魏鳳靜 （遼寧省綏中縣畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)察所 125200）

文獻綜述

關(guān)于“瘦肉精”分類、危害及檢測標準的探討

魏鳳靜 （遼寧省綏中縣畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)察所 125200）

“瘦肉精”是一類腎上腺素受體激動劑的統(tǒng)稱，在我國被嚴格禁止應用于食品動物中。本文對“瘦肉精”的分類、作用機理、中毒危害等做了梳理和歸納，并針對其檢測手段和標準做了比較和探討，以期為瘦肉精的有效監(jiān)管提供參考和借鑒。

1 “瘦肉精”的分類

“瘦肉精”不是指某一種特定的藥物，而是一類具有促進蛋白質(zhì)合成，抑制脂肪沉積的苯乙醇胺類化合物的統(tǒng)稱。它們同屬于腎上腺素受體(主要β受體)激動劑類物質(zhì)，按結(jié)構(gòu)通常可分為苯胺型、苯酚型和苯二酚型等三大類。市場上常見的“瘦肉精”主要是鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等三種[1,2]。2001～2002年，農(nóng)業(yè)部等國家部委先后下發(fā)了第176號公告、第193號公告和第1519號條例等禁止使用β激動劑類藥物作為獸藥和飼料添加劑[3,4,5]。

表1 “瘦肉精”的主要分類

除了上述16種“瘦肉精”外，近年來又出現(xiàn)了一些新型“瘦肉精”物質(zhì)。比如可樂定(Clonidine)、巴氯芬(Baclofen)、賽庚啶(Cyproheptadine)等[5]。

2 “瘦肉精”的作用機理及其危害

2.1 作用機理 以鹽酸克侖特羅為例，它與β-腎上腺素受體結(jié)合，形成激動劑受體復合物，復合物激活G5蛋白，G5蛋白的α亞基隨后激活腺苷酸環(huán)化酶，由該酶產(chǎn)生的環(huán)腺苷酸(cAMP)是一種重要的胞內(nèi)信使分子。環(huán)腺苷酸(cAMP)產(chǎn)生效應的機制是通過結(jié)合到蛋白激酶k的調(diào)節(jié)亞基，以釋放該酶的催化亞基，使其磷酸化一系列的胞內(nèi)蛋白。其中的部分蛋白是酶，在被磷酸化時激活。環(huán)腺苷酸應答元件結(jié)合蛋白(CREB)被蛋白激酶A磷酸化，結(jié)合到一個基因調(diào)控部位的cAMP應答元件上，并激活該基因的轉(zhuǎn)錄，磷酸化增強了CREB的轉(zhuǎn)錄活性，這也是在哺乳動物細胞中，β-腎上腺受體激動劑介導的很多基因轉(zhuǎn)錄的機制，其他一些酶的活性在磷酸化時受到抑制[6,7]。

2.2 危害 （1）鹽酸克倫特羅急性中毒主要是由于激動心臟和骨骼肌的β2腎上腺素受體所致。若短時間攝入過量的克倫特羅可引起急性中毒，在臨床上主要表現(xiàn)為心悸、胸悶、頭暈頭痛、惡心嘔吐、頸背部肌肉酸痛、血壓升高。心電圖顯示竇性心動過速，陣發(fā)性室上性心動過速、竇房傳導阻滯、早搏等。實驗室檢查血象增高、心肌酶學登高、血糖增高、血鉀降低、肌酐增高、尿素氮增高等[8]。（2）鹽酸克侖特羅可作用于多種靶器官，過量且長時間使用會對器官造成慢性毒性。小鼠染毒30d，解剖發(fā)現(xiàn)其右心室擴張，心臟外形呈卵圓形。心尖鈍圓，心壁變薄而柔軟，心臟內(nèi)積有多量的血液，切開心臟后心壁自行塌陷，心臟組織形態(tài)出現(xiàn)了明顯的變化[9]。Femmer等給予麻醉的狗連續(xù)靜脈注射克倫特羅12.5μg/kg劑量，心率增加18%，血壓升高44%，增加心臟容積43%，降低外周阻力30%，心肌在顯微鏡下有小損傷，此損傷非劑量依賴性，全部定位于左心室乳頭狀肌[10]。李明禎等在研究克倫特羅對小鼠的肝臟損傷時發(fā)現(xiàn)，在染毒30d后可觀察到高劑量組小鼠體內(nèi)MDA明顯升高，而SOD和GSH-PX活力出現(xiàn)明顯降低。而谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)出現(xiàn)明顯上升[11]。（3）鹽酸克倫特羅對腎臟的毒性主要表現(xiàn)在高劑量能使腎臟器系數(shù)發(fā)生改變。同時也有實驗表明，長時間染毒的大鼠其腎上腺皮質(zhì)激素細胞會增生，說明長期服用可鹽酸克侖特羅會導致腎上腺分泌過度，對機體產(chǎn)生不利影響。Spencer等對綿羊的實驗表明鹽酸克侖特羅對抗體的產(chǎn)生有抑制作用，在一定程度上降低了免疫力。作為重要的免疫器官，胸腺和脾臟在克侖特羅作用下也會出現(xiàn)一系列的病理變化。此外，鹽酸克侖特羅對大鼠胚胎枝芽細胞的分化也有一定的抑制作用，顯示出其細胞毒性[12]。

3 檢測方法及其標準限值

3.1 檢測方法 （1）根據(jù)監(jiān)測對象和代謝規(guī)律的不同，“瘦肉精”檢測通常采用尿液檢測，近年來，反芻類動物中毛發(fā)檢測也成為研究熱點[13]。（2）根據(jù)檢測原理的不同，目前我國的“瘦肉精”檢測技術(shù)主要包括了快速篩查技術(shù)和確證分析技術(shù)。快速篩查技術(shù)主要利用免疫學分析原理，通過膠體金免疫技術(shù)和酶聯(lián)免疫技術(shù)(ELISA)，產(chǎn)品對應為快速試紙檢測卡和試劑盒?？捎糜凇笆萑饩钡亩ㄐ?半定量檢測篩查。檢測限值一般在納克(ng)數(shù)量級。其優(yōu)點是價格相對低廉，快速便捷，適于大規(guī)模的樣本初篩。對檢測出的陽性樣本仍需實驗室確證才可以作為執(zhí)法依據(jù)。（3）確證分析技術(shù)主要包括了薄層層析(TLC)、高壓液相色譜(HPLC)、高壓液相色譜/二極管陳列(HPLC/ PDA)、高壓液相色譜/熒光(HPLC/FLU)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、氣相色譜-傅里葉紅外聯(lián)用(GC-FTIP)和毛細管電泳等方法。優(yōu)點是準確度、靈敏度高，但需要復雜昂貴的檢測設(shè)備，對其廣泛應用有一定的限制[14]。

表2 我國“瘦肉精”檢測標準限值

3.2 標準限值 （1）農(nóng)業(yè)部在第176號公告、第193號公告、第235號公告中明確指出鹽酸克侖特羅、(硫酸)沙丁胺醇、萊克多巴胺等禁止在飼料和動物飲用水中使用，在所有可食用組織中不得檢出，LC-MS方法中檢測標準限值為≤0.5μg/L；膠體金試紙條可從農(nóng)業(yè)部備案產(chǎn)品中或者各省組織的比對試驗優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品中選擇。假陽性率應≤5%，假陰性率為0。鹽酸克侖特羅和萊克多巴胺檢測限值應≤3μg/L，沙丁胺醇檢測限值應≤5μg/L；酶聯(lián)免疫試劑盒應符合農(nóng)業(yè)部《獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑(盒)備案參考評判標準》的要求。假陽性率應≤5%，假陰性率為0。鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇檢測限值應≤1μg/kg。（2）在國外，歐盟早在1996年通過委員會指令96/23/EC中，對鹽酸克侖特羅等進行了嚴格管制，禁用于食用動物。對于β2類激動劑用于牲畜支氣管痙攣、抑制子宮收縮等要進行登記使用，并嚴格控制用量。根據(jù)86/469/EEC指令，歐盟成員國均有義務(wù)對動物及肉制品中合法及非法獸藥(添加劑)殘留等進行管控。美國食品和藥物管理局(FDA)法規(guī)21CFR530.41規(guī)定，克侖特羅為食品動物禁用物質(zhì)。其只能用于某些動物疾病的治療，并且嚴格指定了克侖特羅原料供應商，其他購買方式和途徑均視為違法。日本等國對鹽酸克侖特羅的檢出限定值定為0.05μg/kg[15]。

4 討論

（1）“瘦肉精”對于我國養(yǎng)殖業(yè)來說并不陌生，部分養(yǎng)殖戶出于利益和投機，將其非法飼喂于食品動物，造成了在動物肌體和人體內(nèi)的殘留和蓄積損傷。近幾年來，群發(fā)性和單發(fā)性的“瘦肉精”中毒事件更是屢見報端。中國、美國、日本、歐盟等國家對克侖特羅等“瘦肉精”已經(jīng)亮起了紅燈。（2）本文以“瘦肉精”的定義入手，從結(jié)構(gòu)上對其做了分類，并歸納總結(jié)了近年來新興的“瘦肉精”類物質(zhì)。以實際生產(chǎn)中最為常用的、價格最便宜的鹽酸克侖特羅為例，從分子層面和表觀癥狀上對其作用機理和危害做了詳述，使人們知其然和所以然。（3）在檢測標準上，近年來我國已經(jīng)出臺了相應條例對飼料中、肉制品中、尿液中的“瘦肉精”殘留檢測限值提出了明確規(guī)定。但應該清晰地認識到與發(fā)達國家標準差異和不同。以克侖特羅為例，我國檢出限值定為0.5μg/kg，而日本為0.05μg/kg，較中國嚴格10倍，檢測能力的巨大差距和實際殘留的高風險對我國的進出口肉類產(chǎn)品都造成了一定壓力和隱患，也為下一步技術(shù)標準的革新提供了參考。（4）檢測手段上，應該清晰地認識到快速篩查和確證分析的利弊，根據(jù)實際情況，選擇合適的檢測手段，以滿足工作和實際需求。需要強調(diào)的是，目前“瘦肉精”快檢卡生產(chǎn)廠家眾多，而在農(nóng)業(yè)部備案的生產(chǎn)廠家僅約為30家。鹽酸克侖特羅檢測卡種類可達180余種，而經(jīng)農(nóng)業(yè)部備案的CL快檢卡只有10余種。所以在監(jiān)管采購的選擇上要注意甄別。

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[3] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第176號[S]. 2002.

[4] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第193號[S]. 2002.

[5] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第1519號[S]. 2010.

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