x，溫度28℃。觀察并記錄芽分化的情況，將分化培養(yǎng)獲得的小苗轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)中。增殖培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即改良MS+6-BA 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mg/L+糖30g/L。將分化出來(lái)的甘蔗苗切小至5～6株/叢，每個(gè)處理接種l5瓶。光照培養(yǎng)20～25d換1次培養(yǎng)基，增殖培養(yǎng)5次，光照14h，光照度為1500～20001x，溫度28℃。觀察并記錄組培苗增殖的情況。

1.2.3 生根培養(yǎng)增殖獲得的甘蔗小苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基也是以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即MS+NAA 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mg/L+糖70g/L，將比較大叢的甘蔗組培苗自然分離成較小的叢苗，每個(gè)處理接種14瓶，每瓶接種5叢苗。光照培養(yǎng)20～25d，光照14h，光照度為1500～2000lx，溫度28℃。觀察并記錄生根情況。

表1 不同2,4-D濃度對(duì)甘蔗愈傷誘導(dǎo)的影響

2 結(jié)果

2.1不同2，4-D濃度對(duì)愈傷的影響

2，4-D濃度對(duì)甘蔗愈傷的生長(zhǎng)影響大，當(dāng)濃度較低時(shí),愈傷的生長(zhǎng)較慢，質(zhì)地也比較硬：當(dāng)濃度較高時(shí)，愈傷的長(zhǎng)勢(shì)好，但是愈傷的質(zhì)量較差，活性不好，難以分化，分化后容易出現(xiàn)變異。由表1可以看出當(dāng)2，4-D濃度為2.0 mg/L時(shí)愈傷組織長(zhǎng)勢(shì)好，呈淡黃色，而且質(zhì)量最好。因此，最適宜桂南亞08-212新品系愈傷生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為改良MS+ 2，4-D 2.0 mg/L。

表2 不同6-BA濃度對(duì)甘蔗愈傷組織分化的影響

2.2不同6-BA濃度對(duì)愈傷組織分化的影響

從表2可以看出，隨著6-BA濃度不斷提高，分化出苗率也隨之提高，當(dāng)其濃度達(dá)到2mg/L時(shí)，出苗率最高，達(dá)到75.0%，隨后出苗率降低，當(dāng)6-BA濃度為3.0 mg/L時(shí)，出苗率為58.3%。苗的長(zhǎng)勢(shì)亦然，隨著6-BA濃度不斷增加，長(zhǎng)勢(shì)也越好，芽亦粗壯，當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L時(shí)，苗長(zhǎng)勢(shì)最好，葉片濃綠，芽粗壯。由此可以看出，最適宜桂南亞08-212甘蔗愈傷組織分化出苗的培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 2.0 mg/L。

表3 不同6-BA濃度對(duì)甘蔗培殖率的影響

2.3不同6-BA濃度對(duì)甘蔗增殖率的影響

從表3可以看出，隨著6-BA濃度升高，甘蔗增殖率不斷升高，葉色逐漸變深，當(dāng)6-BA濃度為3.0 mg/L時(shí)，增殖系數(shù)為3.5，苗最粗壯，葉色深綠。由此可以看出：最適宜桂南亞08-212增殖的培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 3.0 mg/L，在該培養(yǎng)基中增殖獲得的甘蔗小苗長(zhǎng)勢(shì)好，葉濃綠，增殖系數(shù)最高。

表4 不同NAA濃度對(duì)甘蔗組培苗生根的影晌

2.4不同NAA濃度對(duì)甘蔗組培苗生根的影響

從表4可以看出，NAA是影響生根的重要因素，各處理都可以生根，NAA的濃度對(duì)根的生長(zhǎng)速度影響較大，隨著NAA濃度的升高，根的長(zhǎng)度會(huì)隨之變化，當(dāng)NAA的濃度在5.0 mg/L時(shí)根的誘導(dǎo)最快、根長(zhǎng)最長(zhǎng)，也最為粗壯，植株生長(zhǎng)健壯。由此可以看出，最適宜的桂南亞08-212的生根培養(yǎng)基為改良MS+NAA 5.0 mg/L。

3 結(jié)論與討論

甘蔗的組織培養(yǎng)有一定的特性，不同品種之間存在一定的差異，特別是在愈傷誘導(dǎo)方面，有些品種需要較高的2，4-D濃度，而有些品種愈傷在較低濃度時(shí)生長(zhǎng)良好。2，4-D低濃度時(shí)愈傷生長(zhǎng)慢，長(zhǎng)勢(shì)不好，質(zhì)量不好，而濃度高時(shí)，愈傷的生長(zhǎng)過(guò)快，活性不好，容易變異。因此，愈傷誘導(dǎo)時(shí)2，4-D的濃度一定要控制好，過(guò)高或過(guò)低都不好。試驗(yàn)結(jié)果表明：桂南亞08-212甘蔗在2，4-D濃度為2.0 mg/L時(shí)，最適宜愈傷組織誘導(dǎo)。6-BA濃度會(huì)影響愈傷組織分化，濃度太高或太低都會(huì)抑制分化出苗，只有在適宜的濃度下，才會(huì)比較好地分化出苗，最適宜桂南亞08-212分化的培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 2.0 mg/L。6-BA的濃度也影響著甘蔗增殖系數(shù)，濃度太低，增殖率不理想，過(guò)高容易出現(xiàn)變異，最適宜桂南亞08-212的培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 3.0 mg/L，在該培養(yǎng)基中增殖獲得的甘蔗小苗長(zhǎng)勢(shì)好，葉濃綠，增殖系數(shù)最高。NAA是影響甘蔗組培苗生根的重要因素，在試驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)NAA的濃度在5.0 mg/L時(shí)根的誘導(dǎo)最快、根長(zhǎng)最長(zhǎng)，也最為粗壯，植株生長(zhǎng)健壯。

[1]陳躍.云南甘蔗產(chǎn)業(yè)發(fā)展//云南省第十二次甘蔗學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C].2006：1-8.

[2]李奇?zhèn)?，陳子云，梁?現(xiàn)代甘蔗改良技術(shù)[M].廣州：華南理工大學(xué)出版社，2000：65.

Rapid Propagation Technology of Tissue Culture for New Sugarcane Variety GNY08-212

QIN Chang-xian,TANG Li-qiu,MA Wen-qing,WEI Hai-qiu,GUO Qiang
(South Asian Tropical Agricultural Science Research Institute of Guangxi,Longzhou,Guangxi 532415)

The tender leaves of sugarcane GNY 08-212 as explant,the experiment was carried out by using different concentration of 2,4 D for slices of tender leaf callus induction,different concentration of 6-BA for callus induction and multiplication culture,and different concentration of NAA for induction rooting of sugarcane somaclone.The results show that：the effect of the culture MS+2,4 D 2.0 mg/L for tender leaves callus induction displayed the best;the effect of the culture MS+6-BA 2.0 mg/L for differentiation culture displayed the best; the effect of the culture MS+6-BA 2.0 mg/L for multiplication culture was the best;the effect of the culture MS +NAA 5.0 mg/L for rooting medium displayed the best.

sugarcane;GNY08-212;rapid propagation technology of tissue culture

S566.103；Q81

：A

：1007－2624（2017）03－0009－02

10.13570/j.cnki.scc.2017.03.003

2017-01-03

高產(chǎn)、高糖、抗逆性強(qiáng)甘蔗優(yōu)良新品種選育（桂科攻1598006-1-1E）。

秦昌鮮（1984-），女，農(nóng)藝師，研究方向：甘蔗育種，E-mail：237554879@qq.com