趙旭，周艷麗，代麗娟

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

薯蕷皂苷對IBS-D模型大鼠治療作用研究

趙旭，周艷麗，代麗娟*

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

目的：研究穿山龍?zhí)崛∥锸硎氃碥諏Ω篂a型腸易激綜合征模型(IBS-D)大鼠的治療作用。方法：番瀉葉灌胃法制作IBS-D大鼠模型，治療3周后，檢測大鼠血清5-HT、血漿SP、血漿VIP含量變化。結(jié)果：造模后大鼠血清5-HT、血漿SP、血漿VIP含量顯著升高，薯蕷皂苷治療后，大鼠血清5-HT、血漿SP、血漿VIP含量均下降，其中高劑量組效果最明顯。結(jié)論：薯蕷皂苷可能通過調(diào)整5-HT、SP、VIP等胃腸激素的分泌、釋放，進(jìn)而調(diào)整腸道運(yùn)動、增強(qiáng)腸道黏膜免疫、降低腸道敏感性，從而起到治療IBS-D的作用。

穿山龍；薯蕷皂苷；腸易激綜合征；5-HT；VIP

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，腸易激綜合征(irritable bowel syndrome，IBS)在人群中的發(fā)病率為10%～20%，占到消化科就診人數(shù)的50%以上，發(fā)病率很高[1-2]?？茖W(xué)研究表明內(nèi)臟敏感性增高和胃腸動力學(xué)異常是其病理生理學(xué)基礎(chǔ)，中醫(yī)將腸易激綜合征歸于“腸郁”的范疇，認(rèn)為其病機(jī)多為肝郁脾虛，氣血不和所致，治療以疏肝解郁，健脾化濕為主[3-5]。

薯蕷皂苷是穿山龍中的活性成分[6]，現(xiàn)代藥理研究表明，其具有調(diào)節(jié)腸運(yùn)動、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、鎮(zhèn)痛、殺菌等多方面的藥理活性，而這些藥理活性正好逐一針對著IBS的腸道運(yùn)動異常、神經(jīng)免疫、內(nèi)臟高敏感和腸道菌群失調(diào)等各種發(fā)病機(jī)制。而且前期研究中也證實(shí)了薯蕷皂苷確有對以腹瀉為主癥疾病有治療作用，推測薯蕷皂苷治療慢性腹瀉的機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)結(jié)腸運(yùn)動達(dá)到治療的目的[7]。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品與動物材料

薯蕷皂苷，番瀉葉，購自佳木斯中醫(yī)院。Wistar大鼠，雄性，4周齡，體質(zhì)量90～100 g，由佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組

120只動物隨機(jī)分為對照組、模型組、陽性藥物對照組、薯蕷皂苷高、中、低劑量組，每組20只。

1.2.2 模型制備

造模方法：采用番瀉葉灌胃法制作脾虛型IBS-D大鼠模型，灌服濃度為0.3 g/mL番瀉葉煎劑2 mL，每日1次，持續(xù)2周。

1.2.3 給藥方法

空白組：繼續(xù)正常喂養(yǎng)不給任何藥物。模型組：造模成功后給予生理鹽水灌胃，2 mL/次，每日1次。對照組：予以匹維溴銨片(1.5 mg/mL)灌胃(20 mL/kg)處理。薯蕷皂苷高劑量組：30 g生藥/(kg·d)，薯蕷皂苷中劑量組：15 g生藥/(kg·d)，薯蕷皂苷小劑量組：7.5 g生藥/(kg·d)，治療組每天給藥1次，每次2 mL，連續(xù)14 d。

1.2.4 標(biāo)本的采集和指標(biāo)測定

治療3周后，停止給藥并禁食水24 h后，斷頭處死取血，4 ℃3 000 r/min離心10 min，分離血漿、血清，置-20℃低溫冰箱保存。檢測血清5-HT、血漿VIP、血漿SP的含量，具體步驟按試劑盒說明操作。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)，LSD法對數(shù)據(jù)進(jìn)行兩兩比較，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清5-HT檢測結(jié)果

與空白組相比，模型組大鼠血清5-HT含量顯著升高(P<0.05)；與模型組相比，陽性藥物組和薯蕷皂苷高、中、低劑量組血清5-HT含量顯著下降(P<0.05)，其中高劑量藥物組效果最明顯。

2.2 血漿SP檢測結(jié)果

與空白組相比，模型組大鼠血漿SP含量顯著升高(P<0.05)；與模型組相比，陽性藥物組，薯蕷皂苷高、中、低劑量組血漿SP含量顯著下降(P<0.05)。

2.3 血漿VIP檢測結(jié)果

與空白組相比，模型組大鼠血漿VIP含量顯著升高(P<0.05)；與模型組相比，陽性藥物組，薯蕷皂苷高、中、低劑量組血漿VIP含量顯著下降(P<0.05)。

表1 薯蕷皂苷對大鼠血清5-HT含量的影響±s)

注：與空白組相比，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

表2 薯蕷皂苷對大鼠血漿SP含量的影響±s)

注：與空白組相比，*P<0.05；與模型組比較,#P<0.05

表3 薯蕷皂苷對大鼠血漿VIP含量的影響±s)

注：與空白組相比，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

3 討論

腸易激綜合征(IBS)病程長，經(jīng)久不愈、反復(fù)發(fā)作，雖然近年來對其治療已經(jīng)有很多的治療方法和研究，但是由于病因復(fù)雜，目前治療尚不甚滿意[8]。目前，就針對IBS治療的藥物大多以對癥治療為主，諸如5-HT受體阻滯劑、鈣離子拮抗劑、生長抑素類藥物、抗膽堿類藥物等[9-13]，這些藥物可有效的改善腹痛、便秘、腹瀉等癥狀，但因毒副作用較多，不宜長期應(yīng)用[14]。

中醫(yī)藥在IBS防治上有明顯的優(yōu)勢，中醫(yī)對此病有較豐富臨床治療方法，并在臨床上有較好的療效。但研究復(fù)方較多，但明確成分研究尚少[15]。中藥穿山龍為薯蕷科薯蕷屬植物穿龍薯蕷(Dioscorea nipponica Makino)的干燥根莖，其功效是祛風(fēng)除濕、舒筋通絡(luò)、活血止痛、止咳平喘[16]。穿山龍所含主要成分薯蕷皂苷具有調(diào)節(jié)腸運(yùn)動、鎮(zhèn)痛、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、殺菌等多方面的藥理活性。而這些藥理活性正好逐一針對著IBS的腸道運(yùn)動異常、內(nèi)臟高敏感、炎癥、神經(jīng)免疫機(jī)制和腸道菌群失調(diào)等各種發(fā)病機(jī)制。此外薯蕷皂苷對腎功能、肝功能等經(jīng)過長期的觀察，未發(fā)現(xiàn)毒副作用，服用安全。同時，我們在前期研究中證實(shí)了薯蕷皂苷確有對以腹瀉為主癥疾病有治療作用[17]，推測薯蕷皂苷治療慢性腹瀉的機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)結(jié)腸運(yùn)動或調(diào)節(jié)腸道通透性達(dá)到目的的。

5-HT是人體重要的血管活性物質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)，5-HT是參與IBS發(fā)病的胃腸激素之一，在IBS發(fā)病機(jī)制中起著重要作用，且對內(nèi)臟感覺傳導(dǎo)、腸道運(yùn)動、腸道分泌和吸收均有作用。多項(xiàng)研究表明D-IBS患者血清中5-HT濃度增高[18-19]，是引起腹瀉的重要物質(zhì)[20]。本研究結(jié)果表明，穿龍薯蕷能降低D-IBS大鼠血漿5-HT的含量，這可能是其改善D-IBS臨床癥狀的作用機(jī)制之一。

VIP是由28個氨基酸組成的多肽，由內(nèi)分泌細(xì)胞D1和含VIP能神經(jīng)元及神經(jīng)纖維分秘釋放，VIP具有促進(jìn)分秘和吸收功能，抑制小腸水電解質(zhì)吸收和膽囊收縮，同時亦可擴(kuò)張腸道血管、增加腸道血流，促進(jìn)膽汁、胰液和腸液分秘。張艷霞等[21]研究發(fā)現(xiàn)，腹瀉型IBS患者VIP含量增加可促進(jìn)胃腸液及電解質(zhì)的分泌，推測VIP是患者出現(xiàn)腹瀉等癥狀的原因之一。四逆當(dāng)歸方治療顯著降低VIP含量，其作用機(jī)理可能是通過調(diào)整胃腸動力，恢復(fù)正常的腸蠕動、延長水、電解質(zhì)通過腸道的時間從而改善腹痛腹瀉癥狀。本研究發(fā)現(xiàn)薯蕷皂苷可降低腹瀉型IBS大鼠VIP含量，推測其亦是進(jìn)胃腸液及電解質(zhì)的分泌，而達(dá)到治療效果。

SP是一種主要的促炎癥性感覺性神經(jīng)肽，它刺激膽囊收縮，促進(jìn)胃腸道平滑肌收縮和腸蠕動，抑制腸道吸收。汪正芳等[22]研究表明腹瀉型腸易激綜合征大鼠SP含量增加，疏肝健脾方可降低腹瀉型腸易激綜合征大鼠SP含量，從而可有效治療D-IBS。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果也表明，腹瀉型腸易激綜合征大鼠血漿中SP含量增加。薯蕷皂苷中藥低、中、高劑量組均能降低SP含量，提示薯蕷皂苷可能是通過改變SP的異常分泌以改善胃腸道的收縮和蠕動，從而達(dá)到治療效果。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)以番瀉葉灌胃法建立大鼠D-IBS模型在一定程度上模擬了人的D-IBS臨床表現(xiàn)，在使用穿山龍主要成分薯蕷皂苷干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)薯蕷皂苷可以有效緩解D-IBS大鼠腹瀉及內(nèi)臟高敏性，其作用可能是通過調(diào)整紊亂的胃腸激素的分泌、釋放，進(jìn)而調(diào)整腸道運(yùn)動、抑制腸道的異常分泌、降低腸道敏感性、增強(qiáng)腸道黏膜免疫，從而起到治療IBS-D的目的。

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2016-12-26

2017-03-04

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81274035)；黑龍江省中醫(yī)藥科研項(xiàng)目(ZHY16-034)；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)科研基金(201516)

趙旭(1980-)，女，碩士，講師，主要從事胃腸病的研究。

*通訊作者：代麗娟(1980-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合治療慢性腎病研究。

R285.5

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1002-2392(2017)02-0022-03