張建華 查玉平 陳京元 王義勛 趙東容 唐桂林

摘要：在白僵菌三級(jí)生產(chǎn)中，使用3種不同培養(yǎng)盤，研究其對(duì)原菌粉生產(chǎn)的影響。結(jié)果表明，多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量和活孢率最高，分別為12225±217億孢子/g和9050±096%。多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉顯著好于竹制簸箕和鍍鋅鋼盤生產(chǎn)的原菌粉。而且多孔塑盤在通透性和操作性上具有優(yōu)勢(shì)，烘干所需時(shí)間最短。這說(shuō)明多孔塑盤適合用于白僵菌的三級(jí)生產(chǎn)。

關(guān)鍵詞：白僵菌；培養(yǎng)盤；工業(yè)化生產(chǎn)；含孢量；活孢率

中圖分類號(hào)：文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004-3020（2016）06-0040-03

Effect of Deferent Culture Plates on Production of Beauveria bassiana

Zhang Jianhua（1）Zha Yuping（2）Chen Jingyuan（2） Wang Yixun（2）Zhao Dongrong（1）Tang Guilin（1）

（1.Dangyang City Station for Forest Pest and Disease Control and QuarantineYichang443000；2. Hubei Academy of ForestryWuhan430075）

Abstract： In tertiary production of Beauveria bassiana， effects of three different culture plates on the raw powder production were studied. The results showed that the spore density and viabilty of the raw powder， which produced in porous plastic plates， were highest. The spore density was 122.25±2.17 billion spores/g， and viability was 90.50±0.96%. The raw powder produced in porous plastic plates significantly better than those produced in bamboo dustpan or galvanized steel plate. And porous plastic plates had advantages in permeability and workability， in which the raw powder drying needed fewest time. These showed that porous plastic plates were suitable to tertiary production of B. bassiana.

Key words：Beauveria bassiana；Culture plate；industrial production；spore density；viabilty

白僵菌屬于絲孢綱Hyphomycetale 叢梗孢目Moniliales 叢梗孢科Moniliaceae 白僵菌屬Beauveria，是一類寄主范圍廣、致病力強(qiáng)的昆蟲(chóng)病原真菌[1]。我國(guó)已經(jīng)將白僵菌廣泛應(yīng)用于農(nóng)林害蟲(chóng)的防治當(dāng)中，并取得了較好效果，尤其在玉米螟Ostrina furnacalis和馬尾松毛蟲(chóng)Dendrolimus punctatus防治上，取得了令人矚目的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益[2-4]。在目前農(nóng)林害蟲(chóng)防治中，白僵菌是應(yīng)用最多的一種真菌殺蟲(chóng)劑。

早在上世紀(jì)70年代，我國(guó)就開(kāi)始大量生產(chǎn)白僵菌。當(dāng)時(shí)主要為固體發(fā)酵，即從一級(jí)到三級(jí)均用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)[5]。到上世紀(jì)80年代，我國(guó)白僵菌生產(chǎn)有了較大進(jìn)展， 分生孢子提取技術(shù)改進(jìn)為旋風(fēng)分離機(jī)等機(jī)械提取[6]。近年來(lái)，我國(guó)白僵菌生產(chǎn)工藝主要為液固兩相發(fā)酵，利用液體發(fā)酵快速生產(chǎn)大量的菌絲體或芽生孢子，再轉(zhuǎn)到固體營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上使其產(chǎn)生氣生分生孢子[7]。其中，三級(jí)生產(chǎn)是白僵菌生產(chǎn)工藝中變革較多的一個(gè)環(huán)節(jié)，例如由土床發(fā)酵發(fā)展到淺盤發(fā)酵[7]。本文研究了白僵菌三級(jí)生產(chǎn)中，不同培養(yǎng)盤的應(yīng)用對(duì)生產(chǎn)的影響，為改進(jìn)白僵菌生產(chǎn)工藝，提高生產(chǎn)效率提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

供試培養(yǎng)盤為竹制簸箕、鍍鋅鋼盤和多孔塑盤。具體參數(shù)見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)方法

將同一批二級(jí)生產(chǎn)的菌液接種到3種不同的培養(yǎng)盤（各100盤）上，在相同條件下進(jìn)行三級(jí)培養(yǎng)。檢測(cè)原菌粉含孢量和活孢率，比較3種培養(yǎng)盤對(duì)生產(chǎn)其他方面的影響。試驗(yàn)重復(fù)4次。

1.3數(shù)據(jù)處理

采用Excel和spss20軟件處理數(shù)據(jù)并繪制相關(guān)圖表。

2結(jié)果與分析

2.1對(duì)原菌粉含孢量的影響

圖1顯示，在三級(jí)生產(chǎn)中使用多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量最高。本試驗(yàn)中，使用竹制簸箕生產(chǎn)的原菌粉含孢量為10425±284億孢子/g，使用鍍鋅鋼盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量為9988±466億孢子/g，而多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量為12225±217億孢子/g。應(yīng)用spss2.0軟件進(jìn)行成對(duì)樣本檢驗(yàn)，多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量顯著高于竹制簸箕和鍍鋅鋼盤生產(chǎn)的原菌粉含孢量（p<001）。說(shuō)明培養(yǎng)盤的選擇對(duì)于白僵菌原菌粉的含孢量影響顯著。

2.2對(duì)原菌粉活孢率的影響

由圖2可以看出，在三級(jí)生產(chǎn)中，多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉活孢率最高。本試驗(yàn)中，使用竹制簸箕生產(chǎn)的原菌粉活孢率為（8200±329）%，使用鍍鋅鋼盤生產(chǎn)的原菌粉活孢率為（7863±248）%，而多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉活孢率為（9050±096）%。應(yīng)用spss20軟件進(jìn)行成對(duì)樣本檢驗(yàn)，多孔塑盤生產(chǎn)的原菌粉活孢率與竹制簸箕生產(chǎn)的原菌粉活孢率存在顯著性差異（p<005），與鍍鋅鋼盤生產(chǎn)的原菌粉活孢率存在極顯著性差異（p<<001）。說(shuō)明培養(yǎng)盤的選擇對(duì)于白僵菌原菌粉的活孢率影響顯著。

3結(jié)論

白僵菌三級(jí)生產(chǎn)中，不同培養(yǎng)盤培養(yǎng)的白僵菌原菌粉的含孢量和活孢率存在顯著差異。多孔塑盤培養(yǎng)的白僵菌原菌粉含孢量和活孢率均最高。并且多孔塑盤在通透性和操作性上也具有優(yōu)勢(shì)，烘干所需時(shí)間最短，培養(yǎng)所需時(shí)間也相對(duì)較短。因此，在白僵菌三級(jí)生產(chǎn)中，使用多孔塑盤既能達(dá)到提高原菌粉含孢量和活孢率的目的，又能減少生產(chǎn)時(shí)間和勞動(dòng)強(qiáng)度。

參考文獻(xiàn)

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[3]查玉平，胡承輝，陳京元，等. 白僵菌大面積防治馬尾松毛蟲(chóng)效果分析[J]. 湖北林業(yè)科技，2013，42（4）：4446.

[4]陸晴，佘花娣，佟文悅.應(yīng)用白僵菌防治玉米螟的研究進(jìn)展[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，17（5）：5962.

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[6]李雅志，陳京元，喬永文，等. 白僵菌純孢子粉的工業(yè)化生產(chǎn)及其質(zhì)量研究[J]. 湖北林業(yè)科技，1989（3）：2832.

[7] 劉健，陳洪章，李佐虎.白僵菌殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)工藝研究狀況與展望[J].中國(guó)生物防治雜志，2003，19（2）：8690.

（責(zé)任編輯：夏劍萍）