劉新橋, 覃彬華, 原文珂，韓海燕

(中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，武漢 430074)

紅毛七化學(xué)成分研究

劉新橋, 覃彬華, 原文珂，韓海燕

(中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，武漢 430074)

為研究紅毛七根及其根莖的化學(xué)成分，采用常壓硅膠柱色譜，葡聚糖凝膠Sephadex LH-20、反相高效液相制備色譜對其進(jìn)行了分離純化，并且通過1H NMR和13C NMR波譜技術(shù)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定.最終從乙酸乙酯層中分離出7個化合物，鑒定為升麻素 (1)、香蘭素(2)、對羥基苯甲酸(3)、對羥基苯乙醇(4)、阿魏酸(5)、異阿魏酸(6)、obtucarbamate A(7)、其中化合物都1～7為首次分離得到.

小檗科；紅毛七；化學(xué)成分

紅毛七為小檗科紅毛七屬植物CaulophyllumrobustomMaxim，又名葳嚴(yán)仙、紅毛三七、海椒七、雞骨升麻、紅毛細(xì)辛、搜山貓等[1]，藥用部位為根及根莖，，主要分布于東北、陜西、浙江、湖北、四川、西藏等地，具有活血化瘀，祛風(fēng)除濕，行氣止痛之功效，常用于月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、產(chǎn)后血瘀腹痛、脘腹寒痛、跌打損傷、風(fēng)濕痹痛[2].目前，國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報道已經(jīng)從中分離得到生物堿、三萜皂苷、脂肪酸、甾醇等化學(xué)成分， 并且發(fā)現(xiàn)其有抗風(fēng)濕、抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌、抗細(xì)胞毒、抗氧化以及抗腫瘤等活性[3，4].為了繼續(xù)尋找紅毛七中具有藥用價值的生物活性成分，本實(shí)驗(yàn)對紅毛七的化學(xué)成分進(jìn)行了進(jìn)一步研究，采用系統(tǒng)研究方法，對乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行化學(xué)成分分離和結(jié)構(gòu)鑒定，得到7個化合物，分別鑒定為：升麻素 (1)、香蘭素(2)、對羥基苯甲酸(3)、對羥基苯乙醇 (4)、阿魏酸(5)、異阿魏酸(6)、obtucarbamate A(7)、化合物1～7均為首次分離得到,結(jié)構(gòu)見圖1.

1 儀器和材料

1.1 儀器和試劑

Agilent 400 DD2型核磁共振波譜儀(美國Agilent公司)，Dionex UltiMate 3000型高效液相色譜儀(美國Dionex公司)，C18柱(250 mm×20 mm， 日本YMC公司)，柱色譜硅膠和薄層色譜硅膠(青島海洋化工廠)，Sephadex LH-20 (Pharmacia)，二氯甲烷(天津富宇精細(xì)化工有限公司)，甲醇(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司).紅毛七于2015年7月采自湖北五峰縣，經(jīng)中南民族大學(xué)藥學(xué)院劉新橋副教授鑒定為紅毛七CaulophyllumrobustomMaxim，植物標(biāo)本保存于中南民族大學(xué)藥學(xué)院.

1)升麻素 ； 2)香蘭素；3) 對羥基苯甲酸；4)對羥基苯乙醇;5) 阿魏酸； 6)異阿魏酸；7) obtucarbamate A

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 提取與分離

取干燥紅毛七根及根莖30 kg粉碎，用95%及60%乙醇滲漉提取，得到總浸膏，加水混懸，分別用石油醚，乙酸乙酯，水飽和的正丁醇萃取，得到乙酸乙酯部位410 g，通過常壓硅膠柱色譜技術(shù)，采用石油醚︰乙酸乙酯︰甲醇體系體積比分別為：10∶1∶0，8∶1∶0，6∶1∶0，4∶1∶0，2∶1∶0，1∶1∶0，0∶1∶0，0∶95∶5，0∶9∶1，0∶8∶2，0∶4∶1，得到7個洗脫部分Fr.1～7.Fr.7經(jīng)過Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脫，得到2個組分Fr.a1～a2,Fr.a2用ODS-HPLC(40%甲醇)純化得到化合物1(9.2 mg)，F(xiàn)r.3經(jīng)硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇(99∶1-85∶15)梯度洗脫，得到9個組分Fr.3a～3l，F(xiàn)r.3a經(jīng)Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脫得到3個組分Fr.3a1～3a3,Fr.3a3用ODS-HPLC(45%甲醇)純化得到化合物2(3.4 mg)，F(xiàn)r.3d經(jīng)Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脫得到3個組分Fr.3d1～3d3,Fr.3d3用ODS-HPLC(50%甲醇)純化得到化合物7(5.6 mg)，F(xiàn)r.3l經(jīng)Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脫得到3個組分Fr.3l1～3l3,Fr.3l3用ODS-HPLC(60%甲醇)純化得到化合物3(13.1 mg)和4(4.6 mg) ，F(xiàn)r.4經(jīng)硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇(99∶1-85∶15)梯度洗脫，得到8個組分Fr.4a～4h，F(xiàn)r.4d經(jīng)Sephadex LH-20，氯仿-甲醇(1∶1)洗脫得到3個組分Fr.4d1～4d3，F(xiàn)r.4d3用ODS-HPLC(40%甲醇)純化得到化合物5(4 mg)和6(30 mg).

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ: 6.61 (1H, s, H-8), 6.23 (1H, s, H-3), 4.76 (1H, t,J= 8.6 Hz, H-2′), 4.44 (2H, s, -CH2OH), 3.93 ( 3H, s, -OCH3), 3.34 ( 2H, m, H-3′), 1.30 (3H, s, -CH3), 1.24 (3H, s, -CH3).13C NMR (101 MHz, CD3OD)δ: 179.9(C-4), 168.8(C-2), 167.2(C-5), 161.3(C-7), 157.1(C-8a), 118.6(C-6), 112.4(C-4a), 109.4(C-3), 94.6(C-8), 92.7(C-2′), 72.3(C-4′), 61.3(-CH2OH), 61.19(-OCH3),28.8(C-3′), 25.5(-CH3), 25.4(-CH3).以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報道的cimifugin數(shù)據(jù)一致，故化合物1為升麻素.

化合物2 白色結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：9.76 (1H , s , OH) , 7.41 (1H , dd ,J= 2.0, 8.0 Hz , H-6 ) , 7.38 (1H , d ,J= 2.0 Hz , H-5) , 6.95 (1H , d ,J= 8.0 Hz , H-2) , 3.83(3H , s , -OCH3) ,13C NMR (DMSO , 100 MHz)δ: 190.9 (-CHO) , 153.1 (C-4) , 148.1 (C-3) , 128.6(C-1) , 126.0(C-6) , 115.4 (C-5) , 110.7(C-2) , 55.5 (-OCH3) .以上波普數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報道的Vanillin數(shù)據(jù)一致，故化合物2為香蘭素.

化合物3 白色結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：7.78 (2H, d ,J=8.0, H-2,6) , 6.82 (2H , d ,J=8.0, H-3,5),13C NMR (100 MHz,

DMSO)δ:167.2(C-7), 161.5(C-4), 131.5(C-2,6), 121.5(C-1), 115.1(C-3,5).以上波普數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報道的p-hydroxybenzoic acid數(shù)據(jù)一致，故化合物3為對羥基苯甲酸.

化合物4 白色晶體，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ: 9.15 (1H , s , OH ) , 6.98 ( 2H , d ,J= 8.0 Hz , H-2 , 6 ) , 6.65 ( 2H , d ,J= 8.0 Hz , H-3,5 ) , 4.58 (1H , s , -CH2OH) , 3.63 (2H , t ,J= 2.4 Hz , H-2′) , 2.87 (2H, t ,J= 2.4 Hz , H-1′) .13C NMR (DMSO , 100 MHz)δ: 155.4 (C-4) , 129.7(C-2,6) , 129.4 (C-1) , 114.9(C-3,5) , 62.6 (C-2′) , 38.3 (C-1′) .以上波普數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報道的Tyrosol數(shù)據(jù)一致，故化合物4為對羥基苯乙醇.

化合物5 白色針狀結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：7.48 (1H,d,J= 15.9 Hz, H-7), 7.27 (1H, d ,J= 1.7 Hz, H-2), 7.08 (1H, dd ,J= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 6.79 (1H, d ,J= 8.0 Hz, H-5), 6.36 (1H, d ,J= 15.9 Hz, H-8), 3.81 (3H, s , OCH3).13C NMR (100 MHz, DMSO)δ:168.4(C-9), 149.5(C-3), 148.3(C-4), 144.9(C-7), 126.2(C-1), 123.2(C-6), 116.1(C-8), 115.9(C-5), 111.5(C-2), 56.1(-OCH3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報道的ferulic acid數(shù)據(jù)一致，故化合物5為阿魏酸.

化合物6 白色針狀結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ： 6.24(1H,d,J= 15.9 Hz, H-2), 6.94 (1H, d ,J= 8.4 Hz, H-6′), 7.05 (1H, d ,J= 8.4 Hz, H-5′), 7.09(1H, d ,J= 2.1 Hz, H-2′), 7.44(1H, d ,J= 15.9 Hz, H-3), 3.80(3H, s , -OCH3).13C NMR (100 MHz, DMSO)δ:167.7(C-1), 149.8(C-4), 146.6(C-3′), 144.1(C-3),127.1(C-1′), 120.1(C-2), 116.3(C-6′), 114.1(C-5′), 111.9(C-2′), 55.6(-OCH3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報道的isferulic acid數(shù)據(jù)一致，故化合物6為異阿魏酸.

化合物7 白色結(jié)晶，1H NMR (400 MHz, DMSO)δ：9.55 (1H, s ,1-NH), 8.81 (1H, s, 3-NH), 7.49 (1H, s, H-2), 7.17 (1H, dd ,J=8.2, 1.7 Hz, H-6), 7.06 (1H, d ,J= 8.3 Hz, H-5), 3.64 (6H, s,2-OCH3),13CNMR (101MHz, DMSO)δ: 154.7(1-NHC=O), 153.9(3-NHC=O),137.2(C-1), 136.4(C-3), 130.2(C-5), 125.6(C-4), 115.0(C-6), 114.8(C-2), 51.6(-OCH3),51.5(-OCH3), 17.1(4-CH3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報道的obtucarbamate A數(shù)據(jù)一致，故化合物7為obtucarbamate A.

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Research on the Chemical Constituents ofCaulophyllumrobustomMaxim

LiuXinqiao,QinBinhua,YuanWenke,HanHaiyan

(School of Pharmacy, South-Central University for Nationalities, Wuhan 430074, China)

To study the chemical constituents ofCaulophyllumrobustomMaxim, the EtOAc extract of the roots and tubers of the plant were treated by repeated column chromatography with silica gel, Sephadex LH-20 and ODS-HPLC.The results indicated that seven compounds were isolated from the extract.The structures were identified by1H NMR and13C NMR as cimifugin(1), vanillin (2), p-hydroxybenzoic acid (3), Tyrosol (4),ferulic acid(5),isferulic acid(6)，obtucarbamate A(7), It was the first time to isolate compounds 1～7 fromCaulophyllumrobustomMaxim .

Berberidaceae；CaulophyllumrobustomMaxim;chemical constituents

2016-12-27

劉新橋(1978-)，男，副教授，研究方向：天然藥物化學(xué)，E-mail: 296343430@qq.com

湖北省自然科學(xué)基金計劃重點(diǎn)項(xiàng)目(創(chuàng)新群體)(2013CFA013)

O629；R284.1

A

1672-4321(2017)01-0061-03