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        三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床評價

        2017-04-29 00:00:00楊紅莉
        健康前沿 2017年9期

        摘要:目的:探討三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床價值。方法:隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例,梅毒反應素選擇TRUST(甲苯胺紅不加熱試驗)檢驗,梅毒螺體抗體選擇ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)、TPPA(梅毒螺旋體顆粒凝集試驗)與膠體金法(金免疫層析試驗)檢驗。即TPPA檢驗均呈現(xiàn)陽性指標時,方可確診為潛伏妊娠梅毒。結果:本次實驗800例孕婦中,潛伏妊娠梅毒患者共存在25例,陽性檢出率為3.12%。3種檢驗方法結果對比中,可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種,假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法;ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%,陰性預測值更是在98%以上,且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。結論:ELISA檢驗作為潛伏妊娠梅毒檢測常見方法,輔助TRUST檢驗和膠體金法工作的開展,可提升陽性檢出率,為后續(xù)母嬰傳播預防及阻斷提供可靠性數(shù)據(jù)支持。

        關鍵詞:血清檢查;潛伏妊娠梅毒;陽性率

        梅毒作為性傳播病癥,主要因梅毒螺旋體感染導致的全身性病變,性接觸、妊娠均屬于該病傳播的主要方式。特別在女性妊娠期間,梅毒感染將會引起早產(chǎn)和胎兒水腫、流產(chǎn)與死產(chǎn)、宮內(nèi)生長局限等問題,而在新生兒中后遺癥也尤為嚴重,即先天梅毒兒[1]。因此,加強孕婦產(chǎn)前檢查于治療,是預防胎傳梅毒的關鍵手段。鑒于此,隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例為研究對象,探討三種方法檢測潛伏妊娠梅毒的臨床價值?,F(xiàn)總結如下:

        1 資料與方法

        1.1 研究資料

        隨機選擇本院2014年3月-2017年8月期間行血清檢查的圍產(chǎn)保健孕婦800例,年齡區(qū)間在20-39歲,年齡中位數(shù)為(29.5±9.5)歲。800例孕婦中,均無任何梅毒癥狀及體征;采用空腹肘靜脈采血的方式,以5ml血液樣本為基準,對樣本血清予以分離處理。潛伏妊娠梅毒診斷標準:孕婦或配偶存在梅毒感染史、婚外性行為;本人存在流產(chǎn)和早產(chǎn)、死產(chǎn)與分娩梅毒兒等現(xiàn)象;血清學檢查呈現(xiàn)陽性;無任何梅毒癥狀或體征。先天梅毒兒診斷標準:新生兒、母親血清梅毒檢查中,均呈現(xiàn)陽性;新生兒存在以下2種及其以上表現(xiàn),斑疹和股端掌趾蛻皮、斑丘疹和黏膜損害、肝脾腫大與病理性黃疸、水腫、貧血及呼吸困難、腹脹、低體重等。

        1.2 儀器與試劑

        儀器:酶標儀、洗板機(均由北京普朗公司生產(chǎn))和核酸擴增熒光檢測儀(羅氏lightcycler2.0);試劑:TP-ELISA試劑盒(生產(chǎn)企業(yè):英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司)、TRUST試劑盒(生產(chǎn)企業(yè):上海榮盛有限公司)、GICA試劑盒(生產(chǎn)企業(yè):艾康(杭州)生物有限公司)、TPPA試劑盒(生產(chǎn)企業(yè):日本富士瑞必歐株式會社)、室內(nèi)質(zhì)控血清(生產(chǎn)企業(yè):科華公司)。

        1.3 檢測

        對800例孕婦血清予以檢驗,即TRUST檢驗、ELISA檢驗、TPPA檢驗、膠體金法4種血清試驗。下文主要針對TRUST檢驗、ELISA檢驗及膠體金法步驟予以分析。

        1.3.1TPPA檢驗

        將血清置于U型培養(yǎng)板處予以稀釋,以1:80、1:40、1:20、1:10的比例,形成四種稀釋液;再經(jīng)致敏和未致敏明膠顆粒的添加,置于實驗室內(nèi);且于120min后,對實驗結果予以判定[2]。

        1.3.2ELISA檢驗

        通過碳酸鹽包被緩沖液的使用,對血清抗體予以稀釋,經(jīng)待測血清向包被反應孔的添加,輔助酶標抗體,將孵育時間控制在30-60min、孵育溫度控制在37℃;再經(jīng)四甲基聯(lián)苯胺底物液的顯色處理,在硫酸終止反應的前提下,反應孔顏色較深,則證明待測血清陽性越強,反之則為陰性[3]。

        1.3.3膠體金法

        選擇去離子水對氯金酸實施溶解,以此將其濃度控制在0.2g/L,經(jīng)煮沸操作后,向溶液內(nèi)滴加1/25比例的檸檬酸三鈉,將溶液濃度控制在10g/L時,持續(xù)煮沸7分鐘后,完成15納米的膠體金制備工作;結合免疫層析測試條的運用,因該測試條由吸水濾紙、吸水纖維及硝酸纖維素構成,可在金標記物、待測血清混合的基礎上,呈現(xiàn)2條紅色色帶,則為血清陽性;1條則為血清陰性;0條則為試劑失效[4]。

        1.4 評價指標

        當TPPA檢驗均呈現(xiàn)陽性指標時,方可確診為潛伏妊娠梅毒。其中,陽性檢出率=(陽性檢出例數(shù)-假陽性檢出例數(shù))/確診未潛伏妊娠梅毒例數(shù)×100.00%;假陽性率=假陽性檢出例數(shù)/800×100.00%。

        1.5 統(tǒng)計學方法

        通過SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件的選擇,組間數(shù)據(jù)采用卡方、t值檢驗。P<0.05時,證明數(shù)據(jù)對比存在統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 潛伏妊娠梅毒陽性檢出率

        將TPPA檢驗結果同時呈現(xiàn)陽性指標作為潛伏妊娠梅毒檢驗標準,于本次實驗800例孕婦中,潛伏妊娠梅毒患者共存在25例,陽性檢出率為3.12%。

        2.2 ELISA、TRUST及膠體金法結果對比

        3種檢驗方法結果對比中,可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種,假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法。

        2.3 ELISA、TRUST及膠體金法效能對比

        ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%,陰性預測值更是在98%以上,且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。

        3 討論

        梅毒主要經(jīng)梅毒螺旋體慢性或系統(tǒng)性病變引起的性傳播疾病,分為Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、Ⅲ期梅毒和潛伏梅毒、先天梅毒等,按照《中華人民共和國傳染病防治法》相關標準,梅毒屬于乙類防治病種。同時,梅毒典型癥狀主要為:Ⅰ期梅毒:硬下疳且呈現(xiàn)無痛性、紅色硬結,多發(fā)外生殖器;Ⅱ期梅毒:以梅毒疹為主要體征,且存在全身癥狀,硬下疳可自行消退;Ⅲ期梅毒:皮膚黏膜損傷和近關節(jié)結節(jié)、腦血管梅毒、梅毒性腦膜炎及主動脈瓣閉鎖障礙等[5]。

        妊娠梅毒多以潛伏狀態(tài)為主,且在孕婦內(nèi)毒螺旋體、費梅毒螺旋體檢查中,血清樣本呈現(xiàn)假陽性,雖患者無任何梅毒癥狀,但卻呈現(xiàn)陽性指標,加大妊娠潛伏梅毒診斷難度。故醫(yī)學領域急需超靈敏陽性血清檢驗技術,以便更快、更準做好妊娠潛伏梅毒診斷工作。而在此過程中,常見血清試驗包含TRUST檢驗、ELISA檢驗、TPPA檢驗、膠體金法等方法,以TPPA檢驗的方式,其結果更具準確性和權威性價值;其余3種方法則是以高靈敏度、經(jīng)濟、便捷的特點,在妊娠潛伏梅毒診斷中得以常見[6]。

        同時,若要從根本上避免先天梅毒兒,則應在孕期加強梅毒篩查工作。據(jù)國外研究結果表明,孕28周、分娩晚期梅毒復查工作,能夠在精準診斷潛伏妊娠梅毒的同時,將先天梅毒兒控制在最低標準。結合本文研究結果顯示,800例孕婦中,潛伏妊娠梅毒患者共存在25例,陽性檢出率為3.12%。3種檢驗方法結果對比中,可知ELISA檢驗符合率明顯高于其它兩種,假陽性檢出率高于膠體金法、低于TRUST檢驗方法;ELISA、TRUST及膠體金法特異性均超于95%,陰性預測值更是在98%以上,且ELISA實驗具有最高陽性似然和最低陰性似然的現(xiàn)象。

        總之,ELISA檢驗作為潛伏妊娠梅毒檢測常見方法,輔助TRUST檢驗和膠體金法工作的開展,可提升陽性檢出率,為后續(xù)母嬰傳播預防及阻斷提供可靠性數(shù)據(jù)支持。

        參考文獻:

        [1]符琴,王咸菊,王桂,等.妊娠合并梅毒的高危因素分析[J].熱帶醫(yī)學雜志,2016,16(7):933-936.

        [2]黃必然,周姝,楊遠超,等.潛伏梅毒孕婦及其新生兒特異性IgM抗體檢測分析[J].中國熱帶醫(yī)學,2014,14(8):962-964.

        [3]吳奇,王麗,季靈婷,等.上海閘北地區(qū)妊娠梅毒分子流行病學特征分析[J].檢驗醫(yī)學,2016,31(06):486-490.

        [4]笪蘇蓉,陳官芝,董娜,等.梅毒患者外周血特異性轉(zhuǎn)錄因子FOXP3 mRNA的表達[J].中國中西醫(yī)結合皮膚性病學雜志,2015,14(02):84-88.

        [5]賴其偉.潛伏梅毒患者的血清降鈣素原檢測分析[J].醫(yī)學檢驗與臨床,2016,27(1):22-24.

        [6]謝春雷.潛伏梅毒發(fā)病率上升趨勢原因分析[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2016,13(26):59-61.

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