李婷，徐曉，周燕，楊洋，陳偉芳，鄭濤

（九江學(xué)院附屬醫(yī)院，江西 九江 332000）

細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色對(duì)漿膜腔積液的診斷價(jià)值

李婷，徐曉，周燕，楊洋，陳偉芳，鄭濤

（九江學(xué)院附屬醫(yī)院，江西 九江 332000）

目的 探討細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色對(duì)漿膜腔積液的診斷價(jià)值。方法 選取680例漿膜腔積液患者（其中497例為胸腔積液、164例為腹腔積液、19例為心包腔積液），對(duì)所有患者進(jìn)行常規(guī)涂片并制備石蠟包埋細(xì)胞塊。若在細(xì)胞沉渣石蠟包埋檢測(cè)涂片或細(xì)胞切塊中發(fā)現(xiàn)存在可疑惡性腫瘤細(xì)胞，則對(duì)其進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色檢驗(yàn)法。結(jié)果 本組680例患者細(xì)胞沉渣石蠟包埋檢驗(yàn)中共診斷出365例良性胸腔積液、174例良性腹腔積液和13例良性心包積液，44例采取了二步法，進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，1例加作了抗酸染色檢驗(yàn)。胸腔積液中31例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色檢驗(yàn)，明確診斷25例，其中1例僅提示腺癌細(xì)胞未提示組織來源信息，6例提示增生的間皮細(xì)胞；腹腔積液8例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色檢驗(yàn)，5例明確診斷，2例僅提示腺癌細(xì)胞而未提示細(xì)胞組織來源信息，1例提示增生的間皮細(xì)胞；心包積液中3例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色，2例明確診斷，其中1例僅提示腺癌細(xì)胞而未提示細(xì)胞組織來源。結(jié)論細(xì)胞沉渣石蠟包埋和免疫組織化學(xué)染色在漿膜腔積液的診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)其定性診斷具有輔助作用，同時(shí)還能明確惡性腫瘤細(xì)胞的組織來源，值得臨床上推廣應(yīng)用。

細(xì)胞沉渣石蠟包埋；免疫組織化學(xué)染色；漿膜腔積液；診斷價(jià)值

脫落細(xì)胞學(xué)檢查方法能對(duì)細(xì)胞的大小和形態(tài)進(jìn)行觀察，從而進(jìn)行定性診斷，這一檢查診斷方法具有微創(chuàng)、快捷和簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，因而在臨床中應(yīng)用廣泛[1]。本研究旨在探討細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色對(duì)漿膜腔積液的診斷價(jià)值，選取680例漿膜腔積液患者，對(duì)其進(jìn)行了細(xì)胞沉渣石蠟包埋處理和免疫組織化學(xué)染色病理檢查，獲得了滿意結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年3月～2016年3月九江學(xué)院附屬醫(yī)院收治的漿膜積液患者共680例為研究對(duì)象，所選病例均經(jīng)臨床病例檢查確診，其中男性患者411例，女性患者269例。年齡42～68歲，平均（54.29±8.61）歲，其中497例為胸腔積液、164例為腹腔積液、19例為心包腔積液。

1.2 檢測(cè)方法 所有患者取漿膜腔積液并制作標(biāo)本，將新鮮漿膜腔積液標(biāo)本靜置約30 min，取近玻璃瓶底的5 mL液體，放棄上清液[2]。將所取液體置于試管中進(jìn)行離心處理，3 000 r/min，離心時(shí)間約為15 min，而后常規(guī)涂片。在剩余液體中加入等量的濃度為95%的乙醇，搖晃混勻后靜置約30 min，帶瓶底有白色絮狀物形成后取近瓶底的5 mL液體。再將所取液體放入試管中離心，3 000 r/min，離心時(shí)間約為15 min，棄去上清液后在試管中加入等量的濃度為10%的中性甲醛[3]。接著再次離心，3000r/min，離心時(shí)間約為5 min，而后棄去上清液將沉渣用濾紙包裹，使用10%的中性甲醛固定和脫水處理，最后使用石蠟包埋。將使用石蠟包埋好的細(xì)胞塊切片，厚度為3μm，使用HE染色處理，進(jìn)行鏡檢，若在涂片或細(xì)胞切塊中有發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞存在時(shí)，則對(duì)其進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色二步檢驗(yàn)法[4]。

2 結(jié)果

本組患者均采取了漿膜腔積液作標(biāo)本，并進(jìn)行了涂片和石蠟包埋細(xì)胞塊HE切片，根據(jù)其細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，共診斷出365例良性胸腔積液、174例良性腹腔積液和13例良性心包積液；共有83例漿膜腔積液標(biāo)本涂片或細(xì)胞切塊中發(fā)現(xiàn)有可疑惡性腫瘤細(xì)胞存在（由于沉渣石蠟包埋組織中細(xì)胞成分太少而未進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色檢驗(yàn)），其中59例為胸腔積液、22例為腹腔積液、2例心包積液；44例采取了二步法，進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，1例加作了抗酸染色檢驗(yàn)。

胸腔積液中共有31例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，其中明確診斷的有25例（21例肺腺癌、1例尿路上皮癌、1例B細(xì)胞淋巴瘤、1例橫紋肌肉瘤、1例乳腺腺癌），其中1例僅提示腺癌細(xì)胞未提示組織來源信息，5例提示增生的間皮細(xì)胞；腹腔積液中共有8例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色，其中5例明確診斷（1例消化道來源的腺癌、1例肺腺癌、3例卵巢漿液性腺癌），其中2例僅提示腺癌細(xì)胞而未提示細(xì)胞組織來源信息，1例提示增生的間皮細(xì)胞；心包積液中3例發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞后進(jìn)行了細(xì)胞塊切片免疫組織化學(xué)染色，其中2例明確診斷（1例乳腺腺癌、1例肺腺癌），其中1例僅提示腺癌細(xì)胞而未提示細(xì)胞組織來源。

3 討論

漿膜腔積液可能是腫瘤的首發(fā)癥狀（特殊情況下甚至是唯一癥狀），也有可能是多種腫瘤的伴發(fā)癥狀[5]。盡管如此，在漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)特征不典型或是缺乏臨床特征表現(xiàn)時(shí)，該病在臨床上的病理診斷難度將加大。脫落細(xì)胞檢查中卻上組織學(xué)形態(tài)，在由于炎癥等其他因素所導(dǎo)致的間皮細(xì)胞增生的鑒別診斷中難度較大，加上細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷也存在一定的缺陷，即在對(duì)細(xì)胞來源的鑒定上具有一定的局限性。

采用細(xì)胞沉渣石蠟包埋法，將制備出的細(xì)胞塊中存在可以惡性腫瘤細(xì)胞的樣本進(jìn)一步采用免疫組織化學(xué)染色，能明顯提高陽(yáng)性檢出率，從而判斷并明確細(xì)胞的組織來源。細(xì)胞沉渣石蠟包埋法中石蠟包埋的組織細(xì)胞塊可進(jìn)行反復(fù)切片，這樣對(duì)于后續(xù)的特殊染色、免疫組織化學(xué)染色等均很便利，特別是對(duì)于無(wú)法進(jìn)行活檢的病例，使用石蠟包埋組織切片，其標(biāo)本可在其病理學(xué)診斷、治療方案的選擇以及預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮巨大作用。沉渣石蠟包埋細(xì)胞塊與石蠟包埋組織塊技術(shù)十分相似，通過增加待檢細(xì)胞數(shù)量，且細(xì)胞在經(jīng)過固定后的形態(tài)與組織學(xué)切片中的細(xì)胞形態(tài)非常接近，這為其臨床診斷提供了便利。

本研究中沉渣石蠟包埋細(xì)胞塊免疫組織化學(xué)染色結(jié)果提示有32例腺癌，這與臨床中關(guān)于轉(zhuǎn)移性腫瘤中以腺癌最為多見的相關(guān)報(bào)道結(jié)果一致。免疫組織化學(xué)染色對(duì)脫落細(xì)胞檢查中存在的不足之處可很好的彌補(bǔ)，能為其診斷中難以鑒別的地方提供輔助診斷線索，在細(xì)胞來源的判斷中能發(fā)揮重大作用，具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

本研究結(jié)果中，5例胸腔積液和1例腹腔積液涂片檢查中發(fā)現(xiàn)可疑惡性腫瘤細(xì)胞，但細(xì)胞塊切片經(jīng)免疫組織化學(xué)染色后提示增生的間皮細(xì)胞。可見免疫組織化學(xué)染色并不能百分之百的表達(dá)，僅僅只是輔助的診斷方法，特別是在細(xì)胞量較少或是經(jīng)過治療后的患者樣本中。免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性結(jié)果則表示明確診斷，但陰性也并非排除標(biāo)準(zhǔn)，需要結(jié)合臨床情況進(jìn)行綜合具體分析才能下定論。除此之外，漿膜腔積液沉渣細(xì)胞塊中的細(xì)胞數(shù)量與多項(xiàng)因素相關(guān)，包括是否病變、采集到的漿膜腔積液是否及時(shí)處理、操作過程是否嚴(yán)格規(guī)范、血清離心時(shí)間是否充足、沉渣的留取是否準(zhǔn)確等。

[1] 王炳淑,劉友斌,卜平鳳，等.細(xì)胞沉渣石蠟包埋、免疫組織化學(xué)染色病理檢查對(duì)漿膜腔積液的定性診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥,2015,13(28)：98-99.

[2] 翟輝霞,李文燦.免疫組化聯(lián)合抗體在胸腹水沉渣石蠟包埋病理診斷中的應(yīng)用[J].衛(wèi)生職業(yè)教育,2014,32(4)：144-145.

[3] 朱林琳,羅明惠,孟亞飛，等.免疫組化抗體聯(lián)合應(yīng)用在胸腹水沉渣包埋病理診斷中的意義[J].中國(guó)農(nóng)村衛(wèi)生,2015,22 (18)：45.

[4] 朱利,劉雙元,馮君，等.胸腹水沉渣切片對(duì)腫瘤細(xì)胞診斷的意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(13)：1037,1039.

[5] 鄧志勇,李海,陳芳，等.細(xì)胞塊石蠟切片技術(shù)在癌性胸腔及腹腔積液診斷中應(yīng)用[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2011,25 (10)：998-999.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.03.078