張 青 ，傅衛(wèi)紅△ ，張國(guó)強(qiáng)，陳蘆斌 ，馮 青 ，趙曉余，王永興

1.解放軍第四五一醫(yī)院 (西安710054),2.解放軍93801部隊(duì)(咸陽(yáng)712200)

中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型小鼠耳廓微循環(huán)的影響*

張 青1，傅衛(wèi)紅1△，張國(guó)強(qiáng)2，陳蘆斌1，馮 青1，趙曉余1，王永興1

1.解放軍第四五一醫(yī)院 (西安710054),2.解放軍93801部隊(duì)(咸陽(yáng)712200)

目的：探討中藥與礦物鹽微粉對(duì)急性血瘀模型小鼠耳廓微循環(huán)的影響。方法：采用皮下注射鹽酸腎上腺素與冰水浴的方法制作急性血瘀小鼠耳廓微循環(huán)障礙動(dòng)物模型，觀察中藥與礦物鹽微粉對(duì)小鼠耳廓微動(dòng)脈血液流速及微動(dòng)脈血液輸入管徑、輸出管徑的影響。結(jié)果：中藥與礦物鹽微粉各劑量組給藥10、30、60min后血液輸入管徑、輸出管徑、微動(dòng)脈血流速均增加，與模型組比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。結(jié)論：中藥與礦物鹽微粉具有改善急性血瘀模型小鼠耳廓微循環(huán)的作用。

中藥與礦物鹽微粉系專利產(chǎn)品多功能外用熱療包的內(nèi)容物微粉混勻而成，主要成分包括沒(méi)藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中藥和礦物鹽，具有活血祛瘀、溫經(jīng)通絡(luò)、消腫止痛的功效，對(duì)多種病因引起的頸肩腰腿痛有較好的臨床療效[1-2]。本研究采用腎上腺素加冰浴法復(fù)制小鼠耳廓微循環(huán)障礙模型，研究中藥與礦物鹽微粉對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)障礙的影響，探討中藥與礦物鹽微粉的作用機(jī)制?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

材料與方法

1 材 料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：5-6周齡昆明種小白鼠，雌雄各半，體重18-22g。由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(軍)2012-0007。飼養(yǎng)于空調(diào)恒溫室內(nèi)，室溫24±2℃，相對(duì)濕度40%～60%，過(guò)濾送風(fēng)，自動(dòng)控制晝夜各12 h。自由攝氏和飲水，滅菌全價(jià)營(yíng)養(yǎng)顆粒飼料(由第四軍醫(yī)大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心提供)喂養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前飼養(yǎng)觀察2周，選擇健康動(dòng)物用于試驗(yàn)。

1.2 藥物和試劑：多功能外用熱療包批號(hào)：20130305。稱取其內(nèi)容物適量，先粉碎成棕色粗粉，后微粉，收集微粉( 300目篩通過(guò)率≥95%)，室溫保存?zhèn)溆谩＜t花油(廣州泰恩制藥廠有限公司出品，批號(hào)140101)；鹽酸腎上腺素(西南藥業(yè)股份有限公司出品，批號(hào)1310151)。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器：FW-177型中草藥粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn))；BFM-6型超微粉碎機(jī)(濟(jì)南倍力粉技術(shù)工程有限公司生產(chǎn))；AF-100制冰機(jī)(美國(guó)IMI CORNELIUS.INC)；WX-9B微循環(huán)儀(徐州光學(xué)儀器總廠生產(chǎn))。

2 方 法

2.1 動(dòng)物分組及劑量：將動(dòng)物隨機(jī)分為6組，分組及給藥如下：正常對(duì)照組(未加藥處理組)、血瘀模型組、正紅花油陽(yáng)性對(duì)照組(0.1 ml/只)、中藥與礦物鹽微粉高劑量組(150 g/kg)、中劑量組(90 g/kg)、低劑量組(30 g/kg)。劑量設(shè)置依據(jù)臨床擬用劑量。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法：血瘀模型組、陽(yáng)性藥物對(duì)照組、中藥與礦物鹽微粉高、中、低劑量組小鼠給予皮下注射鹽酸腎上腺素(8 ml/kg)，2 h后放入0℃冷水浸泡2 min，取出后再次按8 ml/kg的量皮下注射鹽酸腎上腺素，2 h后再次放入0℃冷水浸泡2 min后取出。12 h后各組動(dòng)物分別給藥，正常組、模型組動(dòng)物耳廓外滴溫?zé)嵴麴s水0.1ml/只，陽(yáng)性對(duì)照組動(dòng)物給予耳廓外涂正紅花油0.1 ml/只，中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組動(dòng)物頸背部及耳廓熱敷微粉治療包10 min，然后采用1%的戊巴比妥鈉0.1 ml/10 g腹腔注射麻醉小鼠，在其耳廓表面涂上香柏油，置兩塊玻片間，在微循環(huán)顯微鏡下，觀察耳廓邊緣平行的1.5-2 mm微血管的變化情況，測(cè)定給藥后10、30、60 min微血管的輸入管徑、輸出管徑與血液流速的情況。

結(jié) 果

1 對(duì)血瘀模型小鼠耳廓微動(dòng)脈血液流速的影響 模型組動(dòng)物耳廓微動(dòng)脈血液流速較正常組顯著減緩，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，提示小鼠耳廓微循環(huán)障礙造模成功；中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組給藥10、30、60 min后，小鼠耳廓微動(dòng)脈血液流速與模型組比較明顯加快(P<0.05，P<0.01)，說(shuō)明中藥與礦物鹽微粉能明顯增加小鼠耳廓微循環(huán)障礙中微動(dòng)脈的血液流速,見(jiàn)表1。

表1 中藥與礦物鹽微粉對(duì)血瘀模型小鼠微動(dòng)脈血液流速的影響(μm/s)

注：與正常組相比，△P<0.01；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

2 對(duì)血瘀模型小鼠耳廓血液輸入管徑的影響 與正常組相比，模型組動(dòng)物耳廓根部的血液輸入管徑顯著減小(P<0.01)；中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組給藥10、30、60 min后，該血管管徑增大，與模型組比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，說(shuō)明中藥與礦物鹽微粉能擴(kuò)張小鼠耳廓微循環(huán)障礙血液輸入管徑,見(jiàn)表2。

表2 中藥與礦物鹽微粉對(duì)血瘀模型小鼠微動(dòng)脈血液輸入管徑的影響(μm)

注：與正常組相比，△P<0.01；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 對(duì)血瘀模型小鼠耳廓血液輸出管徑的影響 模型組小鼠耳廓根部的血液輸出管徑較正常組顯著減小(P<0.01)；中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組給藥10、30、60min后，微動(dòng)脈血液輸出管徑有不同程度增大，與模型組相比有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)，說(shuō)明中藥與礦物鹽微粉能明顯擴(kuò)張小鼠耳廓微循環(huán)障礙血液輸出管徑,見(jiàn)表3。

表3 中藥與礦物鹽微粉對(duì)血瘀模型小鼠微動(dòng)脈血液輸入管徑的影響(μm)

注：與正常組相比，△P<0.01；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

討 論

血瘀證是中醫(yī)臨床常見(jiàn)的證候類型，也是許多臨床疾病的基本病理機(jī)制[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，血瘀證與微循環(huán)障礙、血液流變學(xué)異常、血液凝固性增高或纖溶性降低、血小板聚集性增高或釋放功能亢進(jìn)、血流動(dòng)力學(xué)障礙、血管狹窄、阻塞等因素有關(guān)[4]。其中微循環(huán)異常改變常作為血瘀證診斷及血瘀程度判斷的客觀指標(biāo)[5-6]。耳廓微循環(huán)法具有簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)，多被用于觀察藥物對(duì)微循環(huán)影響[7]。

臨床上各種原因?qū)е碌念i肩腰腿痛多因肌肉、肌腱、韌帶、關(guān)節(jié)、神經(jīng)、血管等組織急慢性損傷及無(wú)菌性炎癥引起，屬中醫(yī)“痹證”范疇，多因外受風(fēng)寒濕邪，或因勞傷起病，或跌撲閃挫，致經(jīng)脈氣血阻滯不通，瘀血留注而致疼痛；或先天稟賦不足，后天失調(diào)，久病體虛，年老體衰，以致氣血不足，腎經(jīng)虧損，筋脈、骨骼失去濡養(yǎng)而發(fā)生疼痛[8]。中醫(yī)理論認(rèn)為：瘀血在骨關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，血脈瘀滯，氣血不行，而致筋骨失養(yǎng)發(fā)病。王清任在《醫(yī)林改錯(cuò)》中有“痹證有瘀血”的論述，主張活血化瘀治療痹證?；钛ńj(luò)祛瘀、改善微循環(huán)可達(dá)到鎮(zhèn)痛的作用，貫穿于各種疾病急慢性頸肩腰腿痛的治療過(guò)程中[9]。

本研究治療組所用中藥礦物鹽微粉系專利產(chǎn)品多功能熱療包中的中藥與礦物鹽按比例混合，經(jīng)粉碎、研磨、過(guò)篩后的微粉。其組方包括沒(méi)藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中藥和礦物鹽，其中乳香、沒(méi)藥、延胡索相協(xié)活血祛瘀、行氣止痛；羌活、當(dāng)歸和五靈脂共奏散寒活血止痛之效；透骨草、生川烏、防風(fēng)、川芎和花椒可祛留滯經(jīng)絡(luò)的風(fēng)寒濕邪；當(dāng)歸、川芎養(yǎng)血兼活血。綜合全方，祛邪扶正，標(biāo)本兼顧，發(fā)揮活血化瘀、祛濕散寒、通經(jīng)通絡(luò)的功效，使局部瘀血消散，受損傷的氣血得以濡養(yǎng)，達(dá)到通則不痛的療效[10]。同時(shí)加入了礦物鹽，引藥下行，入腎軟堅(jiān)，增補(bǔ)肝腎，緩和藥材辛燥之性，增進(jìn)藥材療效，并能促進(jìn)滲液吸收，達(dá)到消炎、消腫、止痛作用。

本研究采用腎上腺素加冰水刺激的方法復(fù)制急性血瘀證模型，皮下注射腎上腺素模擬應(yīng)激時(shí)機(jī)體分泌大量腎上腺素的狀態(tài)，以冰水浸泡動(dòng)物，模擬外寒侵襲，兩種因素的綜合作用復(fù)制出急性寒凝血瘀型大鼠模型，并對(duì)專利產(chǎn)品多功能外用治療包內(nèi)容物的活血化瘀作用進(jìn)行了探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：中藥與礦物鹽微粉治療組血液輸入管徑、輸出管徑、微動(dòng)脈血流速均增加。提示中藥與礦物鹽微粉具有活血化瘀，改善微循環(huán)障礙的作用，其具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

[1] 張 青，傅衛(wèi)紅，黃美蘭，等.飛行人員頸椎亞健康的綜合防治[J]. 頸腰痛雜志，2014，35(1)：22-24.

[2] 張 青，傅衛(wèi)紅，陳慧玲，等．飛行人員頸肩腰腿痛的綜合防治[J]．解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，35(3)：234-237.

[3] 杜金行，李騰飛，史載祥．血瘀證及活血化瘀臨床研究回顧與展望[J]．中華中醫(yī)藥雜志，2012，27(9)：2247-2253．

[4] 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)活血化瘀專業(yè)委員會(huì)．血瘀證中西醫(yī)結(jié)合診療共識(shí)[J]．中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2011，31(6)：829-844．

[5] 劉建林，彭 成，潘 媛，等．元胡止痛膠囊活血鎮(zhèn)痛作用研究[J]．中藥藥理與臨床， 2013，29(5)：11-14．

[6] 李顯華，杜佳林，包玉龍，等．丹龍膠囊活血化瘀作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]． 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)，2012， 29(2)∶18-19.

[7] 潘 媛，彭 成，劉建林. 川芎定痛顆?；钛鲎饔玫难芯縖J]． 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2013， 19(7):174-177.

[8] 經(jīng)振興．頸肩腰腿痛的中醫(yī)藥治療策略[J]．中醫(yī)臨床研究，2014,6(25)：144-146．

[9] 楊鮮珍，王淑英．炎痛舒搽劑對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)的影響[J]．陜西中醫(yī)，2011，32(5)：629-631．

[10] 張 青，李 偉，張琳靜，等.活血化瘀中藥配合礦物質(zhì)熱敷治療頸肩腰腿痛962例[J]. 陜西中醫(yī),2014,35(1):28-29.

(收稿：2016-11-09)

Effect of traditional Chinese medicine and mineral salts micropowder on ear microcirculation in mice of acute blood stasis model

Zhang Qing,Fu Weihong,Zhang Guoqiang, et al.

The 451st Hospital of PLA(Xi’an 710032)

Objective: To explore the effects of external application of the traditional Chinese medicine and mineral salts(TCM-MS)micropowder on ear microcirculation in acute blood stasis model of mice. Methods: Sixty mice were randomly divided into the normal group, the model group, the positive control group, and low dose (30g/kg)，middle dose (90g/kg) and high dose (150g/kg) of TCM-MS micropowder group, with 10 mice in each group. The TCM-MS micropowder groups were administered with external application of TCM-MS micropowder. The models of mouse ears microcirculatory disturbance were established by means of subcutaneous injection of adrenaline and ice water bath after treatment for 6 days. The instrument of microcirculation were used to observe the ear venule, arteriole diameter and the blood flow speed of mouse．Results: The ear venule, arteriole diameter and the blood flow speed were obviously increased in different doses of TCM-MS micropowder group (P<0.05，P<0.01). Conclusion: The TCM-MS micropowder could significantly expand the capillary vessels and promote the microcirculation on acute blood stasis model of mice.

Acute blood stasis Animal experimentation Mice

*全軍保健專項(xiàng)課題(12BJ207)

血瘀證 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 小鼠

R247.9

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.04.061

△通訊作者