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        長鏈非編碼RNA在膀胱癌中的研究概況

        2017-04-14 01:26:42李其金鐘麗明
        當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2017年31期
        關(guān)鍵詞:長鏈膀胱癌編碼

        李其金,鐘麗明

        (1.南方醫(yī)科大學(xué)附屬南海區(qū)人民醫(yī)院麻醉科,廣東 佛山 528200;2.南海衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)校,廣東 佛山 528200)

        長鏈非編碼RNA在膀胱癌中的研究概況

        李其金1,鐘麗明2

        (1.南方醫(yī)科大學(xué)附屬南海區(qū)人民醫(yī)院麻醉科,廣東 佛山 528200;2.南海衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)校,廣東 佛山 528200)

        隨著二代測(cè)序技術(shù)的廣泛應(yīng)用和基因?qū)用嫔夏[瘤學(xué)研究的深入,曾被忽略、被低估的lncRNA被揭示與人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),從不同的生物學(xué)途徑影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn),lncRNA與膀胱癌的增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)、耐藥等密切相關(guān)。本文將對(duì)lncRNA在膀胱癌中的研究概況進(jìn)行綜述。

        膀胱癌;長鏈非編碼RNA;lncRNA結(jié)腸癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄物2;HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA

        膀胱癌是泌尿生殖系統(tǒng)中的最常見惡性腫瘤,在我國腫瘤發(fā)病率排行榜上位居第八位。近年來膀胱癌的治療有一定進(jìn)展,但總體生存期并無明顯提高,5年生存期僅維持在50%~60%[1]。隨著二代測(cè)序技術(shù)的廣泛應(yīng)用和基因?qū)用嫔夏[瘤學(xué)研究的深入,曾被忽略、被低估的lncRNA被揭示,盡管這些RNA不編碼蛋白質(zhì),但是可從不同的生物學(xué)途徑影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。lncRNA與膀胱癌的關(guān)系也逐漸受到關(guān)注,本文就新近研究發(fā)現(xiàn)的幾個(gè)與膀胱癌密切相關(guān)的lncRNA作一綜述。

        1 基因組的“暗物質(zhì)”,長鏈非編碼RNA概述

        lncRNA是一類長度大約200~2000 nt的非編碼RNA,最近幾年日益成為生命科學(xué)領(lǐng)域的新型研究熱點(diǎn)。在哺乳動(dòng)物基因組中,大約4%~9%的序列可轉(zhuǎn)錄lncRNA,起初被認(rèn)為不具有生物學(xué)功能,最近發(fā)現(xiàn),lncRNA可作為小分子RNA(如miRNA、siRNA、piRNA等)的前體分子,也可結(jié)合特定蛋白質(zhì)形成核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合體,調(diào)控蛋白質(zhì)定位或活性。另外,lncRNA還參與組蛋白修飾、染色體結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄激活或抑制等過程[2]。

        2 lncRNA與腫瘤

        目前,大多數(shù)lncRNA已被分類。隨著深度測(cè)序和芯片技術(shù)的發(fā)展,大量的 lncRNA在腫瘤組織中被發(fā)現(xiàn)。這些lncRNA的再激活或失抑制可能與細(xì)胞永生性及生長不受控制相關(guān),這表明lncRNA在腫瘤發(fā)病機(jī)制中有著關(guān)鍵的作用[3]?,F(xiàn)在認(rèn)為非編碼基因的突變、表觀遺傳學(xué)修飾、在機(jī)體內(nèi)拷貝數(shù)量的改變等,與數(shù)種腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[4]。長鏈非編碼RNA異常表達(dá)與腫瘤密切相關(guān),其異常表達(dá)主要表現(xiàn)如下三個(gè)方面:一是一些lncRNA可能僅僅在某些腫瘤中呈特異性表達(dá);二是很多l(xiāng)ncRNA不僅僅在一種腫瘤中呈過表達(dá)(如MALAT1已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在肺癌、腸癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤中都存在過表達(dá));三是一些腫瘤中可能不止一種lncRNA呈過表達(dá)(例如在前列腺癌中PCGEM1,DD3(PCA3),PCAF1均發(fā)現(xiàn)表達(dá)異常)[5]。

        3 lncRNA與膀胱癌

        最近兩年內(nèi)膀胱癌與長鏈非編碼RNA的研究日趨增多,發(fā)現(xiàn)與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展,增殖浸潤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)、診斷治療以及預(yù)后有一定相關(guān)性。

        3.1 PANDAR與膀胱腫癌 Hung等首先發(fā)現(xiàn)了lncRNA PANDAR(promoter of CDKN1A antisense DNA damage-activated RNA),位于人染色體6p21.2,PANDAR對(duì)于DNA損傷具有較高的敏感度,P53在DNA損傷后會(huì)誘導(dǎo)PANDAR表達(dá),直接結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子NF-YA,抑制其對(duì)靶基因FAS基因的作用,進(jìn)而對(duì)凋亡基因表達(dá)起到很好的抑制作用,PANDAR缺失導(dǎo)致人成纖維細(xì)胞對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡更加敏感[6]。

        早有研究顯示,PANDAR在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中表達(dá)下調(diào),PANDAR低表達(dá)與臨床較差的預(yù)后相關(guān)。然而肝癌中PANDAR表達(dá)上調(diào),PANDAR低表達(dá)預(yù)示著較好的臨床預(yù)后。乳腺癌組織和細(xì)胞系均有PANDAR表達(dá)上調(diào),在乳腺癌中發(fā)揮促癌基因的作用并可調(diào)節(jié)細(xì)胞周期[7]。以上說明lncRNA PANDAR在腫瘤中發(fā)揮了重要作用。

        Zhan等2016年對(duì)55例膀胱癌臨床標(biāo)本研究發(fā)現(xiàn),lncRNA PANDAR在腫瘤組織中,與癌旁組織相比,表達(dá)明顯上調(diào)。PANDAR高表達(dá)與膀胱癌更高的組織學(xué)分期(P<0.05)、更高的TNM分級(jí)相關(guān)(P<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),沉默PANDAR的表達(dá)可抑制膀胱癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移,細(xì)胞凋亡增加;過表達(dá)PANDAAR可促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞增殖、遷移,抑制細(xì)胞凋亡[8]。

        PANDAR在膀胱癌中發(fā)揮致癌作用,可作為指示預(yù)后的生物靶標(biāo)和潛在的治療靶點(diǎn),有重要的臨床意義。

        3.2 PVT1與膀胱癌 長鏈非編碼RNA PTV1位于人染色體8q24.21,長度為1716bp,與人類腫瘤關(guān)系密切。PTV1在前列腺癌中表達(dá)上調(diào)并與腫瘤的發(fā)展相關(guān);在卵巢癌中可能是潛在治療靶點(diǎn);在胃癌和肝癌中促進(jìn)了腫瘤的進(jìn)展;在乳腺癌中獨(dú)立于MYC促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、抑制凋亡[9]。

        與癌旁組織相比,lncRNA PTV1在62.5%(20/32例)的膀胱癌組織中表達(dá)增加(P<0.01),并且與膀胱癌的病理分級(jí)(P=0.028)、TNM分期相關(guān)(P=0.002)。體外實(shí)驗(yàn)中,給予膀胱癌T24、5637細(xì)胞轉(zhuǎn)染si-PTV1,EdU實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖,發(fā)現(xiàn)兩類細(xì)胞UdU陽性者分別降低了40%(P<0.01)和50%(P<0.01)。提示PVT1促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞增殖。與si-NC對(duì)照組相比,Hoechst 33258染色和流式細(xì)胞分析發(fā)現(xiàn),si-PVT1處理組caspase3(P<0.01)和細(xì)胞凋亡比率(P<0.01)均明顯增加。最后,同時(shí)給予多西環(huán)素和多西環(huán)素誘導(dǎo)的PVT1 shRNA處理膀胱癌T24、5637細(xì)胞,給予1μg/mL多西環(huán)素處理時(shí),與陰性對(duì)照組相比,T24和5637細(xì)胞PVT1的表達(dá)分別下降了58%和60%,與此同時(shí)膀胱癌細(xì)胞增殖明顯下降,凋亡增加[10]。

        PTV1促進(jìn)膀胱進(jìn)展,多西環(huán)素誘導(dǎo)的PVT1 shRNA可顯著抑制膀胱癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

        3.3 CCAT2和膀胱癌 lncRNA結(jié)腸癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄物2(colon cancer associated transcript 2,CCAT2)位于人染色體8q24.21,首先在結(jié)腸癌組織中被發(fā)現(xiàn)并命名,且在存在轉(zhuǎn)移的腫瘤組織中表達(dá)水平更高,并作為Wnt通路的下游靶基因可促進(jìn)結(jié)腸癌的生長和轉(zhuǎn)移[11]。CCAT2的表達(dá)異??梢越档腿橄侔┙M織對(duì)化療藥物5-氟尿嘧啶的敏感性[12]。在食管癌中CCAT2有吸煙史的患者癌組織CCAT2表達(dá)水平更高,且CCAT2對(duì)食管鱗狀細(xì)胞癌的診斷有較高的診斷價(jià)值[13]。

        Li等2016年對(duì)48例膀胱癌病理組織經(jīng)行研究,發(fā)現(xiàn)28例標(biāo)本中CCAT2的表達(dá)在腫瘤組織較癌旁組織表達(dá)增高(P<0.05)。CCAT2過表達(dá)與膀胱癌病理分級(jí)(P=0.014),TNM分期(P=0.016)正相關(guān)。四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)即tetoff和tet-on是目前應(yīng)用最廣,也是惟一已用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的一類可調(diào)控系統(tǒng)[14]。為了定量抑制CCAT2的表達(dá),Li等構(gòu)建了四環(huán)素誘導(dǎo)的CCAT2 shRNA,同時(shí)給予

        同時(shí)給2 mL四環(huán)素和四環(huán)素誘導(dǎo)的CCAT2 shRNA質(zhì)粒處理T24和5637細(xì)胞,CCAT2在5637和T24中的表達(dá)分別穩(wěn)定下降了58%(P<0.01)和63%(P<0.01)。與對(duì)照組相比,2μg/mL四環(huán)素誘導(dǎo)的CCAT2 shRNA處理的T24和5637細(xì)胞,分別進(jìn)行Edu實(shí)驗(yàn),流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn),人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)膀胱癌T24、5637細(xì)胞增殖能力明顯降低,細(xì)胞遷移能力下降,凋亡受到抑制[15]。

        CCAT2在促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用,四環(huán)素表達(dá)系統(tǒng)誘導(dǎo)的CCAT2 shRNA可能成為膀胱癌基因治療的手段。

        3.4 HOTAIR和膀胱癌 HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)具有反式作用(trans-acting)的lncRNA基因。定位于人染色體12q13.13區(qū)域HOX基因家族HOXC11基因的反義鏈,長6232bp,編碼2.2kb長鏈非編碼RNA分子[16]。

        實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞中HOTAIR可通過與PRC2的共同作用使組蛋白H3第27位賴氨酸三甲基化(H3K27me3),與LSD1共同作用使組蛋白H3第4位賴氨酸去甲基化(H3K4me3)。HOTAIR首次在人成纖維細(xì)胞中表達(dá),隨后在包括肝癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等多種腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)且與不良預(yù)后相關(guān)。

        實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)lncRNA HOTAIR可作為膀胱癌總體生存期獨(dú)立的預(yù)后因子,可調(diào)節(jié)膀胱癌對(duì)阿霉素的化療耐藥性[17]。另一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HOTAIR在腫瘤組織中的表達(dá)為癌旁組織的20倍。HOTAIR可影響miR-205啟動(dòng)子區(qū)域H3K4me3和H3K27me3的平衡,由此抑制miR-205的表達(dá)。miR-205據(jù)信在進(jìn)展期膀胱癌中表達(dá)增加,并參與了膀胱癌的浸潤和增殖[18]。較少有研究發(fā)現(xiàn)lncRNA通過調(diào)節(jié)miRNA啟動(dòng)子的組蛋白修飾作用影響miRNA的表達(dá)。miRNA-205與HOTAIR之間的聯(lián)系可能為膀胱癌的治療提供新的靶點(diǎn)。

        3.5 MALAT1和膀胱癌 肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄子1是lncRNA家族的重要成員,定位于染色體11q13.1,長度為6.7kb,在細(xì)胞核中分布表達(dá)。其在正常肺、胰腺以及非小細(xì)胞肺癌中高表達(dá)(NSCLC)。MALAT1沉默可調(diào)節(jié)肺癌細(xì)胞遷移相關(guān)的基因表達(dá),抑制肺癌細(xì)胞的遷移[19]。

        在膀胱癌的研究中發(fā)現(xiàn)MALAT-1在膀胱癌組織中表達(dá)上調(diào),并且在發(fā)生轉(zhuǎn)移的膀胱癌原發(fā)灶中,MALAT-1較無轉(zhuǎn)移病變者表達(dá)顯著升高。體外實(shí)驗(yàn)證明MALAT-1通過Wnt通路促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),siRNA下調(diào)MALAT-1的表達(dá)可降低上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)的ZEB1、ZEB2水平,同時(shí)上調(diào)E-cadherin水平,抑制膀胱癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[19]。

        進(jìn)一步對(duì)MALAT-1調(diào)節(jié)膀胱癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制進(jìn)行研究,通過RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP技術(shù))、RNA pull down實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)MALAT-1與suz12特異性結(jié)合,過表達(dá)suz12降低T24細(xì)胞E-cadherin表達(dá)。免疫沉淀實(shí)驗(yàn)(ChIP)發(fā)現(xiàn)抑制MALAT-1表達(dá)降低了T24細(xì)胞中suz12與E-cadherin啟動(dòng)子的結(jié)合,證明MALAT-1通過suz12抑制了E-cadherin的表達(dá)。最后,沉默T24細(xì)胞中MALAT1表達(dá)可顯著降低TGF-β誘導(dǎo)的E-cadherin表達(dá)抑制,降低了EMT相關(guān)的分子標(biāo)志物,如N-cadherinh和fibronectin等[20]。證實(shí)了MALAT-1在TGF-β誘導(dǎo)的膀胱癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化中發(fā)揮了重要作用。該研究表明MALAT-1在膀胱癌的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了重要作用。

        4 小結(jié)

        LncRNA不僅在生物體中以多種機(jī)制發(fā)揮其生物學(xué)功能,且其功能失調(diào)與多種疾病的發(fā)生,發(fā)展相關(guān)。lncRNA是目前發(fā)現(xiàn)的與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系的非編碼RNA,通過參與轉(zhuǎn)錄前,轉(zhuǎn)錄后以及表觀遺傳學(xué)修飾等不同層面參與腫瘤的生物學(xué)進(jìn)程。雖然目前l(fā)ncRNA與膀胱癌的關(guān)系還處于起步階段,但隨著對(duì)lncRNA的功能以及作用機(jī)制越來越多的認(rèn)知,對(duì)于膀胱癌相關(guān)的lncRNA的深入研究,將更好的對(duì)膀胱癌的診斷、術(shù)后檢測(cè)、個(gè)體化治療及新藥研發(fā)提供新的理論支持。

        [1] Khandelwal P,Abraham SN,Apodaca G.Cell biology and physiology of the uroepithelium[J]. American journal of physiology Renal physiology,2009,297(6):F1477-501.

        [2] Beniaminov A,Westhof E,Krol A.Distinctive struc tures between chimpanzee and human in a brain noncoding RNA[J].RNA(New York,NY),2008,14(7):1270-1275.

        [3] WiluszJE,SunwooH,SpectorDL.Longnoncoding RNAs:functionalsurprisesfromtheRNAworld[J].Genes&development,2009,23(13):1494-1504.

        [4] Melton C,Reuter JA,Spacek DV,et al.Recurrent somatic mutations in regulatory regions of human cancer genomes[J].Nature genetics,2015,47(7):710-716.

        [5] Harries LW.Long non-coding RNAs and human disease[J].Biochemical Society transactions, 2012,40(4):902-906.

        [6] Hung T,Wang Y,Lin MF,et al.Extensive and coordinated transcription of noncoding RNAs within cellcycle promoters[J].Nature genetics,2011,43(7):621-629.

        [7] Sang Y,Tang J,Li S,et al.LncRNA PANDAR regulates the G1/S transition of breast cancer cells by suppressing p16(INK4A)expression[J].Scientific reports,2016,6:22366.

        [8] Zhan Y,Lin J,Liu Y,et al.Up-regulation of long non-coding RNA PANDAR is associated with poor prognosis and promotes tumorigenesis in bladder cancer[J].Journal of experimental&clinical cancer research:CR,2016,35(1):83.

        [9] Kong R,Zhang EB,Yin DD,et al.Long noncoding RNA PVT1 indicates a poor prognosis of gastric cancer and promotes cell proliferation through epigenetically regulating p15 and p16[J].Molecular cancer,2015,14:82.

        [10]Zhuang C,Li J,Liu Y,et al.Tetracycline-inducible shRNA targeting long non-coding RNA PVT1 inhibitscellgrowthandinducesapoptosisinbladder cancer cells[J].Oncotarget,2015,6(38):41194-41203.

        [11]Ling H,Spizzo R,Atlasi Y,et al.CCAT2,a novel noncoding RNA mapping to 8q24,underlies metastatic progression and chromosomal instability in colon cancer[J].Genome research,2013,23(9):1446-1461.

        [12]Redis RS,Sieuwerts AM,Look MP,et al.CCAT2,a novel long non-coding RNA in breast cancer:expression study and clinical correlations[J]. Oncotarget,2013,4(10):1748-1762.

        [13]WangJ,QiuM,XuY,etal.LongnoncodingRNA CCAT2correlateswithsmokinginesophagealsquamous cell carcinoma[J].Tumour biology:the journal of the International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine,2015,36(7):5523-5528.

        [14]Das AT,Tenenbaum L,Berkhout B.Tet-On systems for doxycycline-inducible gene expression[J]. Current gene therapy,2016,16(3):156-167.

        [15]Li J,Zhuang C,Liu Y,et al.shRNA targeting long non-coding RNA CCAT2 controlled by tetracycline-inducible system inhibits progression of bladder cancer cells[J].Oncotarget,2016,7(20):28989-28997.

        [16]Shah N,Sukumar S.The Hox genes and their roles in oncogenesis[J].NaturereviewsCancer,2010,10(5):361-371.

        [17]Shang C,Guo Y,Zhang H,et al.Long noncoding RNA HOTAIR is a prognostic biomarker and inhibits chemosensitivity to doxorubicin in bladder transitional cell carcinoma[J].Cancer chemotherapy and pharmacology,2016,77(3):507-513.

        [18]Sun X,Du P,Yuan W,et al.Long non-coding RNA HOTAIR regulates cyclin J via inhibition of microRNA-205 expression in bladder cancer[J].Cell death&disease,2015,6:e1907.

        [19]Han Y,Liu Y,Nie L,et al.Inducing cell proliferation inhibition,apoptosis,and motility reduction by silencing long noncoding ribonucleic acid metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 in urothelial carcinoma of the bladder[J]. Urology,2013,81(1):209 e1-7.

        [20]Fan Y,Shen B,Tan M,et al.TGF-beta-induced upregulation of malat1 promotes bladder cancer metastasisbyassociatingwithsuz12[J].Clinicalcancer research:an official journal of the American Association for Cancer Research,2014,20(6):1531-1541.

        The present status of lncRNAin bladder caner

        Li Qi-jin1,Zhong Li-ming2
        (1.Department ofAnesthesiology,The Nanhai hospital of Southern Medical University,Foshan,Guangdong,528200,China;2.Nanhai hygienic vocational technical school,Foshan,Guangdong,528200,China)

        Taking advantage of next-generation sequencing technology,transcriptomic changes in tumors have been investigated,Long noncoding RNAs(lncRNAs)are non-protein coding RNAs regulating gene expression,It have been ignored that long noncoding RNA abnormal expression was closely correlated with tumor for a long time.Now it is fully believed that lncRNA was closely related to bladder tumor cell proliferation,invasion,metastasis,recurrence and drug resistence.This article reviews the present status of lncRNAin bladder caner.

        Bladder carcinoma;Long noncoding RNA;CCAT2;HOTAIR

        10.3969/j.issn.1009-4393.2017.31.089

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