許京淑，向航，譚軍，徐奔

(恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院血液病科，湖北 恩施 445000)

滋陰補(bǔ)腎方治療再生障礙性貧血的臨床療效及對(duì)外周血IL-2、IL-6及IFN-γ的影響

許京淑，向航，譚軍，徐奔

(恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院血液病科，湖北 恩施 445000)

目的：研究滋陰補(bǔ)腎方治療再生障礙性貧血的臨床療效，并對(duì)其治療作用機(jī)制進(jìn)行研究。方法：104例再生障礙性貧血患者隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組51例，觀察組53例。對(duì)照組患者給予口服環(huán)孢素軟膠囊、司坦唑醇片，同時(shí)給予輔助的對(duì)癥治療，總療程6個(gè)月。觀察組在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上給予滋陰補(bǔ)腎方，療程6個(gè)月。對(duì)比治療前后患者外周血象變化、免疫因子，再對(duì)其療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果：兩組在治療后外周血象均顯著升高(P<0.05)；并且治療后觀察組患者變化較對(duì)照組明顯(P<0.05)。兩組在治療后均可顯著降低IL-2、IL-6及IFN-γ的水平(P<0.05)，并且治療后觀察組患者血清中以上因子水平降低更明顯(P<0.05)。而觀察組治療總有效率較對(duì)照組高(P<0.05)。結(jié)論：滋陰補(bǔ)腎方治療再生障礙性貧血效果顯著，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫因子相關(guān)。

滋陰補(bǔ)腎；再生障礙性貧血；IL-6；IL-2

再生障礙性貧血(Aplastic Anemia，AA)是指骨髓造血功能降低或衰竭的疾病，主要表現(xiàn)是全血細(xì)胞減少。由于物理、化學(xué)、生物或不明原因引起骨髓造血干細(xì)胞及骨髓微環(huán)境嚴(yán)重受損，造成骨髓造血功能衰竭[1]。該病起病急，臨床上主要表現(xiàn)為較嚴(yán)重感染和出血、發(fā)熱、并伴乏力、頭昏、心悸和氣短癥狀等癥狀[2]。亞洲國(guó)家AA發(fā)病率為明顯高于歐美國(guó)家[3]，該疾病各年齡組均可發(fā)病，但以青壯年多見(jiàn)，男性發(fā)病率略高于女性。近年的相關(guān)資料顯示，免疫因素是一種再生障礙性貧血的主要病機(jī)，臨床中常用的免疫抑制療法可以有效治療AA，但免疫抑制法采用的藥物也會(huì)引起肝腎功能損害、感覺(jué)末梢功能異常等機(jī)體產(chǎn)生不良反應(yīng)，中醫(yī)在治療再生障礙性貧血方面具有一定的優(yōu)勢(shì)，本院采用滋陰補(bǔ)腎方對(duì)再生障礙性貧血進(jìn)行治療，臨床療效良好，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對(duì)象為2014年11月—2016年4月來(lái)本院血液科住院的104例再生障礙性貧血患者，按照隨機(jī)數(shù)字表法，將所選病例分為對(duì)照組及觀察組，對(duì)照組51例，男34例，女17例，年齡19～62歲，平均年齡(40.8±7.9)歲，就診前平均病程(23.4±5.2)月，其中診斷為慢性再生障礙性貧血(CAA)患者28例，重型再生障礙性貧血(SAA)患者23例；對(duì)照組53例，男29例，女24例，年齡17～63歲，平均年齡(42.7±6.3)歲，就診前平均病程(25.1±5.9)月，其中診斷為慢性再生障礙性貧血(CAA)患者30例，重型再生障礙性貧血(SAA)患者23例；入選的兩組患者治療前年齡、性別、文化程度、臨床表現(xiàn)、病情嚴(yán)重程度和經(jīng)濟(jì)狀況等一般情況比較，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

①發(fā)病緩慢，貧血、感染、出血均較輕；②血象：全血細(xì)胞減少，網(wǎng)織紅細(xì)胞<1%，外周血中性粒細(xì)胞<1.5×109/L，血小板<20×109/L，血紅蛋白<100 g/L，具備上述4項(xiàng)中之2項(xiàng)；③骨髓象：骨髓多部位增生減低(<正常的50%)或重度減低(<正常的25%)，骨髓小粒空虛，非造血細(xì)胞>70%，脂肪細(xì)胞增多；④無(wú)肝脾腫大；⑤排除其他引起全血細(xì)胞減少的疾病。[4-5]

1.3 中醫(yī)癥候標(biāo)準(zhǔn)

腎陰虛型：主癥：表現(xiàn)心悸、盜汗、眩暈耳鳴、周身乏力、面色口唇、指甲蒼白、出血明顯；次癥：表現(xiàn)低熱、手足心熱、口渴咽干思飲、大便干結(jié)；舌脈：舌質(zhì)淡或舌尖紅，苔少、脈細(xì)數(shù)。

1.4 治療方法

對(duì)照組患者給予口服環(huán)孢素軟膠囊(商品名：田可，華北制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H10960009)，3～5 mg/(kg·d)，2次/d。維持環(huán)孢素濃度在200～400 ng/mL；口服司坦唑醇片(廣東臺(tái)城制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字:H44021119)，6 mg/d，3次/d；同時(shí)給予維生素B族、肌苷以及保肝支持對(duì)癥治療，總療程6個(gè)月。

觀察組患者在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上給予滋陰補(bǔ)腎方治療。組方方劑：熟地黃25 g，阿膠20 g，山茱萸20 g，桑椹20 g，山藥20 g，當(dāng)歸15 g，黃芪15 g，制首烏15 g，茯苓15 g，麥冬15 g，黃精15 g，菟絲子15 g，枸杞15 g，補(bǔ)骨脂15 g，淫羊藿15 g，巴戟天10 g，肉蓯蓉10 g，雞血藤10 g，甘草6 g。每日1劑,水煎,早晚2次分服，1個(gè)月為1療程，療程6個(gè)月。

1.5 觀測(cè)指標(biāo)

比較兩組患者治療前后外周血象變化(包括中性粒細(xì)胞、血紅蛋白、網(wǎng)織紅細(xì)胞及血小板)；在治療前及治療6個(gè)月后，兩組患者空腹10 h后分別肘靜脈采集非抗凝外周靜脈血5 mL，室溫下自然凝固15 min，以臺(tái)式冷凍離心機(jī)3000 r/min離心10 min，收集血清，所有標(biāo)本均放置于-80 ℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)試血清中白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)及干擾素IFN-γ的水平；觀察兩組患者臨床療效。

1.6 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[6]中的關(guān)于再生障礙性貧血的療效進(jìn)行判定，總有效率=[(基本治愈+緩解+進(jìn)步)/總例數(shù)]×100%。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的臨床療效比較

治療后兩組療效見(jiàn)表1，觀察組基本痊愈32例，緩解15例，進(jìn)步3例，無(wú)效3例，總有效率93.6%；對(duì)照組基本治愈20例，緩解10例，進(jìn)步7例，無(wú)效14例，總有效率72.5%，兩組經(jīng)χ2檢驗(yàn)有顯著差異(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者臨床療效比較(例)

2.2 兩組患者治療前后外周血象變化比較

由表2可見(jiàn)，對(duì)照組和觀察組在治療6個(gè)月后外周血象指標(biāo)均顯著升高(P<0.05)；并且治療后觀察組患者血清中以上指標(biāo)均明顯較對(duì)照組高(P<0.05)。

表2 兩組患者治療前后外周血象變化±s)

注：與本組治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組治療后比較，△P<0.05

2.3 兩組患者治療前后IL-2、IL-6及IFN-γ比較

表3 兩組患者血清中IL-2、IL-6及IFN-γ的水平

注：與本組治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組治療后比較，△P<0.05

由表3可知，對(duì)照組和觀察組在治療后均可顯著降低IL-2、IL-6及IFN-γ的水平(P<0.05)；并且治療后觀察組患者血清中IL-2、IL-6及IFN-γ水平均明顯較對(duì)照組低(P<0.05)。

3 討論

中醫(yī)沒(méi)有再生障礙性貧血的具體描述，但根據(jù)該疾病的臨床表現(xiàn)將此病納入“血證”“血虛”“虛勞”范疇，主要病機(jī)為先天腎精不足，腎為先天之本，腎藏精，主骨生髓，精能生血，精血同源，腎氣不足，化血無(wú)力。脾為后天之本，氣血生化之源，脾得腎之精氣滋養(yǎng)，兒腎病久必將累及脾，生化無(wú)源，氣血虧虛，導(dǎo)致臨床“虛勞血虛”之象。治療以益氣補(bǔ)腎、滋陰健脾、養(yǎng)血生髓為原則。熟地滋陰補(bǔ)腎，填精益髓，是補(bǔ)腎陰之要藥，為君藥；阿膠補(bǔ)血、滋陰為血肉有情之品，峻補(bǔ)精髓；山藥補(bǔ)脾益陰，滋腎固精；阿膠、山藥為臣藥，以助熟地補(bǔ)陰之功。山茱萸養(yǎng)肝滋腎，收斂固澀；桑椹滋陰補(bǔ)血，生津潤(rùn)燥；當(dāng)歸為補(bǔ)血之圣藥，黃芪補(bǔ)氣健脾、益衛(wèi)固表，當(dāng)歸與黃芪配伍，補(bǔ)氣補(bǔ)血。制首烏補(bǔ)益精血；茯苓利水滲濕，麥冬味甘柔潤(rùn)，養(yǎng)陰潤(rùn)肺，益胃生津；黃精補(bǔ)益脾氣，又養(yǎng)脾陰。菟絲子滋補(bǔ)肝腎，益精養(yǎng)血；枸杞滋補(bǔ)肝腎，益精明目，菟絲子、枸杞、山藥、茯苓配伍以補(bǔ)腎益脾以止瀉。補(bǔ)骨脂、淫羊藿補(bǔ)腎壯陽(yáng)，肉蓯蓉、巴戟天補(bǔ)腎助陽(yáng)，與諸滋補(bǔ)腎陰之品相伍，有“陽(yáng)中求陰”之效。雞血藤行血補(bǔ)血，甘草調(diào)和諸藥。全方配伍，共奏補(bǔ)腎滋陰、生髓補(bǔ)血之功。

已有報(bào)道再生障礙性貧血與免疫機(jī)制密切相關(guān)[6-7]，在再生障礙性貧血發(fā)病過(guò)程中，造血功能受到免疫功能的抑制，而在細(xì)胞免疫中發(fā)揮主要作用的細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞[8]，正常機(jī)體內(nèi)，T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量、CD4+/CD8+維持在一定的范圍內(nèi)，保持著一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，也維持機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。機(jī)體CD4 T淋巴細(xì)胞會(huì)在不同細(xì)胞因子的作用下進(jìn)一步分化成 Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞[9]。正常情況下，Th1、Th2細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)的數(shù)量及發(fā)揮的功能作用處于一種平衡狀態(tài)。Th1細(xì)胞主要通過(guò)分泌IL-2、IFN-γ 和TNF-β等免疫因子來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞免疫；Th2細(xì)胞主要通過(guò)分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等免疫因子來(lái)介導(dǎo)體液免疫。AA患者Th1細(xì)胞數(shù)量明顯增多，而Th2細(xì)胞數(shù)則沒(méi)什么變化，導(dǎo)致Th1/Th2的比例顯著升高。IFN-γ是一種重要的造血負(fù)調(diào)控因子，又單核細(xì)胞、NK細(xì)胞、NK T細(xì)胞和 B、T淋巴細(xì)胞分泌，IFN-γ刺激Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化，激活CTL細(xì)胞，抑制Th2細(xì)胞的功能，同時(shí)還可誘導(dǎo)TNF-α的分泌[10-11]，并且AA患者的IFN-γ水平會(huì)高于正常人。IL-2主要由CD4+和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生，可促進(jìn)所有亞型T細(xì)胞增殖，增強(qiáng)NK細(xì)胞毒活性。IL-2不僅可反映T細(xì)胞的功能，并且IL-2 異常與 AA 的造血抑制有關(guān)，AA患者的IL-2會(huì)顯著降低[12]。IL-6主要是由T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞在受到刺激時(shí)生成的，并可以直接促進(jìn)粒細(xì)胞及巨噬系祖細(xì)胞的增殖，IL-6與IL-3協(xié)同增加造血干細(xì)胞的數(shù)量，縮短集落形成的時(shí)間，并增加形成集落的數(shù)量[13]。機(jī)體中IL-6含量與AA的發(fā)生密切相關(guān)，IL-6分泌增多，從而破壞了正常的造血調(diào)控平衡，最終誘導(dǎo)AA的發(fā)生[14]。

補(bǔ)腎中藥可以刺激骨髓造血，調(diào)節(jié)如腎上腺皮質(zhì)激素，皮質(zhì)醇等部分激素水平的變化；調(diào)節(jié)免疫紊亂，保護(hù)血細(xì)胞及改善血細(xì)胞環(huán)境，進(jìn)而刺激機(jī)體骨髓造血功能。本研究滋陰補(bǔ)腎方補(bǔ)腎以填髓生血、化生氣血，可以降低AA患者體內(nèi)的免疫因子，療效確切，是治療再生障礙性貧血的有效療法。

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Effect of Nourishing Yin and Tonifying Kidney prescription in the Treatment of AplasticAnemia and Clinically Curative Effect IL-2, IL-6 and IFN-γ of Peripheral Blood

XU Jing-shu, XIANG Hang, TAN Jun, XU Ben

(DepartmentofHematology,EnshiCentralHospital,Enshi445000,China)

Objective: To study the clinically curative effect of tonifying kidney in the treatment of aplastic anemia, and to research the mechanism of its therapeutic effect. Methods: Select 104 cases of aplastic anemia patients, and the patients were randomly divided into two groups,with 51 cases in the control group and 53 cases in the observation group. Patients in the control group were given oral administration of Cyclosporin soft capsules and oral Stanozolol tablets,at the same time receiving the supportive treatment,with the total course for 6 months. The observation group was given nourishing Yin and tonifying kidney prescription on the basis of the therapy in the control group, and the treatment lasted 6 months. A comparative study between two groups before and after treatment was conducted according to the peripheral hemogram and immune factors, and then evaluate its efficacy. Results: In two groups after treatment peripheral hemogram was significantly increased (P<0.05), and in the observation group the above index was significantly higher than that in the control group (P<0.05). In two groups after treatment the levels of IL-2, IL-6 and IFN-γ were sigrificantly reduced(P<0.05); after treatment, the serum levels of IL-2, IL-6 and IFN-γ in the observation group were significantly lower than those in the control group (P<0.05). The difference between two groups was statistically significant (P<0.05). Conclusion: Its mechanism may be related to the regulation of immune factor of inflammatory factor IL-2, IL-6 and IFN-γ, and the therapy is worthy of clinical application.

Nourishing Yin and tonifying kidney; Aplastic anemia; IL-6; IL-2

2016-12-08

2017-01-15

2014年恩施州第一批農(nóng)業(yè)與社會(huì)發(fā)展科技指導(dǎo)性計(jì)劃

許京淑(1970-)，女，碩士，副主任醫(yī)師,研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療再生障礙性貧血。

R285.6

A

1002-2392(2017)02-0064-04